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五桑饮含药血清通过抗沉默信息调节因子蛋白1/腺苷酸活化蛋白激酶通路和增强细胞自噬减轻高糖诱导足细胞损伤的研究

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河北中医 2024年第7期46卷 1120-1126,1131页

作者：徐震宇李恬盖云上海中医药大学附属第七人民医院治未病科上海200137

目的研究探讨五桑饮含药血清对体外培养足细胞损伤的保护和相关机制。方法通过五桑饮煎剂灌胃SD大鼠7 d,制备含药血清。用含药大鼠血清和正常大鼠血清分别处理高糖诱导的小鼠足细胞48 h,以低糖和高糖处理的足细胞分别作为对照组和模型... 详细信息

目的研究探讨五桑饮含药血清对体外培养足细胞损伤的保护和相关机制。方法通过五桑饮煎剂灌胃SD大鼠7 d,制备含药血清。用含药大鼠血清和正常大鼠血清分别处理高糖诱导的小鼠足细胞48 h,以低糖和高糖处理的足细胞分别作为对照组和模型组。分别测量细胞活力,细胞凋亡率,上清乳酸脱氢酶(LDH)含量、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)浓度,以及细胞裂解物中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。免疫荧光分析细胞自噬。定量聚合酶链式反应(PCR)分析检测基因的表达变化。蛋白印迹法(Western blot)分析抗沉默信息调节因子蛋白1(SIRT1)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)蛋白表达水平。结果含有五桑饮的大鼠血清可改善足细胞增殖,降低LDH释放,抑制细胞凋亡、炎症因子释放和氧化应激反应。五桑饮含药血清进一步促进高糖诱导的足细胞自噬,促进Beclin-1和p62的mRNA水平,并促进SIRT1和p-AMPK蛋白的表达水平。结论五桑饮含药血清通过激活SIRT1/AMPK途径促进足细胞自噬,减轻高糖诱导的足细胞损伤。

关键词：糖尿病肾病足细胞五桑饮自噬动物实验

结直肠癌肝转移患者的血浆胆汁酸谱特征及临床价值

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海军军医大学学报 2024年第5期45卷 578-583页

作者：贾茹张平平袁苑王炎冯琴上海中医药大学附属曙光医院肿瘤科上海201203 上海中医药大学中西医结合学院上海201203 上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院科技实验中心上海201203

目的分析不同转移情况结直肠癌患者血浆胆汁酸含量及胆汁酸谱分布的差异,并评估血浆胆汁酸含量比值联合肿瘤标志物对结直肠癌肝转移的诊断价值。方法纳入2021年4月至2022年1月于上海中医药大学附属曙光医院就诊的结直肠腺癌肝转移或无... 详细信息

目的分析不同转移情况结直肠癌患者血浆胆汁酸含量及胆汁酸谱分布的差异,并评估血浆胆汁酸含量比值联合肿瘤标志物对结直肠癌肝转移的诊断价值。方法纳入2021年4月至2022年1月于上海中医药大学附属曙光医院就诊的结直肠腺癌肝转移或无转移患者163例,其中无转移组82例、肝转移组81例。收集患者的临床资料,用Karnofsky功能状态(KPS)评分评估生存质量;收集患者外周血样本,检测总胆汁酸及肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)和糖类抗原125(CA125)]水平,用高效液相色谱-串联质谱法检测血浆中15种胆汁酸的含量。分析两组患者胆汁酸含量及胆汁酸谱分布的差异,并绘制ROC曲线分析胆汁酸含量比值联合肿瘤标志物对结直肠癌肝转移的临床诊断效能。结果两组结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤位置、病理分化程度、KPS评分差异无统计学意义(均P>0.05)。肝转移组患者总胆汁酸、CEA、CA125均较无转移组患者升高(均P<0.001),血浆胆汁酸谱中甘氨胆酸、脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、甘氨熊脱氧胆酸、石胆酸和甘氨石胆酸含量均较无转移组患者升高(均P<0.05),血浆次级胆汁酸含量高于无转移组患者(P<0.001),次级胆汁酸与初级胆汁酸含量比值高于无转移组患者(P<0.001)。次级胆汁酸与初级胆汁酸含量比值联合CEA、CA125诊断结直肠癌肝转移的灵敏度为71.60%,特异度为80.49%,AUC为0.820(95%CI 0.754~0.885,P<0.001)。结论结直肠癌肝转移患者血浆胆汁酸含量升高,胆汁酸谱异于无转移患者;次级胆汁酸与初级胆汁酸含量比值联合CEA、CA125对结直肠癌肝转移有较高的诊断价值。

