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甘麦大枣汤加味对抑郁症模型大鼠海马-HPA轴的调节作用

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中国老年学杂志 2012年第24期32卷 5450-5452页

作者：张晟戴薇薇张学礼金国琴夏花英上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的探讨甘麦大枣汤加味对模型大鼠海马-HPA轴的调节作用。方法以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,RT-PCR法检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)、脑源性神经... 详细信息

目的探讨甘麦大枣汤加味对模型大鼠海马-HPA轴的调节作用。方法以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,RT-PCR法检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)、脑源性神经营养因子(BD-NF)mRNA表达。并以西药文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响。结果模型组大鼠垂体重/体重、血浆ACTH、CORT含量显著增高(P<0.05),海马GR、BDNF mRNA表达降低;与模型大鼠比较,西药组与中药组大鼠血浆CORT含量显著下降(P<0.05),血浆ACTH含量有下降趋势,海马GR、BDNF mRNA表达增高。结论甘麦大枣汤加味与文拉法辛通过对海马保护作用,抑制HPA轴过度亢进,从而纠正模型大鼠行为学异常。

关键词：抑郁症慢性不可预见性温和刺激海马下丘脑-垂体-肾上腺轴甘麦大枣汤

肝细胞内两种磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性

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复旦学报（医学版） 2001年第3期28卷 198-201页

作者：卢虹陈迎风吴兴中复旦大学基础医学院生物化学教研室上海200032

目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PL... 详细信息

目的　观察肝细胞内磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的活性。方法　采用化学诱癌法、免疫法、亲和层析法、WesternBlot技术等方法。结果　 (1)钙离子依赖性PC PLC活性在诱癌过程中逐步升高 ;(2 )鞘磷脂酶活性在诱癌过程中无显著改变 ;(3)PC PLC抗体对钙非依赖性PC PLC活性具有显著抑制 ;(4 )肝细胞中存在着与PC PLC抗体相结合的蛋白质 ;(5 )钙依赖性和钙非依赖性PC PLC的蛋白峰有部分重叠 ;(6 )亲和层析柱提纯的酶蛋白只有钙非依赖性PC PLC活性。

关键词：磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C 肝癌中性鞘磷脂酶

布鲁氏菌分泌蛋白BspC的生物信息学分析、多克隆抗体制备及互作蛋白筛选

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中国病原生物学杂志 2025年第1期 34-40+45页

作者：印双红刘虹燕邓肖玉杜昌青刘阳李寅翠孙馨王书利张俊波铜仁学院大健康学院湖南医药学院基础医学院铜仁学院农林工程与规划学院铜仁学院贵州省梵净山地区生物多样性保护与利用重点实验室商丘师范学院生物与食品学院

目的本研究旨在探究BspC蛋白在布鲁氏菌感染中的作用机理。方法通过在线预测软件分析BspC蛋白的生物学功能，通过化学合成法构建pET-28a-BspC原核融合表达载体并转化大肠埃希菌BL2感受态细胞，经IPTG诱导后大量表达和纯化BspC蛋白。... 详细信息

目的本研究旨在探究BspC蛋白在布鲁氏菌感染中的作用机理。方法通过在线预测软件分析BspC蛋白的生物学功能，通过化学合成法构建pET-28a-BspC原核融合表达载体并转化大肠埃希菌BL2感受态细胞，经IPTG诱导后大量表达和纯化BspC蛋白。利用纯化的蛋白进行动物免疫并收集抗血清，通过ELISA检测抗血清效价。纯化抗体并通过Western blot进行鉴定。构建RAW264.7细胞的cDNA文库和BspC蛋白的诱饵质粒，对诱饵质粒自激活和毒性进行检测，筛选与BspC互作的宿主蛋白，利用回交验证实验对互作蛋白进行验证。结果 BspC蛋白具有信号肽，有6个抗原决定簇，二级结构以α-螺旋为主；成功构建pET-28a-BspC载体，且诱导表达后重组蛋白大小约为16.7 ku; ELISA检测发现兔抗血清效价为1:512 000;Western blot检测结果显示制备的多克隆抗体可以特异性结合体外表达的BspC蛋白；利用NCBI的BLAST对7个阳性克隆测序结果比对分析，获得潜在互作宿主蛋白FDX1、DNAJA1、HSPA5、PTPN2。结论本研究成功制备BspC多克隆抗体和筛选获得BspC蛋白的互作蛋白，为进一步研究BspC蛋白在布鲁氏菌感染过程中的功能和机制奠定基础。

