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双荧光标记的人高骨转移肺腺癌细胞株的建立及其转录组学特征分析

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中国肺癌杂志 2024年第4期27卷 257-265页

作者：陆悦仇荣邓妍刘星羽杜玉珍上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海交通大学医学院附属第六人民医院医学检验科上海201306

背景与目的骨是肺腺癌常见的转移部位,但肺腺癌骨转移的机制尚不明确。目前肺腺癌骨转移机制研究缺乏易于示踪且稳定高骨转移的肺腺癌细胞模型,因此,本研究旨在建立绿色荧光蛋白(green f luorescent protein,GFP)和萤火虫荧光素酶(firef... 详细信息

背景与目的骨是肺腺癌常见的转移部位,但肺腺癌骨转移的机制尚不明确。目前肺腺癌骨转移机制研究缺乏易于示踪且稳定高骨转移的肺腺癌细胞模型,因此,本研究旨在建立绿色荧光蛋白(green f luorescent protein,GFP)和萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,LUC)双标记的人高骨转移肺腺癌细胞株,为肺腺癌骨转移的研究提供新的实验工具。方法人肺腺癌细胞系A549-GFP-LUC经左心室注射至裸鼠体内构建骨转移模型,经连续3次体内驯化,获取人高骨转移肺腺癌细胞株A549-GFP-LUC-BM3;CCK-8(cell counting kit-8)、克隆形成实验比较A549-GFP-LUC-BM3细胞株和亲本细胞的体外增殖能力,划痕实验、Transwell实验以及Western blot比较迁移和侵袭能力;并进一步将A549-GFP-LUC-BM3细胞和亲本细胞行测序转录组学分析。结果成功建立人高骨转移肺腺癌细胞A549-GFP-LUC-BM3,相较于亲本细胞,该细胞骨转移发生率显著提高,且体外增殖、迁移和侵袭能力显著增强。转录组学测序结果显示,相较于亲本细胞,A549-GFP-LUC-BM3细胞中共筛选到差异基因2954个,其中1021个基因上调,1933个基因下调;基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集显示差异基因主要定位于细胞外周、质膜以及细胞外基质等细胞组分,分子功能主要富集在信号受体结合、钙离子结合和细胞外基质结构成分等,生物过程富集在细胞黏附和生物黏附等;京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析显示差异基因在细胞色素P450(cytochrome P450,CYP)对外源性物质的代谢、视黄醇代谢、细胞黏附分子、CYP对药物代谢、类固醇激素的生物合成以及核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路上显著富集。结论成功建立GFP和LUC双标记的人高骨转移肺腺癌细胞株,该细胞株在生物学行为水平和转录组测序水平均提示具有高骨转移潜能。

关键词：肺肿瘤骨转移动物模型细胞株转录组学分析

3D-打印非共面模板辅助CT引导放射性粒子植入治疗中晚期胰腺癌的临床研究

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中国医学计算机成像杂志 2024年第4期30卷 457-463页

作者：黎鑫乐陆健贡桔李超杰王力伟刘琳上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院上海200025 同济大学附属精神卫生中心

目的:评估3D-打印非共面模板辅助CT引导^(125)I粒子植入治疗中晚期胰腺癌的临床价值。方法:回顾性分析2017年1月-2023年6月在2家医院接受放射性^(125)I粒子植入治疗的84例中晚期胰腺癌患者资料。其中20例为3D-打印非共面模板辅助125I粒... 详细信息