关键词：结直肠肿瘤肝转移胆汁酸次级胆汁酸诊断标志物

基于生信分析和动力学模拟鉴定阿尔茨海默病免疫标志物及靶向药食同源中药预测

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中草药 2024年第8期55卷 2667-2683页

作者：梁朋朋王雅乐黄海李桂云吴红彦上海中医药大学深圳医院广东深圳518004

目的分析阿尔茨海默病(Alzheimer’s,AD)免疫相关的生物标志物、发病机制、免疫浸润水平和潜在的靶向药食同源中药。方法从GEO数据库中下载GSE5281、GSE132903数据集的表达谱,获得AD差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)... 详细信息

目的分析阿尔茨海默病(Alzheimer’s,AD)免疫相关的生物标志物、发病机制、免疫浸润水平和潜在的靶向药食同源中药。方法从GEO数据库中下载GSE5281、GSE132903数据集的表达谱,获得AD差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。采用加权共表达算法鉴定出AD重要模块基因,再从Imm Port Portal数据库获取免疫相关基因(immune-related genes,IRGs),将这些基因取交集得到免疫重要差异基因;随后应用最小绝对收缩和选择算法(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)及机器学习-支持向量机递归特征消除(support vector machine-recursive feature elimination,SVM-RFE)方法进行分析,筛选出AD共同的免疫相关标志物,并通过基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)、基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探索生物途径。然后,通过受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线来评估其鉴别能力,并在GSE122063数据集中进行验证。此外,建立临床列线图和曲线进行临床应用评估。基于转录样本中不同细胞类型相对丰度算法(cell-type identification by estimating relative subsets of RNA transcripts,Cibersort)和单样本基因集富集分析(single-sample gene set enrichment analysis,ss GSEA)进行免疫细胞浸润分析。最后,运用Coremine Medical、Herb数据库进行中药和成分分析,并进行分子对接和动力学模拟。结果共筛选出1360个DEGs和富半胱氨酸和甘氨酸的蛋白质1(cysteine and glycine rich protein 1,CSRP1)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、白细胞介素4受体(interleukin 4 receptor,IL4R)、生长抑素(somatostatin,SST)、人核因子-κB抑制蛋白α(nuclear factor-kappa B inhibitor alpha,NFKBIA)5个生物标志物。GO分析显示AD与神经系统发育和细胞发育的正向调节高度相关;KEGG和GSEA富集结果显示AD与B细胞受体信号通路、糖胺聚糖生物合成途径等通路最为密切。免疫浸润分析显示AD脑组织内巨噬细胞、记忆B细胞、中心记忆CD8 T细胞等比例上升,初始CD4+T细胞、活化的CD8+T细胞、效应记忆CD8+T细胞比例下降,B2M、CD40等检查位点有明显差异。潜在靶向中药有人参、当归、厚朴花等82种,四气五味以温、寒、平、辛、苦、甘为主,归经以肝、肺、脾、胃经为主,功效以清热、活血、补虚居多。分子对接和动力学模拟显示20(S)-原人参二醇与标志物对接稳定。结论通过多种方法筛选出了AD的生物标志物,通过富集分析得到了AD相关的生物过程及信号通路,阐释了免疫相关机制,人参、当归、厚朴花等药食同源类中药有望成为AD新药开发的重要来源,为AD发病机制、临床治疗、药物研发提供新的思路。

