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hBMSCs的生物打印初步研究

中国修复重建外科杂志 2009年第4期23卷 497-500页

作者：麻荪香柴岗刘齐海胡庆夕周广东崔磊上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海200011 上海市组织工程研究重点实验室上海大学快速成型中心

目的初步确立hBMSCs的二维生物打印方法,实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后细胞活力。方法取健康志愿者骨髓5mL,常规培养hBMSCs至第2代,调整为1×106个/mL单细胞悬液。实验分3组:打印组1细胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)荧光... 详细信息

目的初步确立hBMSCs的二维生物打印方法,实现对细胞喷射过程的控制并保持打印后细胞活力。方法取健康志愿者骨髓5mL,常规培养hBMSCs至第2代,调整为1×106个/mL单细胞悬液。实验分3组:打印组1细胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)荧光标记,快速成型组织打印机进行二维细胞打印,x轴间隔300μm,y轴间隔1500μm,激光共聚焦显微镜观察。打印组2细胞未行PI标记,经生物打印后培养2h,Live/Dead viability Kit测定细胞活力,激光共聚焦显微镜观察细胞荧光染色情况;取1份未经Live/Dead viability Kit测试的打印组2细胞,培养7d后倒置显微镜观察细胞形态,贴壁后常规培养,动态观察细胞生长状态。对照组除细胞悬液不行打印,其余操作同打印组2。结果打印组1细胞激光共聚焦显微镜观察,"细胞墨滴"在二维组织中规则且均匀分布,满足二维设计细胞打印要求;每个"细胞墨滴"包含细胞15～35个。打印组2细胞经活力测试,细胞孵育30min后激光共聚焦显微镜观察显示细胞荧光染色情况。对照组细胞活力与打印组2无明显区别。打印后细胞常规培养7d,细胞可正常贴壁生长,形态、生长状态良好。结论通过生物打印技术可实现hBMSCs在二维平面上的定向、定量规则分布,并为进一步的细胞三维打印乃至器官打印体系奠定基础。

关键词：组织工程 hBMSCs 细胞打印快速成型

颊侧黏膜瓣在牙源性口腔上颌窦瘘修复中的应用

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中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志 2022年第3期30卷 211-215页

作者：孙艺渊许晨婕王珮华江璞玉吴晴伟上海交通大学医学院附属第九人民医院耳鼻咽喉头颈外科上海交通大学医学院耳科学研究所上海市耳鼻疾病转化医学重点实验室上海200011

目的探讨颊侧黏膜瓣在牙源性口腔上颌窦瘘修复手术中的临床应用,评价改善鼻腔及口腔相关功能的临床疗效。方法2017年1月~2020年12月收治15例牙源性上颌窦炎合并口腔上颌窦瘘患者,术前所有患者均行高分辨率螺旋CT扫描或CBCT用于评估。实... 详细信息

目的探讨颊侧黏膜瓣在牙源性口腔上颌窦瘘修复手术中的临床应用,评价改善鼻腔及口腔相关功能的临床疗效。方法2017年1月~2020年12月收治15例牙源性上颌窦炎合并口腔上颌窦瘘患者,术前所有患者均行高分辨率螺旋CT扫描或CBCT用于评估。实施功能性鼻内镜上颌窦开放手术,同时使用口腔上颌窦瘘邻近的颊侧黏膜瓣修复关闭瘘口。结果115例牙源性上颌窦炎合并口腔上颌窦瘘患者术后随访6~12个月,14例患者瘘口一期愈合,1例患者出现修补创面裂开,使用颊脂垫瓣修复愈合。患者手术前、后鼻部VAS评分均值分别为(6.87±1.51)分和(1.87±0.92)分,口腔健康影响程度量表评分均值分别为(30.07±8.16)和(14.07±3.75),两组数据差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论颊侧黏膜瓣作为局部口腔黏膜瓣,应用于口腔上颌窦瘘修复,血运丰富,手术操作简单,成功率高,可改善患者的生活质量,具有重要的临床应用价值。

