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丹参注射液对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子及胰岛素样生长因子-1表达的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2018年第3期38卷 272-275页

作者：刘杨高玉亭苗宇船山西中医药大学基础医学院病理教研室晋中030619

目的·观察丹参注射液对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)表达的影响。方法·SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型组和治疗组各10只,其中正常对照组常规饲养,模型组和治疗组的大鼠建立Allens’重力打击SCI模型。按每日1 mL/kg剂量分别腹腔注射生理盐水和丹参注射液,连续给药14 d。伤后1、3、7及14 d时采用联合行为评分法(combine behavioral score,CBS)评价大鼠脊髓神经功能。14 d时采用免疫组织化学染色和Western blotting检测各实验组大鼠脊髓组织BDNF和IGF-1的表达。结果·与正常对照组比较,模型组和治疗组大鼠的CBS评分升高,并随损伤时间的延长出现不同程度的降低,至伤后14 d,治疗组大鼠的CBS评分显著低于模型组(P=0.000);与模型组比较,治疗组大鼠BDNF和IGF-1的阳性细胞数和相对表达量均显著升高(均P<0.05)。结论·丹参注射液可通过调节BDNF和IGF-1的表达促进脊髓的损伤修复。

关键词：脊髓损伤丹参注射液脑源性神经营养因子胰岛素样生长因子-1

小鼠与大鼠急性力竭运动方法的建立及其对心肌超微结构的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2011年第10期31卷 1366-1369页

作者：杨洁郑嘉毅周冬冬陈新宇张岚陈红上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 上海交通大学基础医学院药理学教研室上海200025

目的研究小鼠与大鼠急性力竭运动的方法及急性力竭运动对心肌超微结构的影响。方法健康雄性8月龄C57/black小鼠及SD大鼠各10只,分别分为对照组和力竭运动组。小鼠进行为期2周的适应性训练,即在平板跑台上跑步训练,1次/d,10 min/次,运动... 详细信息

目的研究小鼠与大鼠急性力竭运动的方法及急性力竭运动对心肌超微结构的影响。方法健康雄性8月龄C57/black小鼠及SD大鼠各10只,分别分为对照组和力竭运动组。小鼠进行为期2周的适应性训练,即在平板跑台上跑步训练,1次/d,10 min/次,运动速度为15～20 m/min;大鼠进行为期1周的适应性训练后,在平板跑台上跑步1次/d,15 min/次,运动速度为20 m/min。适应性运动训练后进行一次性力竭运动,小鼠力竭运动速度为20～25 m/min,大鼠力竭运动速度为25～30 m/min,动物在跑台上持续跑步直至出现顽固拒跑及力竭体征时停止跑步,并立即将动物麻醉后开胸取左心室心尖部心肌,2%戊二醛固定、树脂包埋、制作超薄切片,以透射电子显微镜观察心肌超微结构的变化。结果小鼠经2周适应性训练后,一次性跑步平均时间(3.6±2.2)h、跑步距离达(4 561±2 174)m时可造成明显的力竭;心肌超微结构变化表现为心肌细胞水肿、线粒体嵴肿胀甚至溶解,出现部分线粒体异常高密度颗粒样结构及溶酶体增多。大鼠经过1周适应性训练后,一次性跑步平均时间(2.3±0.4)h、跑步距离达(6 947±1 052)m时可造成明显的力竭;心肌超微结构变化表现为心肌细胞水肿,肌丝排列紊乱,线粒体密度增加,线粒体嵴断裂、溶解、甚至空泡化。结论小鼠及大鼠一次性急性力竭运动可致心肌细胞水肿与线粒体损伤。

关键词：急性力竭运动心肌超微结构线粒体小鼠大鼠

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赶黄草挥发油GC-MS分析及保肝靶点筛选

天然产物研究与开发 2019年第9期31卷 1520-1527页

作者：杨欣李亚辉刘明吕润霖钱海兵贵州中医药大学基础医学院

为筛选赶黄草挥发油保肝作用的关键活性成分及靶标蛋白,本研究采用水蒸汽蒸馏法(steam distillation method)提取赶黄草中的挥发油,并结合GC-MS(gas chromatography-mass spectrometer)进行分析鉴定,通过生物信息学对赶黄草挥发油主要... 详细信息

为筛选赶黄草挥发油保肝作用的关键活性成分及靶标蛋白,本研究采用水蒸汽蒸馏法(steam distillation method)提取赶黄草中的挥发油,并结合GC-MS(gas chromatography-mass spectrometer)进行分析鉴定,通过生物信息学对赶黄草挥发油主要化学成分(相对含量>2%)进行靶点筛选、生物功能和疾病分析,采用分子对接技术(sybyl2.1.1)对关键活性成分进行验证,基于Ligplot1.4.5软件对活性成分与CNR1进行相互作用分析。结果从赶黄草挥发油中共检测出31种活性成分,靶点筛选得到6个hub靶点(CNR2、CNR1、CCR5、CCR3、PRKCA、PRKCB)。研究发现赶黄草挥发油可能通过调节大麻素受体2、大麻素受体1、C-C趋化因子受体5、C-C趋化因子受体3、蛋白激酶Cα、蛋白激酶Cβ防治肝硬化、肝炎和非酒精性脂肪肝等肝脏疾病。此外香叶基丙酮、2-硬脂酸单甘油酯和金合欢基丙酮为赶黄草挥发油保肝的关键活性成分。

