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小鼠精原细胞分选方法改良的研究

中华男科学杂志 2019年第11期25卷 963-970页

作者：李堃刘悦黄鹏杨智昉胡茜张颖李志宏吕叶辉梁乐上海健康医学院基础医学院上海201318 上海交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学教研室上海200025 上海健康医学院临床医学院上海201318

目的:通过特异抗体结合的磁珠分选,改进小鼠未分化和分化中两类精原细胞分选方法。方法:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术,分别将出生后7 d雄性小鼠睾丸中的Thy1^+细胞和c-Kit^+细胞分别做为未分化和分化中的精原细胞分... 详细信息

目的:通过特异抗体结合的磁珠分选,改进小鼠未分化和分化中两类精原细胞分选方法。方法:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术,分别将出生后7 d雄性小鼠睾丸中的Thy1^+细胞和c-Kit^+细胞分别做为未分化和分化中的精原细胞分选出来,利用免疫荧光技术和流式细胞术,检测两种精原细胞的纯度,利用实时荧光定量PCR检测两种精原细胞中Gfrα1、Plzf、c-kit和sohlh2 mRNA的表达差异来鉴定两种精原细胞,并将Thy1^+细胞进行原代细胞培养。结果:Thy1^+细胞和c-Kit^+细胞的分选纯度分别达到(85.6±8.35)%和(89.40±2.77)%(P<0.01)。Thy1^+细胞中Gfrα1和Plzf基因的相对表达量分别可达到c-Kit^+细胞的(9.47±1.29)、(4.40±0.59)倍,而在c-Kit^+细胞中kit和sohlh2基因的相对表达量分别可达到Thy1^+细胞的(7.38±1.07)、(3.88±0.28)倍(P<0.01)。原代培养后,可见细胞状态良好,能够顺利的自我增殖,并具有精原干细胞增殖特征。结论:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术可以有效地将未分化和分化中的精原细胞分选出来,并将未分化的精原细胞进行体外培养。

关键词：精原细胞分化中未分化磁珠分选小鼠

丙戊酸孤独症大鼠脑中经典Wnt信号通路的变化

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中国病理生理杂志 2014年第8期30卷 1394-1399页

作者：张应花邓晓慧王中平崔卫刚文小军李瑞锡新乡医学院解剖教研室河南新乡453003 复旦大学上海医学院人体解剖与组织胚胎学系上海200032 九江学院基础医学院生理学与病理生理学教研室江西九江332000

目的:探讨经典Wnt信号通路在孤独症发病中的作用。方法:利用丙戊酸孤独症大鼠模型,检测经典Wnt信号通路信号分子在孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达。Western blotting法检测糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3... 详细信息

目的:探讨经典Wnt信号通路在孤独症发病中的作用。方法:利用丙戊酸孤独症大鼠模型,检测经典Wnt信号通路信号分子在孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达。Western blotting法检测糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、磷酸化GSK-3β、β-catenin和磷酸化β-catenin表达,半定量RT-PCR法检测GSK-3β、β-catenin、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达。结果:与对照组相比,在丙戊酸孤独症大鼠前额叶皮质及海马脑区,失活的GSK-3β磷酸化表达显著增加,抑制性的β-catenin磷酸化表达显著减少;GSK-3βmRNA表达减少,β-catenin mRNA表达增加,下游c-Myc和cyclin D1 mRNA表达增加。结论:前额叶皮质及海马中经典Wnt信号通路活性增加可能促进了机体对孤独症的易感性。

关键词：孤独症 Wnt信号通路丙戊酸

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硬脑膜的形态结构研究

中华外科杂志 1990年第2期28卷 108-109页

作者：姜殿辅秦振声 200070，上海铁道医学院人体解剖学教研室 00070，上海铁道医学院人体解剖学教研室数理统计教研室生理教研室

调查100例成年人硬脑膜标本,用定积分法计算硬脑膜面积,男性平均为0.080m、女性平均为0.076m。使用小游标卡尺测量硬脑膜厚度,额区平均为0.25mm,顶区0.4mm,枕区0.3mm,颞区0.35mm。每1mm的硬脑膜能承受37kg左右的抗张力强度。硬脑膜的纤... 详细信息

调查100例成年人硬脑膜标本,用定积分法计算硬脑膜面积,男性平均为0.080m、女性平均为0.076m。使用小游标卡尺测量硬脑膜厚度,额区平均为0.25mm,顶区0.4mm,枕区0.3mm,颞区0.35mm。每1mm的硬脑膜能承受37kg左右的抗张力强度。硬脑膜的纤维走向多种多样,一般以弓状、放射状、纵行和斜行为主。冷冻干的硬脑膜,作为生物移植材料,在国外已广泛应用于临床外科、妇产科、五官科和齿科等领域之内。