关键词：阿尔茨海默病加权共表达分析机器学习免疫浸润生物标志物人参当归厚朴花 20(S)-原人参二醇

不同抗原表位的cTnI单克隆抗体对cTnI-TnC复合物亲和性的研究

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中国免疫学杂志 2024年

作者：何成山刘洋刘路遥吴豫陆志成上海中医药大学附属第七人民医院医学检验科中国人民解放军联勤保障部队第九〇八医院检验输血科

目的：了解不同心肌肌钙蛋白I（cTnI）抗原表位的单克隆抗体（MAb）对cTnI-肌钙蛋白C（cTnI-TnC）抗原的亲和性，筛选新型cTnI特异性抗体用于临床检测试剂盒研发。方法：基于微阵列化学发光免疫分析技术平台，采用cTnI-TnC抗原点样硬基... 详细信息

目的：了解不同心肌肌钙蛋白I（cTnI）抗原表位的单克隆抗体（MAb）对cTnI-肌钙蛋白C（cTnI-TnC）抗原的亲和性，筛选新型cTnI特异性抗体用于临床检测试剂盒研发。方法：基于微阵列化学发光免疫分析技术平台，采用cTnI-TnC抗原点样硬基质芯片，以鼠源性cTnI MAb作为待检抗体，HRP-羊抗鼠IgG为检测抗体，对抗原点样液、抗原点样浓度、待检抗体浓度进行实验条件优化；使用竞争法检测不同抗原表位的cTnI MAb对cTnI-TnC的亲和力，实验组为加入梯度浓度的cTnI-TnC，对照组加入等体积的稀释液，检测不同cTnI MAb的反应信号，计算亲和常数。结果：最优实验条件：抗原点样液为P105，抗原点样浓度为0.1mg/mL，待检抗体浓度为80ng/mL；包含TnC抗体的20c6cc和7B9cc MAb亲和性最好，其中20c6cc MAb达3.18×106L/moL；cTnI MAb中位于肽链C端的a.a.r 130-145、169-178和190-196区域的cTnI MAb表现出较好亲和力，其中MAb 625（a.a.r 169-178）为6.37×105L/moL，在cTnI MAb中亲和性最强。结论：cTnI肽链C端a.a.r 130-145、169-178、190-196和TnC区的cTnI MAb与cTnI-TnC抗原的亲和性较好，针对该区域设计新型cTnI补位抗体，可作为解决自身抗体及肽链蛋白水解负性干扰的新思路。

关键词：心肌肌钙蛋白I 肌钙蛋白C 单克隆抗体亲和性

基于以“味”统方、苦辛平逆法的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭合并糖尿病的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 98-106页

作者：张蒙王新东上海中医药大学附属曙光医院上海201203 南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准... 详细信息

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准的HFp EF合并2型糖尿病气阴两虚,水瘀内停证患者108例,随机分为对照组、观察组(每组各54例)。两组均遵循指南推荐予以慢性心力衰竭及糖尿病西医常规基础治疗,观察组在此基础上予葶鹿益心饮加载治疗,治疗疗程为12周。观察患者治疗前后纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、左室舒张末径(LVEDD)、左房内径(LAD)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度(E)/舒张早期二尖瓣环峰值速度(e')比值(E/e')、N末端B型脑钠肽前体(NT-pro BNP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、运动耐量评价指标6 min步行试验距离、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表、中医证候积分及其他安全性指标。结果:最终完成试验观察病例104例,其中对照组52例,观察组52例;对照组治疗后心功能分级改善显效及有效患者35例,总有效率为67.3%;观察组治疗后心功能分级改善显效及有效患者47例,总有效率为90.4%,观察组患者总有效率明显优于对照组(χ^(2)=2.754,P中医证候改善程度明显优于对照组(P中医证候积分。

关键词：射血分数保留型心力衰竭 2型糖尿病气阴两虚、水瘀内停葶鹿益心饮临床疗效

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补肾健脾方对乙肝病毒感染者免疫功能的影响

中药药理与临床 2024年第6期40卷 32-37页

作者：刘影陈旭东邵华卿孙陈岑徐汉辰王磊上海中医药大学附属龙华医院脾胃病研究所上海200030 上海中医药大学附属龙华医院检验科上海200030 上海中医药大学附属龙华医院肝病科上海200030

