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胃肠安方含药血清诱导胃癌MKN-45细胞铁死亡及其机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第4期31卷 132-139页

作者：李鑫杨金祖钱建新陶丽陈舲上海中医药大学附属龙华医院上海200032 上海中医药大学附属龙华医院江西医院南昌330006 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200437

目的:观察胃肠安方含药血清对人胃癌细胞铁死亡的影响,并探讨其潜在作用机制。方法:分别灌胃SD大鼠18、36、72 g·kg^(-1)·d^(-1)胃肠安方药液后制备不同剂量的含药血清。不同剂量的胃肠安方含药血清处理MKN-45细胞后,细胞增殖与活性... 详细信息

目的:观察胃肠安方含药血清对人胃癌细胞铁死亡的影响,并探讨其潜在作用机制。方法:分别灌胃SD大鼠18、36、72 g·kg^(-1)·d^(-1)胃肠安方药液后制备不同剂量的含药血清。不同剂量的胃肠安方含药血清处理MKN-45细胞后,细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞增殖活力的改变;同时添加凋亡抑制剂、坏死性凋亡抑制剂及铁死亡抑制剂观察细胞在胃肠安方含药血清处理后的存活情况;活性氧荧光探针(DCF-DA)检测细胞内活性氧(ROS)水平;脂质过氧化荧光探针(C11-bODIPY)检测细胞内脂质过氧化水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测亚铁离子(Fe^(2+))、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、醛酮还原酶1成员b1(AKR1b1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)相关分子表达。结果:与空白组比较,胃肠安方含药血清处理后MKN-45细胞活力明显降低(Pb1、GPX4 m RNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),ACSL4的m RNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖性。与空白组比较,胃肠安方组磷酸化(p)-STAT3、p-ERK蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖性。结论:胃肠安方含药血清可诱导胃癌铁死亡抑制MKN-45细胞增殖,其机制可能与调控STAT3及MAPK通路相关。

关键词：胃癌胃肠安方含药血清铁死亡醛酮还原酶1成员b1 信号转导和转录激活因子3 丝裂原活化蛋白激酶

肺岩宁颗粒诱导肺癌细胞铁死亡及对Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：刘欣王文婕徐振晔郑展上海中医药大学附属龙华医院

目的：本研究主要探讨肺岩宁颗粒对肺癌细胞铁死亡的影响，以及对调控核转录因子E2相关因2（Nrf2）/小鼠溶质载体家族7成员11（SLC7A11）/谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）信号通路的调节作用。方法：Cell counting kit-8（CCK-8）检测肺岩... 详细信息

目的：本研究主要探讨肺岩宁颗粒对肺癌细胞铁死亡的影响，以及对调控核转录因子E2相关因2（Nrf2）/小鼠溶质载体家族7成员11（SLC7A11）/谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）信号通路的调节作用。方法：Cell counting kit-8（CCK-8）检测肺岩宁颗粒对肺癌A549细胞增殖的影响；将肺癌A549细胞分为空白组、铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1，Fer-1）组(10μmol·L-1)、肺岩宁颗粒组(600μg·mL-1)、肺岩宁颗粒+ Ferrostatin-1组，干预48h后观察各组细胞的活性和形态。采用Cell counting kit-8（CCK-8）法检测细胞存活率；生化试剂检测A549细胞内活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、二价铁离子(Fe2+)；蛋白印迹法（Western blot）检测kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）、核因子E2相关因子（Nrf2）小鼠溶质载体家族7成员（SLC7A11）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX4）蛋白的表达水平；将肺癌A549细胞分为空白组和肺岩宁颗粒组(600μg·mL-1)，透射电镜（TEM）下观察线粒体形态。结果：经肺岩宁颗粒干预后，与空白组比较，肺岩宁颗粒以浓度依赖性抑制 A549细胞增殖（P<0.01）；与空白组比较，肺岩宁颗粒组能够抑制肺癌细胞活性（P<0.01）；与肺岩宁颗粒组比较，肺岩宁颗粒+Fer-1组细胞活性有所恢复（P<0.05）；与空白组比较，肺岩宁颗粒组显著升高细胞内ROS、MDA、Fe2+水平（P<0.01），同时显著降低GSH水平（P<0.01），促进铁死亡；与空白组比较，肺岩宁颗粒组降低Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白的表达，增强Keap1蛋白表达（P<0.01）;与肺岩宁颗粒组比较，肺岩宁颗粒+Fer-1组Nrf2、SLC7A11、GPX4的蛋白表达水平显著上升（P<0.01），Keap1的蛋白表达水平则显著下降（P<0.01）；与空白组比较，肺岩宁颗粒组线粒体缩小，基质电子密度增加。结论：肺岩宁颗粒能够诱导肺癌细胞发生铁死亡，其机制可能与肺岩宁颗粒抑制Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路有关。

