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不同产地苗圃银杏叶的质量表征与土壤因子关联性

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中成药 2022年第6期44卷 1875-1881页

作者：江美芳张艳欣王丹丹高崎上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海200120

目的考察不同产地苗圃银杏叶品质特征,分析它与土壤因子的相关性。方法 UPLC-Q-TOF-MS/MS分析采用Waters ACQUITY UPLC C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相水(0.05%甲酸)-甲醇(含0.05%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.1 mL/min;柱温4... 详细信息

目的考察不同产地苗圃银杏叶品质特征,分析它与土壤因子的相关性。方法 UPLC-Q-TOF-MS/MS分析采用Waters ACQUITY UPLC C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相水(0.05%甲酸)-甲醇(含0.05%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.1 mL/min;柱温40℃;检测波长360 nm。采用OPLS-DA对不同产地苗圃银杏叶品质表征,灰色关联度法和冗余分析法研究银杏叶品质与土壤因子间的关联性。结果山东平邑、上海崇明、四川都江堰银杏叶总内酯含量分别为0.570%、0.347%、0.480%,总黄酮醇苷含量分别为0.603%、0.661%、0.782%,总双黄酮含量分别为0.301%、0.628%、0.552%,总有机酸含量分别为8.722%、3.512%、2.810%,总烷基酚含量分别为1.936%、7.144%、5.673%。银杏酸C17∶1、莽草酸、原儿茶酸、银杏内酯B、金松双黄酮、银杏酸C13∶0、银杏内酯A、山柰酚-3-O-芸香糖苷、白果内酯为主要差异性成分。银杏叶品质与土壤中有效磷、pH、有机质、水分相关;萜内酯类含量与土壤有机质呈正相关性,与pH、水分呈负相关性;总黄酮醇苷类含量与土壤中水分、pH呈正相关性;有机酸类含量与土壤中水分、pH呈正相关性;烷基酚类含量与土壤中有效磷、有机质呈负相关性;双黄酮类含量与土壤中有机质呈负相关性,与土壤水分呈正相关性。结论不同产地苗圃银杏叶化学成分具有显著差异,可为相关制剂原药材选取提供参考。

关键词：银杏叶质量特征土壤因子 UPLC-Q-TOF-MS/MS

模式动物斑马鱼在神经退行性疾病研究中的应用

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中国现代应用药学 2023年第9期40卷 1290-1296页

作者：刘妍佳江美芳朱国琴高崎上海中医药大学上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201203

斑马鱼作为一种新型模式低等脊椎动物,具有发育周期短、体外受精、胚胎透明、突变种多等优势,被广泛应用于神经、心血管、消化等方面的研究中。神经退行性疾病包括帕金森病、阿尔茨海默病等,近年来发病率不断上升,且有年轻化的趋势,严... 详细信息

斑马鱼作为一种新型模式低等脊椎动物,具有发育周期短、体外受精、胚胎透明、突变种多等优势,被广泛应用于神经、心血管、消化等方面的研究中。神经退行性疾病包括帕金森病、阿尔茨海默病等,近年来发病率不断上升,且有年轻化的趋势,严重影响人们的身体健康和生活质量。因其发病机制复杂,至今仍缺乏治疗此类疾病的方法。本文综述近年来用斑马鱼制作神经退行性疾病模型的主要方式及可行性,为研究神经退行性疾病中斑马鱼模型的选择提供参考。

关键词：斑马鱼帕金森病阿尔茨海默病神经退行性疾病

基于高通量测序比较不同产地药用银杏根际土壤微生物多样性

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药物生物技术 2021年第2期28卷 117-122页

作者：陈冉刘志强王丹丹上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201203

不同的生态区的气候、土壤微生物分布都具有差异,因此会用产地来标志药材的质量。对药用银杏种植土壤的微生物空间分布格局的认识,将有助于人们对药用银杏的道地性做出判断,同时也为应对土壤病害等方面提供理论依据,能有效的指导种植。... 详细信息

不同的生态区的气候、土壤微生物分布都具有差异,因此会用产地来标志药材的质量。对药用银杏种植土壤的微生物空间分布格局的认识,将有助于人们对药用银杏的道地性做出判断,同时也为应对土壤病害等方面提供理论依据,能有效的指导种植。文章以都江堰、平邑、崇明三个不同的药用银杏种植产地采收期(7月)的银杏根际土壤为研究对象,采用16S r DNA、18S r DNA高通量测序方法分析他们土壤细菌和真菌的多样性以及群落组成结构,并对该时期土壤微生物多样性以及其土壤理化结果进行相关性分析。结果表明,三个产地的银杏根际土壤中的真菌和细菌在丰富度和多样性上都大致呈现都江堰>平邑>崇明;在群落结构上,三个产地的优势菌群较为相似,但是具体的群落结构有差异,都江堰与平邑的土壤真菌群落结构较为接近,都江堰与崇明的土壤细菌群落结构较为相似;在门水平上,三产地的优势真菌菌群为:子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、毛霉亚门(Mucoromycota);优势细菌菌群为:变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi);平邑的土壤细菌菌群受土壤理化因子的影响与其他两个产地区别较大,而土壤真菌受土壤理化因子的影响就较为接近。研究结果为不同银杏种植产地土壤根际微生物的群落分布提供了研究资料,加深对药材道地性的产生和维持机制的理解,从而深入挖掘种植土壤中未知的生物资源。

