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淫羊藿苷调控线粒体动力学改善慢性肾衰竭模型大鼠肾间质纤维化

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中国中药杂志 2022年第8期47卷 2170-2177页

作者：王蒙王凌晨冯晓轩周圆叶朝阳王琛上海中医药大学附属曙光医院肾病科上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所上海201203 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

观察淫羊藿苷(icariin,ICA)对慢性肾衰竭大鼠模型线粒体动力学的影响,探讨淫羊藿苷抗肾间质纤维化的分子机制。SD雄性大鼠采用5/6(ablation and infarction,A/I)术(左肾动脉2/3结扎,右肾切除术)制备慢性肾衰竭大鼠模型,随机分为5/6(A/I... 详细信息

观察淫羊藿苷(icariin,ICA)对慢性肾衰竭大鼠模型线粒体动力学的影响,探讨淫羊藿苷抗肾间质纤维化的分子机制。SD雄性大鼠采用5/6(ablation and infarction,A/I)术(左肾动脉2/3结扎,右肾切除术)制备慢性肾衰竭大鼠模型,随机分为5/6(A/I)组、5/6(A/I)+淫羊藿苷低剂量组、5/6(A/I)+淫羊藿苷高剂量组,另取12只假手术大鼠随机分为假手术组(sham)和假手术+淫羊藿苷高剂量组(sham+ICAH)。各组给予相应干预,8周后,Western blot法检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、线粒体动力学相关蛋白(p-Drp1 S616、p-Drp1 S637、Mfn1、Mfn2)和线粒体功能相关蛋白(TFAM、ATP6)表达水平,免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E),不同浓度淫羊藿苷干预,CCK-8法检测细胞活力;20 ng·mL^(-1)TGF-β1刺激NRK-52E细胞24 h,同时给予淫羊藿苷处理,Western blot法检测淫羊藿苷对纤维连接蛋白(Fn)、结缔组织生长因子(CTGF)、p-Drp1 S616、p-Drp1 S637、Mfn1、Mfn2、TFAM和ATP6蛋白的影响,检测ATP含量和线粒体形态;20 ng·mL^(-1)TGF-β1刺激的NRK-52E细胞用或不用5μmol·L^(-1)淫羊藿苷和10μmol·L^(-1)线粒体融合启动子M1(mitochondrial fusion promoter M1,MFP-M1)处理24 h,Western blot法检测纤维化标志蛋白Fn、CTGF的表达。Western blot结果显示,与sham组相比,5/6(A/I)组Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-Drp1 S616蛋白水平升高,p-Drp1 S637、Mfn1、Mfn2、TFAM、ATP6蛋白水平降低;与5/6(A/I)组比较,淫羊藿苷组大鼠Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-Drp1 S616蛋白水平明显降低,p-Drp1 S637、Mfn1、Mfn2、TFAM、ATP6蛋白水平明显升高。免疫组化结果显示,5/6(A/I)组α-SMA在肾小管间质区域阳性染色较sham组升高,淫羊藿苷组较5/6(A/I)组α-SMA蛋白表达明显降低。并且,纤维化程度、线粒体动力学和线粒体功能的改善在淫羊藿苷高剂量组的大鼠中尤为突出。体外研究发现,淫羊藿苷可以剂量依赖性地抑制TGF-β1诱导NRK-52E细胞Fn、CTGF和p-Drp1 S616蛋白水平的升高,增加p-Drp1 S637、Mfn1、Mfn2、TFAM、ATP6蛋白水平,升高ATP含量和改善线粒体形态;进一步研究发现,与淫羊藿苷单独处理相比,淫羊藿苷联合MFP-M1可进一步下调TGF-β1诱导NRK-52E细胞Fn和CTGF蛋白表达。总之,淫羊藿苷可明显抑制慢性肾衰竭肾间质纤维化,其机制与改善线粒体动力学密切相关。