关键词：肺岩宁颗粒肺癌铁死亡核因子E2相关因子2(Nrf2)/小鼠溶质载体家族7成员SLC7A11/谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)信号通路中药

从“急性虚证”探讨放射治疗、化学治疗后骨髓抑制论治思路

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北京中医药大学学报 2025年第1期48卷 122-126页

作者：李志明黄芬姜家旺江威陈小春李鑫江西中医药大学附属医院南昌330006 上海中医药大学附属龙华医院

骨髓抑制是放射治疗(简称“放疗”)、化学治疗(简称“化疗”)常见的不良反应之一。放、化疗等抗肿瘤治疗首先直接杀伤患者外周血细胞,损伤气血;进一步杀伤骨髓增殖活跃的细胞群,损伤阴血;再进一步干扰造血干细胞,损伤精血。这个过程迅... 详细信息

骨髓抑制是放射治疗(简称“放疗”)、化学治疗(简称“化疗”)常见的不良反应之一。放、化疗等抗肿瘤治疗首先直接杀伤患者外周血细胞,损伤气血;进一步杀伤骨髓增殖活跃的细胞群,损伤阴血;再进一步干扰造血干细胞,损伤精血。这个过程迅速而猛烈,符合“急性虚证”起病急、变化快、病情危重、复杂多变、并发症多、预后差等特点。鉴于此,其辨治与一般虚证当有明显差异。本文提出“预防为先,早治防变;峻补其虚,扶正祛邪;急补救危,刻不容缓;全程补益,甚者独行”的辨治原则和思路,以期为放、化疗后骨髓抑制提供理论参考和实践借鉴。

关键词：急性虚证骨髓抑制放射治疗化学治疗

运脾化痰通络方对痰湿内蕴型性早熟小鼠的治疗作用及可能机制

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辽宁中医杂志 2025年

作者：刘秀秀石李李文姜永红姜之炎上海中医药大学附属龙华医院儿科

目的探讨运脾化痰通络方治疗痰湿内蕴型性早熟可能的作用机制。方法选取3周龄C57bL/6J小鼠20只，通过N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA）联合高脂饮食构建痰湿内蕴型性早熟小鼠模型，随机分为对照组、模型组、运脾化痰通络方组和戈那瑞林组，... 详细信息

目的探讨运脾化痰通络方治疗痰湿内蕴型性早熟可能的作用机制。方法选取3周龄C57bL/6J小鼠20只，通过N-甲基-DL-天冬氨酸（NMA）联合高脂饮食构建痰湿内蕴型性早熟小鼠模型，随机分为对照组、模型组、运脾化痰通络方组和戈那瑞林组，每组5只。苏木素-伊红（HE）染色检测子宫、卵巢病理形态学改变，免疫组化检测卵巢促卵泡激素受体（FSHR）阳性表达，Western blot法检测下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）、神经肽Y（NPY）蛋白表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。结果与模型组比较，运脾化痰通络方组和戈那瑞林组小鼠子宫内壁及平滑肌更薄且炎性浸润降低，卵巢内成熟卵泡数量降低，颗粒层更加致密且厚；与模型组比较，运脾化痰通络方和戈那瑞林组卵巢组织内FSHR阳性表达均明显下降（P<0.05）；与模型组比较，运脾化痰通络方和戈那瑞林组GnRH蛋白表达均明显下降，NPY蛋白表达均明显增加（P<0.05）；与模型组比较，运脾化痰通络方和戈那瑞林组小鼠血清FINS、TC、TG含量均明显降低（P<0.05）。结论运脾化痰化痰通络方可抑制下丘脑GnRH蛋白表达和卵巢FSHR细胞的表达水平，促进下丘脑NPY蛋白表达，降低血清 FINS、TC和TG含量，通过改善痰湿内蕴型性早熟小鼠体内糖脂代谢紊乱，发挥治疗性早熟的作用。

关键词：运脾化痰通络方性早熟痰湿内蕴型作用机制

代谢微环境探讨健脾补肾方治疗男性骨质疏松的机制

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中国骨质疏松杂志 2025年第3期 374-381+423页

作者：孙杰郭杨李晓锋薛纯纯马勇李沐哲唐德志笪巍伟施杞南京中医药大学上海中医药大学附属市中医医院施杞名中医传承工作室上海中医药大学附属龙华医院

目的基于骨-糖脂代谢微环境探讨健脾补肾方治疗男性骨质疏松的作用机制。方法通过网络药理学分析健脾补肾方治疗男性骨质疏松的潜在作用机制；建立60只雄性小鼠骨质疏松模型，随机分配为假手术组、模型组、中药组、十一酸睾酮组，并... 详细信息