目的:评估3D-打印非共面模板辅助CT引导^(125)I粒子植入治疗中晚期胰腺癌的临床价值。方法:回顾性分析2017年1月-2023年6月在2家医院接受放射性^(125)I粒子植入治疗的84例中晚期胰腺癌患者资料。其中20例为3D-打印非共面模板辅助125I粒子植入(A组),64例为徒手植入^(125)I粒子(B组)。所有患者进行术前计划、术后剂量验证。计算术前术后D_(90)、V_(90)、V_(100)、V_(150),以及2组患者手术操作时间。A组的中位随访时间为8.1个月,B组的中位随访时间为6.6个月。术后1~3个月行CT扫描,参照世界卫生组织(WHO)实体肿瘤疗效标准(RECIST)进行疗效评估。比较分析2组的总体生存(OS)及不良事件发生。Kaplan-Meier生存曲线用于计算生存率,并使用对数秩检验进行比较。Cox回归分析用于估计变量和结果之间关联的风险比(HR)和95%置信区间(CI)。结果:所有患者均成功植入^(125)I粒子。植入术后,A组和B组术后D_(90)均值、V_(90)、V_(100)、V_(150)与术前相比,差异均无统计学意义(均P>0.05),分别为(145.18±5.00)Gy vs (135.14±4.21)Gy、(96.37±0.71)%vs (95.25±0.81)%、(94.47±0.92)%vs (92.84±1.08)%、(75.89±2.17)%vs(76.10±1.77)%,以及(136.15±1.58)Gy vs (134.96±1.49)Gy、(96.20±0.35)%vs (96.59±0.31)%、(93.80±0.40)%vs (93.93±0.40)%、(74.49±0.96)%vs (74.22±0.49)%。A组手术操作时间为(42.1±7.1)min (1次穿刺将全部穿刺针同时植入),低于B组的(57.6±6.5)min(穿刺次数一般2~3次),差异有统计学意义(P<0.05)。A组治疗总有效率为75.0%,B组治疗总有效率为70.3%,2组间差异无统计学意义(P=0.685)。A组和B组半年、1年、2年OS率分别为65%、20%、10%和56.7%、12.5%、4.7%,2组间差异无统计学意义(P=0.662)。病灶大小是OS的独立预测因素(P=0.001)。A组仅有2例患者发生术后少量渗血,静推2 U注射用蛇毒血凝酶(巴曲亭)后24 h内吸收。结论:3D打印模板辅助碘粒子植入治疗胰腺癌证明了有效性且缩短了手术时间、减少穿刺次数,降低手术难度,避免反复定位从而降低CT辐射受量,提高患者耐受度;在剂量学控制、术后近期疗效、总体生存率方面与徒手碘粒子植入治疗胰腺癌相比没有差异。

关键词：胰腺癌近距离放射治疗放射性同位素碘-125粒子 3D打印模板预后

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血清中PD-L1含量与胃癌病人预后的关系

外科理论与实践 2024年第3期29卷 230-235页

作者：陈长强严晓伟胡皆乐包皙婷项明姜松耀上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海201800 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科上海201800

目的:分析胃癌病人血清中程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)含量及其与肿瘤分期和预后的关系。方法:收集我院2018年8月至2019年12月60例胃癌病人血清,15例健康成人血清作为对照,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PD... 详细信息

目的:分析胃癌病人血清中程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)含量及其与肿瘤分期和预后的关系。方法:收集我院2018年8月至2019年12月60例胃癌病人血清,15例健康成人血清作为对照,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PD-L1的含量,比较胃癌病人与健康成人血清PD-L1含量的差异,分析胃癌病人血清PD-L1的含量与病期及预后的关系。免疫组织化学检测肿瘤组织内PD-L1的表达情况,并分析其与血清中PD-L1含量的相关性。结果:胃癌组血清中PD-L1的含量明显高于对照组。Ⅲ、Ⅳ期胃癌病人血清PD-L1含量明显高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌病人。胃癌病人合并腹膜转移者血清PD-L1含量明显升高,提示预后不良。生存分析显示,血清PD-L1含量高的胃癌病人生存期明显短于低者。检测肿瘤组织标本中PD-L1的表达水平,发现其与血清中PD-L1含量无明显相关性。结论:胃癌病人血清中PD-L1含量高于健康成人。随病期进展逐渐升高。胃癌伴腹膜转移的病人血清中PD-L1升高明显。血清中PD-L1含量与肿瘤组织中的PD-L1表达不相关。

关键词：胃癌程序性死亡配体1 血清

原发中枢神经系统大B细胞淋巴瘤临床病理特点及生存分析

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中华血液学杂志 2024年第5期45卷 481-487页

作者：许起帆沈容沈一格曹怡文钱樱许彭鹏程澍王黎赵维莅上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科医学基因组学国家重点实验室上海血液学研究所上海200025

目的回顾性分析原发中枢神经系统大B细胞淋巴瘤(PCNSLBCL)患者的临床、病理特征、疗效、生存和预后情况。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院自2010年10月至2022年11月收治的70例PCNSLBCL患者的临床和病理资料, 采用Kaplan-M... 详细信息

