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肠道菌群与局部肾素-血管紧张素系统对糖尿病肾病的影响及中医药研究进展

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中国实验方剂学杂志 2023年第15期29卷 242-248页

作者：杨超茅李园园张顺宵高建东上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201999 上海中医药大学附属曙光医院上海201203

糖尿病肾病(DN)是临床常见的糖尿病并发症,是导致终末期肾脏病(ESRD)的主要原因,同时也是糖尿病患者生存的关键决定因素。糖尿病肾病发病机制复杂,目前认为与血流动力学异常、肠道菌群紊乱、糖脂代谢紊乱、氧化应激、遗传易感性及蛋白... 详细信息

糖尿病肾病(DN)是临床常见的糖尿病并发症,是导致终末期肾脏病(ESRD)的主要原因,同时也是糖尿病患者生存的关键决定因素。糖尿病肾病发病机制复杂,目前认为与血流动力学异常、肠道菌群紊乱、糖脂代谢紊乱、氧化应激、遗传易感性及蛋白非酶糖基化等有关。局部肾素-血管紧张素系统(RAS)一直都是糖尿病肾病致病性和进行性变化的核心,其一旦被激活,会进而诱发血管内产生大量氧自由基,破坏内皮功能,影响机体微循环。随着最近的研究发现,肠道菌群及其代谢产物可能通过激活或者拮抗局部RAS从而影响DN的发生发展。中药治疗糖尿病肾病相比单纯西药治疗具有多靶点、不良反应小等优势。近年来不少中医学者发现单味药及其有效成分提取物、中药复方可以通过调节局部RAS或者调节肠道菌群的方式改善肾脏功能,如补脾的党参、山药、白术、茯苓,也有补肾的熟地黄、山茱萸、太子参;以及具有活血化瘀通络功效的水蛭、丹参、当归。该文整理并归纳了肠道菌群与局部RAS在DN的发生发展过程中起到的作用,并且参考近几年中药干预DN的动物实验或临床试验,进行分析、归纳,总结,以期为DN的中西医结合治疗提供更多的治疗策略和理论依据。

关键词：糖尿病肾病(DN) 肠道菌群肾素-血管紧张素系统(RAS) 中医中药

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS分析覆盆子不同部位的化学成分及其9种成分含量的快速测定

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中草药 2023年第15期54卷 4789-4803页

作者：沈瑶黄思红刘依茹李靖蕾陈昌伦刘考铧刘伟秦路平李荣胜吴建军浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 上海中医药大学附属曙光医院宝山分院儿科上海201900 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法对覆盆子Rubus chingii不同部位(小核果和花托)化学成分进行分析鉴定,并建立快速测定覆盆子中9种成分含量的方法。方法采用Acquity UPLC HSS T_(3)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸... 详细信息

目的采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法对覆盆子Rubus chingii不同部位(小核果和花托)化学成分进行分析鉴定,并建立快速测定覆盆子中9种成分含量的方法。方法采用Acquity UPLC HSS T_(3)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水与乙腈为流动相,梯度洗脱;覆盆子化学成分鉴定时采用正负离子Full MS/dd-MS^(2)模式,通过化合物的一级、二级质谱信息,结合对照品比对确认,进行覆盆子不同部位主要化学成分的快速、精准识别。采用ACQUITY BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱在负离子Full MS/SIM模式,建立快速测定覆盆子不同部位中9种成分(没食子酸、芦丁、鞣花酸、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、椴树苷、槲皮素和山柰酚)含量的UHPLC-Q-Exactive OrbitrapHRMS方法,并测定其含量。结果从覆盆子小核果和花托中共鉴定122种化学成分,包括黄酮类66种、有机酸类28种、萜类24种、其他类4种。成功建立一种6 min完成覆盆子中9种成分含量测定的方法,各成分在其线性范围内线性关系良好;精密度、重复性及稳定性良好(RSD≤6.30%);加样回收率在99.45%~105.30%(RSD≤4.43%),并发现小核果中芦丁的含量显著高于花托;而花托中的鞣花酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷和椴树苷的含量显著高于小核果。结论覆盆子小核果和花托部位的化学成分存在差异性,运用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS建立的定量方法分析时间短、灵敏度高、准确性好,方法学考察结果均符合含量测定的要求,可用于覆盆子中9种成分的快速测定。

关键词：覆盆子小核果花托超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱没食子酸芦丁鞣花酸金丝桃苷山柰酚-3-O-芸香糖苷紫云英苷椴树苷槲皮素山柰酚