关键词：硬脑膜形态结构生物移植材料

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生物材料在心脏再生修复过程中的应用

中国动脉硬化杂志 2024年第6期32卷 539-546页

作者：吴学平吕叶辉上海健康医学院人体解剖与组织胚胎学教研室上海市201318 上海健康医学院创面防治研究所上海市201318

心肌梗死是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死,发病率和死亡率居高不下。虽然通过冠状动脉介入或溶栓药物等治疗手段恢复血供,能提高患者的生存率,但难以挽救梗死区丢失的心肌细胞,而成年哺乳动物心脏自身修复能力有限是造... 详细信息

心肌梗死是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死,发病率和死亡率居高不下。虽然通过冠状动脉介入或溶栓药物等治疗手段恢复血供,能提高患者的生存率,但难以挽救梗死区丢失的心肌细胞,而成年哺乳动物心脏自身修复能力有限是造成心肌纤维化,最终进展为心力衰竭的主要因素。长期以来,已有的治疗手段难以逆转心肌梗死后的心力衰竭进程。细胞移植有望成为促进梗死修复与再生最有前景的治疗方法,由于缺血缺氧微环境导致移植后有限的干细胞存活和保留,结果不是很理想。而脱细胞生物材料以促进血管生成和减轻纤维化显示了临床前治疗潜力。该综述概述了各种脱细胞生物材料及通过微创的方式进行心外膜修复及心肌内注射促进心脏再生、改善心脏功能的利与弊,为将来利用脱细胞生物材料结合优化的药物促进心肌再生提供参考。

关键词：缺血性心脏病脱细胞生物材料心脏手术心肌再生血管生成

Ⅰ型、Ⅲ胶原mRNA在Ⅱ型糖尿病大鼠窦房结的表达及变化

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解剖学杂志 2017年第5期40卷 517-519页

作者：林乐迎欧阳娟张红旗王庆志赣南医学院人体解剖学教研室赣州341000 赣南医学院生理学教研室赣州341000 复旦大学上海医学院解剖学组织学与胚胎学系上海200032 新乡医学院人体解剖学教研室新乡453003

目的:探讨Ⅱ型糖尿病大鼠窦房结(SAN)内Ⅰ、Ⅲ型间质胶原重塑及胰岛素对其的影响。方法:高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备Ⅱ型糖尿病大鼠模型,并随机分为正常对照组、糖尿病组和胰岛素治疗组(每只3 U/d股内侧皮下注射)... 详细信息

目的:探讨Ⅱ型糖尿病大鼠窦房结(SAN)内Ⅰ、Ⅲ型间质胶原重塑及胰岛素对其的影响。方法:高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备Ⅱ型糖尿病大鼠模型,并随机分为正常对照组、糖尿病组和胰岛素治疗组(每只3 U/d股内侧皮下注射),对照组和糖尿病组注射等剂量的生理盐水(股内侧皮下注射)每天1次,持续喂养4个月;以半定量RTPCR检测Ⅰ型、Ⅲ胶原mRNA在各组窦房结的表达及变化。结果:与对照组比较,糖尿病组Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维在窦房结内明显增加;治疗组较糖尿病组呈显著下降。图像分析结果显示Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达量为糖尿病组>治疗组>对照组。糖尿病组Ⅰ/Ⅲ型胶原基因mRNA表达比值明显较对照组上升。结论:Ⅱ型糖尿病可致窦房结胶原重塑,胰岛素治疗可使其发生逆转。

关键词：胶原窦房结糖尿病大鼠

Ⅰ型、Ⅲ型胶原基因mRNA在Ⅱ型糖尿病大鼠房室结的表达及变化

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解剖学杂志 2015年第4期38卷 405-405,476页

目的:探讨Ⅱ型糖尿病大鼠房室结内Ⅰ、Ⅲ型间质胶原重塑及胰岛素对其的影响.方法:高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备Ⅱ型糖尿病大鼠模型,并随机分为正常对照组、糖尿病组和胰岛素治疗组,半定量RT-PCR方法检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原基... 详细信息

目的:探讨Ⅱ型糖尿病大鼠房室结内Ⅰ、Ⅲ型间质胶原重塑及胰岛素对其的影响.方法:高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备Ⅱ型糖尿病大鼠模型,并随机分为正常对照组、糖尿病组和胰岛素治疗组,半定量RT-PCR方法检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原基因rmRNA在各组房室结的表达及变化.结果:糖尿病组Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维在房室结内明显增加,而治疗组较糖尿病组呈显著下降.图像分析结果显示Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量为糖尿病组＞治疗组＞对照组.糖尿病组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例明显较对照组上升.结论:Ⅱ型糖尿病大鼠房室结16周后出现间质胶原重塑,胶原类型比例失衡;Ⅱ型糖尿病大鼠行胰岛素降低血糖后可不同程度下调房室结间质胶原的沉积,一定程度上逆转胶原类型比例紊乱.