关键词：布鲁氏菌分泌蛋白BspC 生物信息学分析多克隆抗体酵母双杂交互作蛋白

补肾方药对老年大鼠血清皮质酮含量、LTP及空间学习记忆能力的影响

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中国老年学杂志 2011年第24期31卷 4815-4818页

作者：康湘萍金国琴董献文龚张斌徐品初上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203 上海中医药大学基础医学院生理学教研室上海中医药大学附属曙光医院

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设... 详细信息

目的观察补肾方药(左归丸、右归丸)对老年大鼠血清皮质酮水平、海马长时程增强(LTP)及空间学习记忆能力的影响。方法以自然衰老(24月龄)SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年皮质酮(GC)拮抗组、老年左归组和老年右归组,另设青年对照组。采用ELISA法检测大鼠血清皮质酮含量,Morris水迷宫法观察各组大鼠空间学习记忆能力,电生理方法记录在体大鼠LTP变化;同时观察补肾方药对上述指标异常变化的改善作用。结果与青年对照组相比,老年对照组大鼠的血清皮质酮含量明显升高(P<0.05),空间学习记忆能力显著下降,海马CA1区LTP明显受到抑制(P<0.05);补肾方药左归丸、右归丸能不同程度地改善上述指标的异常变化。结论补肾方药左归丸、右归丸改善老年大鼠空间学习记忆能力的机制之一可能与拮抗高皮质酮对老年大鼠空间学习记忆的损伤有关,其余相关分子机制有待进一步研究。

关键词：老年大鼠皮质酮学习记忆 LTP 补肾方药

抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用

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中药药理与临床 2011年第6期27卷 6-10页

作者：张学礼戴薇薇金国琴夏花英姚领爱龚张斌康湘萍黎志萍张丽娜张晟上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受... 详细信息

目的:探讨抑郁症模型大鼠海马受体、离子通道基因表达谱变化及甘麦大枣汤加味的调节作用。方法:以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,通过旷场行为测定和饮水试验观察大鼠行为学变化,采用基因芯片技术检测大鼠海马各类受体mRNA表达,RT-PCR法检测大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达。并以文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响。结果:模型组大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著下降(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达下调,BDNF mRNA表达显著下降(P<0.05);与模型组比较,甘麦大枣汤加味23g/kg与文拉法辛25mg/kg大鼠水平运动、垂直活动及糖水消耗量显著上升(P<0.01),海马单胺类(DA、5-HT、NE)、氨基酸类(NMDA、GABA、Gly)、神经肽类(AT、AVP)受体亚型表达上调,BDNF mRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:甘麦大枣汤加味与文拉法辛可上调海马单胺类、氨基酸类、神经肽类受体亚型,改善细胞信号转导途径功能,增加BDNF表达,从而纠正模型大鼠行为学异常。

关键词：甘麦大枣汤加味抑郁症慢性不可预见性温和刺激神经递质受体信号转导

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整合素家族与甲状腺癌

中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第4期22卷 524-527页

作者：姜昕汝郑月娟上海中医药大学基础医学院病原教研室上海201203

整合素作为细胞表面受体、细胞间的黏附分子,对细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的黏附起介导作用。近几十年来,恶性肿瘤甲状腺癌的发病率急速攀升,很大原因是由于恶性肿瘤细胞极易增殖、侵袭和转移,而这种特性与细胞表面黏附分子整合... 详细信息

整合素作为细胞表面受体、细胞间的黏附分子,对细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的黏附起介导作用。近几十年来,恶性肿瘤甲状腺癌的发病率急速攀升,很大原因是由于恶性肿瘤细胞极易增殖、侵袭和转移,而这种特性与细胞表面黏附分子整合素有密切的关系。有研究发现,整合素α3β1、α6β1、αvβ3等通过与细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、血小板反应蛋白(thrombospondin,TSP)和细胞外基质胶原(collagen,CO)、层黏连蛋白(laminin,LN)、纤连蛋白(fibronectin,FN)等配体结合,激活FAK-Ras-Raf或磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-Akt-m TOR等信号转导通路,调控甲状腺癌细胞的生长、繁殖、侵袭和转移。通过针对整合素信号通路上多个靶点进行分子靶向干预,可能研发出甲状腺癌的针对性治疗方案。本文主要对整合素在甲状腺癌的增殖、侵袭、转移、诊断和治疗等方面所起的作用作一综述。