关键词：口腔上颌窦瘘牙源性上颌窦炎颊侧黏膜瓣

环状RNA circ_0007823在三阴性乳腺癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响

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中华乳腺病杂志（电子版） 2022年第4期16卷 204-211页

作者：于金玲高蓓敏崔静王浩峰朱江帆沈卫达上海市长宁区妇幼保健院乳腺科 200050 同济大学医学院附属第十人民医院普外科上海200072

目的研究三阴性乳腺癌中环状RNA circ_0007823的表达量及其影响三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学行为的可能机制。方法按照纳入及排除标准,纳入2016年1月至2020年12月上海市长宁区妇幼保健院收治的女性TNBC患者120例,按照随机数字表法从中... 详细信息

目的研究三阴性乳腺癌中环状RNA circ_0007823的表达量及其影响三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学行为的可能机制。方法按照纳入及排除标准,纳入2016年1月至2020年12月上海市长宁区妇幼保健院收治的女性TNBC患者120例,按照随机数字表法从中选择30例进行回顾性研究。运用实时定量RT-PCR检测circ_0007823在TNBC组织及癌旁正常组织中的表达量,用t检验比较其差异。按照circ_0007823在TNBC组织中的表达量中位值为截点,将30例患者分为circ_0007823高表达组与circ_0007823低表达组,采用Fisher确切概率法比较circ_0007823高、低表达组间临床病理特征的差异。为了研究circ_0007823过表达在TNBC细胞中的作用,将MDA-MB-231细胞分为2组:circ_0007823过表达质粒转染组和空载体转染组(对照),分别转染circ_0007823过表达载体质粒及空载体质粒。转染48 h后,使用Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力,使用CCK-8法检测细胞的增殖活性。为了进一步研究circ_0007823突变在TNBC细胞中的作用,将MDA-MB-231细胞分为3组:circ_NC组、circ_0007823-Mut组、circ_0007823-WT组,分别转染空载体、circ_0007823突变型和circ_0007823野生型质粒。转染48 h后,使用Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;转染0、24、48、72、96 h后,使用CCK-8法检测细胞的增殖活性。使用双荧光素酶报告基因实验验证circ_0007823与miR-182-5p的关系。运用RT-PCR及Western blot实验检测过表达circ_0007823后MDA-MB-231细胞中miR-182-5p及靶基因FOXF2的表达。迁移细胞数、侵袭细胞数的2组比较采用t检验,多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用Tukey法。细胞吸光度值的2组比较采用t检验,不同时间点的多组比较采用重复测量方差分析,组间两两比较采用Bonferroni法。结果TNBC组织中circ_0007823的表达量较癌旁正常组织降低(5.97±3.08比20.28±5.44,t=16.469,P<0.001)。TNBC组织中circ_0007823的表达量与淋巴结转移相关(P=0.014)。与空载体组相比,circ_0007823过表达组迁移细胞数降低(120.67±6.81比107.00±3.61,t=5.857,P=0.028),侵袭细胞数也降低(94.00±3.61比58.33±3.06,t=107.000,P<0.001),吸光度值下降(0.73±0.02比0.63±0.02,t=7.187,P=0.001)。circ_NC组、circ_0007823-Mut组、circ_0007823-WT组迁移细胞数分别为120.67±6.81、109.67±6.51、82.00±17.91,差异有统计学意义(F=38.550,P<0.001);3组侵袭细胞数分别为272.33±6.03、261.67±2.52、194.67±9.02,差异有统计学意义(F=128.648,P<0.001)。circ_0007823-WT组的迁移及侵袭细胞数较对照组、circ_0007823-Mut组均下降(P均<0.001)。circ_NC组、circ_0007823-Mut组、circ_0007823-WT组MDAMB-231细胞吸光度值比较,差异有统计学意义(组间比较,F=297.883,P<0.001;不同时间点比较,F=1207.174,P<0.001;交互作用,F=42.433,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验证实circ_0007823与miR-182-5p具有靶向结合位点。与对照组相比,circ_0007823过表达质粒转染MDA-MB-231细胞后,circ_0007823的表达量升高(1.01±0.9比9.30±2.47,t=-5.794,P=0.029),miR-182-5p的表达量降低(1.00±0.11比0.86±0.09,t=2.838,P=0.022),FOXF2的mRNA表达量升高(0.87±0.11比1.06±0.24,t=2.697,P=0.027)。结论circ_0007823在TNBC中低表达,对TNBC细胞增殖、侵袭及迁移能力有抑制作用,并可与miR-182-5p靶向结合,上调FOXF2表达。