目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测... 详细信息

目的:观察乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染对机体免疫功能的影响,研究补肾健脾方对HBV感染者免疫功能的影响。方法:(1)将招募的慢性HBV感染者及健康志愿者分为实验组和对照组,采集各组研究对象的外周血,分离血清,ELISA法检测两组血清中γ干扰素(IFN-γ)、α干扰素(IFN-α)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术(FCM)检测两组的PBMC中自然杀伤细胞(NK)、辅助性T细胞1(Th1)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)数量及胞内IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α、干扰素基因刺激蛋白(STING)、T盒子转录因子(T-BET)、信号传导转录激活因子4(STAT4)蛋白表达水平。(2)制备大鼠含药血清,通过WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒筛选含药血清干预PBMC的安全剂量;以HBV感染者PBMC为实验对象将其分为3个组,空白对照组、空白血清组和含药血清组,干预48 h后,ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-12、TNF-α含量,FCM检测各组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量及胞内细胞因子水平;RT-qPCR法检测各组细胞因子mRNA表达。结果:(1)与健康志愿者相比,HBV感染者血清中IFN-γ、IL-12含量和PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量明显降低(P<0.05);HBV感染者PBMC胞内IFN-γ、IL-12、TNF-α、STAT4、T-BET较健康志愿者合成减少(P<0.05)。(2)与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清组PBMC细胞培养上清中IFN-γ、IL-12含量明显升高(P<0.05);补肾健脾方含药血清组PBMC中CTL、Th1、NK细胞数量以及胞内IFN-γ蛋白表达水平较空白血清组明显升高(P<0.05);与空白血清组相比,补肾健脾方含药血清可明显上调Ifnγ、IL2、Il12、TnfαmRNA表达(P<0.05)。结论:补肾健脾方可通过上调CTL、Th1、NK细胞数量,促进IL-12分泌,进而促进IFN-γ的合成与分泌,从而恢复HBV感染者PBMC的免疫功能。

关键词：补肾健脾方干扰素γ 乙型肝炎病毒免疫 T盒子转录因子信号传导转录激活因子4 T淋巴细胞

腰痛舒痹方联合温针灸治疗风寒湿痹型腰椎间盘突出症临床研究

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新中医 2024年第1期56卷 104-107页

作者：朱晓雨袁韩涛胡洪奎姜海涛盛文博李四波上海中医药大学上海201203 上海中医药大学附属第七人民医院上海200137

目的:观察腰痛舒痹方联合温针灸治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及对血清中炎症介质白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:选取腰椎间盘突出症患者90例,采用随机数字表法分为中药组、针灸组、联合组各30例。... 详细信息

目的:观察腰痛舒痹方联合温针灸治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及对血清中炎症介质白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:选取腰椎间盘突出症患者90例,采用随机数字表法分为中药组、针灸组、联合组各30例。中药组给予腰痛舒痹方治疗,针灸组给予温针灸治疗,联合组给予腰痛舒痹方联合温针灸治疗,疗程6周。评价3组临床疗效,比较3组治疗前后视觉模拟评分法(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分,并检测血清IL-1β、TNF-α水平。结果:联合组总有效率高于中药组和针灸组(P<0.05)。治疗后,3组VAS评分、ODI指数均较治疗前降低(P<0.05);且联合组VAS评分、ODI指数均低于中药组和针灸组(P<0.05)。治疗后,3组IL-1β、TNF-α水平均较治疗前降低(P<0.05),且联合组IL-1β、TNF-α水平均低于中药组和针灸组(P<0.05)。结论:腰痛舒痹方联合温针灸治疗风寒湿痹型腰椎间盘突出症可提高临床疗效,减轻患者疼痛,改善腰部活动度,降低血清中炎症因子的表达,提高患者生活自理能力。

关键词：腰椎间盘突出症风寒湿痹证腰痛舒痹方温针灸白细胞介素-1β 肿瘤坏死因子-α 腰椎功能

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古代肺系疫病的记载价值和意义剖析

中国医学伦理学 2024年第3期37卷 373-376,F0003页

作者：张晓东陈跃来宋秀玲上海中医药大学中医学院上海201203 上海中医药大学附属龙华医院上海200032 上海中医药大学研究生院上海201203

从人类发展史看,疫病一直伴随着人类的生息繁衍,对人类的身体健康及生命安全造成了严重威胁。疫病起病急、传染性强,一旦发病,能够迅速传染给周围的人,会使许多人在很短时间内被感染。肺系疫病是疫病中发病率、流行性及传染性最高的一... 详细信息