关键词：赶黄草挥发油保肝分子对接

一贯煎通过调节Parp-1的翻译后修饰保护肝细胞DNA

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中国药理学通报 2023年第2期39卷 373-379页

作者：张宇佳叶杰卢艳琳闫晓风李华王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海201203 苏州卫生职业技术学院临床医学院江苏苏州215009 上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科上海200032

目的观察一贯煎(Yiguanjian decoction,YGJ)影响Parp-1修复H_(2)O_(2)诱导肝细胞DNA损伤的机制。方法培养小鼠胚胎肝细胞BNL CL.2,建立H_(2)O_(2)细胞损伤模型并用YGJ预处理,CCK-8检测细胞活力,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞死亡,EDU掺入检测细胞增殖,8-羟基脱氧鸟苷比色法和γ-H_(2)AX细胞荧光染色检测DNA损伤。免疫印迹法检测Parp-1、Parp-1的Par化和乙酰化。结果H_(2)O_(2)作用后,肝细胞凋亡率增加;细胞增殖被明显抑制;DNA损伤持续存在于整个实验过程。Parp-1在6 h升高后维持高表达,Parp-1的Par化和乙酰化均先升高随后降低。Sirt-1的抑制剂EX527可明显提高Parp-1的Par化,而其激动剂SRT1720可明显降低Parp-1的Par化。YGJ作用后细胞凋亡率和DNA损伤明显减少,增殖细胞数明显增加,Parp-1高表达时间点提前,Parp-1的Par化明显提高,乙酰化时间点推迟,且持续时间更长。结论YGJ可降低H_(2)O_(2)诱导的肝细胞DNA损伤,其作用机制与Sirt-1对Parp-1去乙酰化维持其含量、负调控Parp-1的Par化维持一定的活性有关。

关键词：肝细胞 Parp-1 Sirt-1 翻译后修饰 DNA损伤 H_(2)O_(2)

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眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠水通道蛋白3表达的影响

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世界华人消化杂志 2011年第9期19卷 899-904页

作者：王艳杰刘慧慧刘旭东柴纪严赵金茹王德山辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学基础医学院生理教研室辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学基础医学院教学实验中心辽宁省沈阳市110032

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组1... 详细信息

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组10只.采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS大鼠模型.采用RT-PCR检测结肠VIP的mRNA表达水平变化;采用Realtime-PCR法检测AQP3的mRNA表达水平变化,采用SABC免疫组织化学法检测结肠AQP3的蛋白表达水平变化.结果:与对照组比较,D-IBS模型组结肠VIP的mRNA表达水平显著升高(0.94±0.07vs0.64±0.15,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低(1.09±0.09vs7.02±1.25;0.284±0.020vs0.601±0.027,均P<0.01).与D-IBS模型组比较,眼针组结肠VIP的mRNA表达水平显著降低(0.78±0.15vs0.94±0.07,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(2.33±0.66vs1.09±0.09;0.374±0.03vs10.284±0.020,均P<0.01).结论:通过抑制结肠中VIP的表达和分泌及升高AQP3的表达,调控结肠水液代谢可能是眼针治疗D-IBS的作用机制之一.

关键词：眼针腹泻型肠易激综合征血管活性肠肽水通道蛋白3

野黄芩甙元及其类似物对蛋白激酶C的抑制作用

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上海医科大学学报 1993年第3期20卷 187-191页

作者：徐光张礼萍沈慧芬胡昌奇上海医科大学基础医学院生物化学教研室药学院天然药物化学教研室

本实验测定了19种黄酮类化合物对蛋白激酶C(PKC)活性的影响,并初步探讨了化学结构与活性之间的关系。其中从中药灯盏花中分离得到的野黄岑甙元和从黄芩中分离得到的黄芩素抑制PKC的IC_(50)分别为48μmol/L和76μmol/L,并观察到野黄芩甙... 详细信息

本实验测定了19种黄酮类化合物对蛋白激酶C(PKC)活性的影响,并初步探讨了化学结构与活性之间的关系。其中从中药灯盏花中分离得到的野黄岑甙元和从黄芩中分离得到的黄芩素抑制PKC的IC_(50)分别为48μmol/L和76μmol/L,并观察到野黄芩甙元在Ca^(2+)浓度10^(-2)至10^(-7)mol/L时都显示对PKC的抑制作用,这种作用也不因二油酰甘油酯或底物组蛋白的浓度增加而逆转,说明野黄芩甙元对PKC的作用属于非竞争性抑制。

关键词：蛋白激酶C 野黄芩甙元黄芩素

黄芪汤对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型作用的机制

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世界华人消化杂志 2010年第23期18卷 2410-2415页

作者：闫晓风刘平孙明瑜王晓玲上海中医药大学基础医学院生物教研室上海市201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所上海高校中医内科学E-研究院上海市201203

