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结直肠癌中自然杀伤细胞表型及功能初探

上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 713-722页

作者：冯昫皎刘健悦戚炀炀孙晶沈蕾上海交通大学基础医学院免疫学与微生物学系上海市免疫学研究所上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科上海市微创外科临床医学中心上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院免疫与疾病研究中心上海200025

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本... 详细信息

目的·初步探究结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者肿瘤组织中免疫微环境的组成,分析自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)在CRC中的比例、表型及功能特征。方法·收集CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和匹配的CRC患者外周血样本,消化组织制备成单细胞悬液,使用流式细胞术检测各类免疫细胞比例,通过t-SNE(t-distributed stochastic neighbor embedding)降维与统计学分析,描述CRC肿瘤免疫微环境的特征。运用流式细胞术检测肿瘤组织和癌旁组织中NK细胞表面活化分子的表达情况,包括CD16、CD27、CD69、晚期活化标志人类白细胞抗原-DR(human leukocyte antigen-DR,HLA-DR)、细胞耗竭标志T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3,TIM-3)。运用流式细胞术探究CD38分子在NK细胞上的表达水平,描述CD38highNK细胞的表型特征。利用细胞刺激试剂盒激活NK细胞,通过流式细胞术胞内染色检测NK细胞的功能,包括细胞因子γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)的表达水平。结果·收集25例CRC患者肿瘤组织及配对的癌旁组织和15例匹配的CRC患者外周血样本。CRC肿瘤组织中包含T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及髓系细胞等免疫细胞。与癌旁组织相比,肿瘤组织中T淋巴细胞(P=0.000)和髓系细胞(P=0.026)的比例显著升高,NK细胞(P=0.007)的比例显著降低,B淋巴细胞比例差异无统计学意义。与癌旁组织相比,肿瘤组织中NK细胞表面CD27(P=0.000)、CD69(P=0.001)表达水平显著降低,同时CD16(P=0.008)、HLA-DR(P=0.000)和TIM-3(P=0.024)的表达水平显著升高,呈现晚期活化和耗竭表型。NK细胞按CD38的表达水平可分为CD38highNK和CD38lowNK 2个亚群。与癌旁组织相比,肿瘤组织CD38highNK(P=0.003)比例显著降低,CD38lowNK比例差异无统计学意义。相比CD38lowNK,CD38highNK的CD27高表达,CD16、NKp46、CD57、CD94、HLA-DR和CD158a低表达(均P=0.000),处于早期分化和未活化的状态。肿瘤浸润的NK细胞与癌旁组织相比,分泌细胞因子IFN-γ(P=0.032)、TNF-α(P=0.042)和GM-CSF(P=0.019)的水平显著降低,表明NK细胞杀伤功能受损。结论·CRC患者肿瘤组织中NK细胞浸润减少,早期分化状态的CD38highNK细胞亚群下降,分泌细胞因子的能力下降并呈现耗竭表型。这些结果提示NK细胞在CRC中功能受损,介导的抗肿瘤免疫应答下降。

关键词：自然杀伤细胞结直肠癌 CD38

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新医科视角下医学微生物学课程的创新与实践

微生物学通报 2024年

作者：钮晓音何平郭晓奎刘畅上海交通大学医学院

“医学微生物学”是临床医学、口腔医学和预防医学等专业开设的核心必修课。在强调学科交叉、系统集成、先进技术支撑的新医科建设背景下，针对课程教学中存在的“易混淆难运用、轻整体弱思辨、疏防病少责任”三大问题，设计基于显隐双... 详细信息

“医学微生物学”是临床医学、口腔医学和预防医学等专业开设的核心必修课。在强调学科交叉、系统集成、先进技术支撑的新医科建设背景下，针对课程教学中存在的“易混淆难运用、轻整体弱思辨、疏防病少责任”三大问题，设计基于显隐双主体的课程目标，重构旨在培养系统性思维与批判性思维的教学内容，建立“讲授与讨论相结合；专业与故事相结合；基础与前沿相结合；线上与线下相结合”的教学模式，构筑发展性多元评价体系。课程创新成果表明，学生学习成绩、知识运用能力、系统性思维、批判性思维、专业责任感及创新内驱力均显著改善，为从新医科视角下进行基础课程教学改革提供新思路。

