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血小板伪装银纳米颗粒水凝胶加速1型糖尿病大鼠创面愈合

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中国组织工程研究 2024年第17期28卷 2659-2666页

作者：王金磊李科赵亮锦州医科大学药学院辽宁省锦州市121001 锦州医科大学生命科学研究院辽宁省锦州市121001

背景:细菌感染和血管生成功能受损一直是糖尿病创面愈合的障碍,多药耐药的问题同样不容忽视,因此迫切需要寻找一种新的治疗策略。目的:制备血小板伪装银纳米颗粒水凝胶,观察其对糖尿病创面的治疗作用。方法:①体外实验:通过回流加热的... 详细信息

背景:细菌感染和血管生成功能受损一直是糖尿病创面愈合的障碍,多药耐药的问题同样不容忽视,因此迫切需要寻找一种新的治疗策略。目的:制备血小板伪装银纳米颗粒水凝胶,观察其对糖尿病创面的治疗作用。方法:①体外实验:通过回流加热的方式制备超小银纳米颗粒(ultra-small silver nanoparticles,usAgNPs),将其与血小板(platelets,PL)偶联后加入羧甲基纤维素(carboxymethyl cellulose,CMC)水凝胶中,制备usAgNPs-PL/CMC水凝胶,表征水凝胶的微观结构、溶胀性能及力学性能,采用二甲氧唑黄比色法、活性氧法、细菌生物膜法、细菌活性等方法检测该水凝胶的抗菌能力。②体内实验:将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和usAgNPs-PL/CMC水凝胶组,每组8只,除假手术组外,其余4组建立1型糖尿病模型,造模成功后在5组大鼠背部制作1个深达筋膜层的皮肤创面(直径20 mm),假手术组、模型组大鼠创面注射生理盐水,CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和usAgNPs-PL/CMC水凝胶组大鼠创面分别植入对应的水凝胶。治疗14 d后,观察创面愈合情况与愈合质量。结果与结论:①体外实验:usAgNPs-PL/CMC水凝胶具有均匀的三维网状结构、良好的力学性能与较强的吸水能力,可明显抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,并且对两细菌生物膜形成具有良好的抑制和清除作用,具有良好的抗菌能力;②体内实验:治疗14 d后,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组创面基本闭合,创面愈合率最高,创面菌落数量明显少于模型组;治疗14 d的苏木精-伊红、Masson染色显示,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组、usAgNPs/CMC水凝胶组和CMC水凝胶组创面出现再生真皮的组织结构,新生肉芽组织表皮均完整且厚,其中usAgNPs-PL/CMC水凝胶组可见堆积的平行的成熟胶原纤维;治疗7 d的CD31免疫组化及Ki67免疫荧光染色显示,usAgNPs-PL/CMC水凝胶组创面微血管数量、成纤维细胞数量最多;③结果表明:usAgNPs-PL/CMC水凝胶可通过快速抑菌和促进血管生成来加速1型糖尿病大鼠创面的愈合。

关键词：超小纳米银颗粒血小板羧甲基纤维素水凝胶糖尿病创面创面愈合抑菌

CYP27A1对肝细胞癌预后的影响及生物学作用

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解放军医学杂志 2024年第4期49卷 387-395页

作者：张昕彤吴昊胡艳芬张文桃畅靖嘉朱剑军李莉刘铭山西医科大学基础医学院医学细胞生物与遗传学教研室山西太原030001

目的分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用,并初步探讨其影响HCC生长的分子机制。方法基于癌症基因数据库(TCGA)分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系;基于CYP27A1表达... 详细信息

目的分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用,并初步探讨其影响HCC生长的分子机制。方法基于癌症基因数据库(TCGA)分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系;基于CYP27A1表达量中位值,将样本分为CYP27A1高表达组(n=170)与CYP27A1低表达组(n=170),利用基因集富集分析(GSEA)分别对两组进行基因集富集分析;免疫荧光染色检测及数据库查找CYP27A1蛋白亚细胞定位;构建过表达CYP27A1质粒,转染HCC细胞MHCC-97H和HCCLM3,设置阴性对照组(转染空载质粒)与CYP27A1过表达组(转染过表达CYP27A1重组质粒)。采用CCK-8法、流式细胞仪、活性氧(ROS)荧光探针等检测过表达CYP27A1对HCC细胞活力、凋亡及ROS生成的影响;结合生物信息学分析CYP27A1与ROS生成相关基因及HCC增殖相关基因表达的相关性。结果与正常肝组织比较,HCC组织中CYP27A1 mRNA表达量明显降低(P组总生存率明显低于高表达组(P组HCC“干性”亚类和“增殖”亚类基因集水平升高。在MHCC-97H和HCCLM3细胞中,CYP27A1主要定位于细胞核;在HepG2细胞中,CYP27A1主要定位于线粒体。与阴性对照组比较,过表达CYP27A1后,HCC细胞活力下降(P0.05)。CYP27A1与抑制ROS生成相关基因表达呈正相关(P<0.05),抑制ROS生成相关基因与HCC增殖相关基因表达呈负相关(P<0.05)。结论CYP27A1在HCC中呈低表达,下调CYP27A1可能通过促进ROS生成促进HCC恶性生长。

