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铁皮石斛醋酸乙酯部位化学成分研究

中草药 2021年第17期52卷 5218-5225页

作者：周宇娟王俊豪薛亚甫徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(1... 详细信息

目的进一步研究铁皮石斛Dendrobium officinale活性醋酸乙酯部位的化学成分。方法运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱法等分离技术,进行化合物的分离纯化,根据^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。结果从铁皮石斛乙醇提取物的醋酸乙酯部位分离得到了34个化合物,分别鉴定为moscatin(1)、黑麦草内酯(2)、柚皮素(3)、橙皮苷(4)、甘草素(5)、2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol(6)、异甘草素(7)、(E)-4-hydroxycinnamic acid(8)、(Z)-4-hydroxycinnamic acid(9)、coniferyl p-coumarate(10)、sinapyl p-coumarate(11)、tinosporaic acid A(12)、N-trans-coumaroyltyramine(13)、N-trans-feruloyltyramine(14)、丁香脂素(15)、pinoresinol(16)、梣皮树脂醇(17)、lirioresionol(18)、2(5H)-Furanone 5-hydroxy-3,4-dimethyl-5-pentyl(19)、丁香酸(20)、十六烷酸(21)、对羟基苯甲酸(22)、对羟基苯甲醛(23)、阿魏酸(24)、二氢松柏醇(25)、十七烷(26)、4-羟基-3,5-二甲氧基反式肉桂醛(27)、dihydro-p-cinnamic acid(28)、(+)-(4S)-(2E)-4-羟基-2-壬烯酸(29)、1,3-benzenediol(30)、对羟基苯酚(31)、水杨酸(32)、对羟基苯乙酮(33)和香草醛(34)。结论化合物2首次从石斛属植物中分离得到,化合物3~7均为首次从铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛 loliolide 柚皮素 hesperetin 甘草素 2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-l-propanol 异甘草素

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铁皮石斛联苄类化学成分的研究

中国中药杂志 2021年第15期46卷 3853-3858页

作者：周宇娟王俊豪徐红侴桂新王峥涛上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海中药标准化研究中心上海201203

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结... 详细信息

研究铁皮石斛乙酸乙酯部分中联苄类化学成分。运用大孔树脂、MCI、硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)、ODS等柱色谱、制备薄层色谱及制备高效液相色谱等技术进行化合物的分离纯化,根据1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱数据和理化性质鉴定化合物的结构。从铁皮石斛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到了15个联苄类化合物,分别鉴定为dendrocandin X(1)、3,4′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(2)、6″-de-O-methyldendrofindlaphenol A(3)、3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(4)、dendrosinen B(5)、3,4,4′-三羟基-5-甲氧基联苄(6)、3,3′-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(7)、3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄(8)、杓唇石斛素(9)、石斛酚(10)、4,4′-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(11)、3,4′,5-三羟基-3′-甲氧基联苄(12)、3-O-methylgigantol(13)、dendrocandin U(14)和dendrocandin N(15)。化合物1为新化合物,化合物2首次在石斛属中分离得到,化合物37首次在铁皮石斛中分离得到。

关键词：铁皮石斛化学成分联苄 dendrocandin X

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实时直接分析质谱技术在中药分析中的应用

质谱学报 2023年第4期44卷 461-475,I0001页

作者：王星宇顾文怡张方丽张丹李林楠王峥涛杨莉上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室国家中医药管理局中药新资源与质量评价重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203

以中药为代表的天然药物具有悠久的药用历史,其功效物质基础解析和质量评价对于促进中医药的传承和创新发展具有重要意义。由于中药化学组成复杂,准确分析和鉴定与临床药效密切相关的指标成分较为困难,亟需开发和运用新型分离表征手段... 详细信息

以中药为代表的天然药物具有悠久的药用历史,其功效物质基础解析和质量评价对于促进中医药的传承和创新发展具有重要意义。由于中药化学组成复杂,准确分析和鉴定与临床药效密切相关的指标成分较为困难,亟需开发和运用新型分离表征手段。实时直接分析质谱(direct analysis in real-time mass spectrometry,DART-MS)是近年来新兴的常压敞开式离子化质谱技术,具有分析速度快、原位、样品前处理简单等特点。自2005年被报道以来,DART-MS在生物医学、环境监测、公共安全、药物分析等领域应用广泛。该技术为解析中药复杂化学成分和质量控制提供了新方式,具有较好的应用前景。本文概述了DART-MS技术的原理、特点、影响因素及技术进展,总结其在中药分析中的应用情况,并展望其发展前景。

关键词：原位电离质谱实时直接分析质谱(DART-MS) 中草药天然药物质量控制

红花均一多糖的结构表征及抑制HepG2增殖活性

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高等学校化学学报 2023年第4期44卷 52-61页

作者：徐永斌冯帅霞陈洁龚欢施松善王辉俊王顺春上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室上海201203