目的回顾性分析原发中枢神经系统大B细胞淋巴瘤(PCNSLBCL)患者的临床、病理特征、疗效、生存和预后情况。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院自2010年10月至2022年11月收治的70例PCNSLBCL患者的临床和病理资料, 采用Kaplan-Meier法及Log-rank检验进行生存分析以及Cox比例风险模型进行预后分析。结果 70例PCNSLBCL患者接受一线诱导治疗后49例(70.0%)评价为完全缓解(CR), 4例(5.7%)评价为部分缓解, 客观缓解率为75.7%。2年无进展生存(PFS)率55.8%, 中位PFS期为35.9个月;2年总生存(OS)率79.1%, 中位OS期未达到。一线诱导CR后, 接受auto-HSCT的患者累积复发率(CIR)低于未接受任何巩固治疗的患者(P=0.032);口服小分子药物维持的患者2年PFS率为84.4%, 中位PFS期为79.5个月, 无巩固治疗患者2年PFS率为54.4%, 中位PFS期为35.9个月, 差异有统计学意义(P=0.038)。多因素分析显示纪念斯隆-凯特琳肿瘤中心(MSKCC)预后评分3类是影响PCNSLBCL患者OS的独立预后不良因素(HR=3.127, 95%CI 1.057~9.253, P=0.039)。结论一线诱导治疗CR的PCNSLBCL患者接受auto-HSCT巩固治疗可降低CIR, 口服小分子药物维持治疗可延长PFS期。MSKCC预后评分3类与PCNSLBCL患者较差的OS相关。

关键词：淋巴瘤,大B细胞,弥漫性中枢神经系统布鲁顿酪氨酸激酶突变预后

TUBB1突变型骨髓增生异常综合症患者临床特征及血小板输注无效相关性分析

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临床输血与检验 2024年第5期26卷 683-689页

作者：赵嘉璐范鑫秋曾一梅蔡晓红李佳明王学锋上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科上海200025

目的探究骨髓增生异常综合征(MDS)合并TUBB1突变患者的临床特点,及TUBB1突变与血小板输注治疗无效的相关性。方法回顾性研究。系统收集2018年2月—2023年10月在上海交通大学医学院附属瑞金医院诊断为MDS并接受化学药物治疗的81例患者的... 详细信息

目的探究骨髓增生异常综合征(MDS)合并TUBB1突变患者的临床特点,及TUBB1突变与血小板输注治疗无效的相关性。方法回顾性研究。系统收集2018年2月—2023年10月在上海交通大学医学院附属瑞金医院诊断为MDS并接受化学药物治疗的81例患者的临床资料,观察血常规、基因突变、CD34、血小板输注无效(PTR:Platelet transfusion refractoriness)发生率等。生存曲线采用Kaplan-Meier法绘制,PTR危险因素分析采用Logistic回归分析,森林图采用R studio绘制。结果81例MDS患者中,TUBB1突变型组10例,野生型组71例。与TUBB1野生型患者相比,TUBB1突变型患者CD34^(+)MKs比例更高[33.50(14.25,55.88)%vs.4.00(2.00,10.00)%,P<0.001]、血小板计数减少伴体积增大[36.00(18.75,186.50)×10^(9)/L vs.91.00(67.00,164.00)×10^(9)/L,P<0.05;(12.03±1.92)fL vs.(9.19±0.97)fL,P<0.001]。TUBB1突变型组发生血小板输注治疗无效8例(80.00%),野生型组发生血小板输注治疗无效18例(25.35%),比较两组差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,TUBB1突变是血小板输注治疗无效的独立危险因素(P<0.05,OR=7.28)。结论TUBB1基因突变的MDS患者普遍表现为CD34^(+)MKs比例增加和巨大血小板减少征。且TUBB1突变为MDS患者化疗后骨髓抑制期血小板输注治疗无效的独立危险因素。

关键词： TUBB1 骨髓增生异常综合征巨大血小板 CD34^(+)MKs 血小板输注无效

孕期盆腹力学运动对改善初产妇围产期盆底功能的效果研究

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中华预防医学杂志 2024年第5期58卷 656-664页

