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肺癌恶性胸腔积液来源肿瘤细胞的小鼠PDX模型构建及实验验证

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 435-443页

作者：王梦婷陈怡楠轩辕欣阳袁海花上海交通大学医学院附属第九人民医院肿瘤科上海201999

目的·构建肺癌患者恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)肿瘤细胞来源的肿瘤异种移植(patientderived tumor xenograft,PDX)模型,并进行实验验证。方法·从基因表达综合数据集(Gene Expression Omnibus,GEO)下载人肺癌伴MPE单细胞转录组测序公共数据GSE131907和人肺癌实体瘤单细胞转录组测序公共数据GSE203360,对数据进行聚类、差异基因本体功能富集分析,明确应用MPE建模的可行性。同时收集肺癌患者的MPE样本,经离心、裂解红细胞等富集细胞操作后,将其植入非肥胖型糖尿病重症联合免疫缺陷(non-obese diabetic/severe combined immunodeficient,NOD/SCID)小鼠皮下,待移植瘤生长至1000 mm³时进行瘤体传代及保存。对稳定传代移植瘤进行组织病理学检测,通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察细胞组织形态,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测肺癌标志物表达情况。结果·经单细胞数据分析发现MPE中肿瘤细胞的增殖功能更强,提示MPE中肿瘤细胞PDX建模或具备更佳成瘤效果;共收集35例肺癌MPE样本,成功构建13例PDX模型,成功率达37.14%;在组织病理学检测中,H-E染色可见移植瘤组织细胞异型性明显,IHC检测显示细胞角蛋白7(cytokeratin 7,CK7)、甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor-1,TTF1)和天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)等肺癌标志物均呈阳性表达。结论·通过富集肺癌患者MPE中的肿瘤细胞,成功构建了更为简便高效、可实时动态建模的PDX模型。该模型保留了肺癌患者肿瘤细胞的恶性特征及蛋白表达特性,为肺癌伴MPE患者的基础研究和临床用药指导提供了重要的实验模型工具。

关键词：肺癌恶性胸腔积液原代细胞培养患者来源的肿瘤异种移植模型

基于MRI多参数成像的决策树模型在腮腺肿瘤诊断中的价值

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中华放射学杂志 2024年第5期58卷 503-509页

作者：杨功鑫戴晓庆朱凌陶晓峰上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科上海200011

目的通过基于MRI多参数成像构建与临床治疗决策密切相关的腮腺肿瘤诊断决策树模型,并验证其在腮腺肿瘤诊断中的临床价值。方法该研究为横断面研究,回顾性收集2018年6月至2022年12月间上海交通大学医学院附属第九人民医院经病理证实的46... 详细信息

目的通过基于MRI多参数成像构建与临床治疗决策密切相关的腮腺肿瘤诊断决策树模型,并验证其在腮腺肿瘤诊断中的临床价值。方法该研究为横断面研究,回顾性收集2018年6月至2022年12月间上海交通大学医学院附属第九人民医院经病理证实的461例腮腺肿瘤患者的MRI数据,包括腮腺良性肿瘤364例、恶性上皮性肿瘤82例、淋巴瘤15例。按病理结果分层随机抽样分为训练集(326例)和验证集(135例)。训练集中良性肿瘤、恶性上皮肿瘤、淋巴瘤分别为256、59、11例,验证集中分别为108、23、4例。基于MRI和临床特征,通过卡方自动交互检测(CHAID)算法建立决策树模型,通过模型分类诊断,并计算对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤的诊断准确度,绘制受试者操作特征曲线,评价对3种肿瘤单独的诊断效能。结果在训练集中,通过CHAID算法得到肿瘤形状、包膜、表观扩散系数和时间-信号曲线类型4个最佳诊断指标,以此建立了决策树模型。该模型对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤的整体诊断准确度,在训练集为90.8%(296/326),在验证集为94.1%(127/135)。对腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤进行独立诊断时,训练集的曲线下面积分别为0.964、0.957、0.980,验证集分别为0.958、0.944、0.992。结论基于MRI多参数的决策树预测模型诊断腮腺良性肿瘤、恶性上皮性肿瘤和淋巴瘤具有较高效能。

关键词：腮腺肿瘤磁共振成像决策树

KHSRP通过ANK3调节前列腺癌细胞对雄激素的反应性

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 417-426页

作者：蔡人杰徐明上海交通大学医学院附属第九人民医院肿瘤科上海201999

目的·研究KH型剪接调节蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KHSRP)对前列腺癌细胞增殖能力的影响及其下游基因的表达调控,考察KHSRP在前列腺癌由雄激素依赖型向非依赖型转变过程中的潜在作用及机制。方法·通过重组慢病毒感染... 详细信息