对红花多糖进行分离提纯和结构表征,探讨了红花均一多糖对HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用.采用水提醇沉法提取红花粗多糖;通过阴离子交换色谱柱和分子筛凝胶色谱柱对红花粗多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对红花多糖的均... 详细信息

对红花多糖进行分离提纯和结构表征,探讨了红花均一多糖对HepG2肝癌细胞增殖的抑制作用.采用水提醇沉法提取红花粗多糖;通过阴离子交换色谱柱和分子筛凝胶色谱柱对红花粗多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)对红花多糖的均一性以及分子量分布进行测定;采用单糖组成、甲基化及核磁共振波谱等方法对其进行结构解析.通过体外细胞实验,研究了红花多糖对于肿瘤细胞的作用.从红花中分离得到一种均一多糖(CTPS-1A),通过HPGPC计算得出其分子量为***-1A的单糖组成为n(阿拉伯糖)∶n(半乳糖)=59.2∶40.8.利用甲基化分析其连接方式为T-Galp,1,3-Galp,1,6-Galp,1,3,6-Galp,T-Araf,1,5-Araf和1,3,5-Araf.研究结果表明,CTPS-1A为阿拉伯半乳聚糖(AG),其主链由-β-Galp-(6→1)-β-Galp-(6→组成,并在1,6-β-Galp的3位连有T-β-Galp,1,3-β-Galp,T-α-Araf,1,5-α-Araf,1,3及5-α-Araf等分支.体外培养HepG2细胞实验结果表明,CTPS-1A通过增强细胞核收缩和细胞凋亡对HepG2的生长具有抑制作用.

关键词：红花多糖结构表征阿拉伯半乳聚糖 HepG2肝癌细胞

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基于胆汁酸代谢网络分析中药黄药子的肝毒性

药学学报 2011年第1期46卷 39-44页

作者：徐英陈崇崇杨莉王君明季莉莉王峥涛胡之璧上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室暨中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201210 上海中药标准化研究中心上海201210

本文采用超高效液相色谱质谱联用(UPLC-MS)胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction,ET)和单体化合物黄独素B(diosbulbin B,DB)致小鼠的肝毒性。通过小鼠毒性实验,ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。血清... 详细信息

本文采用超高效液相色谱质谱联用(UPLC-MS)胆汁酸代谢网络分析方法评价黄药子乙醇提取物(ethanol extraction,ET)和单体化合物黄独素B(diosbulbin B,DB)致小鼠的肝毒性。通过小鼠毒性实验,ET和DB给药组小鼠都可见明显的肝脏毒性。血清胆汁酸含量测定结果经主成分分析后,空白组和给药组区分明显,ET和DB给药组矢量方向一致,但两者之间也有一定距离,提示DB是黄药子致肝毒性的主要毒性成分之一。经偏最小二乘法-判别分析后,结果表明牛磺酸结合型胆汁酸对表征ET和DB致小鼠肝毒性具有重要的贡献,且以牛磺酸结合型为主的胆汁酸与ALT和AST具有很好的相关性,因此以牛磺酸结合型为主的胆汁酸可作为评价黄药子致小鼠肝毒性的生物标识物。本研究为进一步深入评价黄药子致肝毒性及致毒机制研究奠定了基础。

关键词：胆汁酸黄药子黄独素B 主成分分析偏最小二乘法-判别分析相关分析

蜈蚣藻中一种硫酸半乳聚糖的分离纯化、结构鉴定及其抗新生血管生成活性

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高等学校化学学报 2008年第9期29卷 1755-1759页

作者：严君施松善王顺春王峥涛胡之璧上海中医药大学中药研究所教育部中药标准化研究重点实验室

为了寻找多糖类血管生成抑制剂,我们以蜈蚣藻(Grateloupia filicina)为原料,经水提、醇沉、DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B凝胶柱层析分离纯化,得到一个均一多糖(GFP15).采用HPGPC、糖组成分析、绝对构型测定、甲基化分析... 详细信息

为了寻找多糖类血管生成抑制剂,我们以蜈蚣藻(Grateloupia filicina)为原料,经水提、醇沉、DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B凝胶柱层析分离纯化,得到一个均一多糖(GFP15).采用HPGPC、糖组成分析、绝对构型测定、甲基化分析、IR和NMR等技术对GFP15进行结构鉴定.结果表明,GFP15为一琼胶和卡拉胶中间型的硫酸半乳聚糖,主要由1,3连接的β-D-半乳糖和1,4连接的2,3位硫酸基双取代的α-D-半乳糖交替组成,1,3连接β-D-半乳糖的4位和6位上分别有少量的硫酸基取代,1,4连接的半乳糖有少量是α-L-半乳糖,此外,还有极少量的木糖、3,6-脱水半乳糖和6-甲基-半乳糖.利用鸡胚尿囊膜法(CAM)对GFP15进行抗新生血管生成活性评价,结果显示,GFP15(100μg/egg)能抑制尿囊膜新生血管的形成,提示GFP15作为一种多糖类血管生成抑制剂具有开发为抗肿瘤药物的潜在价值.