关键词：三阴性乳腺癌转移微RNAs circ_0007823

微小RNA-148a对胃癌细胞MKN45增殖能力的影响及机制研究

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中华胃肠外科杂志 2014年第10期17卷 1036-1039页

作者：邱光庭王遂函李大鹏李继坤上海交通大学附属第一人民医院普通外科 200080

目的：探讨微小RNA（miR）-148a对人胃癌细胞增殖的影响及可能机制。方法采用实时定量PCR技术检测60例胃癌组织及癌旁组织中miR-148a的表达水平。利用慢病毒包装建立稳定表达miR-148a的MKN45细胞系为转染组，未转染的MKN45细胞系为对照... 详细信息

目的：探讨微小RNA（miR）-148a对人胃癌细胞增殖的影响及可能机制。方法采用实时定量PCR技术检测60例胃癌组织及癌旁组织中miR-148a的表达水平。利用慢病毒包装建立稳定表达miR-148a的MKN45细胞系为转染组，未转染的MKN45细胞系为对照组。 CCK8法检测MKN45细胞的增殖情况，通过targetscan预测miR-148a的靶基因，Western-blot检测靶基因的表达水平。结果54例（90．0％，54/60）胃癌组织中miR-148a的表达量较癌旁组织下调，其中37例（61．7％，37/60）下降2倍以上；淋巴结转移、有无癌旁血管浸润及TNM分期Ⅲ～Ⅴ期者其表达量明显降低（P＜0．05）。转染miR-148a后3 d，MKN45细胞生长明显受抑，转染组吸光度值（0．978±0．091）明显低于对照组（1．182±0．074，P＝0．000）。转染组CDC25B（通过targetscan发现的miR-148a靶基因）蛋白表达较对照组明显降低。结论 miR-148a在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织；其具有抑制胃癌细胞增殖的作用，CDC25B可能是miR-148a发挥抑癌作用的靶基因。

关键词：胃肿瘤微小RNA 细胞增殖 CDC25B基因

唾液腺腺样囊性癌颈淋巴结转移规律的临床研究

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中国肿瘤临床 2016年第24期43卷 1094-1098页

作者：黄擎韩楠男刘胜文王丽珍阮敏杨雯君张陈平上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科上海市口腔医学重点实验室上海市200011 安徽省合肥市第二人民医院口腔颌面外科上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科、上海市口腔医学重点实验室

目的:本研究旨在回顾性分析头颈部腺样囊性癌的颈部淋巴结的临床转移规律。方法:回顾性分析1995年1月至2008年12月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科的616例腺样囊性癌患者的临床资料,对其中62例腺样囊性癌... 详细信息

目的:本研究旨在回顾性分析头颈部腺样囊性癌的颈部淋巴结的临床转移规律。方法:回顾性分析1995年1月至2008年12月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科的616例腺样囊性癌患者的临床资料,对其中62例腺样囊性癌合并颈部淋巴结转移的患者进行临床统计学分析。结果:头颈部腺样囊性癌的颈淋巴结转移的发生率约为10%,原发于舌根、舌体及口底部的腺样囊性癌较其他部位更易发生颈部淋巴结转移,分别为19.2%、17.6%和15.3%,转移部位多发生在Ⅰb区与Ⅱ区。淋巴结转移的方式以经典的管道性转移为主,直接浸润型转移仅常见于下颌下腺的腺样囊性癌累及颌下淋巴结。原发部位及瘤周淋巴血管浸润与颈部淋巴结转移的发生密切相关。出现颈部淋巴结转移的患者其临床预后明显较差(P<0.01)。结论:舌-口底复合体为头颈部腺样囊性癌发生淋巴结转移的常见原发部位,在临床治疗及随访上应得到更多关注。