目的·研究KH型剪接调节蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KHSRP)对前列腺癌细胞增殖能力的影响及其下游基因的表达调控,考察KHSRP在前列腺癌由雄激素依赖型向非依赖型转变过程中的潜在作用及机制。方法·通过重组慢病毒感染雄激素依赖型前列腺癌LNCaP细胞和雄激素非依赖型前列腺癌DU145细胞,分别构建KHSRP功能性缺失/获得的稳定细胞株,并比较KHSRP在2种细胞之间的功能差异。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测稳定细胞株中KHSRP、雄激素受体(androgen receptor,AR)及锚定蛋白3(ankyrin 3,ANK3)的表达量。通过细胞增殖实验、平板克隆实验、小鼠成瘤实验等检测KHSRP对LNCaP细胞增殖能力的影响。通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-seq)检测KHSRP影响的下游基因,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测KHSRP下游基因的mRNA表达量。结合癌细胞系百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedia,CCLE)、癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)、基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库,分析研究ANK3和KHSRP在前列腺组织样本中的表达情况以及ANK3在不同前列腺癌细胞株中的表达差异。结果·GEO数据分析结果显示KHSRP在前列腺癌组织中的表达高于良性前列腺组织,提示其与前列腺癌的发生相关。细胞增殖实验、平板克隆实验、小鼠成瘤实验结果显示KHSRP的表达与LNCaP细胞增殖能力呈负相关,提示KHSRP可以抑制前列腺癌细胞的增殖,且KHSRP对LNCaP细胞增殖能力的影响强于对DU145细胞的影响。对LNCaP稳定细胞株的Western blotting和RT-qPCR检测显示KSHRP过表达后LNCaP细胞中AR蛋白质水平下降,但mRNA水平未产生变化,提示KHSRP可以间接调节AR的蛋白质水平。RNA-seq和RT-qPCR结果显示KHSRP与影响AR蛋白稳定性的调节因子ANK3的表达呈正相关,随后的Western blotting证明KHSRP过表达后ANK3蛋白质的表达量明显升高,TCGA数据分析结果进一步说明KHSRP与ANK3的mRNA表达的相关性。根据CCLE和GEO数据,ANK3的表达与前列腺癌的恶性程度也密切相关。结论·KHSRP可能通过ANK3间接调控AR的蛋白稳定性,影响雄激素依赖型前列腺癌细胞的增殖能力,并介导前列腺癌细胞对雄激素反应性的改变。

关键词： KH型剪接调节蛋白(KHSRP) 雄激素受体(AR) 锚定蛋白3(ANK3) 前列腺癌细胞增殖

基于HPLC-QQQ-MS技术探讨炮制对肉苁蓉中5个活性成分的含量影响

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天然产物研究与开发 2024年第1期36卷 86-93页

作者：雷慧博余雅婷韩璐吴岩原永芳俞晓艳上海交通大学医学院附属第九人民医院药剂科上海200011

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱... 详细信息

炮制一般会对中药材的成分及药效产生重要作用,本文为了探讨炮制加工对肉苁蓉成分的影响,建立了同时测定炮制前后肉苁蓉中肉苁蓉苷F、毛蕊花糖苷、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量的高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(high-performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry,HPLC-QQQ-MS)的检测方法。采用50%甲醇溶液提取药物粉末,在Agilent Zorbax Eclipse Plus C 18(2.1 mm×150 mm,1.8μm)的色谱柱上,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,选取负离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式,以木通苯乙醇苷为内标成分,以进样量1μL,流速0.3 mL/min,柱温35℃,样品管理器温度8℃于HPLC-QQQ-MS进行同一批次炮制前后肉苁蓉中这五种成分的含量测定。结果显示5种成分在各自范围内线性关系良好,相关系数(r)在0.9929~0.9985之间,平均加样回收率在98.15%~100.2%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于4.6%。所建立的研究方法简便准确,可用于肉苁蓉的质量控制,并用于评价炮制对肉苁蓉含量及药效的影响。

关键词：肉苁蓉炮制化学成分含量测定 HPLC-QQQ-MS

SFXN3在头颈部鳞状细胞癌中的表达及其对细胞增殖的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第4期44卷 427-434页

作者：安俊伊陈必颖陈循睿尹姗姗边洲亮刘峰上海交通大学医学院附属第九人民医院肿瘤科上海201999

目的·分析线粒体相关基因SFXN3(sideroflexin 3)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达及其对细胞增殖的影响。方法·从公共数据库获取与线粒体相关的基因和TCGA-HNSCC数据集,使用生物信息学方法... 详细信息