关键词：胶原房室结糖尿病大鼠

分选蛋白SNX4在小鼠睾丸中的表达和定位研究

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安徽医科大学学报 2020年第2期55卷 235-239页

目的明确分选连接蛋白4(SNX4)在小鼠睾丸中的表达规律及其可能参与的内体分选功能。方法利用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测小鼠睾丸中SNX家族23个家族成员的mRNA的表达差异。利用Real-time PCR技术检测小鼠肝、脾、肾、脑和... 详细信息

目的明确分选连接蛋白4(SNX4)在小鼠睾丸中的表达规律及其可能参与的内体分选功能。方法利用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测小鼠睾丸中SNX家族23个家族成员的mRNA的表达差异。利用Real-time PCR技术检测小鼠肝、脾、肾、脑和睾丸的mRNA的表达差异。利用免疫组织化学和免疫荧光染色的方法,检测SNX4和大鼠肉瘤(Ras)蛋白超家族成员中的Rab家族成员之一Rab5在睾丸及支持细胞中的定位。结果在小鼠的睾丸中SNX4的相对表达量可达到肝脏的约(15.49±4.92)倍(P<0.01);在睾丸中,SNX家族中的23个家族成员中,SNX1和SNX4的相对表达量较高。SNX4在睾丸支持细胞(sertoli cells)表达,并且与早期内体的标志物Rab5具有共定位的特性。结论SNX4在小鼠睾丸sertoli cells高表达并且和Rab5共定位,SNX4的蛋白分布提示其可能参与了sertoli cells中内体的运输和分选过程。

关键词： SNX4 睾丸 Rab5 内体

G-CSF对帕金森病小鼠运动能力和黑质纹状体神经元的影响

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神经解剖学杂志 2019年第1期35卷 1-7页

作者：张丹丹张宇新张乘云郭森崔海鹏贾桦宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系银川750004 华北理工大学基础医学院人体解剖学教研室唐山063200 承德医学院人体解剖学教研室承德067000 承德医学院病理生理学教研室承德067000

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CS... 详细信息

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中脑黑质致密部(SNpc)及纹状体(STR)多巴胺(DA)能神经元的影响。方法:正常健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、MPTP组及MPTP+G-CSF组,采用腹腔注射MPTP法制作小鼠PD模型,MPTP+G-CSF组于最后一次MPTP注射后再腹腔注射G-CSF。爬杆实验观察小鼠的行为学改变;尼氏染色技术观察各组小鼠黑质致密部神经元数量及形态学变化;免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)在各组小鼠中脑黑质致密部及纹状体的表达; Western Blot法检测各组小鼠中脑TH蛋白的表达量。结果:与对照组相比,MPTP组小鼠较对照组爬杆用时显著延长(P <0. 05),尼氏染色显示黑质致密部神经元数量显著减少(P <0. 05),黑质致密部、纹状体TH表达量显著减少(P <0. 05); MPTP+G-CSF组较MPTP组爬杆用时显著缩短(P <0. 05),神经元丢失减少(P <0. 05),神经元形态较完整;与MPTP组比较,MPTP+G-CSF组黑质致密部、纹状体TH表达水平显著增高(P <0. 05)。结论:G-CSF能够改善PD小鼠运动功能,减少黑质致密部多巴胺能神经元丢失,增加TH表达水平。

关键词：帕金森病 1-甲基4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶粒细胞集落刺激因子酪氨酸羟化酶小鼠

舒林酸对丙戊酸孤独症动物模型大鼠氧化应激变化的影响

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中国病理生理杂志 2014年第12期30卷 2161-2165页

作者：张应花杨彩玲崔卫刚王中平文小军李瑞锡新乡医学院解剖教研室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院口腔颌面外科河南卫辉453100 复旦大学上海医学院人体解剖与组织胚胎学系上海200032 九江学院基础医学院生理学与病理生理学教研室江西九江332000

目的:探讨舒林酸对孤独症发生过程中氧化应激变化的影响。方法:利用丙戊酸(VPA)孤独症动物模型,检测经典Wnt信号通路特异性抑制剂舒林酸处理后经典Wnt信号通路及氧化应激标志物在孤独症模型大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达变化。Western... 详细信息

目的:探讨舒林酸对孤独症发生过程中氧化应激变化的影响。方法:利用丙戊酸(VPA)孤独症动物模型,检测经典Wnt信号通路特异性抑制剂舒林酸处理后经典Wnt信号通路及氧化应激标志物在孤独症模型大鼠前额叶皮质及海马脑区的表达变化。Western blotting法检测糖原合成激酶3β(GSK-3β)、β-catenin和4-羟基壬烯醛(4-HNE)表达,半定量RT-PCR法检测硫氧还蛋白(Trx)1和Trx2 mRNA表达。结果:与对照组相比,在前额叶皮质及海马脑区VPA组GSK-3β蛋白表达减少,Trx1和Trx mRNA表达减少,β-catenin与4-HNE的表达增加;而与VPA组相比,VPA与舒林酸同时处理组GSK-3β的表达显著增加,β-catenin和4-HNE的表达显著减少。结论:舒林酸减少了孤独症发生过程中氧化应激的产生,提示经典Wnt信号通路上调导致氧化应激产生,进而导致孤独症易感性增加。

关键词：孤独症 Wnt/β-catenin通路丙戊酸舒林酸氧化应激