关键词：慢性肾衰竭肾间质纤维化线粒体动力学淫羊藿苷

成体肝脏Numb基因过表达可抑制胆汁性肝纤维化进展

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中华肝脏病杂志 2022年第11期30卷 1175-1181页

作者：许燕楠胥文陈佳美刘伟陈高峰张华刘平慕永平上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的探讨成体肝脏Numb基因过表达是否可有效干预胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的进展。方法SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham,n=6)、胆总管结扎组(BDL,n=6)、空载体质粒组(Numb-EV,n=6)和Numb基因过表达组(Numb-OE,n=6)。胆总管结扎制备CLF... 详细信息

目的探讨成体肝脏Numb基因过表达是否可有效干预胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的进展。方法SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham,n=6)、胆总管结扎组(BDL,n=6)、空载体质粒组(Numb-EV,n=6)和Numb基因过表达组(Numb-OE,n=6)。胆总管结扎制备CLF模型,并于造模的同时将载有克隆Numb基因的腺相关病毒(AAV)经脾脏注射至大鼠体内,4周末取材。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)、血清总胆红素(TBil)、血清胆汁酸(TBA)、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量、肝组织中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与细胞角蛋白(CK)7、CK19的表达情况及肝组织病理情况。多组均数比较采用方差分析。结果与Sham组比较,BDL组大鼠肝组织Numb mRNA水平显著降低(0.872±0.237与0.452±0.147,P=0.003);与Numb-EV组比较,Numb-OE组肝组织Numb mRNA水平显著升高(0.487±0.122与1.094±0.345,P<0.01)。与Sham组比较,BDL组肝组织Hyp含量(μg/L)(288.46±49.49与901.98±271.85,P<0.01)及α-SMA mRNA水平(0.858±0.234与8.976±1.398,P<0.01)均显著升高;与Numb-EV组比较,Numb-OE组Hyp含量(μg/L)(864.32±113.54与580.44±171.77,P=0.039)及α-SMA mRNA水平(6.138±1.443与1.322±0.859,P<0.01)以及蛋白水平显著降低。与Sham组比较,BDL组血清ALT、AST、TBil、TBA水平均显著升高(P值均<0.01),Alb含量显著降低(P<0.01);与Numb-EV组比较,Numb-OE组AST、TBil水平均显著降低(P值均<0.01),ALT、TBA水平也明显降低(P值均<0.05),Alb含量显著升高(P值均<0.01),差异有统计学意义。与Sham组比较,BDL组CK7、CK19的mRNA表达水平均显著升高(1.40±0.42与43.78±7.56、1.11±0.51与363.81±134.84,P值均<0.01);与Numb-EV组比较,Numb-OE组CK7、CK19的mRNA表达水平显著降低(343.19±81.22与3.22±2.34、40.53±14.02与15.68±9.36,P值均<0.01)。结论成体肝脏Numb基因过表达可抑制CLF进展,这可能成为CLF治疗的新靶点。

关键词：肝纤维化胆汁淤积 Numb基因胆管增生腺相关病毒

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中医药治疗胃癌术后胃肠功能障碍的研究进展

中国实验方剂学杂志 2023年第21期29卷 238-244页

作者：张国磊王宇立韩力韩奇成宋利杰康宁方志红上海中医药大学附属市中医医院上海200071

胃癌是我国发病率最高的消化系统肿瘤,是严重危害我国民众生命健康的重大疾病,手术是胃癌主要治疗方式之一,术后胃肠功能障碍(PGD)是术后最常见的并发症之一。PGD的发病机制尚不明确,现代医学缺乏高效、针对性的药物,治疗措施较为局限,... 详细信息

