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长江刀鲚GHRH基因遗传多态性及其与生长性状的关联分析

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西北农业学报 2024年第6期33卷 997-1007页

作者：于爱清施永海徐嘉波刘永士邓平平上海市水产研究所上海市水产技术推广站上海200433

生长激素释放激素(GHRH)是鱼类生长激素合成和分泌的重要调控因子,对细胞的生长、增殖和分化极为重要。基于长江刀鲚转录组测序数据,利用基因克隆和PCR扩增技术,获得其GHRH基因的cDNA全长和基因组DNA序列,并开展基因遗传多态性与生长性... 详细信息

生长激素释放激素(GHRH)是鱼类生长激素合成和分泌的重要调控因子,对细胞的生长、增殖和分化极为重要。基于长江刀鲚转录组测序数据,利用基因克隆和PCR扩增技术,获得其GHRH基因的cDNA全长和基因组DNA序列,并开展基因遗传多态性与生长性状的关联性研究,为其分子标记辅助育种提供技术支持。结果显示:长江刀鲚GHRH基因cDNA全长1329 bp,由5′-UTR(300 bp)、ORF(465 bp)和3′-UTR(564 bp)组成,推导的蛋白序列由154个氨基酸组成,具有一个信号肽和GLUCA结构域;该基因的DNA序列长2983 bp,由4个内含子和5个外显子组成,经筛选,在第1、2内含子和第3外显子上分别筛选到9、2和1个SNP位点;12个突变位点共36种基因型,分别与100尾长江刀鲚的体质量、体长和体高性状进行关联分析,获得2个与其生长性状显著相关的位点(g.1636C>T和g.1882A>C)(PT和g.1882A>C可以作为优选长江刀鲚繁育亲本的重要候选分子标记。

关键词：长江刀鲚 GHRH 单核苷酸多态性生长性状关联分析

一株磺胺喹噁啉降解菌株Aspergillus sp. S-3的分离、鉴定及其降解代谢途径

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应用与环境生物学报 2024年

作者：陈雪婷张玉平刘菁华上海市水产研究所(上海市水产技术推广站)

磺胺喹噁啉(SQX)在集约化的养殖业中应用广泛，其残留威胁生态系统和人体健康，目前关于微生物纯培养物降解SQX的研究较少。本研究从养殖池塘底泥样品中分离到一株SQX降解菌株S-3，通过形态学特征和ITS序列系统发育分析将其鉴定为曲霉属... 详细信息

磺胺喹噁啉(SQX)在集约化的养殖业中应用广泛，其残留威胁生态系统和人体健康，目前关于微生物纯培养物降解SQX的研究较少。本研究从养殖池塘底泥样品中分离到一株SQX降解菌株S-3，通过形态学特征和ITS序列系统发育分析将其鉴定为曲霉属(Aspergillus sp.)。单因素实验表明，菌株S-3的最佳生长和降解温度及pH分别为30 ℃和7.0，降解最佳接种量为1%-5%。在此条件下，菌株S-3对初始浓度为0.8-24 mg/L的SQX具有较高的降解率(72 h降解率均在83.0%以上)。菌株S-3还可以降解磺胺邻二甲氧嘧啶和磺胺异恶唑，降解率分别为和78.5%和65.5%。通过超高效液相色谱串联高分辨率电喷雾电离质谱仪鉴定了菌株S-3降解SQX生成的6种代谢产物，并据此推测菌株S-3分别采用分子内SO2的脱除、脱氨羟基化以及喹噁啉基的羟基化策略开启SQX的降解。采用Toxicity Estimation Software Tool (T.E.S.T.)软件评估了降解产物的毒性，结果表明其急性毒性、发育毒性和致突变性的毒性分级区间整体上呈现减毒趋势。斑马鱼攻毒试验初步表明菌株S-3对水生生物的安全性较高。综上所述，本研究获得一株高效安全的SQX降解菌株Aspergillus sp. S-3，为环境污染的微生物修复提供菌株资源和理论依据。(图8 表4 参34)

关键词：磺胺喹噁啉微生物降解曲霉菌属降解特性代谢产物

鲤Rhbdd3重组乳酸菌微生物制剂的开发及效果评价

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海洋与湖沼 2024年第4期55卷 1019-1026页

作者：刘亚楠张小明邵玲上海市水产研究所、上海市水产技术推广站上海200433

鱼类Rhbdd3(Rhomboid domain-containing protein 3)蛋白具有抗水生病毒感染功能,然而生产实践中缺乏其大量制备及应用方案。为研制鲤Rhbdd3蛋白重组微生物制剂,利用乳酸菌NICE表达系统,构建了Rhbdd3蛋白重组表达质粒pNZ8148-rhbdd3,并... 详细信息