关键词：根际土壤药用银杏高通量测序微生物多样性土壤理化相关性

银杏酮酯片中萜内酯、黄酮苷整合溶出度的测定

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中成药 2020年第10期42卷 2716-2719页

作者：江美芳高崎王丹丹上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201210

目的测定银杏酮酯片中萜内酯、黄酮苷的整合溶出度。方法UPLC-MS法同时测定银杏内酯B、银杏内酯A、银杏内酯C、白果内酯、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖、山柰酚-3-O-芸香糖、香蒲新苷在pH1.2缓冲液中的溶出度,通过质量分数权重... 详细信息

目的测定银杏酮酯片中萜内酯、黄酮苷的整合溶出度。方法UPLC-MS法同时测定银杏内酯B、银杏内酯A、银杏内酯C、白果内酯、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖、山柰酚-3-O-芸香糖、香蒲新苷在pH1.2缓冲液中的溶出度,通过质量分数权重系数法对其进行整合表征,f2相似因子法比较各成分溶出曲线与整合溶出曲线的相似性。结果2类成分在30 min内的溶出度均达到90%以上,整合溶出曲线与各成分溶出曲线的f2均大于50。结论多成分加权整合溶出度能较好地表征银杏酮酯片体外溶出情况,可为中药整体性质研究提供思路。

关键词：银杏酮酯片萜内酯黄酮苷整合溶出度 UPLC-MS 权重系数法 f2相似因子法

ITS2和psbA-trnH序列对人参属常见药用植物的DNA分子鉴定研究

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沈阳药科大学学报 2021年第5期38卷 523-529页

作者：张亚光陈丹青朱国琴上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703 上海上药神象健康药业有限公司上海200336

目的评价两种DNA条形码候选区对常见人参属药用植物品种的鉴别能力。方法选择ITS2和psbA-trnH序列扩增并测序,运用最大简约法(maximum parsimony,MP)、非加权分组平均法(unweighted group average method,UPGMA)和最大似然法(maximum li... 详细信息

目的评价两种DNA条形码候选区对常见人参属药用植物品种的鉴别能力。方法选择ITS2和psbA-trnH序列扩增并测序,运用最大简约法(maximum parsimony,MP)、非加权分组平均法(unweighted group average method,UPGMA)和最大似然法(maximum likelihood,ML)对条带构建系统发育树。通过基因扩增效果,种间差异区分度,序列一致性等指标探讨DNA条形码区分人参属常见植物的能力。结果ITS2序列和psbA-trnH作为DNA条形码,可以将人参属植物与其他五加科植物准确区分。其中,ITS2序列一致性为97.06%,优于psbA-trnH序列测得的40.13%。结论以ITS2序列为主,psbA-trnH序列为辅的条形码组合可以对常见人参属植物进行DNA分子鉴定。

关键词： ITS2 psbA-trnH 系统发育树 DNA分子鉴定

荆银颗粒HPLC指纹图谱建立及13种成分测定

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中成药 2023年第10期45卷 3205-3209页

作者：张艳欣江美芳王丹丹上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海200120 上海中医药大学上海200120

目的建立荆银颗粒HPLC指纹图谱,并同时测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、升麻素苷、甘草苷、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、5⁃O⁃甲基维斯阿米醇苷、异绿原酸C、牛蒡子苷的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Wate... 详细信息

目的建立荆银颗粒HPLC指纹图谱,并同时测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、升麻素苷、甘草苷、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、5⁃O⁃甲基维斯阿米醇苷、异绿原酸C、牛蒡子苷的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm);流动相0􀆰1%磷酸⁃乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长210 nm。结果23批样品指纹图谱中有16个共有峰,相似度均大于0􀆰970。13种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0􀆰9995),平均加样回收率96.05%~102.06%,RSD 0.98%~2.76%。结论该方法稳定、可靠、准确,可用于荆银颗粒的质量控制。

