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中医寒湿证素对膝骨关节炎患者临床症状的影响研究

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1419-1422页

作者：蒋鼎徐勤光申安平鄢来军王学宗郑昱新曹月龙上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海201203

目的探索中医寒湿证素与膝骨关节炎临床症状之间的关系。方法采用横断面研究设计,研究对象来自课题组前期风寒湿研究队列中2015年3月至2015年11月在上海中医药大学附属曙光医院关节科门诊就诊的膝骨关节炎患者110例,其中女性87例,平均... 详细信息

目的探索中医寒湿证素与膝骨关节炎临床症状之间的关系。方法采用横断面研究设计,研究对象来自课题组前期风寒湿研究队列中2015年3月至2015年11月在上海中医药大学附属曙光医院关节科门诊就诊的膝骨关节炎患者110例,其中女性87例,平均年龄为(60.67±6.01)岁,平均体质量指数(BMI)为(23.79±2.88)kg/m^(2)。依据《证素辨证学》的证素诊断标准,判别符合寒、湿证素诊断的患者;采用西安大略麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评估临床症状;分别比较寒组与非寒组、湿组与非湿组、寒+湿组与非(寒+湿)组的组间WOMAC评分;运用多元回归分析探讨寒证素、湿证素及寒+湿证素与WOMAC评分的相关性。结果与证素诊断不成立的患者相比,证素诊断成立(寒证素、湿证素、寒+湿证素)的患者在WOMAC评分上均显著增高(P中医寒、湿证素与KOA患者的临床症状有显著关联,提示对中医寒湿证素的防治将对KOA防治有积极意义。

关键词：中医证素中医诊断学骨关节炎膝骨关节炎

两种肌少症小鼠模型的功能表型、肌肉质量及力量特点比较

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2922-2929页

作者：江强于洁耿子翔王宁郭嘉杨光月王培歌赵咏芳上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市中医药研究院骨伤科研究所

背景：地塞米松和后肢悬吊是常用的动物肌少症造模方法，具有造模时间短、操作简便、成本低等特点。目的：比较地塞米松和后肢悬吊诱导小鼠肌少症模型在肌肉质量、力量及功能表型以及分子机制表型方面的差异。方法：采用随机抽样法将30... 详细信息

背景：地塞米松和后肢悬吊是常用的动物肌少症造模方法，具有造模时间短、操作简便、成本低等特点。目的：比较地塞米松和后肢悬吊诱导小鼠肌少症模型在肌肉质量、力量及功能表型以及分子机制表型方面的差异。方法：采用随机抽样法将30只C57BL/6小鼠随机分成3组，每组10只：正常对照组不进行任何干预；地塞米松组小鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠溶液1 mg/(kg·d)，连续注射6周，建立肌少症模型；后肢悬吊组采用鼠尾套悬吊小鼠后肢16 h,1次/d，连续悬吊6周，建立肌少症模型。造模6周内，监测小鼠体质量变化；造模6周后，检测小鼠四肢抓力、活动能力(游泳实验)、骨骼肌湿质量、骨骼肌病理形态，采用RT-PCR与Western blot检测骨骼肌蛋白质合成与分解代谢指标、AMPK/FoXO3α信号通路的表达。结果与结论：(1)从造模后第2周开始，地塞米松组、后肢悬吊组小鼠体质量均低于正常对照组(P <0.05)。(2)造模6周后，与正常对照组相比，造模两组小鼠四肢抓力均下降(P <0.05)，腓肠肌湿质量、趾长伸肌湿质量、腓肠肌与比目鱼肌横截面积均下降(P <0.05)；地塞米松组小鼠腓肠肌横截面积明显小于后肢悬吊组(P <0.05)，比目鱼肌横截面积大于后肢悬吊组(P <0.05)；与正常对照组、后肢悬吊组相比，地塞米松组小鼠活动能力降低(P <0.05)。(3)与正常对照组相比，造模两组PI3K、mTOR、AMPK、PGC-1α mRNA表达与p-AMPK/AMPK蛋白均降低(P <0.05),FoXO3α mRNA表达与PGC-1α、FoXO3蛋白表达均升高(P <0.05)；地塞米松组Akt1 mRNA表达降低(P <0.05),Atrogin-1、MuRF-1mRNA表达升高(P <0.05)；后肢悬吊组Akt1 mRNA表达升高(P <0.05)。(4)与地塞米松组相比，后肢悬吊组mTOR、Akt1、FoXO3α mRNA表达升高(P <0.05),Atrogin-1、MuRF-1 mRNA表达降低(P <0.05)。(5)结果表明，两种造模方法均会导致骨骼肌线粒体能量代谢水平下降，地塞米松组通过泛素蛋白酶体和能量代谢途径的双重作用介导骨骼肌发生萎缩，后肢悬吊组通过AMPK/FoXO3α信号通路介导能量代谢途径引起骨骼肌发生萎缩，从而引起骨骼肌的质量、力量及功能下降。