胃癌是我国发病率最高的消化系统肿瘤,是严重危害我国民众生命健康的重大疾病,手术是胃癌主要治疗方式之一,术后胃肠功能障碍(PGD)是术后最常见的并发症之一。PGD的发病机制尚不明确,现代医学缺乏高效、针对性的药物,治疗措施较为局限,难以有效改善胃肠功能,影响生活质量及远期预后,存在治疗困境。PGD可归属于中医学“呕吐”“痞满”“胃反”“腹胀”“肠痹”“肠结”等范畴。近年来,众多中医药学者对胃癌PGD展开了大量研究,并取得了诸多研究成果。基于此种研究背景,文章结合近年来中医药治疗胃癌PGD的相关文献,分别从PGD的现代医学认识、中医病因病机、辨证治疗、临床研究等方面进行介绍,对近年来中医药治疗胃癌PGD的研究进展作一综述。研究发现中医药治疗胃癌PGD方式多样,包括中药内服、中药灌肠、耳穴压豆、穴位贴敷、针刺、艾灸等内外治法,具有操作简单、不良反应小、疗效确切、联合治疗效果显著等优势。该文系统整理了中医药治疗胃癌PGD的治疗措施,阐述了中医药治疗胃癌PGD的治法思路,归纳总结了中医药治疗胃癌PGD的研究成果,同时也指出了当前中医药治疗胃癌PGD的不足,并对未来中医药治疗胃癌PGD的研究方向进行了展望,可为中医药治疗胃癌PGD的研究提供一定参考。

关键词：中医药胃癌术后胃肠功能障碍研究进展

基于网络药理学和分子对接技术探讨酸枣仁汤治疗肺癌相关性失眠的作用机制

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中药新药与临床药理 2022年第6期33卷 813-824页

作者：姚嘉良王盼盼张龙田建辉上海中医药大学附属市中医医院肿瘤科上海200071 上海市中医医院中医肿瘤研究所上海200071

目的基于网络药理学和分子对接技术分析酸枣仁汤治疗肺癌相关性失眠的潜在生物学机制。方法通过TCMSP数据库、化学专业数据库并根据ADME筛选获取酸枣仁汤的主要有效化学成分及靶点;通过Gencards、OMIM数据库获取“肺癌、失眠”的疾病靶... 详细信息

目的基于网络药理学和分子对接技术分析酸枣仁汤治疗肺癌相关性失眠的潜在生物学机制。方法通过TCMSP数据库、化学专业数据库并根据ADME筛选获取酸枣仁汤的主要有效化学成分及靶点;通过Gencards、OMIM数据库获取“肺癌、失眠”的疾病靶点,构建“药物-疾病”的交集靶点网络;利用STRING平台及拓扑分析软件,构建“酸枣仁汤-肺癌-失眠”核心靶点网络;利用R语言对核心蛋白进行GO功能及KEGG通路分析;使用AutoDock vina软件对核心靶点与化学成分进行分子对接,利用Kaplan-Meier Plotter软件分析核心靶点对肺癌患者预后的影响。结果酸枣仁汤筛选后得到102个作用于“肺癌-失眠”疾病核心靶点的有效化学成分,根据度值筛选排序靠前的化合物分别为(S)-coclaurine、山柰酚(kaempferol)、植物甾醇(stigmasterol)、薯蓣皂素(diosgenin)等。筛选后得到“酸枣仁汤-肺癌-失眠”核心靶点23个,涉及548个GO条目,31条KEGG信号通路。分子对接结果显示山柰酚、薯蓣皂素、柚皮素与核心关键靶点对接度较好。Kaplan-Meier Plotter进一步分析酸枣仁汤治疗“肺癌-失眠”排前3位的核心靶点VEGFA、CAT、TNF,结果显示其均与肺癌患者的生存预后紧密相关。结论酸枣仁汤中的活性化合物山柰酚、柚皮素、薯蓣皂素等可作用于AKT1、TNF、VEGFA、CAT等多靶点,调节多种癌症、免疫、内分泌代谢信号通路,治疗肺癌相关性失眠,改善患者生活质量,从而有益于延长患者生存期,并为中医经典方剂的临床新药转化研究提供新的系统生物学思路。

关键词：酸枣仁汤肺癌失眠网络药理学分子对接

大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型的建立与评估

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中国比较医学杂志 2023年

作者：余奎梁晓强韩冕张静喆上海中医药大学附属龙华医院上海中医药大学附属龙华医院浦东分院上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，检测其病理生理指标，为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠，采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建，... 详细信息

