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抗丁香酚单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立

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核农学报 2025年第2期39卷 339-350页

作者：董晓涵翟璐黄雅丽杨加成陈青舟廖杰金仁耀浙江工商大学海洋食品研究院浙江杭州310012 杭州博岳生物技术有限公司浙江杭州310018 杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013 杭州南开日新生物技术有限公司浙江杭州310000 浙江华才检测技术有限公司浙江绍兴311800

为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eug... 详细信息

为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eugenol-OVA),进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和紫外扫描鉴定;利用免疫抗原Eugenol-BSA免疫小鼠,经细胞融合、筛选和克隆,最终得到1株能稳定分泌抗丁香酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3D9),并准备腹水,利用间接竞争ELISA(icELISA)方法测定腹水效价;对获得的单克隆抗体进行鉴定,经条件优化建立胶体金免疫层析试纸条检测方法,对试纸条的灵敏度和稳定性进行评价。结果表明,Eugenol-BSA偶联比约为16∶1,Eugenol-OVA偶联比约为10∶1,完全抗原偶联成功;3D9细胞株的抗体类型及亚类均为免疫球蛋白G(IgG1),轻链为κ链;单克隆抗体效价达1×10^(-6);丁香酚浓度与抑制率之间的线性回归方程为y=9.671lnx+10.539(R^(2)=0.998),半数抑制浓度(IC_(50))为59.2 ng·mL^(-1),表明制备的抗丁香酚单克隆抗体具有较高的检测灵敏度。所制备的胶体金免疫试纸条优化参数为:胶体金标记最适pH值9、0.2 mol·L^(-1)K2CO3添加量12μL、抗体最佳标记量7μg·mL^(-1)、胶体金试纸条的T线消失浓度1.8μg·mL^(-1),该参数下的裸眼检出限0.3μg·mL^(-1)。本研究可为丁香酚的现场检测提供有效方法。

关键词：丁香酚单克隆抗体人工抗原胶体金试纸条

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球轴承刚度斜弹簧计算方法

轴承 2025年第1期 69-75页

作者：赵联春赵纪辉晏丽明王东上海斐赛轴承科技有限公司上海201199 洛阳摩梯普润滑技术有限公司河南洛阳471611 上海斐耐润滑技术有限公司上海201612

针对传统轴承刚度计算方法计算过程复杂,计算结果正确性存疑的问题,提出了一种斜弹簧计算方法,以角接触球轴承为例,推导了受联合载荷、高速运转和仅受中心轴向载荷、中低速运转2种极端情形下的轴承刚度计算公式,斜弹簧计算方法整个过程... 详细信息

针对传统轴承刚度计算方法计算过程复杂,计算结果正确性存疑的问题,提出了一种斜弹簧计算方法,以角接触球轴承为例,推导了受联合载荷、高速运转和仅受中心轴向载荷、中低速运转2种极端情形下的轴承刚度计算公式,斜弹簧计算方法整个过程无需微分和矩阵运算,物理意义清晰,正确性能够自证,计算过程简洁,计算精度高。并与虚功原理法、刚度投影法、准静态模型的增量法进行对比,结果表明:与虚功原理法误差较小,进一步证明了斜弹簧计算方法的正确性;与刚度投影法、准静态模型的增量法误差较大,两者所依据的物理基础不实的计算结果正确性存疑。

关键词：滚动轴承角接触球轴承刚度弹簧载荷变形

ELISA法对大鼠血清中HLX43药代动力学的探索性研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：刘嘉豪张二辉刘晓平皖南医学院上海佐临生物科技有限公司

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Hu... 详细信息

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Human IgG（检测总抗体）或Anti-payload antibody（检测结合抗体），加入待测样品，用Goat anti-human IgG Monkey ads-HRP作为检测抗体进行检测，加入TMB底物显色一段时间后，加入终止液中止反应，使用酶标仪SoftMax软件在双波长450 nm/630 nm下读取吸收度，采用 A450 nm-A630 nm 读值进行数值拟合，参考相关法规要求进行初步验证后，SD大鼠静脉注射15 mg/kg HLX43取血检测血药浓度，并计算药代动力学参数。结果：确定分析方法的线性范围为200～6 000 ng/mL，对分析方法的标准曲线、精密度、准确度、钩状效应、稀释线性以及选择性（基质效应）的考察结果均可接受。对SD大鼠血清样品进行定量分析，得到HLX43的药代动力学参数，检测结合抗体和检测总抗体的方法所得出的t1/2分别为110.9 h和110.6 h，Cmax分别为343.3 μg/mL和386.3 μg/mL，AUC0-inf分别为13 977.511 h·μg·mL-1和16 916.523 h·μg·mL-1。结论：本研究建立了两种快速灵敏的方法用于HLX43的药动学研究，为抗体偶联药物的临床研究奠定了基础。