目的·分析线粒体相关基因SFXN3(sideroflexin 3)在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达及其对细胞增殖的影响。方法·从公共数据库获取与线粒体相关的基因和TCGA-HNSCC数据集,使用生物信息学方法筛选出目标基因SFXN3。使用UALCAN数据库分析SFXN3在HNSCC患者样本中的表达,并根据TCGAHNSCC队列和GEO队列(GSE65858、GSE41613和GSE27020)对不同SFXN3表达水平的患者进行生存分析,使用TCGA-HNSCC队列和GEO队列(GSE40020、GSE210287)在治疗有应答和无应答的患者之间比较SFXN3表达水平差异。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)在收集的HNSCC癌和癌旁组织验证SFXN3的表达情况,并检测SFXN3在人正常口腔上皮细胞和HNSCC肿瘤细胞系中的表达水平。构建稳定敲低SFXN3的HNSCC细胞株,使用Incucyte活细胞成像分析系统和平板克隆形成实验观察SFXN3对HNSCC细胞增殖能力的影响。将稳定敲低SFXN3的细胞和对照组细胞的总RNA进行转录组测序,对敲低组相比对照组差异表达下调的基因进行通路富集分析。结果·SFXN3在HNSCC患者肿瘤组织中高表达(P=0.000),SFXN3高表达组患者预后较差(均P<0.05);治疗无应答者SFXN3表达水平高于有应答者(P=0.008),提示不良预后。并且在收集的HNSCC肿瘤组织和HNSCC细胞系上验证了SFXN3的高表达(均P<0.05)。SFXN3的表达水平敲低后,HNSCC细胞的增殖能力下降,平板克隆形成数目减少(均P<0.05)。RNA测序显示,SFXN3敲低组的HNSCC细胞差异表达下调的基因在DNA复制、细胞周期、线粒体翻译、线粒体RNA代谢过程、线粒体基因表达等通路富集。结论·SFXN3在HNSCC中高表达,与患者预后负相关。HNSCC细胞敲低SFXN3后增殖能力和平板克隆形成能力受到抑制,可能通过影响线粒体功能发挥作用。

关键词： SFXN3 头颈部鳞状细胞癌线粒体细胞增殖

新型冠状病毒感染继发诺卡菌病合并活动性肺结核一例并文献复习

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中国呼吸与危重监护杂志 2024年第7期23卷 504-508页

作者：任洁汤荣杨锴谢国钢丁凤鸣张旻上海交通大学医学院附属第一人民医院呼吸与危重症医学科上海交通大学医学院附属第一人民医院检验医学中心上海交通大学医学院附属第一人民医院放射科

目的分析新型冠状病毒感染继发诺卡菌病合并活动性肺结核患者的临床特征，提高临床医师对诺卡菌病的认识。方法回顾性分析1例新型冠状病毒感染患者继发诺卡菌病合并活动性肺结核病例的临床症状、实验室检查、影像学检查、病原学结果... 详细信息

目的分析新型冠状病毒感染继发诺卡菌病合并活动性肺结核患者的临床特征，提高临床医师对诺卡菌病的认识。方法回顾性分析1例新型冠状病毒感染患者继发诺卡菌病合并活动性肺结核病例的临床症状、实验室检查、影像学检查、病原学结果及治疗，并复习国内外相关文献。结果患者女，72岁，在新型冠状病毒感染后出现长期反复发热、咳嗽和咳痰，胸部CT提示双肺炎症，痰涂片抗酸染色阴性，常规痰培养未见可疑致病菌，最终通过肺泡灌洗液宏基因组学二代基因测序发现圣乔治教堂诺卡菌合并结核分枝杆菌感染，经针对上述病原体抗感染治疗后患者病情显著缓解。文献复习显示诺卡菌感染在免疫缺陷患者中的风险高，其合并结核分枝杆菌感染时易出现漏诊和误诊。目前在新型冠状病毒感染期间或感染后出现的诺卡菌病例仅有少数报道，尚未检索到类似本例新型冠状病毒感染后继发诺卡菌病合并活动性肺结核的病例报告。结论诺卡菌病的临床症状、体征和影像学缺乏特异性，病原学培养耗时长，因此对于新型冠状病毒感染后出现反复发热患者，应注重基于分子生物学的病原微生物检测，考虑是否存在诺卡菌合并结核分枝杆菌感染可能，避免因漏诊、误诊而延误治疗。