关键词：医学微生物学新医科教学模式教学评价

基础医学课程在培养医学生创新能力中的作用：以机体防御与免疫课程为例

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中国免疫学杂志 2024年

作者：钮晓音陈广洁上海交通大学医学院

教育强国和健康中国战略对医学人才的创新能力提出了新要求，基础医学教育是医学生通识教育与专业教育的桥梁，在基础医学课程中培养学生的创新思维和创新能力，为学生之后的专业学习奠定良好的基础尤为重要。本文将阐述基础医学课程对... 详细信息

教育强国和健康中国战略对医学人才的创新能力提出了新要求，基础医学教育是医学生通识教育与专业教育的桥梁，在基础医学课程中培养学生的创新思维和创新能力，为学生之后的专业学习奠定良好的基础尤为重要。本文将阐述基础医学课程对学生创新能力培养的必要性，并以基础医学整合课程“机体防御与免疫”为例，介绍课程相应的改革举措与所取得的成效。通过课程学习，80%以上的学生自我评价在创新思维能力方面有所提升，并积极参与免疫学的课内外科研创新实践项目，并获奖33项。同时，本文将进一步思考基础医学课程在学生创新能力培养中的关键突破点，以期更好地为医学创新人才的培养服务。

关键词：基础医学免疫学机体防御与免疫创新能力

三级淋巴结构在食管鳞状细胞癌预后及免疫治疗中的研究进展

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中国胸心血管外科临床杂志 2024年

作者：牛振屹金润森颜克鹏张燕李鹤成上海交通大学医学院附属瑞金医院胸外科上海交通大学医学院上海市免疫学研究所

食管鳞状细胞癌（鳞癌）是我国食管癌的主要病理类型，严重威胁我国人民的健康。以免疫检查点抑制剂为主的免疫治疗极大改善了食管鳞癌患者的预后，但仍存在治疗疗效有限的问题。三级淋巴结构（tertiary lymphoid structure,TLS）是在... 详细信息

食管鳞状细胞癌（鳞癌）是我国食管癌的主要病理类型，严重威胁我国人民的健康。以免疫检查点抑制剂为主的免疫治疗极大改善了食管鳞癌患者的预后，但仍存在治疗疗效有限的问题。三级淋巴结构（tertiary lymphoid structure,TLS）是在非淋巴器官内聚集形成的有组织异位淋巴结构。既往研究发现，食管鳞癌中的TLS与患者更好的预后相关，并且能增强患者的免疫治疗疗效。本文结合目前TLS在食管鳞癌领域的相关研究，对TLS与食管鳞癌患者预后及免疫治疗间的关系作一综述，希望能为开展食管鳞癌的精准免疫治疗提供参考。

关键词：食管鳞状细胞癌三级淋巴结构免疫治疗综述

肿瘤微环境免疫细胞调节肿瘤细胞耐药性的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第7期44卷 830-838页

作者：张烨晟杨易静黄依雯施珑玙王曼媛陈思思上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海200127 上海交通大学医学院附属胸科医院胸部肿瘤研究所上海200030 上海交通大学医学院附属仁济医院干细胞研究中心上海200127 上海交通大学医学院医学技术学院上海200025 上海交通大学医学院附属第一人民医院疑难疾病精准研究中心上海201600

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是肿瘤细胞生存的复杂细胞环境,内含多种类型的细胞和围绕肿瘤细胞的细胞外成分。免疫细胞是TME的关键组成部分,包括肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)、髓系抑制性细胞(myel... 详细信息

肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是肿瘤细胞生存的复杂细胞环境,内含多种类型的细胞和围绕肿瘤细胞的细胞外成分。免疫细胞是TME的关键组成部分,包括肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)、髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)、淋巴细胞、调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)、自然杀伤细胞(natural killer cells,NK cells)及树突状细胞(dendritic cells,DCs)等。值得关注的是,目前肿瘤耐药是化学治疗(化疗)、放射治疗(放疗)、靶向治疗及免疫治疗等肿瘤治疗方法疗效受限并导致治疗失败的主要原因。研究发现,肿瘤细胞耐药性的产生是肿瘤细胞与TME相互作用的结果。因此,如何克服TME所致肿瘤耐药被认为是肿瘤治疗的一大难点。近年来,随着对TME中免疫细胞研究的深入,免疫细胞调节肿瘤细胞耐药性的具体机制研究取得重大进展,而靶向相应免疫细胞、信号通路或细胞因子的治疗策略被证实能够有效减少肿瘤耐药并改善肿瘤治疗效果。该文就TME中TAMs、MDSCs、Tregs和NK细胞等在肿瘤耐药中发挥的作用及克服肿瘤耐药的靶向策略的研究进展进行综述,并讨论肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)和免疫抑制性调节性B细胞(B regulatory cells,Bregs)与肿瘤耐药之间的关系,以期为克服肿瘤耐药和提高抗肿瘤治疗效果提供方向和参考。

关键词：肿瘤微环境耐药肿瘤相关巨噬细胞髓系抑制性细胞调节性T细胞自然杀伤细胞

癌-睾丸抗原SPANXB在肝癌中的表达及其影响肝癌进展的机制研究

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上海交通大学学报(医学版) 2024年第7期44卷 801-813页

作者：薛煜张海龙雷鸣上海交通大学医学院附属第九人民医院上海精准医学研究院上海交通大学转化医学研究院

目的·分析癌-睾丸抗原（cancer-testis antigen,CTA）家族成员SPANXB (sperm protein associated with the nucleus on the X chromosome B)在肝癌中的表达及其与肝癌患者预后之间的相关性，并探究SPANXB对肝癌细胞增殖的影响及其潜在... 详细信息

目的·分析癌-睾丸抗原（cancer-testis antigen,CTA）家族成员SPANXB (sperm protein associated with the nucleus on the X chromosome B)在肝癌中的表达及其与肝癌患者预后之间的相关性，并探究SPANXB对肝癌细胞增殖的影响及其潜在机制。方法·利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库中的肝癌样本数据，分析SPANXB在肝癌组织中的表达及其与患者生存期的相关性。构建稳定敲低SPANXB与稳定过表达SPANXB的肝癌细胞系，利用活细胞成像实验、EdU细胞增殖实验和平板克隆形成实验评估SPANXB对肝癌细胞增殖的影响。通过RNA测序（RNA-sequence,RNA-seq）探究SPANXB调控肝癌细胞增殖的相关通路，并利用细胞周期实验验证SPANXB对肝癌细胞周期的影响。采用免疫沉淀-质谱联用技术（immunoprecipitation-mass spectrometry,IP-MS）探索与SPANXB相互作用的蛋白，并使用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation,Co-IP）进行验证。结果·SPANXB mRNA在肝癌组织中的表达高于正常组织（P=0.003），且与肝癌患者的生存期呈负相关。稳定敲低SPANXB可降低肝癌细胞的增殖能力、克隆形成能力，而稳定过表达SPANXB则可促进这些过程。RNA-seq的结果显示，SPANXB的敲低可下调DNA复制与G1/S细胞周期转换相关通路，细胞周期实验的结果显示SPANXB的敲低可导致肝癌细胞周期发生改变。IP-MS和Co-IP结果显示，SPAXNB与有丝分裂停滞缺陷2样蛋白1 (mitotic arrest deficient 2-like protein 1,MAD2L1)、WD重复域蛋白5 (WD repeat domain 5,WDR5)等细胞周期相关蛋白存在相互作用。结论·SPANXB的高表达与肝癌的预后呈负相关，其可能通过与MAD2L1、WDR5相互作用调控细胞周期并增强肝癌细胞的增殖活性。