目的基于骨-糖脂代谢微环境探讨健脾补肾方治疗男性骨质疏松的作用机制。方法通过网络药理学分析健脾补肾方治疗男性骨质疏松的潜在作用机制；建立60只雄性小鼠骨质疏松模型，随机分配为假手术组、模型组、中药组、十一酸睾酮组，并利用生理盐水、健脾补肾方、十一酸睾酮进行干预，8周后分析骨微结构、生物力学、骨代谢及糖脂代谢等指标。结果KEGG富集分析提示健脾补肾方有效成分主要涉及AGE-RAGE信号通路、脂质和动脉粥样硬化通路。与模型组相比，中药组HE染色可见骨小梁数量增加，骨髓腔内脂肪空泡数量减少；bMD增加(PbV/TV、***、Tb.N显著升高(P0.05);同时，血清TC、TG、LDL、FFA、胰岛素以及ALP、TRAP、β-CTX水平均显著降低(P<0.01),HDL、IGF-1及OCN水平显著升高(P<0.01)。结论健脾补肾方能够有效改善雄性去势小鼠的高骨转换状态，恢复骨形成和骨吸收的平衡，并可能通过调节糖脂代谢的异常水平，协同改善骨微结构、提高骨密度，从而达到治疗男性骨质疏松的作用。

关键词：男性骨质疏松雄性激素健脾补肾方骨代谢糖脂代谢

中医药治疗肿瘤相关性失眠的用药规律及辨治思路探讨

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中成药 2025年第03期 1041-1045页

作者：赵亦卿朱惠蓉上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学

目的探讨中医药治疗肿瘤相关性失眠的用药规律及辨治思路。方法基于数据挖掘，检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普数据库，收集整理相关文献，采用Excel软件建立数据库，SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 25.0软件对相关方... 详细信息

目的探讨中医药治疗肿瘤相关性失眠的用药规律及辨治思路。方法基于数据挖掘，检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普数据库，收集整理相关文献，采用Excel软件建立数据库，SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 25.0软件对相关方剂进行频次、性味、归经统计，并进行关联规则及聚类分析。结果共筛选出72篇文献，涉及方剂88首、中药213味，使用频率较高的中药有甘草、酸枣仁、茯苓、白芍、柴胡、当归等，四气以寒、平、温为主，五味以甘、苦为主，归经以肝、脾、肺、心、肾为主，关联规则10条，聚类方3个。结论中医药治疗肿瘤相关性失眠常用补虚药、安神药、清热药，辨治思路以调和阴阳为基本原则，注重养血以安心神、潜阳以定心志。

关键词：中医药肿瘤相关性失眠用药规律辨治思路数据挖掘

补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 16-23页

作者：王成龙杨志烈常君丽赵永见赵东峰戴薇薇吴宏进张婕王利波谢颖唐德志王拥军杨燕萍上海中医药大学附属龙华医院科技中心实验室上海市200032 上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所上海市200032 上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所上海市200032

背景:补骨脂素具有很强的抗骨质疏松活性,可能对化疗导致的骨质疏松具有恢复作用。目的:探讨补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用及机制。方法:分离培养C57bL/6小鼠骨髓间充质干细胞,以MTT法检测补骨脂素对... 详细信息

背景:补骨脂素具有很强的抗骨质疏松活性,可能对化疗导致的骨质疏松具有恢复作用。目的:探讨补骨脂素对环磷酰胺抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的恢复作用及机制。方法:分离培养C57bL/6小鼠骨髓间充质干细胞,以MTT法检测补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力的影响,以成骨诱导结合碱性磷酸酶染色确定补骨脂素对环磷酰胺抑制骨髓间充质干细胞成骨分化恢复作用的最佳剂量。采用RT-qPCR法检测补骨脂素干预不同时间点成骨分化标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Wnt1、Wnt4、Wnt10b、β-catenin、c-MYC的mRNA表达;采用Western blot法检测补骨脂素干预不同时间点成骨特异性转录因子Runx2及Wnt/β-catenin信号通路相关基因Activeβ-catenin、DKK1、c-MYC、Cyclin D1的蛋白表达。结果与结论:(1)不同浓度补骨脂素对骨髓间充质干细胞活力没有显著影响;200μmol/L补骨脂素干预后对环磷酰胺诱导骨髓间充质干细胞成骨分化抑制的恢复作用最佳;(2)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞成骨标志基因Runx2、ALP、Osteocalcin、骨保护素mRNA表达和Runx2蛋白表达的降低;(3)补骨脂素可以逆转环磷酰胺条件培养基导致的骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin通路相关基因Wnt4、β-catenin、c-MYC mRNA表达和Activeβ-catenin、c-MYC、Cyclin D1蛋白表达的降低以及DKK1蛋白表达的升高;(4)结果表明,环磷酰胺能抑制小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,补骨脂素对其具有恢复作用,且200μmol/L补骨脂素干预效果最佳,而这种保护作用可能与补骨脂素激活Wnt4/β-catenin信号通路有关。