关键词：肌少症小鼠模型肌肉蛋白质合成基因自噬溶酶体基因泛素蛋白酶体基因

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塞来昔布抑制凝血酶诱导的大鼠软骨细胞退变

中国组织工程研究 2024年第34期28卷 5446-5451页

作者：朱志恒丁佳滢葛杨硕黄春萌沈军王学宗郑昱新丁道芳上海中医药大学康复医学院上海市201203 上海中医药大学康复医学研究所上海市201203 上海中医药大学附属光华医院上海市200052 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市201203

背景:骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退... 详细信息

背景:骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退变尚未可知。目的:探讨塞来昔布对凝血酶诱导软骨细胞退变的影响。方法:使用ELISA试剂盒检测骨关节炎患者与正常人血清中凝血酶含量。体外提取、培养SD乳鼠关节软骨细胞,使用第一代细胞进行实验,将软骨细胞分对照组、凝血酶组和塞来昔布组。显微镜下观察3组细胞形态,并使用Edu试剂盒检测细胞增殖情况;qRT-PCR检测软骨细胞外基质成分(聚集蛋白聚糖、弹性蛋白、软骨寡聚基质蛋白)、炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)的表达;免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1的表达;Western Blot检测分解代谢基因如基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2等蛋白的表达。结果与结论:(1)与正常人相比,骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著增高;(2)塞来昔布可明显抑制凝血酶诱导的软骨细胞纤维样形态改变;(3)与凝血酶组相比,塞来昔布抑制了软骨细胞的增殖;(4)凝血酶组Ⅱ型胶原α1等软骨细胞外基质基因表达的下调被塞来昔布抑制(P <0.05);(5)凝血酶可促进软骨细胞炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)以及分解代谢基因(基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2)的表达,在塞来昔布干预下,上述基因的表达下调(P <0.05);(6)结果提示,塞来昔布可以抑制凝血酶的促炎作用,从而改善大鼠软骨细胞退变。

关键词：软骨细胞凝血酶塞来昔布细胞增殖细胞退变

基于数据挖掘和网络药理学的淫羊藿保健品组方规律及主要保健功能研究

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中草药 2024年第6期55卷 2027-2039页

作者：刘永铭刘树森熊轶喆沈知彼王翔齐卓操詹红生杜国庆上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所上海201203 哈尔滨商业大学药学院黑龙江哈尔滨150076 上海中医药大学中医学院上海201203

目的通过数据挖掘、网络药理学及分子对接技术分析含淫羊藿的保健食品的组方规律并对其潜在的机制进行研究。方法通过检索国家市场监督管理总局及药智网含淫羊藿的保健食品,采用频数统计和关联规则等方法分析基本信息及组方规律。通过检... 详细信息