关键词：肝细胞癌细胞色素P450家族27亚家族A成员1 恶性生长

人类白细胞抗原G与COVID-19研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第5期44卷 441-446页

作者：林爱芬颜卫华温州医科大学附属台州医院生物资源中心台州317000 温州医科大学附属台州医院中心实验室台州317000

宿主抗病毒免疫应答对于入侵病毒清除和疾病控制至关重要。COVID-19患者常见免疫细胞数量显著减少和功能耗竭,与疾病严重程度和不良预后密切相关。人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen G,HLA-G)是一种重要的免疫检查点分子,能特异... 详细信息

宿主抗病毒免疫应答对于入侵病毒清除和疾病控制至关重要。COVID-19患者常见免疫细胞数量显著减少和功能耗竭,与疾病严重程度和不良预后密切相关。人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen G,HLA-G)是一种重要的免疫检查点分子,能特异性结合免疫细胞表达的多种免疫抑制性受体,系统性抑制机体免疫应答。近来研究显示,HLA-G基因多态性及其分子表达对SARS-CoV-2易感性及COVID-19疾病进展具有重要意义。本文就HLA-G基因及分子特点、HLA-G/受体信号转导与免疫功能调节、HLA-G与COVID-19疾病进展等方面进行综述。

关键词：人类白细胞抗原G SARS-CoV-2 COVID-19 免疫应答易感性

失活X染色体基因逃逸与系统性红斑狼疮的性别二态性

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遗传 2024年第1期46卷 18-33页

作者：马茜周少岚党洁霍正浩马占兵宁夏大学生命科学学院银川750021 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004 宁夏医科大学总医院风湿免疫科银川750003 宁夏医科大学教育部生育力保持重点实验室银川750004

X染色体失活可平衡女性中两条X染色体的基因剂量。越来越多的证据表明,失活X染色体上存在许多能够逃逸失活的基因。逃逸的机制涉及到DNA、RNA、组蛋白的表观修饰以及众多的调控蛋白和染色质的空间结构。失活X染色体基因逃逸的研究为人... 详细信息

X染色体失活可平衡女性中两条X染色体的基因剂量。越来越多的证据表明,失活X染色体上存在许多能够逃逸失活的基因。逃逸的机制涉及到DNA、RNA、组蛋白的表观修饰以及众多的调控蛋白和染色质的空间结构。失活X染色体基因逃逸的研究为人类疾病(特别是自身免疫性疾病)性别二态性的研究开辟了新的途径。目前已证实包括TLR7、CD40L、IRAK-1、CXCR3、CXorf21等失活X染色体基因逃逸是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)女性好发的重要原因。本文主要综述了失活X染色体上基因逃逸以及与SLE性别二态性形成的分子机制。阐明SLE性别二态性形成的分子机制,不仅对疾病的诊断、治疗具有重要意义,而且对深入揭示人类免疫系统的发育及调控机理也有重要的理论意义。

关键词：失活X染色体基因逃逸性别二态性系统性红斑狼疮

SARS-CoV-2 S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的研究进展

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中国感染控制杂志 2024年第1期23卷 112-118页

作者：刘兴健张华华张锐钢广东医科大学基础医学院生理学教研室广东湛江524023 广东医科大学基础医学院生物学教研室广东湛江524023

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了... 详细信息

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了解S蛋白本身对呼吸道的影响能够为防治新型冠状病毒感染提供新视角。本文对SARS-CoV-2结构蛋白S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的可能机制、临床表现等方面的研究进展进行了梳理,以期为疾病的预防和治疗提供参考。

关键词： SARS-CoV-2 S蛋白 ACE2 呼吸道炎症

铜绿假单胞菌中PA0847二鸟苷酸环化酶活性受非催化位点Y700调控

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微生物学报 2024年第7期64卷 2337-2351页