关键词：甲状腺癌整合素细胞外基质黏附转移

美沙拉秦干预下IBD小鼠结肠组织的转录组分析

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中国实验动物学报 2022年第1期30卷 7-16页

作者：王怡如周唯蒋笑影潘一滨许言午曹永清上海中医药大学附属龙华医院肛肠科上海200032 上海中医药大学基础医学院生物化学教研室上海201203

目的应用转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)检测炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)小鼠结肠组织的基因表达变化,增进对美沙拉秦(5-aminosalicylic acid,5-ASA)治疗IBD的分子机制的理解。方法用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)建立IBD小鼠模型。将15只C57BL/6小鼠随机均分为三组:对照组、DSS组和DSS+5-ASA组。每组随机选择3只小鼠取结肠组织进行测序,经两组间比较,鉴定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)及重要生物学信号通路。随后通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者和经美沙拉秦治疗后患者结肠组织活检的微阵列(microarray)数据,验证前面鉴定得到的子显著DEGs。结果DSS+5-ASA组与DSS组比较中共得到2983个差异表达基因,上调基因604个,下调基因753个;DSS组与对照组比较,共得到1626个差异表达基因,其中上调基因820个,下调基因806个。GO(gene ontology)和KEGG富集分析结果显示,这些DEGs与免疫反应等信号通路有关。部分表达差异显著的基因如Rnase1和Cxcl10,在UC患者结肠组织中有相似的表达趋势。结论经美沙拉秦治疗的IBD模型小鼠结肠组织的基因表达谱,与IBD患者对比进行验证,得到数个IBD治疗过程中可能涉及的基因和生物学通路,增加了美沙拉秦对IBD治疗作用机制的进一步理解。

关键词：炎症性肠病美沙拉秦葡聚糖硫酸钠转录组测序差异表达基因

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衰老与自噬的交互作用

生理科学进展 2012年第4期43卷 247-250页

作者：戴薇薇金国琴上海中医药大学基础医学院生化教研室上海201203

衰老是机体退化时期功能下降及生理紊乱的综合表现。细胞自噬是依赖溶酶体对胞质蛋白和细胞器进行降解的一种途径,自噬可以维持细胞的自我稳态或促进细胞生存。近年来从许多模式生物中的研究表明自噬与衰老之间关系密切,自噬参与衰老以... 详细信息

衰老是机体退化时期功能下降及生理紊乱的综合表现。细胞自噬是依赖溶酶体对胞质蛋白和细胞器进行降解的一种途径,自噬可以维持细胞的自我稳态或促进细胞生存。近年来从许多模式生物中的研究表明自噬与衰老之间关系密切,自噬参与衰老以及与衰老相关的各种病理过程,衰老与自噬之间存在着交互调节作用。本文就细胞自噬的形成过程、衰老与自噬的关系与作用机制作一综述。

关键词：衰老自噬 mTOR Sirtuin 1

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胆固醇诱导人血管平滑肌细胞表型转化

细胞与分子免疫学杂志 2014年第7期30卷 725-728,731页

作者：束波杨一峻钱民章上海中医药大学上海200032 遵义医学院生物化学教研室贵州遵义563003

目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌... 详细信息

目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌22α(SM22α)mRNA的表达;采用Western blot法检测胆固醇对VSMC中α-SMA、SM22α及单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白(MCPIP)表达的影响;CCK-8法检测VSMC增殖。结果 (12.5、25.0、50.0)mg/L胆固醇作用VSMC 48 h较对照组相比,α-SMA及SM22αmRNA水平及蛋白水平表达均降低(P<0.05),50.0 mg/L胆固醇作用后表达水平最低,存在剂量依赖效应;用50.0 mg/L胆固醇分别作用VSMC 48、72 h后,α-SMA及SM22αmRNA及蛋白表达与对照组相比均降低(P<0.05)。与对照组相比,胆固醇作用均明显促进VSMC增殖(P<0.05)。50.0 mg/L胆固醇作用VSMC48 h可诱导MCPIP蛋白表达增加。结论胆固醇作用VSMC后可降低收缩型标志蛋白α-SMA及SM22α的表达、促进VSMC增殖,提示胆固醇可诱导VSMC表型转化。

关键词：平滑肌细胞胆固醇表型转化