关键词：诺卡菌病结核分枝杆菌新型冠状病毒感染发热

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利妥昔单抗治疗免疫性肾小球疾病50问

中华肾脏病杂志 2024年第7期40卷 578-591页

作者：《利妥昔单抗治疗免疫性肾小球疾病50问》编写专家组袁伟杰梅长林不详上海交通大学医学院附属第一人民医院肾脏科上海200080 海军军医大学附属长征医院肾脏病科上海200003

利妥昔单抗(rituximab, RTX)是一种作用于B细胞表面CD20分子的人鼠嵌合单克隆抗体, 目前在免疫性肾小球疾病治疗中的应用越来越广泛, 然而基层临床医师在应用RTX过程中仍存在许多问题。鉴于此, 我们就其中大家较为关注的50个临床问题, ... 详细信息

利妥昔单抗(rituximab, RTX)是一种作用于B细胞表面CD20分子的人鼠嵌合单克隆抗体, 目前在免疫性肾小球疾病治疗中的应用越来越广泛, 然而基层临床医师在应用RTX过程中仍存在许多问题。鉴于此, 我们就其中大家较为关注的50个临床问题, 组织全国肾脏病专家进行了多轮的讨论修改编撰成本文。内容涵盖了RTX治疗膜性肾病、微小病变肾病、抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody, ANCA)相关性血管炎等免疫性肾小球疾病的适用范围、循证证据、治疗方案、药物使用方法及注意事项、特殊人群用药以及药物安全性等方面, 尤其针对临床医师提出的典型问题进行了具体解答, 旨在为广大临床医师提供实用的工作指导和参考。

关键词：肾小球肾炎膜性免疫抑制剂抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎利妥昔单抗

神经调控技术在帕金森病治疗中的应用研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第2期44卷 258-263页

作者：胡灿芳钟传钰曹立上海交通大学医学院附属第六人民医院神经内科上海200233 上海市第六人民医院金山分院神经内科上海201599 上海交通大学医学院附属第六人民医院超声医学科上海200233

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,以静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势异常为主要临床特征。多巴胺能药物是治疗PD的主要药物,但长期使用会使患者出现药效减退,甚至发生异动症、“开-关”现象等不... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,以静止性震颤、运动迟缓、肌强直、姿势异常为主要临床特征。多巴胺能药物是治疗PD的主要药物,但长期使用会使患者出现药效减退,甚至发生异动症、“开-关”现象等不良反应。神经调控技术是一种通过电能、磁场、超声等方式来兴奋或抑制大脑神经元活动、调节神经可塑性变化,从而达到治疗、改善疾病的生物医学工程技术。在PD的非药物治疗方面,神经调控技术作为一类新型的治疗手段,显示出了良好的疗效并具有不良反应少、易耐受等优点。基于此,该文针对脑深部电刺激、经颅磁刺激、经颅直流电刺激、经颅聚焦超声等常见神经调控技术在PD治疗中的应用研究进展进行综述。

关键词：神经调控技术帕金森病脑深部电刺激经颅磁刺激经颅直流电刺激经颅聚焦超声

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防控近视新热点：Premyopia解读

眼科新进展 2024年

作者：邵毅曾艳梅肖轶尘上海交通大学医学院附属上海市第一人民医院眼科南昌大学第一附属医院眼科复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科

儿童近视呈不断上升趋势，已经发展为社会公共卫生问题，受到全世界广泛关注。近视前期（Premyopia）可以更精确地识别近视发生的前兆阶段，Premyopia的儿童有很大概率会发展为近视，且Premyopia儿童在人群中占比较大，因此我们需要重... 详细信息

儿童近视呈不断上升趋势，已经发展为社会公共卫生问题，受到全世界广泛关注。近视前期（Premyopia）可以更精确地识别近视发生的前兆阶段，Premyopia的儿童有很大概率会发展为近视，且Premyopia儿童在人群中占比较大，因此我们需要重点关注Premyopia群体。在Premyopia，眼的调节力已发生下降，与轻度近视相当。早期识别Premyopia，并在Premyopia采取有效的预防措施可以降低近视发生率，延缓近视进展，保护儿童视力，提高生活质量。Premyopia的预防和控制方法包括增加户外活动、重复低强度红光疗法治疗、低浓度阿托品治疗、配戴角膜塑形镜等，除此之外，还包括许多新型技术，如平光离焦镜片、中医药治疗等。我们要牢牢把握Premyopia这一窗口期，探索近视防控新技术，并合理应用新型技术造福患者。

关键词： Premyopia 儿童阿托品低强度红光疗法角膜塑形镜