关键词：唾液腺腺样囊性癌淋巴结转移预后

利用猪颅底奇网制作动静脉畸形模型的实验研究

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介入放射学杂志 2011年第9期20卷 713-716页

作者：吕明明范新东苏立新上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科 200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科 200011

目的利用猪颅底奇网制作一种简单、经济的动静脉畸形模型。方法通过显微外科手术,将猪一侧颈总动脉与颈内静脉或颈外静脉吻合,建成动静脉畸形模型。吻合术后行血管造影及组织学检查。结果 8头家猪手术后全部成活。血流自右侧咽升动脉流... 详细信息

目的利用猪颅底奇网制作一种简单、经济的动静脉畸形模型。方法通过显微外科手术,将猪一侧颈总动脉与颈内静脉或颈外静脉吻合,建成动静脉畸形模型。吻合术后行血管造影及组织学检查。结果 8头家猪手术后全部成活。血流自右侧咽升动脉流经奇网和对侧咽升动脉,进入颈内/外静脉。术后3周1头家猪死亡。另1头家猪1个月时吻合口闭塞。结论使用动静脉端端吻合的方法制作急性期动静脉畸形的动物模型是可行的,但作为慢性期模型还有待改进。

关键词：动静脉畸形动物模型奇网血管吻合

两种树脂粘结剂对纤维桩粘接强度测试及界面的激光扫描共聚焦显微镜观察

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第47期13卷 9291-9294页

作者：陈丽萍黄林艳张富强上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科上海市口腔医学重点实验室上海市200011

背景:树脂类粘结剂包括全酸蚀、自酸蚀和一步法粘结剂,学者们对其粘接性能进行了大量的研究,观点却有所不同。目的:比较两种树脂粘结系统对纤维桩的剪切粘接强度,并用激光扫描共聚焦显微镜观察粘接界面的物理构象,了解宏观的固位力与微... 详细信息

背景:树脂类粘结剂包括全酸蚀、自酸蚀和一步法粘结剂,学者们对其粘接性能进行了大量的研究,观点却有所不同。目的:比较两种树脂粘结系统对纤维桩的剪切粘接强度,并用激光扫描共聚焦显微镜观察粘接界面的物理构象,了解宏观的固位力与微观的形态结构之间的关系。设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2008-03/2009-03在上海交通大学附属第九人民医院口腔修复实验室及口腔外科实验室完成。材料:实验采用的纤维桩为美国BISCO公司MATCHPOST石英纤维桩,两种树脂粘结系统为美国Bisco公司One-step粘结系统(全酸蚀粘结系统)和日本可乐丽株式会社的PanaviaF粘结系统(自酸蚀粘结系统),荧光素为美国Sigma公司罗丹明B异硫氢酸。方法:选用10颗无龋坏的人上颌中切牙,于釉牙骨质界冠方1mm处截除牙冠,随机分成2组,每组5颗。分别用One-step和PanaviaF两种树脂粘结系统在进行罗丹明标记后将石英纤维桩粘固于根管内。主要观察指标:牙根包埋后切片制备成2mm厚的标本,将标本置于EZ20微拉伸机上用微推出法进行剪切粘接强度测试并记录数值,同时用激光扫描共聚焦显微镜观察牙本质-粘结剂-桩之间界面,并用随机软件测量粘接层的厚度。结果:One-step粘结系统的粘接强度明显大于PanaviaF粘结系统的粘接强度(P<0.05),另外根颈部的粘接强度明显大于根尖部的粘接强度(P<0.05)。激光扫描共聚焦显微镜观察显示One-step粘结系统的混合层厚度大于PanaviaF粘结系统的混合层厚度(P<0.05)。结论:全酸蚀粘结系统对纤维桩的粘接强度大于自酸蚀粘结系统,树脂粘结剂对纤维桩的粘接强度在根颈部大于根尖部。