基于UHPLC⁃Q⁃Exactive Orbitrap HRMS技术分析黄芪汤颗粒的化学成分与小鼠口服后的入血成分

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上海中医药杂志 2023年第9期57卷 70-77页

作者：张清李荣胜黄思红沈沁尹艺晓蒋式骊慕永平陈佳美刘平刘伟上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院药学部国家中医药管理局中药制剂三级实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院宝山分院儿科上海201900

目的运用超高效液相串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)技术,分析鉴定黄芪汤颗粒的化学成分及小鼠灌胃黄芪汤颗粒后的主要入血成分。方法色谱分离采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μ... 详细信息

目的运用超高效液相串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS)技术,分析鉴定黄芪汤颗粒的化学成分及小鼠灌胃黄芪汤颗粒后的主要入血成分。方法色谱分离采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱。质谱采用电喷雾电离正离子模式(ESI+)和电喷雾电离负离子模式(ESI-)交替扫描,并自动触发二级质谱扫描功能(Full MS/dd-MS2)采集质谱数据。经Xcalibur 3.0软件获取色谱保留时间以及母离子和碎片离子信息,定性鉴别黄芪汤颗粒的化学成分及小鼠灌胃黄芪汤颗粒后的入血成分及可能的代谢途径。结果综合保留时间、准确分子量、二级碎片信息、对照品比对、文献参考等色谱质谱检测信息,从黄芪汤颗粒中共鉴定出167种化学成分,从小鼠灌胃黄芪汤颗粒后的血清中共检测到甘草素、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷等60种原型成分和43种代谢产物。结论完成了黄芪汤颗粒化学成分及主要入血成分快速鉴定,可为黄芪汤颗粒效应物质解析、质量标准研究及作用机制探讨等提供参考。

关键词：黄芪汤慢性肝病经典名方化学成分代谢产物入血成分

不同证型非酒精性脂肪性肝病患者的血清胆汁酸谱特征研究

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中华中医药杂志 2023年第8期38卷 3805-3809页

作者：安梓铭杨佳妮石磊孙健胡义扬苟小军冯琴上海中医药大学肝病研究所上海201203 上海中医药大学附属曙光医院科技实验中心上海201203 上海中医药大学附属曙光医院检验科上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203 肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市宝山区中西医结合医院中心实验室上海201999

目的:在血清胆汁酸谱层面探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者中医证型肝胆湿热证、肝郁脾虚证的物质基础。方法:182例NAFLD患者辨证分为无证可辨(36例)、肝胆湿热(92例)和肝郁脾虚(54例)3组;收集受试者各项指标及血清总胆汁酸(TBA)水平... 详细信息

目的:在血清胆汁酸谱层面探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者中医证型肝胆湿热证、肝郁脾虚证的物质基础。方法:182例NAFLD患者辨证分为无证可辨(36例)、肝胆湿热(92例)和肝郁脾虚(54例)3组;收集受试者各项指标及血清总胆汁酸(TBA)水平;通过液相色谱/串联质谱分析15种血清胆汁酸水平;比较NAFLD各证型间代谢相关指标及胆汁酸谱特征。结果:肝胆湿热组的TBA显著高于无证可辨组、牛磺石胆酸(TLCA)显著低于无证可辨组(P<0.05);肝郁脾虚组的TBA、石胆酸(LCA)、甘氨石胆酸(GLCA)均显著高于无证可辨组(P<0.05,P<0.01);肝郁脾虚组的甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)显著高于肝胆湿热组(P<0.05)。结论:肝郁脾虚证的NAFLD患者表现出相对更加紊乱的血清胆汁酸代谢异常,血清胆汁酸的代谢紊乱是NAFLD不同证型的物质基础之一。

关键词：胆汁酸非酒精性脂肪性肝病中医证型代谢组学胆汁酸代谢

基于网络药理学探讨复康灵治疗三阴性乳腺癌的作用机制

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上海中医药大学学报 2022年第S01期36卷 210-219页

作者：张玉柱李甜唐润薇袁帅余秋阳张卫红上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201999

目的:运用网络药理学方法筛选中药复方复康灵的活性成分以及作用于三阴性乳腺癌干细胞的靶点和通路,探讨其分子机制。方法:通过TCMSP数据库、TCMID数据库和BATMAN-TCM数据库筛选出复康灵活性成分及其相关靶标;通过GeneCards数据库和GEO... 详细信息