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，检测其病理生理指标，为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠，采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建，评估大鼠造模前后的体重变化、死亡情况、肝功能主要指标变化及肝组织病理改变情况。结果造模后模型组大鼠体重明显降低；假手术组大鼠无死亡，肝功能无异常；模型组大鼠死亡3只，模型组死亡率12%，肝功能主要指标及肝病理呈现出明显的胆汁淤积及肝功能损伤性改变。结论本研究成功建立了大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，该模型具有操作简便、损伤小、死亡率低、造模成功率高等优势，可为多种常见疾病的机制研究和药物研发提供标准化的实验动物模型。

关键词：急性梗阻性化脓性胆管炎胆总管梗阻动物模型大鼠

COVID-19患者嗅觉和味觉功能障碍研究进展

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军事护理 2023年第1期40卷 70-73页

作者：洪慧芳魏薇卢根娣上海中医药大学附属曙光医院中医护理研究所上海201203

自2019年12月报告首例新型冠状病毒(COVID-19)感染患者以来,全球已有6亿多人口被COVID-19感染,并有650万人死亡[1]。其中嗅觉功能障碍(olfactory dysfunction)和味觉功能障碍(gustatory dysfunction)是COVID-19常见的相关症状之一,其发生率明显高于流行性感冒等其他上呼吸道感染疾病,并且可通过嗅觉和味觉障碍来预测和诊断COVID-19。大多数研究[2-3]报告,嗅觉和味觉障碍在发病后1个月内康复,但症状也可持续至2年甚至更久,且转阴后仍持续存在。

关键词： COVID-19 嗅觉障碍味觉障碍护理

从《黄帝内经》“聚沫则为痛”理论探析推拿干预疼痛及痛情绪的作用机制

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北京中医药大学学报 2023年第11期46卷 1510-1516页

作者：程艳彬陆萍朱清广孔令军吴志伟房敏上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200437 上海市中医药研究院中医推拿研究所上海中医药大学针灸推拿学院上海中医药大学附属曙光医院

慢性疼痛迁延难愈,常伴随抑郁、焦虑等痛情绪的发生,严重影响患者生活质量,给个人、家庭、社会造成巨大伤害,因此备受关注。本文基于《黄帝内经》“聚沫则为痛”理论对慢性疼痛的病因病机进行阐释,阐明推拿治疗慢性疼痛的中医学内涵,并... 详细信息

慢性疼痛迁延难愈,常伴随抑郁、焦虑等痛情绪的发生,严重影响患者生活质量,给个人、家庭、社会造成巨大伤害,因此备受关注。本文基于《黄帝内经》“聚沫则为痛”理论对慢性疼痛的病因病机进行阐释,阐明推拿治疗慢性疼痛的中医学内涵,并对推拿治疗慢性疼痛和痛情绪“身心同治”的独特优势进行总结,以期通过对骨关节疾病“聚沫则为痛”理论的探讨为相关基础研究和临床诊疗提供思路。

关键词：聚沫则为痛慢性疼痛痛情绪推拿身心同治

红萸饮对溃疡性结肠炎小鼠NLRP3/Caspase-1/ASC细胞焦亡通路的影响

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中华中医药杂志 2023年第6期38卷 2901-2907页

作者：陈雪董艳曹永清上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所上海200032

目的:探析红萸饮对溃疡性结肠炎(UC)小鼠细胞焦亡通路的调控机制。方法:将40只C57/BL6小鼠随机分为正常组、模型组、红萸饮组(1.5g/kg)和美沙拉秦组(0.50g/kg),采用自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液1周的方法造模。造模后正常组和模型组予蒸... 详细信息