鱼类Rhbdd3(Rhomboid domain-containing protein 3)蛋白具有抗水生病毒感染功能,然而生产实践中缺乏其大量制备及应用方案。为研制鲤Rhbdd3蛋白重组微生物制剂,利用乳酸菌NICE表达系统,构建了Rhbdd3蛋白重组表达质粒pNZ8148-rhbdd3,并转化获得了重组乳酸乳球菌pNZ8148-rhbdd3 NZ9000。利用乳酸链球菌素nisin进行Rhbdd3蛋白的诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blotting进行验证。进一步,将重组乳酸乳球菌进行饲料拌喂并开展鲤春病毒血症病毒(SVCV)人工感染实验,检测鱼体免疫因子表达水平及攻毒后鱼体组织病毒载量。结果显示:经nisin诱导后,pNZ8148-rhbdd3 NZ9000能够表达约为39 kDa的特异性蛋白,与Rhbdd3蛋白大小一致。重组乳酸乳球菌的最佳nisin诱导浓度为100 ng/mL,最佳诱导时间为5 h。重组乳酸乳球菌饲喂后14 d,与对照组相比,实验组鲤鱼组织中免疫相关基因IFN1、IRF7、Viperin、Mx1和ISG15的表达水平均显著上调。此外,SVCV攻毒后,重组乳酸乳球菌饲喂组鱼体组织中病毒滴度较对照组显著降低,表明其可以抑制病毒的增殖。研究结果为Rhbdd3蛋白的大量制备和应用提供了一种可行方案,并为鱼类病毒性疾病的防控提供了一种有效措施。

关键词： Rhbdd3蛋白乳酸菌鲤鱼鲤春病毒血症病毒微生物制剂

一株红霉素降解菌Penicillium ***-1的筛选、降解特性及其应用研究

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生态环境学报 2024年第4期33卷 607-616页

作者：刘菁华张玉平陈雪婷上海市水产研究所(上海市水产技术推广站) 上海200433

在渔业养殖过程中,使用绿色环保、高效低廉的微生物菌剂解决渔业废水中的抗生素残留,对保障水产品质量安全和生态环境有重要意义。为获得可应用于渔业养殖废水的红霉素降解菌剂,采用梯度富集驯化的方法从养殖污染底泥样品中分离筛选红... 详细信息

在渔业养殖过程中,使用绿色环保、高效低廉的微生物菌剂解决渔业废水中的抗生素残留,对保障水产品质量安全和生态环境有重要意义。为获得可应用于渔业养殖废水的红霉素降解菌剂,采用梯度富集驯化的方法从养殖污染底泥样品中分离筛选红霉素降解菌株,通过形态学特征和ITS(InternalTranscribedSpaces)序列分析进行微生物分类鉴定;采用单因素试验确定最适降解温度和pH;利用超高效液相色谱串联高分辨率电喷雾电离质谱仪鉴定降解产物,并据此推测降解途径,通过斑马鱼攻毒试验初步评估菌株的生物安全性;优化菌株固态发酵参数,制备红霉素降解菌剂,并初探降解菌剂对红霉素污染的养殖废水的修复效果。结果显示,获得一株红霉素降解菌株ERY-1并鉴定其为青霉菌属(Penicilliumsp.);菌株ERY-1在温度20-35℃、pH 5-7的环境中具有较好的降解率,在该条件下,菌株对质量浓度为1.0 mg·L^(-1)的红霉素的降解率在97%以上;鉴定了5种降解中间产物,并据此推测菌株ERY-1通过脱水、脱红霉支糖和开环逐渐使红霉素失去抗菌活性;斑马鱼攻毒试验初步表明菌株ERY-1对水生生物具有较高的安全性;以稻壳:麦麸:玉米粉质量比(m꞉m꞉m)为1꞉1꞉1作为固态培养基配方,初始料水比为1g:1L,接种量为0.75%,在温度为25℃,发酵13d后获得产孢量约9.14×10^(9)cfu·g^(-1)的降解菌剂。将制备的降解菌剂投撒到有红霉素残留的养殖废水中,3d后水中的红霉素未达到方法的检出质量浓度(0.2ng·L^(-1))。结果表明,菌株ERY-1可有效的解决渔业养殖废水中的红霉素残留,由其制备的降解菌剂具有良好的应用和推广价值。

关键词：红霉素微生物降解降解特性代谢产物固态发酵菌剂应用

2种饲料投喂下美洲鲥幼鱼肌肉营养成分分析及评价

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中国农业科技导报 2024年第5期26卷 223-233页