目的通过数据挖掘、网络药理学及分子对接技术分析含淫羊藿的保健食品的组方规律并对其潜在的机制进行研究。方法通过检索国家市场监督管理总局及药智网含淫羊藿的保健食品,采用频数统计和关联规则等方法分析基本信息及组方规律。通过检索TCMSP等数据库、整理相关文献获得淫羊藿相关化学成分及潜在靶点;根据保健功能频次分析结果,从GeneCards等数据库中筛选相关的潜在靶点信息;借助R语言相关软件包、String数据库、Cytoscape软件等筛选出关键成分和关键靶点。随后进行蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析,根据度(degree)值筛选出核心靶点,并进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。最后,利用分子对接技术验证核心靶点和关键成分的作用亲和力。结果筛选纳入501种含淫羊藿保健食品。剂型以胶囊剂为主;保健功能频次排名前3的分别为缓解体力疲劳(343次)、有助于增强免疫力(140次)、有助于改善骨密度(87次);涉及116种中药,以补虚药为主,四气以温为主,五味以甘为主,归经以肾经为主。获得淫羊藿有效成分139个、靶基因1677个,获得体力疲劳相关潜在靶点849个、免疫力相关潜在靶点2076个、骨质疏松相关潜在靶点1440个;将淫羊藿和主要保健功能的靶基因取交集,得到淫羊藿缓解体力疲劳关键靶点227个、有助于增强免疫力关键靶点358个、有助于改善骨密度关键靶点332个;淫羊藿通过激酶活性的正向调节等过程及磷脂酰肌醇-3-羟激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)等信号通路起到缓解体力疲劳的作用,通过细胞因子产生的正向调节等过程及Th17细胞分化等信号通路起到增强免疫力的作用,通过对肽的反应等过程及PI3K/Akt等信号通路起到改善骨密度的作用。分子对接结果提示淫羊藿的关键成分与核心靶点能自发稳定地结合。结论通过数据挖掘、网络药理学和分子对接研究,分析了含淫羊藿的保健食品相关信息,初步揭示淫羊藿主要保健功能的潜在靶点与机制通路,为淫羊藿后续产品的研发提供了理论依据。

关键词：淫羊藿保健品数据挖掘网络药理学缓解体力疲劳增强免疫力改善骨密度淫羊藿苷朝藿定A

“筋出槽”大鼠模型骨骼肌形态学和功能的特征性变化

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中国组织工程研究 2024年第26期28卷 4170-4177页

作者：杨宗睿葛海雅石金玉汪正明王媛媛李正言杜国庆詹红生上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所上海市201203

背景:“筋出槽”是被《国际疾病分类第十一次修订本》收录的疾病名称,也是手法、针刺等治疗的临床指征,但其具体的效应机制尚不明确,亟待建立一种可以反映其临床特征和病理特点的动物模型,以便深入研究其临床治疗方法的作用机制。目的:... 详细信息

背景:“筋出槽”是被《国际疾病分类第十一次修订本》收录的疾病名称,也是手法、针刺等治疗的临床指征,但其具体的效应机制尚不明确,亟待建立一种可以反映其临床特征和病理特点的动物模型,以便深入研究其临床治疗方法的作用机制。目的:基于骨骼肌等长收缩建立大鼠“筋出槽”疾病动物模型,探究“筋出槽”后大鼠骨骼肌形态学和功能的特征性变化。方法:60只大鼠随机分为对照组、静态负荷组和额外负重组,每组20只。对照组大鼠正常饲养,不做处理;后两组采用作者课题组设计的静态负荷悬挂造模装置固定大鼠,通过施加静态负荷(以大鼠自身体质量作为静态负荷)使大鼠上肢肌肉持续的等长收缩,建立“筋出槽”损伤模型;额外负重组在静态负荷组的基础上于大鼠踝关节处额外施加体质量50%的质量。分别于造模2,4周后取材,测试大鼠四肢抓力、骨骼肌湿质量、血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平的改变情况,观察大鼠骨骼肌组织形态学和超微结构的变化。结果与结论:①2周时,模型组(静态负荷组和额外负重组)大鼠抓力显著降低,骨骼肌湿质量显著下降,血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平显著上升,肌纤维形态结构异常,伴有大量胶原纤维沉积,电镜结果显示肌原纤维结构紊乱,Z线扭曲,明暗界限模糊;②4周时,模型组大鼠抓力较2周有所上升,血清肌肌酸激酶和乳酸脱氢酶A水平下降,肌纤维形态和超微结构的改变均有不同程度恢复;③提示基于骨骼肌持续等长收缩建立的大鼠骨骼肌损伤模型,2周时可良好反映“筋出槽”的病理特点,可用于进行针刺、手法等治疗“筋出槽”的效应机制研究。