目的:运用网络药理学方法筛选中药复方复康灵的活性成分以及作用于三阴性乳腺癌干细胞的靶点和通路,探讨其分子机制。方法:通过TCMSP数据库、TCMID数据库和BATMAN-TCM数据库筛选出复康灵活性成分及其相关靶标;通过GeneCards数据库和GEO数据库收集疾病相关基因,并做交集筛选目标基因;运用String数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络;采用DAVID数据库对复康灵关键作用靶点进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。结果:通过筛选得到复康灵有效成分108个和对应的靶基因446个,与三阴性乳腺癌干细胞的交集基因为49个;GO分析结果显示复康灵活性成分的基因功能主要表现在信号调控、细胞刺激反应、氧化应激反应、细胞凋亡、炎症反应以及对细胞因子刺激的反应等生物过程中,其抗三阴性乳腺癌的复发和转移的作用主要是通过调控细胞增殖、迁移等生物过程;KEGG分析结果显示其主要通过调控肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、肿瘤通路、表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂耐药等发挥治疗作用。结论:预测了复康灵对三阴性乳腺癌干细胞的作用靶点、物质基础和分子机制,以及复康灵对三阴性乳腺癌转移的分子机制。

关键词：复康灵三阴性乳腺癌干细胞网络药理学通路分子机制

中医药预防内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎研究进展

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中成药 2024年

作者：陈萌蔡淦李甫龚彪张振超邵家东上海市宝山区淞南镇社区卫生服务中心上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学附属龙华医院

内镜逆行胰胆管造影广泛运用于肝胆胰等疾病的临床诊断和治疗，作为一种有创性操作，内镜逆行胰胆管造影术后可能导致严重的并发症，其中最常见的并发症是术后胰腺炎，严重影响患者生活质量，加重患者经济负担，提高了医疗难度。目前临... 详细信息

内镜逆行胰胆管造影广泛运用于肝胆胰等疾病的临床诊断和治疗，作为一种有创性操作，内镜逆行胰胆管造影术后可能导致严重的并发症，其中最常见的并发症是术后胰腺炎，严重影响患者生活质量，加重患者经济负担，提高了医疗难度。目前临床用于预防内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎的西药有限，且具有诸多禁忌症和副作用。中医药在预防内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎方面有效，可降低相关实验室指标，且有整体调节、无特殊禁忌症、不良反应少等优势，但由于中医药的复杂性及处方的个体差异性，目前仍难以得到明确的循证证据，且相关基础研究较少，中医药的有效成分及作用机制目前仍难以明确阐述。本文归纳内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎的流行病学和危险因素、临床研究及实验研究等内容的相关文献，以期为中医药预防内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎提供参考。

关键词：中医药内镜逆行胰胆管造影胰腺炎临床应用预防

真武汤合葶苈大枣泻肺汤辅助治疗慢性心力衰竭急性失代偿期疗效观察

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中国中医急症 2022年第7期31卷 1228-1231页

作者：耿艳胡柏生姜颢上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201900

目的观察真武汤合葶苈大枣泻肺汤辅助治疗慢性心力衰竭急性失代偿期(ADHF)疗效及对N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响并探讨其作用机制。方法 86例患者按照其就诊顺序编号,按照随机数字表法将其分成观察组与对照组各43例。对照组参... 详细信息

目的观察真武汤合葶苈大枣泻肺汤辅助治疗慢性心力衰竭急性失代偿期(ADHF)疗效及对N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响并探讨其作用机制。方法 86例患者按照其就诊顺序编号,按照随机数字表法将其分成观察组与对照组各43例。对照组参照相关指南予以西医标准化治疗方案,观察组在对照组基础上予以真武汤合葶苈大枣泻肺汤辅助治疗。比较两组心功能分级疗效、主要症状评分、血清学指标、左心功能指标、24 h尿量、6 min步行距离(6MWT)以及不良反应发生情况。结果观察组心功能分级总有效率为86.05%,高于对照组的72.09%(P室射血分数(LVEF)、左室舒张末径(LVEDD)、心脏每搏量(SV)水平、24 h尿量和6 MWT水平比较,差别均不大(均P> 0.05)。两组治疗后气短、乏力、心悸、浮肿症状评分、血清NT-proBNP、IL-6、hs-CRP水平、LVEF、LVEDD、SV水平、24 h尿量和6 MWT水平与治疗前比较均改善(均P <0.05),且观察组治疗后与对照组比较,气短、乏力、心悸、浮肿症状评分更低,NT-proBNP、IL-6、hsCRP和LVEDD水平更低,而LVEF、SV水平、24 h尿量、6MWT水平则更高(均P <0.05)。结论将真武汤合葶苈大枣泻肺汤应用于ADHF患者的治疗中,能够进一步提高心功能分级疗效,缓解患者临床症状,改善炎症指标和心肌损伤标志物水平,有助于保护心功能,增加尿量,延缓病情发展,且安全性良好。