作者：蒋飞施永海徐嘉波严银龙刘永士袁新程上海市水产研究所上海市水产技术推广站上海200433

为科学评价常规饲料和绿色饲料养殖美洲鲥幼鱼肌肉的营养品质,采用生化分析方法对2种饲料投喂下美洲鲥幼鱼肌肉营养成分进行测定和比较分析。结果显示,常规饲料组肌肉中的粗脂肪含量(7.84%)极显著高于绿色饲料组(5.05%),水分含量(68.87%... 详细信息

为科学评价常规饲料和绿色饲料养殖美洲鲥幼鱼肌肉的营养品质,采用生化分析方法对2种饲料投喂下美洲鲥幼鱼肌肉营养成分进行测定和比较分析。结果显示,常规饲料组肌肉中的粗脂肪含量(7.84%)极显著高于绿色饲料组(5.05%),水分含量(68.87%)极显著低于绿色饲料组(71.98%),粗蛋白含量(16.93%)显著低于绿色饲料组(17.54%)。常规饲料组和绿色饲料组肌肉中必需氨基酸总量/氨基酸总量和必需氨基酸总量/非必需氨基酸总量无显著差异,均属于优质蛋白;绿色饲料组肌肉中鲜味氨基酸、苦味氨基酸和酸味氨基酸含量均显著高于常规饲料组,且甜味氨基酸含量极显著高于常规饲料组;绿色饲料组肌肉中支链氨基酸含量和支/芳值均显著高于常规饲料组;根据氨基酸评分和化学评分,常规饲料组和绿色饲料组的第一限制性氨基酸均为色氨酸,常规饲料组必需氨基酸指数(73.58)高于绿色饲料组(71.00)。常规饲料组肌肉中二十碳五烯酸(eicosa pentenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(docose hexaenoie acid,DHA)含量均极显著高于绿色饲料组,常规饲料组肌肉中不饱和脂肪酸、n-3多不饱和脂肪酸(Σn-3)、n-6多不饱和脂肪酸(Σn-6)、多不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸和Σn-3/Σn-6多不饱和脂肪酸均极显著高于绿色饲料组,而绿色饲料组肌肉中饱和脂肪酸/不饱和脂肪酸极显著高于常规饲料组。以上结果表明,2种饲料组均属于优质蛋白,在绿色饲料中提高色氨酸、EPA和DHA含量有助于改善美洲鲥肌肉的营养品质。

关键词：美洲鲥饲料肌肉营养成分氨基酸脂肪酸

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凡纳滨对虾养殖尾水悬浮物粒径分布研究

水产科学 2024年第1期43卷 41-50页

作者：刘金金张玲玲张玉平上海市水产研究所上海市水产技术推广站上海200433

为探明凡纳滨对虾养殖尾水中悬浮物的物质组成和粒径分布特性,2021年11月对上海市3口典型对虾养殖池塘(SP1、SP2、SP3)尾水排放过程进行动态监测,采集不同排水深度的尾水样品,分析尾水中悬浮物物质组成和变化规律,研究尾水中悬浮颗粒粒... 详细信息

为探明凡纳滨对虾养殖尾水中悬浮物的物质组成和粒径分布特性,2021年11月对上海市3口典型对虾养殖池塘(SP1、SP2、SP3)尾水排放过程进行动态监测,采集不同排水深度的尾水样品,分析尾水中悬浮物物质组成和变化规律,研究尾水中悬浮颗粒粒径数量和体积分布特征。试验结果显示,尾水中悬浮物、颗粒态氮、颗粒态磷含量随排水深度的增加呈递增趋势,在排水深度达2/3以后增幅明显升高,悬浮物中氮、磷含量平均占比则随之下降,分别由排水前的6.11%和1.20%降至排水末期的0.38%和0.11%;悬浮颗粒粒径分布受排水过程驱动,排水末期SP1、SP2和SP3尾水悬浮颗粒体积组成的中值粒径分别为11.69、20.89μm和38.23μm,主要以<100μm的胶体和细颗粒为主,平均体积占比达92.68%;虾塘尾水悬浮颗粒粒径数量分布符合可变β模型(r^(2)=0.849±0.128),粒径体积分布符合对数正态分布模型(r^(2)=0.879±0.141)。

关键词：凡纳滨对虾养殖尾水悬浮物粒径分布

益生菌在水产养殖可持续发展中的应用现状及展望

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水产学报 2024年第3期48卷 3-15页

作者：赵勇段为旦王友成苏明陶倩张昭寰潘迎捷刘智俊上海海洋大学食品学院农业农村部(上海)水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心上海睿婕水产养殖专业合作社上海市青浦区水产技术推广站上海市水产研究所上海市水产技术推广站