关键词：荆银颗粒 HPLC指纹图谱化学成分

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植物microRNA跨界调控作用

中国生物化学与分子生物学报 2023年第12期39卷 1685-1695页

作者：陶涵金陈冉高崎上海中医药大学中药学院上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703

MicroRNAs(miRNAs)是一类19~24个核苷酸的非编码内源性小分子RNA,功能研究表明,miRNAs参与所有细胞过程的调节,包括生长发育、分化凋亡、炎症、免疫应答、代谢及信号转导等生物学过程。最近研究发现,植物miRNAs作为一类功能广泛的分子... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是一类19~24个核苷酸的非编码内源性小分子RNA,功能研究表明,miRNAs参与所有细胞过程的调节,包括生长发育、分化凋亡、炎症、免疫应答、代谢及信号转导等生物学过程。最近研究发现,植物miRNAs作为一类功能广泛的分子调控因子,不仅调控植物自身基因的表达,外源植物miRNAs还通过饮食进入到哺乳动物细胞中,调节某些与人类疾病治疗相关的基因或生物学过程。一些植物miRNAs由于其3′端存在2′-O-甲基化修饰、独特茎环结构、高GC含量以及微囊泡、RNA结合蛋白或外泌体样纳米颗粒等载体对其的保护作用,从而在食物加工与极端胃肠道环境中能保持高度稳定。植物miRNAs主要通过饮食获取,借助跨膜miRNA转运蛋白质、受体介导的内吞作用、肠上皮细胞间隙扩散、肠道微生物群脂质依赖性摄取等不同的转运机制,其被消化系统吸收后进入体循环并递送至器官组织,再调节受体细胞功能。本文综述了植物来源miRNAs的跨界调控研究现状,详细总结了植物miRNAs抵抗降解的可能方法、跨越胃肠道屏障的转运机制以及被摄入后在哺乳动物体内的调控作用,例如抗炎、抗病毒和抗肿瘤等相关发现,揭示植物miRNAs在基于RNA的分子治疗以及开发新的治疗药物等方面具有很高的应用潜力。

关键词： miRNAs 植物跨界调控稳定性

林下山参、园参、红参与西洋参粉末的化学成分及快速无损鉴别

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上海中医药杂志 2023年第1期57卷 76-86页

作者：李玲江美芳赵林松张艳欣秦超逸陈丹青高崎上海中医药大学上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703 上海上药神象健康药业有限公司上海200336

目的基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)结合多元统计学方法,筛选林下山参、园参、红参与西洋参的主要差异性成分;基于近红外光谱(NIRS)技术与多元统计学方法,建立不同参品的快速无损鉴别方法。方法采用Waters ... 详细信息

目的基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)结合多元统计学方法,筛选林下山参、园参、红参与西洋参的主要差异性成分;基于近红外光谱(NIRS)技术与多元统计学方法,建立不同参品的快速无损鉴别方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,在负离子模式下采集质谱数据,通过与文献数据及对照品比对,鉴定林下山参、园参、红参与西洋参中人参皂苷类成分;通过正交偏最小二乘判别分析(OPLSDA),以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选4种参的主要差异性成分;采集4种参粉末的NIRS,采用光谱预处理方法扣除仪器噪声及背景干扰,通过OPLS-DA,构建4种参粉末的快速无损判别模型。结果共鉴定4种参中54种人参皂苷类成分,筛选了18个主要差异性成分;NIRS技术采用二阶导数预处理方法结合OPLS-DA可实现4种参种类判别分析。结论本研究阐明了林下山参、园参、红参与西洋参的物质基础及差异性成分,可为不同参品的质量标志物的确定提供参考;同时建立了不同参品粉末的快速无损鉴别方法,为生产及市场上不同参品的掺假鉴别提供了有力的技术支撑。

关键词：林下山参园参红参西洋参差异性成分无损鉴别中药研究

基于代谢组学和转录组学的不同生长年限下银杏萜类生物合成关键基因表达分析

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中草药 2022年第4期53卷 1138-1147页

作者：刘志强高崎李航江美芳陈冉上海中医药大学中药学院上海201203 上海上药杏灵科技药业股份有限公司上海201703

目的以不同发育阶段不同树龄的银杏叶(银杏幼树叶,多年生银杏树叶)为对象,分析次生代谢物变化规律,测定黄酮及萜内酯含量,分析萜类生物合成的通路和关键基因表达,为提高银杏萜内酯产量提供分子生药学数据。方法采用液相色谱-质谱联用(LC... 详细信息

目的以不同发育阶段不同树龄的银杏叶(银杏幼树叶,多年生银杏树叶)为对象,分析次生代谢物变化规律,测定黄酮及萜内酯含量,分析萜类生物合成的通路和关键基因表达,为提高银杏萜内酯产量提供分子生药学数据。方法采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术,并进行高通量转录组学测序(RNA-seq),从差异表达基因中寻找次生代谢物生物合成的关联酶基因。结果代谢数据表明,不同树龄,不同发育阶段的银杏叶次生代谢物明显不同,黄酮类成分,老树叶片与幼树叶4~7月含量均呈下降趋势;同发育阶段,幼树叶含量高于老树叶片含量;萜内酯类成分,老树叶片4~7月含量略微呈上升趋势,幼树叶略微呈缓降趋势;同发育阶段,幼树叶含量高于老树叶片含量。转录组分析出萌发期,老树叶片与幼树叶片生长状态相似,5~7月老树叶与幼树叶基因表达发生较大变化。筛选出49条与萜类合成有关的候选基因,分析后发现甲羟戊酸途径(mevalonate pathway,MVA)中老树叶表达高于幼树叶;甲基赤藻糖醇磷酸途径(methylerythritol 4-phosphate pathway,MEP)中幼树叶表达高于老树叶。结论幼树叶比老树叶药用活性成分含量更高,适合作为药材。银杏叶内萜类合成途径可能主要依赖于MEP途径,且相关基因表达量与代谢成分相互证明。

关键词：银杏测序转录组代谢组萜类