作者：黄苏婉丘瑾吴英陈敖峥毛晓燕李玥玥江南大学无锡医学院护理系无锡214122 上海交通大学附属同仁医院妇产科上海200336

目的探讨孕期盆腹力学运动对改善初产妇围产期盆底功能的作用。方法一项单中心前瞻性研究,选取2022年6月至2023年6月在上海交通大学附属同仁医院妇产科建卡产检分娩的200例单胎妊娠初产妇作为研究对象。采用随机数字表法分组,5人因随访... 详细信息

目的探讨孕期盆腹力学运动对改善初产妇围产期盆底功能的作用。方法一项单中心前瞻性研究,选取2022年6月至2023年6月在上海交通大学附属同仁医院妇产科建卡产检分娩的200例单胎妊娠初产妇作为研究对象。采用随机数字表法分组,5人因随访失败等原因退出,最终运动组(97例)和对照组(98例)。进行至少3个月的盆腹力学锻炼,每周固定1次锻炼的参与者被纳入运动组,没有参与运动的被纳入对照组。比较两组孕期不适症状、分娩结局、产后盆底电生理检查结果、产后生活质量和盆底疾病发生率。采用的统计学方法包括独立样本t检验、皮尔逊卡方检验、费希尔精确检验和曼-惠特尼U检验。结果孕晚期腰背痛VAS评分运动组为5.05±1.22,对照组为5.47±1.55,差异有统计学意义(t=2.090,P0.05)。分娩结局比较,运动组阴道分娩率为81.44%(79例),对照组为64.28%(63例),差异有统计学意义(χ^(2)=9.022,P0.05)。运动组压力性尿失禁的发生率为13.4%,对照组为30.61%,差异有统计学意义(P=0.015,P<0.05)。结论盆腹力学运动对减轻围产期盆底的相关症状、改善盆底功能、预防盆底疾病的发生可能有一定的效果。

关键词：盆腹力学运动初产妇盆底功能压力性尿失禁

TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中差异表达基因的筛选及生物学功能分析

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山东医药 2024年第9期64卷 10-13页

作者：陆盈孙顺昌上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院无锡分院检验科

目的筛选TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中的差异表达基因并进行生物学功能分析,探讨TMEM206基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备TMEM206基因敲除小鼠,并通过配殖获得TMEM206基因敲除纯合小鼠。选取3只8周龄雌性TMEM206基因... 详细信息

目的筛选TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中的差异表达基因并进行生物学功能分析,探讨TMEM206基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备TMEM206基因敲除小鼠,并通过配殖获得TMEM206基因敲除纯合小鼠。选取3只8周龄雌性TMEM206基因敲除纯合小鼠和3只同窝雌性野生小鼠,分离小脑组织并提取总RNA,转录组测序后,使用Cuffdiff(v2.2.1)软件的EBseq算法筛选差异表达基因,并使用DAVID数据库对差异表达基因进行基因属性(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共筛选出474个差异表达基因,与正常小脑组织相比,TMEM206基因敲除小鼠小脑组织中上调的基因265个、下调的基因209个。GO功能分析结果显示,差异表达基因的表达产物定位于细胞外膜和主要组织相容性复合体Ⅰ类蛋白(MHCⅠ)较多,功能属性主要归类于结合转录因子、脂类分子及抗原分子等;差异表达基因参与的生物学过程众多,如DNA损伤的细胞反应、细胞分化选择、骨质矿化等。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因在分子属性上多为细胞黏附分子和肿瘤坏死因子路径的分子,功能上主要与细胞吞噬和衰老有关,此外还与人乳头瘤病毒、Ⅰ型人类T淋巴细胞白血病病毒、单纯疱疹病毒、Ⅷ型人疱疹病毒及EB病毒等感染有关。结论TMEM206基因敲除后,小鼠小脑组织中筛选得到474个差异表达基因,差异表达基因与维持细胞外膜结构稳定、细胞黏附、病毒感染有关。

关键词： TMEM206基因小脑组织转录组测序

MLR与冠心病和冠状动脉病变程度相关性分析

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检验医学 2024年第5期39卷 485-490页

作者：刘琳王天凯秦康春凤丁宁上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海201801

目的探讨单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)与冠心病(CHD)和冠状动脉病变程度的相关性。方法选取2022年6—12月上海交通大学医学院附属瑞金医院北部院区200例冠状动脉造影阳性(主要血管直径≥50%)的CHD患者(CHD组),以同期131例造影结果为阴性... 详细信息