关键词：环磷酰胺骨髓间充质干细胞成骨分化补骨脂素 Wnt4 β-catenin

益瘿散结方含药血清对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖及有氧糖酵解的影响

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中国现代应用药学 2025年第03期 402-409页

作者：张雪婷王菊勇上海中医药大学附属龙华医院肿瘤研究所

目的观察益瘿散结方含药血清对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖及有氧糖酵解的影响。方法雄性SD大鼠连续灌胃给药7 d，制备益瘿散结方含药血清。取对数期生长的TPC-1细胞，分为2.5%、5%、7.5%、10%含药血清组和空白血清组，每组3个复... 详细信息

目的观察益瘿散结方含药血清对人甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖及有氧糖酵解的影响。方法雄性SD大鼠连续灌胃给药7 d，制备益瘿散结方含药血清。取对数期生长的TPC-1细胞，分为2.5%、5%、7.5%、10%含药血清组和空白血清组，每组3个复孔，分别用不同浓度含药血清和空白血清进行干预。采用CCK-8检测干预24、48、72 h细胞增殖情况，并筛选益瘿散结方含药血清低、中、高剂量组同空白血清组进行后续实验；采用试剂盒检测干预48 h后细胞乳酸外排量和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生成量情况；采用RT-PCR和Western blotting检测M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase M2,PKM2)、已糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、c-Myc和缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-α,HIF-1α) mRNA和蛋白表达情况；采用可见分光光度法检测PK、HK和LDH酶活性表达情况。结果与空白血清组比较，益瘿散结方含药血清可抑制TPC-1细胞增殖，以5%、7.5%和10%含药血清干预48 h作为低、中、高剂量组进行后续实验。与空白血清组比较，各含药血清组细胞乳酸外排量和ATP生成量显著降低，并且呈剂量依赖性；高剂量组HK2、 PKM2、 LDHA、 HIF-1α和c-Myc的mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001)；中、高剂量组PK、HK和LDH酶活性降低(P<0.01或P<0.001)。结论益瘿散结方含药血清能够抑制TPC-1细胞增殖、抑制细胞有氧糖酵解，其作用机制可能与其抑制c-Myc/HIF-1α信号通路，下调PK、HK、LDH表达及酶活性，减少乳酸和ATP生成有关。

关键词：益瘿散结方含药血清甲状腺癌有氧糖酵解

复原通络方防治下肢动脉硬化闭塞症介入术后再狭窄脉络瘀阻证的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2025年第7期 134-140页

作者：吴芳芳李晓宇柳国斌王宏飞樊炜静黄仁燕上海中医药大学附属曙光医院

目的：观察复原通络方（由黄芪、红花、鸡血藤、路路通、伸筋草、积雪草等中药组成）治疗下肢动脉硬化闭塞症介入术后再狭窄脉络瘀阻证患者的效果及对一期通畅率水平的影响。方法：将88例脉络瘀阻证下肢动脉硬化闭塞症介入术后患者随机... 详细信息

目的：观察复原通络方（由黄芪、红花、鸡血藤、路路通、伸筋草、积雪草等中药组成）治疗下肢动脉硬化闭塞症介入术后再狭窄脉络瘀阻证患者的效果及对一期通畅率水平的影响。方法：将88例脉络瘀阻证下肢动脉硬化闭塞症介入术后患者随机分为两组。对照组（n1=44）服用阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板治疗；观察组（n2=44）在阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板治疗的基础上加用复原通络方免煎颗粒治疗。两组皆治疗24周，随访观察36周。比较两组患者治疗前后的一期通畅率、症状量化评分、踝肱指数（AbI）、凝血功能、炎症指标的变化情况。结果：一期通畅率比较，治疗36周后，观察组一期通畅率优于对照组，差异具有统计学意义（χ2=4.14,PbI水平比较，观察组治疗24、36周后AbI水平高于对照组，差异具有统计学意义（PbC）、红细胞沉降率（ESR）治疗前后差异无统计学意义。结论：在双联抗血小板治疗的基础上，加用复原通络方免煎颗粒，可以提高下肢动脉硬化闭塞症介入术后患者患肢血管一期通畅率。服用更长时间的复原通络方可明显改善患者的临床症状，具有临床应用价值。

关键词：复原通络方下肢动脉硬化闭塞症脉络瘀阻证临床疗效一期通畅率

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