作者：肖王鑫杨婷婷黄卫东袁文肃张燕林志天津大学生命科学学院天津300072 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750003

【目的】鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中PA0847胞内结构域及其突变体的二鸟苷酸环化酶活性,并初步探究其催化机制。【方法】利用刚果红平板染色法验证PA0847胞内域的二鸟苷酸环化酶活性;采用PCR技术构建PA0847 PAS-GGDEF... 详细信息

【目的】鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中PA0847胞内结构域及其突变体的二鸟苷酸环化酶活性,并初步探究其催化机制。【方法】利用刚果红平板染色法验证PA0847胞内域的二鸟苷酸环化酶活性;采用PCR技术构建PA0847 PAS-GGDEF结构域及其单点突变体,并经过表达纯化获得相应蛋白;经凝胶分子筛层析分析蛋白在溶液中的聚集状态;通过体外酶促反应鉴定蛋白的二鸟苷酸环化酶活性,基于噻唑橙荧光染色检测蛋白酶促反应后环鸟苷二磷酸(cyclic diguanylate monophosphate,c-di-GMP)的生成量,并筛选与二鸟苷酸环化酶活性密切相关的氨基酸残基;联用结构预测和分子对接获得PA0847 PAS-GGDEF二聚体以及结合三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate,GTP)的复合物结构模型。【结果】PA0847 PAS-GGDEF主要以二聚体形式发挥催化活性,PAS结构域促进二聚体形成,有效提高二鸟苷酸环化酶活性;突变筛选发现,在低蛋白浓度(0.6 mg/m L)下,非催化位点突变体Y700A活性较野生型显著提高;凝胶分子筛层析表明,其高活性可能与Y700A突变促进GGDEF(Gly-Gly-Asp-Glu-Phe)结构域二聚化有关;结构模型分析显示,PA0847 PAS-GGDEF与GTP结合位点保守,其中K722的氨基侧链在结合GTP的磷酸基团中发挥着重要作用,而Y700芳香环侧链与K722所在的α螺旋有疏水互作,因此Y700A突变可能改变了K722所在螺旋的空间取向,进而促进K722与底物GTP的结合以及GGDEF二聚化。【结论】铜绿假单胞菌PA0847的非催化位点Y700可间接调控二鸟苷酸环化酶活性。

关键词：铜绿假单胞菌 PA0847 环鸟苷二磷酸(c-di-GMP) 三磷酸鸟苷

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利用组培技术构建半夏杂交体系

种子 2024年第4期43卷 81-87页

作者：舒福兴王嘉亮陈国广王馨瑶姚朝旭金磊磊汪鑫王栋栋陈集双南京工业大学生物与制药工程学院南京211816 遵义医科大学生物资源健康利用研究中心贵州遵义563000

本研究通过构建半夏品系的杂交体系并研究杂交种苗的扩繁周期,以解决半夏自然杂交成功率低、杂交种苗繁育效率低的问题。对消毒过的半夏花粉和雌蕊以TTC法测定其活力,并通过对比实验确定雌蕊的最佳培养基,对3种新的半夏品系持续培养出F_... 详细信息

本研究通过构建半夏品系的杂交体系并研究杂交种苗的扩繁周期,以解决半夏自然杂交成功率低、杂交种苗繁育效率低的问题。对消毒过的半夏花粉和雌蕊以TTC法测定其活力,并通过对比实验确定雌蕊的最佳培养基,对3种新的半夏品系持续培养出F_(1)代杂交苗,通过杂交苗继代探究转接周期和成苗周期。结果表明,半夏雌蕊和花粉的最佳消毒时间为6 min;雌蕊的最佳培养基配方是半糖无琼脂MS培养基20.00 g/L+蔗糖15.00 g/L+琼脂5.00 g/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 0.01 mg/L,pH=5.8。以此为基础,培育出F_(1)代苗;4种半夏品系的F_(1)代杂交苗与亲本组培苗叶型有明显区别,经过扩繁发现了两个杂交种苗的扩繁周期。本研究建立了基于植物组织培养技术的半夏杂交体系并获得杂交苗,并探明杂交种苗的繁育周期。

关键词：半夏杂交育种植物组培杂交体系叶型比较繁育周期

不同年份陈皮中多糖-酚结合物的组成和抗氧化性研究

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食品与发酵工业 2024年第16期50卷 265-270页

作者：田长城李晶陶志杰赵大庆蚌埠学院食品与生物工程学院安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学生命科学学院安徽蚌埠233030