目的:探讨黄芪汤逆转二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制.方法:采用DMN诱导大鼠肝纤维化,造模4wk,随机分为正常组,2wk模型组,4wk模型组.造模结束后,将模型组随机分为模型对照组,黄芪汤组.黄芪汤组于第... 详细信息

目的:探讨黄芪汤逆转二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化的作用机制.方法:采用DMN诱导大鼠肝纤维化,造模4wk,随机分为正常组,2wk模型组,4wk模型组.造模结束后,将模型组随机分为模型对照组,黄芪汤组.黄芪汤组于第5周起灌胃,模型对照组以同体积生理盐水灌胃.2wk、4wk、6wk末分别收集大鼠肝组织,免疫印迹法检测Fas、caspase-8、caspase-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达;实时定量PCR法检测α-SMAmRNA表达;明胶酶图法检测肝组织MMP-2和MMP-9的活性.结果:与正常组相比,模型组Fas、caspase-8、caspase-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达量、α-SMA mRNA表达量、MMP-2活性和MMP-9活性均于造模后逐渐升高,4wk时达到高峰.与6wk模型对照组相比,黄芪汤组Fas、caspase-8、caspase-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达量,α-SMAmRNA表达量、MMP-2活性明显降低(1.05±0.02vs1.17±0.04,1.41±0.04vs1.98±0.06,0.86±0.01vs1.19±0.04,1.03±0.03vs1.58±0.06,1.16±0.04vs1.53±0.01,3.12±0.47vs8.48±0.45,2.15±0.03vs2.33±0.05,均P<0.05或0.01).MMP-9蛋白表达及活性均显著升高(1.21±0.00vs1.12±0.01,1.25±0.07vs1.10±0.04,均P<0.05或0.01).结论:黄芪汤显示了良好的抗肝纤维化作用,作用机制与其抑制肝细胞凋亡,抑制HSC活化,调控MMPs/TIMPs系统,促进ECM降解有关.

关键词：黄芪汤肝纤维化细胞凋亡肝星状细胞活化基质金属蛋白酶组织抑制剂

核基质结合区修饰的附着体载体介导的EGFP基因体外表达

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第11期26卷 1233-1238页

作者：梅文瀚吴兆平徐荣婷钱关祥卢健上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶... 详细信息

目的建立一个非病毒介导外源基因高效转移和稳定表达体系。方法采用EB病毒(EBV)来源的附着体质粒载体,并结合顺式作用元件IFN-MAR构建重组质粒pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR。采用荧光显微镜观察并摄片,FACS及逆转录-聚合酶链反应检测EGFP表达阳性的COS-7细胞比例、荧光表达强度及EGFP基因的转录。通过Southern印迹和质粒还原实验分析质粒DNA在细胞中存在的形式。结果本实验构建的重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR和pcDNA3-EGFP-EBNA1-MAR在转染进入COS-7细胞后以染色体外附着体的形式存在。由于EBVR的存在,可以在体外获得EGFP较长时间的稳定表达。IFN-MAR替代O riP后,仍可在体外获得EGFP的稳定表达。结论MAR修饰的EBV附着体载体可以在体外获得外源基因高效稳定的表达。

关键词：基因治疗 EB病毒复制子附着体质粒载体核基质结合区

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慢性胃炎不同病理阶段对舌苔菌门的影响

中华中医药杂志 2021年第8期36卷 4964-4968页

作者：李莉王慧雯丛军顾志坚郭春荣蒋海洋李娜孙祝美上海中医药大学附属曙光医院消化科上海200021 上海中医药大学基础医学院上海201203

目的:探讨慢性胃炎不同病理阶段对舌苔菌门的影响。方法:采用16S rRNA基因测序技术对慢性胃炎患者舌苔菌门进行研究,实验分为炎症组(30例)、单纯萎缩组(20例)和萎缩伴肠化组(30例)。结果:与其他两组比较,萎缩伴肠化组Alpha指数Sobs、Ace... 详细信息

目的:探讨慢性胃炎不同病理阶段对舌苔菌门的影响。方法:采用16S rRNA基因测序技术对慢性胃炎患者舌苔菌门进行研究,实验分为炎症组(30例)、单纯萎缩组(20例)和萎缩伴肠化组(30例)。结果:与其他两组比较,萎缩伴肠化组Alpha指数Sobs、Ace、Chao均显著升高(P生物构成的网络在3组之间也存在差异:炎症组舌苔菌群整体网络是不连通的,可形成局部小的网络连接,而单纯萎缩组能形成一个相对松散的网络结构,萎缩伴肠化组参与网络构建的微量菌门增加,网络更加趋于密集。结论:慢性胃炎不同病理阶段对舌苔菌门具有一定的影响,特别在萎缩伴肠上皮化生阶段,舌苔菌群生物多样性和微量菌门数目显著增多,这说明随着疾病的发生发展,患者的舌苔菌群也发生相应的改变,提示舌苔菌群与胃部病理变化关系密切,口腔-胃在人体形成微生物共生的微环境,为舌苔-口腔菌群-肠道菌群的联系提供支持。

关键词：慢性胃炎舌苔菌群 16S rRNA基因测序技术病理阶段菌门