水产养殖在全球粮食安全中发挥着至关重要的作用，为人类提供优质蛋白源持续稳定供应提供了重要保障。益生菌是一类可用于水产养殖的有益微生物，不仅能够提高水产动物的生长性能、免疫能力，而且具有抑制致病菌、改善养殖水质等功效。... 详细信息

水产养殖在全球粮食安全中发挥着至关重要的作用，为人类提供优质蛋白源持续稳定供应提供了重要保障。益生菌是一类可用于水产养殖的有益微生物，不仅能够提高水产动物的生长性能、免疫能力，而且具有抑制致病菌、改善养殖水质等功效。益生菌在水产养殖中的推广应用可促进水产养殖业的健康可持续发展。因此，本文首先介绍了水产养殖中益生菌的定义与来源，详细阐述了益生菌对水产可持续养殖的意义以及益生菌在水产养殖中的实际应用，并对其未来研究方向进行了展望，以期为益生菌在水产养殖可持续发展中的推广和应用提供可靠的理论依据。

关键词：水产养殖益生菌益生功效可持续发展

水产养殖环境中农兽药物的污染暴露水平及其风险影响评价

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环境科学 2024年第1期45卷 151-158页

作者：张楷文张海燕孔聪顾润润田良良杨光昕王媛陈冈沈晓盛中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 上海海洋大学食品学院上海201306 上海市金山区水产技术推广站上海201599

为探究水产养殖环境中农兽药物污染暴露水平及其对生态环境的风险影响,以上海地区水产养殖环境为例,于2022年7~9月采集40家主要水产养殖场中水体、底泥以及投入品,采用超高压液相色谱-静电场轨道离子阱质谱法分析其农兽药物的含量及种类... 详细信息

为探究水产养殖环境中农兽药物污染暴露水平及其对生态环境的风险影响,以上海地区水产养殖环境为例,于2022年7~9月采集40家主要水产养殖场中水体、底泥以及投入品,采用超高压液相色谱-静电场轨道离子阱质谱法分析其农兽药物的含量及种类,并通过风险商值(RQ)法对底泥和水体中的农兽药物污染进行生态风险评估.结果表明,204份样品(水样72份、泥样72份和投入品60份)中共筛出13种药物,分别是扑草净、多菌灵、西草净、扑灭津、氟苯尼考、西玛津、金刚烷胺、地西泮、甲氧苄啶、环丙沙星、氧氟沙星、甲苯咪唑和恩诺沙星,其中水样中12种,浓度在0.016~2.084μg·L^(-1)之间.泥样中7种,含量在0.018~23.101μg·kg^(-1)之间.投入品中4种,含量在1.979~101.940μg·kg^(-1)之间.水体与底泥同时发现的药物有7种.风险商值评价结果显示,农兽药残留在水产养殖场底泥和水体中均存在高中风险,其中生态风险最高的药物为多菌灵,RQ值分别为3.848和1.580,表现为高风险.建议加强养殖环境中农兽药物外源进入的控制与管理,以保护水产养殖环境的生态系统健康.

关键词：养殖环境农兽药暴露水平风险评估上海地区

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上海地区长吻鮠全人工繁育技术研究

水产科技情报 2024年

作者：杨明谢永德施永海税春徐嘉波上海市水产研究所上海市水产技术推广站

为进一步优化长吻鮠的繁育流程，2021—2023年对上海地区池塘养殖3龄及以上长吻鮠成鱼进行了全人工繁育技术研究。单独采用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)对长吻鮠亲本进行催产：雌鱼分2次注射，第1针催产剂量为2 μg/kg，第2针剂量... 详细信息

为进一步优化长吻鮠的繁育流程，2021—2023年对上海地区池塘养殖3龄及以上长吻鮠成鱼进行了全人工繁育技术研究。单独采用促黄体素释放激素类似物(LHRH-A2)对长吻鮠亲本进行催产：雌鱼分2次注射，第1针催产剂量为2 μg/kg，第2针剂量为15～20 μg/kg，2针间距12～14 h；雄鱼采用1次注射法，在雌鱼注射第2针的同时进行，注射剂量为雌鱼第二针剂量的一半。3年累计催产雌性亲本230尾，其中成功催产雌性亲鱼186尾，催产率80.9%。受精卵在水温24～26 ℃条件下孵化，于50 h左右开始出膜。出膜仔鱼在室内水泥池静水充气条件下经8～14 d培育，3年累计培育获得体长1 cm以上的苗种21.41万尾。相比以往长吻鮠人工繁殖大多采用野生捕捞亲本，本研究采用人工养殖亲本可确保亲鱼数量和质量控制，且使用单一催产剂和静水孵化操作简化了过去混合催产剂和流水孵化的繁琐操作，较易实现规模化繁育。

关键词：长吻鮠全人工繁育催产授精开口饵料