关键词：癌-睾丸抗原 SPANXB 肝癌细胞周期

121例头颈部丛状神经纤维瘤手术治疗患者的回顾性研究

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中华整形外科杂志 2024年第2期40卷 169-178页

作者：王薇顾熠辉朱倍瑶谭好朱子骋顾斌胡晓洁杨军王智超李青峰上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海200011 上海交通大学医学院上海200025

目的:头颈部丛状神经纤维瘤(PNF)的治疗是临床难题,在手术治疗、分类、治疗时机和治疗方法上缺乏共识。通过对头颈部PNF手术治疗患者的临床表现、手术情况、肿瘤复发情况、治疗满意度及生活质量改变的分析,为进一步形成共识提供依据。方... 详细信息

目的:头颈部丛状神经纤维瘤(PNF)的治疗是临床难题,在手术治疗、分类、治疗时机和治疗方法上缺乏共识。通过对头颈部PNF手术治疗患者的临床表现、手术情况、肿瘤复发情况、治疗满意度及生活质量改变的分析,为进一步形成共识提供依据。方法:通过病历查阅及电话随访的方式,回顾性分析2012年5月至2022年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科因头颈部PNF进行手术治疗的Ⅰ型神经纤维瘤病(NF1)患者资料。完整收集、统计分析患者的临床资料,采用电话随访方式对患者和(或)家属的术后即刻满意度、远期手术满意度,以及标准化生活质量问卷HRQol和PlexiQol进行调查。根据治疗前后生活质量改变和远期手术满意度,将患者分为手术获益组及非获益组,使用单因素及多因素logistic回归分析远期手术获益患者的临床特点。结果:有完整记录的头颈部NF1入院手术患者共计512例,随访时筛选病史及影像学明确为NF1相关PNF,并取得有效随访的121例患者纳入研究。男70例,女51例,年龄(25.60±12.85)岁,范围7~63岁,其中≤18岁的患者41例,>18岁的患者80例。瘤体以侵袭性生长为主,62.81%(76/121)患者表现出临床功能障碍。41.32%(50/121)患者接受了多次手术治疗,121例患者总计进行了215次手术。手术目的包括改善外观及功能修复,术后并发症发生率为6.05%(13/215)。末次术后随访时间为(51.41±27.66)个月,42.15%(51/121)患者表示术后瘤体有复发。对术后即刻效果比较满意及非常满意的患者占76.03%(92/121),但在远期随访时满意率降至46.28%(56/121)。≤18岁的患者家属对手术造成的瘢痕不满意比例更高,且有更强的再次手术意愿。瘤体复发与否和手术获益密切相关( OR=2.32, P18岁患者( OR=3.49, P=0.004),并且7~12岁年龄段患者的末次术后复发率最高,达到68.42%(13/19);男性患者的复发概率显著低于女性( OR=0.40, P=0.026)。结论:头颈部PNF患者临床表现复杂,临床诊疗应注重充分的术前评估、积极的多学科诊疗协作和综合应用包括手术及靶向药物的治疗方法,以提高安全性及有效性,减少瘤体复发。

关键词：神经纤维瘤丛状 Ⅰ型神经纤维瘤病头颈部肿瘤肿瘤复发

低氧诱导的长链非编码RNA 68在肝癌中的功能及其作用机制

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 702-712页

作者：谭露沈少明何平上海交通大学基础医学院病理生理学系上海200025 上海交通大学医学院附属仁济医院衰老与组织修复研究院上海200240 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所上海200240