关键词：纤维桩树脂粘结剂粘结强度激光扫描共聚焦显微镜

定制型颞下颌关节-颅底联合假体的研发和临床应用

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中华口腔医学杂志 2021年第7期56卷 627-632页

作者：郑吉驷魏翔焦子先刘小涵陈敏洁姜闻博杨驰上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院3D打印医学转化中心 200011

目的优化设计并通过三维打印制作定制型颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)-颅底联合假体,验证其临床应用的安全性、有效性和精确性。方法前瞻性收集2016年10月至2020年11月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科就诊的T... 详细信息

目的优化设计并通过三维打印制作定制型颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)-颅底联合假体,验证其临床应用的安全性、有效性和精确性。方法前瞻性收集2016年10月至2020年11月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科就诊的TMJ-颅底联合病损患者,将术前颌面部CT数据导入Mimics 18.0软件,根据颅颌面骨应力分布、TMJ和颅底解剖结构与关节运动特征,个性化设计TMJ-颅底联合假体,主要包括颅底、关节窝、关节头和下颌柄4个部件。通过五轴精加工和三维打印等技术制作假体。手术选择改良耳颞前切口[必要时附加下颌后和(或)下颌下切口],显露TMJ-颅底联合病变后,在导板辅助下精准切除病变,固定假体。术中和术后分别对常规评价、颅颌关节结构及功能评价等指标进行记录和评估。结果10例患者[男性4例,女性6例,年龄(43.2±13.6)岁]术中假体均顺利就位且与骨面贴合紧密。随访(29.4±17.3)个月(6~54个月)后,术后患者咬合关系稳定,切口愈合良好,面形得到较好维持,均未发生头晕、头痛、脑脊液漏及永久性面神经损伤等不良症状;术后疼痛、饮食、下颌运动功能、开口度和患侧侧方运动均有明显改善,但前伸和健侧侧方运动恢复欠佳;术后曲面体层X线片和CT检查均显示假体未见明显松动、移位、断裂等;术后假体位置与设计位置相比,功能区最大误差为(0.52±0.17)mm,非功能区最大误差为(1.62±0.26)mm。结论本项研究自主研发的定制型TMJ-颅底联合假体在临床应用中具有较好的安全性、有效性和精确性。

关键词：颞下颌关节颌面假体颅底三维打印定制型假体

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复杂肠癌临床诊治策略之浅见

中华结直肠疾病电子杂志 2017年第2期6卷 90-93页

作者：王志刚上海市第六人民医院胃肠外科 200233

基于我国大肠癌高发的态势和众多局部晚期及复发肠癌病例的挑战,界定复杂肠癌的概念,有利于探索规范化结合个体化的多学科治疗策略。优化针对这类复杂肠癌的临床诊治策略,是提高大肠癌疗效的关键。本文旨在提出一些普遍性的原则供同道讨... 详细信息

基于我国大肠癌高发的态势和众多局部晚期及复发肠癌病例的挑战,界定复杂肠癌的概念,有利于探索规范化结合个体化的多学科治疗策略。优化针对这类复杂肠癌的临床诊治策略,是提高大肠癌疗效的关键。本文旨在提出一些普遍性的原则供同道讨论,以期引发对大肠癌这一疾病的整体把握的思考,包括:平衡原则、动态原则、多维度评价体系、目标导向、慢病全程管理理念、MDT机制、如何看待指南等。提升对大肠癌这一疾病的全面认识和对病情的全程把控,才能实现当代医学模式下的肿瘤规范化、合理、适度、个体化的治疗。复杂肠癌治疗的理念充满哲学与医学思想的交融,既有方法论,也有辩证法,既有对生存的追求,也渗透着人文的关爱。

关键词：结直肠肿瘤诊断治疗策略