关键词： “筋出槽” 中医证候骨骼肌等长收缩肌酸激酶乳酸脱氢酶动物模型

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基于“筋出槽、骨错缝”论治膝骨关节炎

中医杂志 2024年第7期65卷 755-759页

作者：陆洁航张旻李正言潘富伟汪正明葛海雅沈知彼詹红生上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所

基于“筋出槽、骨错缝”的发病机理,结合现代解剖学和生物力学,明确膝部“筋出槽”和“骨错缝”的特征性表现及两者间的内在联系。通过梳理现代研究中“筋出槽、骨错缝”与膝骨关节炎的关系,认为“筋出槽、骨错缝”是膝骨关节炎发生、... 详细信息

基于“筋出槽、骨错缝”的发病机理,结合现代解剖学和生物力学,明确膝部“筋出槽”和“骨错缝”的特征性表现及两者间的内在联系。通过梳理现代研究中“筋出槽、骨错缝”与膝骨关节炎的关系,认为“筋出槽、骨错缝”是膝骨关节炎发生、发展的关键病机,据此提出以饮食起居为先导、以手法整骨诊治于外、以中药内服调达于内、以导引练功贯始终的中医药综合治疗膝骨关节炎策略,以期提高临床疗效。

关键词：膝骨关节炎筋出槽骨错缝

UPLC-MS/MS法同时测定养血软坚胶囊中17种成分的含量

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中成药 2024年第2期46卷 353-358页

作者：刘永铭刘树森熊轶喆王翔吴玉云刘瑾潘凌云杜国庆詹红生上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海200021 上海市中医药研究院骨伤科研究所上海201203 哈尔滨商业大学药学院黑龙江哈尔滨150076 上海中医药大学附属曙光医院药学部上海200021 上海中医药大学科技实验中心上海201203

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定养血软坚胶囊中芹糖甘草苷、芍药内酯苷、獐牙菜苦苷、没食子酸甲酯、苯甲酰芍药苷、獐牙菜苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、异甘草素、马钱苷酸、甘草素、没食子酸、芍药苷、氧化芍药苷、龙胆苦苷、甘... 详细信息

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定养血软坚胶囊中芹糖甘草苷、芍药内酯苷、獐牙菜苦苷、没食子酸甲酯、苯甲酰芍药苷、獐牙菜苷、6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、异甘草素、马钱苷酸、甘草素、没食子酸、芍药苷、氧化芍药苷、龙胆苦苷、甘草酸、异甘草苷、甘草苷的含量。方法分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相2 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果17种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9996),平均加样回收率91.33%~104.03%,RSD 1.58%~3.50%。结论该方法快速、准确、稳定,可用于养血软坚胶囊的质量控制。

关键词：养血软坚胶囊化学成分含量测定 UPLC-MS/MS

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地榆中酚类成分及其Nrf2激动活性研究

药学学报 2024年第1期59卷 170-182页

作者：吴龙龙刘静雯余钟莲张刘强李医明上海中医药大学中药学院上海201203 上海中医药大学科技实验中心上海201203

采用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC等多种色谱技术从地榆饮片(Sanguisorbae Radix)的95%乙醇提取物中分离纯化得到31个酚类化合物,通过理化性质、波谱数据(MS、NMR)、电子圆二色谱(ECD)等技术确定化合物的结构,分别... 详细信息