目的:探析红萸饮对溃疡性结肠炎(UC)小鼠细胞焦亡通路的调控机制。方法:将40只C57/BL6小鼠随机分为正常组、模型组、红萸饮组(1.5g/kg)和美沙拉秦组(0.50g/kg),采用自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液1周的方法造模。造模后正常组和模型组予蒸馏水,红萸饮组和美沙拉秦组予相应药物灌胃7d,期间观察小鼠体质量、粪便等一般情况及疾病活动指数评分(DAI);HE染色观察结肠黏膜变化;微板法测定结肠组织中乳酸脱氢酶(LDH)水平;ELISA法检测血清中IL-18和IL-1β的含量;TUNEL荧光法检测结肠组织细胞凋亡水平;免疫组化法检测通路蛋白(ASC、Caspase-1、NLRP3)变化;Western blot法检测焦亡关键蛋白(IL-1β、IL-18、GSDMD)的表达。结果:与正常组比较,造模后动物体质量降低,DAI评分上升,结肠黏膜损伤严重,结肠组织蛋白上清中LDH含量显著升高(P<0.01),血清炎症因子(IL-1β、IL-18)含量均显著增加(P<0.01),TUNEL染色阳性明显,结肠组织焦亡通路蛋白(ASC、Caspase-1、NLRP3)表达量均显著增加(P<0.01),Westernblot法焦亡关键蛋白(IL-1β、IL-18、GSDMD)表达量均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,给药组小鼠体质量增加,DAI评分降低,结肠黏膜损伤较轻,结肠组织蛋白上清中LDH含量表达显著降低(P<0.01),血清炎症因子(IL-1β、IL-18)含量表达均显著降低(P<0.01),TUNEL染色阳性减弱,结肠组织焦亡通路蛋白(ASC、Caspase-1、NLRP3)表达量均显著下降(P<0.05,P<0.01),Westernblot法焦亡关键蛋白(IL-18、GSDMD)表达量均下降(P<0.01,P<0.05)。结论:红萸饮对UC小鼠细胞焦亡有抑制作用,其作用机制可能是通过调控NLRP3/Caspase-1/ASC通路实现的。

关键词：红萸饮溃疡性结肠炎焦亡炎性小体 Gasdermin D蛋白白细胞介素-1β 白细胞介素-18 机制

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健脾通络方改善胃癌术后失眠的临床疗效观察

辽宁中医杂志 2024年

作者：刘怡任建琳袁晨越储金砚周霖赵勇上海中医药大学附属市中医医院

目的: 观察健脾通络方治疗胃癌术后失眠的临床疗效。方法: 将80例胃癌术后失眠患者随机分为对照组及治疗组，每组40例。对照组（40例，脱落2例）给予艾司唑仑片治疗，治疗组（40例，脱落1例）给予健脾通络方治疗，7天为1个治疗疗程，两... 详细信息

目的: 观察健脾通络方治疗胃癌术后失眠的临床疗效。方法: 将80例胃癌术后失眠患者随机分为对照组及治疗组，每组40例。对照组（40例，脱落2例）给予艾司唑仑片治疗，治疗组（40例，脱落1例）给予健脾通络方治疗，7天为1个治疗疗程，两组均治疗4个疗程。统计两组治疗前后匹兹堡睡眠质量指数(PSQI) 评分、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）评分及中医证候评分变化，比较舌象、苔质变化，对比两组中医证候疗效，并监测不良反应事件的发生。结果：两组PSQI评分比较，治疗组PSQI各项指标及总分均低于对照组（P＜0.05）；两组HAMA评分比较，治疗组优于对照组（P＜0.05）；两组中医证候评分比较，治疗组明显优于对照组（P＜0.05）；治疗后，治疗组舌象、苔质也较治疗前好转（（P＜0.05））；治疗后，两组疗效相比，治疗组有效率为79.49%，对照组有效率为60.53%，差异具有统计学（P＜0.05）。结论: 健脾通络方能够有效提高胃癌术后患者睡眠疗效，改善患者睡眠障碍、提高患者生活质量，且副作用小，能为临床改善胃癌患者相关性失眠提供参考。

关键词：健脾通络方胃癌失眠疗效观察