目的·探究肝癌细胞系中受低氧诱导的长链非编码RNA 68(hypoxia-induced long non-coding RNA 68,HILRNA68)的功能以及其相关机制。方法·利用长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)芯片研究低氧(hypoxia)与常氧(normoxia)分别处理12 h的肝癌细胞系SMMC-7721中表达变化的lncRNA,通过R语言DEseq2程序包分析低氧下表达显著变化的lncRNA,并利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证差异lncRNA。通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)稳定敲除细胞内的低氧诱导因子(hypoxia inducible factors,HIFs)用以研究低氧下HILRNA68转录是否受HIFs的调控。通过细胞核浆分离,结合qRT-PCR检测以及RNA荧光原位杂交技术(RNA fluorescence in situ hybridization,RNA-FISH)实验研究HILRNA68的亚细胞定位。通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)分别在SMMC-7721和MHCC-97H细胞中敲低HILRNA68以研究其在低氧下的细胞功能。通过细胞生长计数实验以及Transwell细胞侵袭实验分别探究低氧下HILRNA68对肝癌细胞的生长增殖以及侵袭转移能力的影响。此外,通过双荧光素酶报告基因实验研究敲低HILRNA68后是否抑制HIF1α的转录活性。结果·通过对lncRNA芯片的结果进行差异基因分析,共得到247个升高和17个降低的lncRNA[定义为倍数变化(fold change)≥4,伪发现率(false discovery rate,FDR)≤0.05]。在差异基因中发现HILRNA68在多个经低氧处理的细胞系中均稳定升高约10倍。低氧下敲低HIF1α、HIF2α、HIF1β均显著抑制HILRNA68的升高(均P研究表明HILRNA68主要定位于细胞核。细胞功能实验结果表明敲低HILRNA68显著抑制肝癌细胞SMMC-7721与MHCC-97H在低氧下的增殖以及侵袭能力(均P研究表明,敲低HILRNA68显著抑制低氧下HIF1α的转录活性(P研究鉴定出一批低氧下表达显著变化的lncRNA,并功能注释了其中升高的HILRNA68。HILRNA68受HIFs调控而升高,升高后促进细胞低氧下的增殖以及侵袭转移能力;机制上,HILRNA68低氧下表达升高后促进HIF1α的转录活性。

关键词：低氧低氧诱导因子长链非编码RNA 细胞增殖细胞侵袭 TCONS_00027424

骨肉瘤免疫微环境及其免疫治疗临床转化研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第7期44卷 814-821页

作者：胡飞蔡晓涵程睿季诗雨苗嘉欣朱晏范广建上海交通大学医学院附属仁济医院骨关节外科上海200001 上海交通大学医学院附属仁济医院中心实验室上海200127 上海交通大学医学院附属新华医院超声科上海200092 上海交通大学医学院附属第一人民医院泌尿外科上海200080 上海交通大学医学院附属新华医院核医学科上海200092 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所肿瘤系统医学全国重点实验室上海200032 上海交通大学医学院附属第一人民医院疑难疾病精准研究中心上海201600

骨肉瘤(osteosarcoma)是儿童和青少年常见的原发性恶性骨肿瘤,因其高复发率和高转移率的特点,在治疗上面临极大的挑战。传统的治疗手段,包括手术、放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗),能在一定程度上缓解患者的症状,但如何提高患者的长期... 详细信息

骨肉瘤(osteosarcoma)是儿童和青少年常见的原发性恶性骨肿瘤,因其高复发率和高转移率的特点,在治疗上面临极大的挑战。传统的治疗手段,包括手术、放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗),能在一定程度上缓解患者的症状,但如何提高患者的长期生存率仍然是亟待解决的难题。随着免疫治疗的不断发展,近年来对肿瘤免疫微环境的研究以及免疫治疗策略的应用均取得了突破性的进展,为骨肉瘤的治疗提供了新的视角。目前,免疫治疗的策略包括肿瘤疫苗、靶向细胞因子、免疫检查点抑制、过继细胞疗法以及联合治疗等。以上策略旨在增强机体免疫反应、克服免疫耐受和防止免疫逃逸,显著提升患者的免疫应答能力。该文系统介绍骨肉瘤的免疫微环境,深入分析免疫微环境的特征,详细阐述免疫治疗在骨肉瘤临床转化研究中的最新进展。深入理解骨肉瘤的免疫特性和相应的治疗方法,有助于为患者提供个性化治疗方案,从而提高其生存率和改善预后。

关键词：骨肉瘤肿瘤免疫微环境免疫治疗临床转化