采用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备HPLC等多种色谱技术从地榆饮片(Sanguisorbae Radix)的95%乙醇提取物中分离纯化得到31个酚类化合物,通过理化性质、波谱数据(MS、NMR)、电子圆二色谱(ECD)等技术确定化合物的结构,分别鉴定为3-methoxyl-2S,3S-epoxyflavanone(1a)、3-methoxyl-2R,3R-epoxyflavanone(1b)、longifoin B(2)、longifoin C(3)、圣草酚(4)、柚皮素(5)、甘草素(6)、5,3?-二羟基-7,4?-二甲氧基二氢黄酮(7)、柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、二氢槲皮素(9)、二氢山柰酚(10)、(-)-garbanzol(11)、(2R,3R)-4-methoxyl-distylin(12)、山柰酚(13)、槲皮素(14)、α,4,2′,4′-tetrahydroxydihydrochalcone(15)、phloretin(16)、(+)-儿茶素(17)、ethyl(+)-cyanidan-3-ol-8-carboxylate(18)、phyllocoumarin(19)、methyl 3-methoxy-4,5-dihydroxybenzoate(20)、4,5-dimethoxy-3-hydroxybenzoicacidmethylester(21)、3,4′-di-O-methylellagicacid(22)、3,4,3′-三甲基逆没食子酸(23)、3,3?,4?-Otrimethylellagic acid-4-O-β-D-xyloside(24)、(3R)-thunberginol C(25)、resveratrol(26)、1-hydroxypinoresinol(27)、(7S,8S)-3-methoxy-3′,7-epoxy-8,4′-oxyneoligna-4,9,9′-triol(28)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(29)、phloracetophenone(30)和4-(4′-hydroxyphenyl)-butan-2-one(31)。其中化合物1a和1b为一对新的2,3-环氧黄酮对映异构体,化合物2和3为一对新的差向异构体,化合物4、5、6、9、10、13、16和26为首次从该植物中分离得到,化合物7、8、27、30和31为首次从该属植物中分离得到,化合物11、12、15、18、19、25、28和29为首次从蔷薇科植物中分离得到。通过双荧光素酶报告基因实验在293T细胞中测定化合物1~24对核因子-红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的激动活性,结果表明,化合物4、6~10、12、14、17、19、20和22~24对Nrf2在25μmol·L-1下表现出显著的促转录活性,为该类化合物的抗氧化活性研究提供参考。

关键词：地榆酚类成分黄酮 2 3-环氧黄酮 Nrf2激动活性抗氧化

针刺“腰痛穴”联合腰椎骨错缝手法治疗腰椎小关节紊乱症的疗效观察

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时珍国医国药 2024年第1期35卷 137-140页

作者：张明才杜国庆元唯安沈知彼熊轶喆王玉鹏王翔石瑛陈东煜詹红生上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市詹红生名中医工作室201203

目的探讨针刺“腰痛穴”联合腰椎“骨错缝”手法治疗腰椎小关节紊乱症的疗效优势。方法为了实现这一研究目标,该研究通过阳性对照的优效性临床试验设计,以治疗腰痛经典止痛药物-非甾体抗炎药戴芬作阳性对照,通过临床随机试验设计,将12... 详细信息

目的探讨针刺“腰痛穴”联合腰椎“骨错缝”手法治疗腰椎小关节紊乱症的疗效优势。方法为了实现这一研究目标,该研究通过阳性对照的优效性临床试验设计,以治疗腰痛经典止痛药物-非甾体抗炎药戴芬作阳性对照,通过临床随机试验设计,将120例受试者随机分为观察组61例(以针刺“腰痛穴”联合腰椎“骨错缝”手法为主要干预手段)和对照组59例(以口服戴芬联合卧床制动为主要干预手段),并分别于入组干预前及第一次治疗结束后30min、干预后第1天、3天、7天、14天进行临床观察指标数据采集,以及第24周随访记录复发率。临床观察指标以(1)腰痛为首要观察指标,具体采取NRS评分表;(2)腰椎功能障碍指数为次要指标,具体采用腰椎ODI量表患者进行自评;(3)总有效率;(4)复发率。结果按照观察时间窗,对两组受试者进行治疗前和治疗后的组间和组内疗效统计分析:(1)腰痛评价,两组组间比较,治疗后30minNRS评分(观察组3.38±1.43,对照组5.25±2.34)、治疗后1天NRS评分(观察组2.54±1.59,对照组4.54±2.64)、治疗后14天NRS评分(观察组0.82±1.12,对照组1.63±1.50)均存在统计学差异(P中医学特色治疗方案-针刺“腰痛穴”联合腰椎“骨错缝”手法在改善腰痛和腰椎功能障碍方面具有起效快、疗效持续可靠以及有效降低复发率等临床优势。

关键词：腰椎小关节紊乱症骨错缝手法腰痛穴针刺