关键词：蜈蚣藻硫酸半乳聚糖抗新生血管生成活性

川续断β-香树脂醇合酶的基因克隆及生物信息学分析

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中国中药杂志 2022年第17期47卷 4593-4599页

作者：姚魏琳潘杰牛腾飞杨小林赵淑娟王峥涛王如锋上海中医药大学中药研究所上海201203 上海中医药大学中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203 上海中药标准化研究中心上海201203 上海中医药大学中药标准化教育部重点实验室上海201203

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三... 详细信息

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三萜皂苷骨架形成的功能。目前有关川续断β-香树脂醇合酶的研究较少,其催化机制仍待探究。为进一步挖掘与丰富该类酶的信息,该研究通过对转录组测序结果进行分析,从川续断中克隆得到1个β-香树脂醇合酶基因DaWβ-AS,并构建至大肠杆菌载体中实现蛋白表达;并采用实时荧光定量PCR技术分析其在川续断4个不同组织中的相对表达量,结果显示DaWβ-AS基因在叶中的相对表达量最高。生物信息学分析表明,DaWβ-AS蛋白含有PLN03012保守结构域,属于cl31551超家族,无跨膜区且不含信号肽。通过对川续断β-AS的克隆、表达及生物信息学分析,为川续断三萜皂苷生物途径解析提供了科学依据,有助于推动后期川续断三萜皂苷的定向生物合成,并为高质量川续断资源培育与开发提供相关参考。

关键词：川续断三萜皂苷 β-香树脂醇合酶基因克隆生物信息学

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鼓槌石斛改善糖尿病性视网膜病活性及其机制

国际药学研究杂志 2016年第2期43卷 301-306页

作者：余增洋陆宾季莉莉王峥涛上海中医药大学中药研究所上海市复方中药重点实验室中药标准化教育部重点实验室中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室上海201203

目的观察鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)乙醇提取物(DC)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导小鼠糖尿病性视网膜病(DR)的改善作用,并研究其可能的机制。方法采用STZ诱导C57小鼠发生糖尿病(DM),进而诱导产生DR,并给予DM小鼠D... 详细信息

目的观察鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum Lindl.)乙醇提取物(DC)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导小鼠糖尿病性视网膜病(DR)的改善作用,并研究其可能的机制。方法采用STZ诱导C57小鼠发生糖尿病(DM),进而诱导产生DR,并给予DM小鼠DC干预。通过视网膜血管免疫荧光染色和视网膜组织苏木精-伊红(HE)染色来检测视网膜血管新生情况;采用实时PCR和酶联免疫分析(ELISA)分别检测视网膜组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路基因表达情况和玻璃体、血清中VEGF含量。结果 DC不同剂量均能够明显降低STZ诱导的糖尿病小鼠视网膜血管新生程度;研究其机制发现,DC能降低STZ诱导的糖尿病小鼠视网膜内增加的低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α),VEGF及其受体VEGFR1和VEGFR2的基因表达,并能降低STZ诱导的糖尿病小鼠玻璃体和血清中增加的VEGF含量。结论 DC具有改善DR的药效活性,其机制为抑制VEGF信号通路的基因表达,并降低玻璃体和血清中的VEGF水平,进而抑制DR病变过程中的视网膜血管新生。

关键词：糖尿病性视网膜病鼓槌石斛血管新生血管内皮细胞生长因子

应用直接PCR技术的药用植物批量样本快速处理及分子鉴定

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药学学报 2017年第11期52卷 1763-1769页

作者：张金家徐红赵淑娟上海中医药大学中药研究所国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室中药标准化教育部重点实验室上海市复方中药重点实验室上海201203

直接PCR技术以微量样品快速裂解产物中DNA为模板,实现对目的基因的有效扩增。基于此,本文随机采集80种药用植物不同部位组织材料,以ITS序列为目的基因,用直接PCR技术进行扩增。通过反应体系优化,得到80个样品的全部ITS片段,扩增成功率为... 详细信息

直接PCR技术以微量样品快速裂解产物中DNA为模板,实现对目的基因的有效扩增。基于此,本文随机采集80种药用植物不同部位组织材料,以ITS序列为目的基因,用直接PCR技术进行扩增。通过反应体系优化,得到80个样品的全部ITS片段,扩增成功率为100%。对扩增片段测序并做Blast分析,与同种属植物ITS序列同源性为96%~100%。该方法避免了繁琐的DNA提取过程,只需取微量植物组织为起始材料,在保证结果准确、稳定的同时,提高了工作效率,为基于DNA条形码的药用植物批量样本的快速处理及分子鉴定提供了新的技术思路。

关键词：直接PCR技术 ITS DNA条形码药用植物分子鉴定