陈皮是一种传统的药食同源物质,在食品和中医药行业中有着广泛的应用。传统观点认为陈皮贮藏年份越久,其营养价值越高,但其机理尚不清楚。该研究着重探讨了1年、5年和10年陈皮中多糖-酚结合物(polysaccharide-phenol conjugates, PPC)... 详细信息

陈皮是一种传统的药食同源物质,在食品和中医药行业中有着广泛的应用。传统观点认为陈皮贮藏年份越久,其营养价值越高,但其机理尚不清楚。该研究着重探讨了1年、5年和10年陈皮中多糖-酚结合物(polysaccharide-phenol conjugates, PPC)的组成及其体外抗氧化活性,以期阐释陈皮贮藏年份与其活性之间的联系。采用扫描电子显微镜观察了PPC的表面结构,同时结合碱解萃取和HPLC法分析了PPC中不同形式酚类物质的含量。研究结果表明,PPC-1中含有较多的游离酚,表面平整光滑,而PPC-5和PPC-10中则含有较多的可溶性和不溶性结合酚,表面呈现为镂空网状结构。体外抗氧化实验结果表明,PPC-5和PPC-10能有效清除DPPH自由基、抑制脂质过氧化,同时抑制自由基对DNA的损伤。随着贮藏年份的延长,陈皮中非共价键结合的酚类会逐渐与多糖发生共价结合,形成的多糖-酚结合物具有更强的抗氧化活性,增强了陈皮的营养功效。

关键词：陈皮多糖抗氧化活性 DNA损伤酚类

采用RNA测序技术分析儿童呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的转录组特征

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中华预防医学杂志 2024年第1期58卷 71-80页

作者：王乐颖乐伊莎李海燕刘振伟翁婷婷陈小芳留佩宁董琳温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童呼吸科温州325027 温州医科大学基因组医学研究院温州325025 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童保健科温州325027

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支... 详细信息

本研究通过对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿血白细胞进行RNA测序,探讨与发病机制及疾病严重度相关的生物学特征。本研究是一项病例对照研究,以2019年10月至2022年4月于温州医科大学附属第二医院儿童呼吸科住院临床诊断为毛细支气管炎,RSV抗原阳性和(或)RSV核酸阳性的87例患儿作为病例组,将病例组按病情分为轻、中、重三组,按有无特应征分为特应征组和无特应征组,选择同期40名健康体检儿童作为对照组,提取病例组和对照组儿童的全血白细胞RNA进行测序,分析数据得到差异表达基因(DEGs),再通过基因本体论(GO)注释、京都基因和基因组百科全书(KEGG)注释、蛋白质相互作用网络(PPI)构建筛选与发病机制、病情以及特应征相关的免疫生物学通路及基因。通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建共表达网络,寻找与疾病严重度相关的潜在生物学指标。结果显示,病例组与对照组相比DEGs共有1782个,其中上调基因1586个,下调基因196个,这些DEGs的GO通路富集显示在分子功能中主要富集在过氧化物酶活性、氧化还原酶活性等过程,在细胞学组分中主要富集在细胞质囊泡腔、分泌颗粒腔中,在生物学过程中主要富集在中性粒细胞激活参与免疫反应、中性粒细胞脱颗粒、中性粒细胞激活等过程。DEGs的KEGG富集分析显示主要富集于病毒蛋白与细胞因子及其受体的相互作用信号通路。构建PPI网络后得到CCL2、IL-10、MMP9和JUN共4个处于核心位置的基因。不同病情组与对照组比较所得DEGs主要富集在逆行内源性大麻素信号转导和细胞凋亡通路上。WGCNA分析显示与血氧饱和度相关的棕色模块与病情关系最为密切,其基因主要富集在RNA解旋酶维甲酸诱导基因-I(RIG-I)样受体信号通路上。特应征组的特异性DEGs有230个,无特应征组的特异性DEGs有444个,KEGG富集分析结果显示两组均富集到NF-κB信号通路上,特应征不会导致RSV毛细支气管炎儿童免疫反应和转录组特征发生明显改变。综上,中性粒细胞激活、脱颗粒途径以及病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用信号通路参与RSV毛细支气管炎宿主的免疫反应。CCL2、IL-10、MMP9和JUN基因可能与发病相关。在RIG-I样受体、细胞凋亡及内源性大麻素相关的信号通路中可能存在与疾病严重度相关的潜在生物学标志物。

关键词：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎疾病严重程度 RNA测序