目的探讨单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)与冠心病(CHD)和冠状动脉病变程度的相关性。方法选取2022年6—12月上海交通大学医学院附属瑞金医院北部院区200例冠状动脉造影阳性(主要血管直径≥50%)的CHD患者(CHD组),以同期131例造影结果为阴性的患者为对照组。比较CHD组和对照组MLR、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)的差异。采用Pearson或Spearman相关分析评估CHD患者MLR与肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和Gensini积分的相关性。采用Logistic回归分析评估CHD的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估MLR诊断CHD的效能。结果CHD组MLR、NLR、PLR均高于对照组(P0.05)。MLR与CHD患者CK、LDH、Gensini积分均呈正相关(r值分别为0.1500、0.2900、0.5451,P0.25时,发生CHD的风险是MLR≤0.17时的1.6倍[比值比(OR)值为1.609,95%可信区间(CI)为1.213~2.133]。ROC曲线分析结果显示,MLR诊断CHD的曲线下面积为0.6743,敏感性为62.00%,特异性为62.60%。结论MLR与CHD和冠状动脉病变程度有关,可能是CHD患者冠状动脉病变严重程度的独立预测因子,可帮助临床判断是否需要进行进一步的侵入性诊疗。

关键词：单核细胞/淋巴细胞比值冠心病冠状动脉病变 Gensini积分

脓毒症诊治中Ang/Tie信号通路的研究进展

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诊断学理论与实践 2024年第1期23卷 90-95页

作者：杨航戴菁王学锋上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

脓毒症以及伴随的多器官功能障碍是一组常见的临床综合征,其患病率随着人口老龄化逐年上升。全球每年发生2000万例脓毒症,死亡率为26%。早期准确诊断脓毒症,有利于及时采取针对性的治疗策略,这是降低病死率的关键。内皮细胞是外源病原... 详细信息

脓毒症以及伴随的多器官功能障碍是一组常见的临床综合征,其患病率随着人口老龄化逐年上升。全球每年发生2000万例脓毒症,死亡率为26%。早期准确诊断脓毒症,有利于及时采取针对性的治疗策略,这是降低病死率的关键。内皮细胞是外源病原体或内源性损伤信号的早期作用对象。研究提示,内皮细胞的结构改变与功能活化在脓毒症的发生、发展中发挥重要作用。作为内皮细胞专属信号通路,血管生成素(angiopoietin,Ang)/酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor,Tie)在内皮细胞的异常激活和损伤中发挥重要作用。Ang/Tie信号通路主要包括2种位于内皮细胞中的酪氨酸激酶受体(Tie1、Tie2)和4种分泌性糖蛋白配体(Ang-1、Ang-2、Ang-3、Ang-4)。机制研究方面,Ang-1可持续性激活Tie2受体,维持细胞与细胞、细胞与基质间的相互作用,支持血管内皮细胞正常的生理功能;Ang-2是Ang-1拮抗剂,可竞争性阻断Ang-1与Tie2受体结合。脓毒症环境下,Ang-1下降,Ang-2升高,Ang-1/Ang-2的比值下降。Ang-2竞争性阻断Ang-1与可溶性Tie2受体结合,内皮细胞处于严重异常激活状态。Ang-2介导肝素酶的释放导致糖萼损伤,可引起血管通透性增加;Ang-2可促进炎症反应;Ang/Tie信号系统失调介导凝血功能障碍,Ang-2升高是弥散性血管内凝血的前哨性事件。临床病情监测方面,Ang-2>5.61 ng/mL,诊断脓毒症的灵敏度为74.36%;Ang-2持续升高,提示内皮功能难以恢复,器官发生功能性改变。早期动态监测Ang-2可用于预测脓毒症相关肺损伤、急性肾损伤。Ang-2/Ang-1比值上升、Ang1/可溶性Tie2比值下降可预测脓毒症患者90 d病死率(ROC曲线面积分别为0.787和0.704)。Ang-2和可溶性Tie-2水平下降,则提示脓毒症血浆置换有效。靶向Ang/Tie信号通路的动物实验获得一定成功,但目前临床试验未能获得有价值的结果。脓毒症相关Ang/Tie信号通路有待于进一步深入研究。

关键词：脓毒症血管生成素酪氨酸激酶受体Ang/Tie