关键词：慢性心力衰竭急性失代偿期真武汤葶苈大枣泻肺汤 N端脑钠肽前体

六味地黄汤加减联合氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠ACE1/AngⅡ/AT1R轴及肠道菌群的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 1-9页

作者：杨超茅张顺宵李园园高建东上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201999 上海中医药大学附属宝山医院上海201999 上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂... 详细信息

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后,予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg^(-1)诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、中药组(六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1))、西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1))、中西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1)联合六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1)),连续灌胃8周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(Up)、尿素氮(Bun)、血肌酐(SCr);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清ACE1、AngⅡ、AT1R水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾组织ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)、过碘酸雪夫氏(PAS)染色后观察肾组织病理形态学改变;采集各组大鼠粪便标本进行16S rDNA高通量测序分析。结果:与正常组比较,模型组Up、FBG、Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平显著升高(P<0.01),肾组织病变严重,ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达显著增加(P<0.01),厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)升高,乳杆菌属的物种丰度下降,穆氏菌属、双歧杆菌属的物种丰度升高;与模型组比较,各给药组Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平均显著下降(P<0.01),肾脏病变程度有所改善,中药组、中西药组Up、FBG水平均显著下降(P<0.01),西药组和中西药组的ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白,中药组的AngⅡ蛋白表达显著减少(P<0.01)、中药组ACE1、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),中药组、中西药组的F/B降低;西药组和中药组布劳特氏菌属的物种丰度升高,中药组、中西药组乳杆菌属、瘤胃球菌科未定属、双歧杆菌属的物种丰度升高,穆氏菌属的物种丰度下降,中药组、中西药组Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05);与西药组比较,中西药组Up水平均显著下降(P<0.01),中西药组的Bun水平明显降低(P<0.05);中西药组ACE1、AT1R水平显著降低(P<0.01),ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),肾脏病变程度改善较明显,双歧杆菌属的物种丰度升高,Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05)。结论:六味地黄汤加减联合氯沙坦钾可通过调节ACE1/AngⅡ/AT1R轴减轻肾脏纤维化,提升大鼠乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度,降低穆氏菌属的物种丰度,并改善肠道菌群的丰富度、均匀度,减轻肾脏病理损伤。

关键词：血管紧张素转换酶1 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ1型受体肠道菌群六味地黄汤加减

吴茱萸汤对化疗性异食癖恶心呕吐模型大鼠干预效果与作用机制的初步研究

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上海中医药杂志 2022年第2期56卷 61-66页

作者：李甜陈飞吴叶晨王晓婷张卫红上海中医药大学附属曙光医院宝山分院乳腺外科上海201900 上海中医药大学附属曙光医院乳腺外科上海201203

目的研究不同剂量吴茱萸汤对顺铂诱导的大鼠化疗相关呕吐及肠道黏膜炎症的药效并初步探讨其作用机制。方法灌胃复方(吴茱萸汤)使用飞行时间高分辨质谱法对其活性成分进行定性。48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、不同剂量吴茱萸汤组(5... 详细信息

目的研究不同剂量吴茱萸汤对顺铂诱导的大鼠化疗相关呕吐及肠道黏膜炎症的药效并初步探讨其作用机制。方法灌胃复方(吴茱萸汤)使用飞行时间高分辨质谱法对其活性成分进行定性。48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、不同剂量吴茱萸汤组(5、10、20 mL/kg)以及阳性对照组(托烷司琼),每组8只。观察造模后1、3、5、7 d大鼠异嗜高岭土情况;液质联用方法定量检测各组大鼠血清中5-羟色胺(5-HT)的浓度;HE染色和免疫荧光观察大鼠结肠组织变化以及磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)、白细胞共同抗原(CD45)的表达。结果吴茱萸碱、吴茱萸次碱为吴茱萸汤的主要成分。治疗后,与模型组比较,吴茱萸汤高、中剂量组大鼠异嗜高岭土的量明显减少、血清5-HT浓度显著降低(P<0.01);病理形态学观察可见,吴茱萸汤高、中剂量组对大鼠结肠黏膜具有保护作用,并降低了γ-H2AX及CD45的表达(P<0.01)。结论吴茱萸汤能治疗顺铂诱导的大鼠化疗后呕吐,并能减轻其肠道炎症反应,其作用机制可能与降低血清中5-HT的浓度,抑制肠道γ-H2AX及CD45的表达有关。

关键词：吴茱萸汤化疗相关恶心呕吐 5-羟色胺磷酸化组蛋白H2AX 白细胞共同抗原模型大鼠中药研究