关键词：酶联免疫吸附分析(ELISA) 定量测定抗体偶联药物药代动力学

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科技驱动产业前行

知识经济 2025年第2期 59-60页

作者：黄刚海默斯(重庆)医学生物技术有限公司

“科技是第一生产力。”而中国经济发展的关键,即是科技创新。直销行业尤应如此。根据世界直销协会联盟2024年9月发布的《2023年全球直销统计数据年度报告》,2023年全球直销行业总销售额为1676亿美元,同比下降2.3%。其中,2023年,健康类... 详细信息

“科技是第一生产力。”而中国经济发展的关键,即是科技创新。直销行业尤应如此。根据世界直销协会联盟2024年9月发布的《2023年全球直销统计数据年度报告》,2023年全球直销行业总销售额为1676亿美元,同比下降2.3%。其中,2023年,健康类的产品与服务是直销行业最大的产品与服务类别,占据了全球销售额的近三分之一(31.7%),其次是化妆品&个人护理(24.2%)、居家/耐用品(17%)。

关键词：直销行业个人护理耐用品统计数据年度报告三分之一产品与服务驱动产业

医药企业创新发展兼顾经济效益与社会效益——访上海艾斯可生物技术有限公司总经理孙琦

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生物产业技术 2016年第6期 60-61页

作者：孙琦上海艾斯可生物技术有限公司

医药行业与人们的生命健康息息相关,行业的发展水平始终是全社会关注的焦点。医药企业的管理者必须要思考选择什么样的发展模式,才能在推动行业进步的同时,达到目标经济效益。上海艾斯可生物技术有限公司总经理孙琦先生对医药企业的发... 详细信息

医药行业与人们的生命健康息息相关,行业的发展水平始终是全社会关注的焦点。医药企业的管理者必须要思考选择什么样的发展模式,才能在推动行业进步的同时,达到目标经济效益。上海艾斯可生物技术有限公司总经理孙琦先生对医药企业的发展有着独到的见解。他认为,企业研发的产品不仅要注重经济利益,更重要的是还要对疾病治疗产生直接影响。如果忽视社会效益,企业的发展一定不会持久,整个医药行业的发展也会受到影响。

关键词：海艾医药行业医药企业孙琦生物技术企业创新发展行业进步发展水平医药研发制药设备

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重组人5型腺病毒对B16黑色素瘤生长的抑制作用

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中国药学杂志 2007年第21期42卷 1633-1635页

作者：葛盛芳孟夏赵毅叶迅梁旻陈红专胡放上海交通大学医学院上海200025 上海三维生物技术有限公司上海201206

目的研究瘤内直接注射重组人5型腺病毒H101对B16黑色素瘤生长以及对手术后再次接种B16黑色素瘤细胞后肿瘤生长的影响。方法建立小鼠B16黑色素瘤动物模型。瘤内直接注射H101腺病毒,测量肿瘤体积,切除肿瘤,再次接种B16黑色素瘤细胞,观察... 详细信息

目的研究瘤内直接注射重组人5型腺病毒H101对B16黑色素瘤生长以及对手术后再次接种B16黑色素瘤细胞后肿瘤生长的影响。方法建立小鼠B16黑色素瘤动物模型。瘤内直接注射H101腺病毒,测量肿瘤体积,切除肿瘤,再次接种B16黑色素瘤细胞,观察肿瘤生长情况。结果细胞接种8 d后,全部小鼠均长出肿瘤。H101注射组肿瘤的体积在给药后3,6,9 d,都显著小于对照组。再次接种B16黑色素瘤细胞后,H101注射组肿瘤的生长速度也显著小于对照组。结论瘤内直接注射H101对B16黑色素瘤生长具有抑制作用,对手术后再次接种的肿瘤生长也具有抑制作用。

关键词：黑色素瘤重组人5型腺病毒H101 基因治疗

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一种鳄嘴花源多肽的改造及体外抗炎活性研究

天然产物研究与开发 2025年

作者：朱方莉何炳蔚曲丽萍上海贝泰妮生物科技有限公司云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司云南云科特色植物提取实验室有限公司

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活... 详细信息

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活性评分网站和多肽毒性预测筛选出无毒且评分大于0.8的25条多肽。将其与丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）靶点进行分子对接，筛选出3条优于MAPK抑制剂西替利嗪的多肽序列。采用固相合成法合成这3条多肽后，测试其对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抑制作用，最终发现了具有优异抗炎潜力的多肽序列WDDC。为了避免与人源蛋白重复并提高稳定性，引入了甘氨酸和乙酰基，改造后的多肽命名为Ac-WDDCG。结果显示，Ac-WDDCG能够显著抑制人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）中Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor family，NLRP3）信号通路相关基因[Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）、NLRP3和核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）]的mRNA表达（P ＜0.05），显著降低RAW 264.7细胞炎症模型中下游炎症因子[肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和NO]的分泌水平（P ＜0.01），并减少了CuSO4诱导的斑马鱼中性粒细胞迁移（P ＜0.05）。提示Ac-WDDCG具有较好的抗炎活性，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。