从人类发展史看,疫病一直伴随着人类的生息繁衍,对人类的身体健康及生命安全造成了严重威胁。疫病起病急、传染性强,一旦发病,能够迅速传染给周围的人,会使许多人在很短时间内被感染。肺系疫病是疫病中发病率、流行性及传染性最高的一类疾病,其对经济社会发展乃至历史进程也会产生影响。概览中国古代文献,古代医家智慧对今天或者未来可能的相关工作具有一定的借鉴价值。从梳理中医古籍中记载的经典理论出发,深入挖掘,重新认识,以期为临床诊治和公共卫生事业发展提供借鉴。

关键词：肺系疫病医学典籍公共卫生临床研究临床实践

巨噬细胞特异性启动子SP146-C1增强血管内皮生长因子C在动脉粥样硬化小鼠中的表达

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中国组织工程研究 2024年第26期28卷 4202-4208页

作者：李斯锦冯骁腾王怡茹刘萍上海中医药大学附属龙华医院上海市200032

背景:携带巨噬细胞特异性启动子SP146-C1(Synthetic promoter 146-C1)及外源性基因血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGFC)的重组9型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9,rAAV9)在动脉粥样硬化组织中的表达效率还不确定。目的:探究rAAV9-SP146-C1-VEGFC在动脉粥样硬化小鼠中的表达效率及对淋巴管生成的影响。方法:取30只ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饮食喂养12周构建动脉粥样硬化模型,随机数字表法分为转染7,14,21,28,35 d组各5只,尾静脉注射5.0×10^(11) vg rAAV9-SP146-C1-VEGFC,对照组5只小鼠尾静脉注射等量对照病毒rAAV9-SP146-C1-Scramble。分别于转染后7,14,21,28,35 d时麻醉后处死,留取血清、股骨、胫骨、心脏及主动脉组织,对照组于7 d时同法取材。各组小鼠的股骨和胫骨用于提取骨髓原代巨噬细胞,RT-qPCR检测骨髓原代巨噬细胞及主动脉中VEGFC、血管内皮细胞生长因子受体3、平足蛋白、淋巴管内皮透明质酸受体1的基因表达;Western blot检测骨髓原代巨噬细胞及主动脉中VEGFC的蛋白表达水平,ELISA检测小鼠血清中VEGFC水平,免疫荧光检测主动脉窦中VEGFC的表达,主动脉周围及心肌中淋巴管内皮透明质酸受体1的表达。结果与结论:①与对照组比较,转染7 d组小鼠血清VEGFC水平增加,主动脉及骨髓巨噬细胞中VEGFC、血管内皮细胞生长因子受体3、平足蛋白、淋巴管内皮透明质酸受体1的mRNA表达增高,骨髓巨噬细胞中VEGFC蛋白表达增高,主动脉窦斑块的VEGFC荧光强度增高(P<0.05,P<0.01);②转染rAAV9-SP146-C1-VEGFC的各组小鼠血清VEGFC水平随时间延长逐渐增加,在28 d时开始减少;主动脉及骨髓巨噬细胞中VEGFC、血管内皮细胞生长因子受体3、平足蛋白、淋巴管内皮透明质酸受体1的mRNA水平、骨髓巨噬细胞中VEGFC蛋白水平、主动脉窦斑块的VEGFC荧光强度、主动脉窦周围及心肌的淋巴管内皮透明质酸受体1荧光强度随着时间延长逐渐增加,其中主动脉淋巴管内皮透明质酸受体1的mRNA水平、主动脉窦周围及心肌的淋巴管内皮透明质酸受体1荧光强度在28 d时表达量最高(P<0.05),其余均在21 d时表达最高,28 d后逐渐减少(P<0.05)。结果表明,rAAV9-SP146-C1-VEGFC可有效转染动脉粥样硬化模型小鼠骨髓巨噬细胞,并促进淋巴管增生。

关键词：动脉粥样硬化巨噬细胞血管内皮生长因子C 巨噬细胞特异性启动子主动脉