关键词：鳄嘴花多肽丝裂原活化蛋白激酶 Nod样受体蛋白3信号通路炎症因子

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肽类添加剂在反刍动物生产中的应用研究进展

动物营养学报 2025年

作者：钟新皇张振斌蔡青和王梦芝扬州大学动物科学与技术学院上海欧耐施生物技术有限公司省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆农垦科学院畜牧兽医研究所

肽是由氨基酸组合连接的活性物质,不仅具有营养性作用,而且具备特定的生物活性功能。肽对机体的活性作用表现在促进养分吸收和代谢、抗炎、抗氧化、免疫调节和维护肠道健康等方面。在动物生产中,肽能够促进动物生长、提高生产力、维持健... 详细信息

肽是由氨基酸组合连接的活性物质,不仅具有营养性作用,而且具备特定的生物活性功能。肽对机体的活性作用表现在促进养分吸收和代谢、抗炎、抗氧化、免疫调节和维护肠道健康等方面。在动物生产中,肽能够促进动物生长、提高生产力、维持健康,具有广阔的应用前景,因此成为21世纪的研究热点。本文聚焦于肽和反刍动物,旨在综述各种肽类物质尤其是活性小肽的作用及其在反刍动物生产中的应用研究进展,以期为反刍动物生产中肽的应用提供参考。

关键词：肽反刍动物应用研究进展

LC-MS/MS法测定蛋白降解靶向嵌合体药物ARV-471在小鼠体内的浓度及其药动学

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：吴浩蒋品郑威张瑜左坚皖南医学院上海美迪西生物医药股份有限公司

目的：以ARV-471作为蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）代表药物，建立高效液相色谱-三重四极杆质谱联用（HPLC-MS/MS）方法测定ARV-471在小鼠血浆中的浓度，用于研究小鼠体内的药动学特征。方法：以维拉帕米为内标，小鼠血浆样品经甲醇沉... 详细信息

目的：以ARV-471作为蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）代表药物，建立高效液相色谱-三重四极杆质谱联用（HPLC-MS/MS）方法测定ARV-471在小鼠血浆中的浓度，用于研究小鼠体内的药动学特征。方法：以维拉帕米为内标，小鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白后，离心取上清液进行LC-MS/MS分析。采用ACQUITY UPLC HSS T3（1.8 μm，2.1×50 mm）色谱柱；以乙腈（含0.1%甲酸）和2 mmol/L甲酸铵水溶液（含0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱；流速为0.6 mL/min；进样体积为2 μL；采用电喷雾离子源（ESI）、正离子扫描、多反应检测（MRM）模式。考察该方法的专属性、标准曲线和定量限、精密度与准确度、回收率与基质效应、以及稳定性和稀释可靠性，并对小鼠静脉注射5 mg/kg和口服灌胃给药30 mg/kg的ARV-471后的血药浓度和药动学参数进行测定和计算。结果：ARV-471在2.0～2 000.0 ng/mL浓度范围内线性关系良好，批内和批间准确度在85.0%～115.0%之间，批内和批间精密度RSD小于15%，专属性、基质效应、稳定性等均符合指导原则要求。药代动力学参数显示：雄性和雌性小鼠灌胃给药30 mg/kg的ARV-471后，Cmax分别为（2 947.19 ± 454.77）和（2 682.02 ± 342.23）ng/mL，AUC0-t分别为（23 357.37 ± 3 488.00）和（20 161.23 ± 1 871.32）ng·h·mL-1，T1/2分别为（3.11 ± 0.18）和（2.93 ± 0.62）h，Tmax分别为（1.83 ± 0.41）和（2.00 ± 0.00）h；雄性和雌性小鼠静脉注射5 mg/kg的ARV-471后，AUC0-t分别为（18 219.07 ± 2 059.41）和（17 238.01 ± 2 380.55）ng·h·mL-1，T1/2分别为（2.76 ± 0.23）和（2.73 ± 0.20）h；雄雌小鼠的绝对生物利用度分别为（19.49 ± 1.81）% 和（21.37 ± 3.19）%。结论：本研究建立了一种快速、灵敏的方法用于ARV-471的药动学研究，为PROTAC类药物的药动学研究奠定了基础。

关键词：蛋白降解靶向嵌合体药动学高效液相色谱-串联质谱法