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尼可地尔对哮喘气道重塑大鼠肺组织Toll样受体4以及核因子-κB p65表达的影响

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中国新药与临床杂志 2012年第2期31卷 90-93页

作者：李杰周鑫韩钰王志强三峡大学医学院湖北宜昌443002 三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002

目的观察尼可地尔对哮喘气道重塑大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR-4)及核因子(NF)-κBp65的作用以及对Bax/Bcl-2的调节情况。方法 32只清洁级SD雄性大鼠,随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和尼可地尔组。采用5点注射和雾化吸入鸡卵清蛋白... 详细信息

目的观察尼可地尔对哮喘气道重塑大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR-4)及核因子(NF)-κBp65的作用以及对Bax/Bcl-2的调节情况。方法 32只清洁级SD雄性大鼠,随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和尼可地尔组。采用5点注射和雾化吸入鸡卵清蛋白+氢氧化铝的方法复制大鼠哮喘模型,地塞米松组予地塞米松0.5 ***-1.d-1雾化吸入,尼可地尔组予尼可地尔3 ***-1.d-1雾化吸入,正常组与哮喘组雾化吸入生理盐水,共4 wk。观察大鼠肺组织病理学改变,NF-κB p65、Bax、Bcl-2的含量,以及TLR-4 mRNA的表达。结果与哮喘组相比,尼可地尔组大鼠的肺部组织炎症细胞浸润较少,肺泡的组织结构较为完整。哮喘组大鼠肺组织NF-κB p65、Bcl-2、TLR-4 mRNA表达高于正常组,Bax表达量较正常组低,差异均有显著意义(P<0.05)。尼可地尔组和地塞米松组大鼠NF-κB p65、Bcl-2、TLR-4mRNA表达低于哮喘组,Bax表达量较哮喘组高,均有显著差异(P<0.05)。结论尼可地尔能逆转哮喘大鼠肺组织病理变化,降低TLR-4介导的NF-κB p65表达,改善Bax/Bcl-2表达失调为其可能机制。

关键词：尼可地尔哮喘 Toll样受体4 NF-κB K通道

人IL-6基因的克隆及其在原核生物中表达及条件的优化

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生物技术通报 2010年第5期26卷 135-140页

作者：史继静刘朝奇杨凡杨祖伟三峡大学分子生物学研究所宜昌443002

构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21... 详细信息

构建人白细胞介素6(IL-6)的原核表达载体并优化其表达条件,为IL-6的高效表达提供试验依据。以人T细胞cDNA为模板通过PCR方法扩增IL-6基因,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,产物用Western blotting及人IL-6检测试剂盒分析鉴定。在保持菌种不改变的前提下,分别改变IPTG的浓度、培养时间、卡那霉素浓度、培养温度等来优化IL-6表达条件。结果显示,原核表达载体pET28 a(+)-IL-6成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约22 kD的IL-6蛋白,经Western blotting鉴定正确,经人IL-6试剂盒检测显示具有较高的免疫活性。在IPTG浓度400μmol/mL,卡那霉素浓度50μg/mL,40℃培养6 h的条件下,目的蛋白表达量最高,可占总蛋白表达量的40%。成功构建人IL-6原核表达载体且获高效表达,为研究IL-6生物学活性及产品开发提供了试验基础。

关键词： IL-6 原核表达条件优化

紫苏水提物对白细胞介素6与其受体结合的拮抗作用(英文)

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中国新药与临床杂志 2009年第9期28卷 703-708页

作者：史继静刘朝奇高明星刘小琴三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002

目的探讨紫苏水提物(PLE)对白细胞介素6(IL-6)与其受体(IL-6R)结合的拮抗作用。方法建立IL-6/IL-6R结合的ELISA模型,观察PLE(0.0625～2mg·L-1)对两者结合的影响。PLE(0.3和3mg·L-1)预处理肝癌HepG2细胞,Western blotting方法检测PLE对rhIL-6诱导Stat3磷酸化的影响。建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,免疫组化方法观察PLE(3g·kg-1)对小鼠肝组织的形态学影响;同时检测IL-6mRNA在肝组织的表达及Stat3磷酸化的水平。结果ELISA检测显示,PLE(0.0625～2mg·L-1)可显著抑制IL-6/IL-6R结合。PLE(0.3和3mg·L-1)可下调IL-6诱导的HepG2细胞中Stat3的磷酸化水平。与对照组相比,PLE(3g·kg-1)组小鼠肝细胞变性、坏死,炎性细胞浸润均有明显改善,且肝组织IL-6mRNA表达及Stat3的磷酸化水平亦显著下降。结论PLE可能阻断IL-6/IL-6R结合,抑制IL-6生物活性。

关键词：白细胞介素6 受体,白细胞介素6 药物拮抗作用紫苏中草药

Toll样受体4在大鼠心肌缺血再灌注损伤中表达的实验研究

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中华心血管病杂志 2008年第1期36卷 57-61页

作者：杨简杨俊丁家望席祖洋李稳慧李松陈勇王艳林王雅琴三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院心内科宜昌443003 三峡大学分子生物学研究所三峡大学医学实验中心

目的观察心肌缺血再灌注早期Toll样受体4mRNA（TLR4 mRNA）及蛋白表达，探讨TLR4在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠随机分为2组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组），每组36只，建立大鼠心肌缺血再灌注模型，按照... 详细信息

目的观察心肌缺血再灌注早期Toll样受体4mRNA（TLR4 mRNA）及蛋白表达，探讨TLR4在心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠随机分为2组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组），每组36只，建立大鼠心肌缺血再灌注模型，按照不同的再灌注时间（0、0．5、1、2、4和8h）处死动物。光镜和电镜观察心肌组织形态及超微结构改变。免疫组化检测心肌TLR4蛋白表达情况。实时定量逆转录聚合酶链反应定量心肌TLR4 mRNA表达水平。酶联免疫吸附试验测定心肌中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果（1）Sham组心肌组织形态及超微结构改变不明显；IR组心肌损伤较重，缺血心肌恢复血液灌注8h内，其病理学变化未见显著改善。（2）Sham组与IR组TLR4蛋白都有阳性表达，IR组TLR4表达增加，且以再灌注1h最为明显（19．62±3．84，P〈0．01）。（3）与Sham组比较，IR组心肌TLR4 mRNA表达水平均出现不同程度上调，以再灌注1h达到峰值[（4．03±0．85）×10^-2，P〈0．01]，而Sham组各时间点未见明显改变。（4）IR组心肌TNF-α水平高于各对应时间点Sham组（P均〈0．05），且心肌TLR4 mRNA表达与TNF-α呈正相关（r=0．728，P〈0．01）。结论心肌缺血再灌注早期，心肌TLR4表达迅速上调，TLR4的激活可能通过促进TNF-α等炎性因子的产生分泌增多来介导心肌缺血再灌注损伤。

关键词：心肌缺血再灌注损伤 Toll样受体4 肿瘤坏死因子-α

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木瓜对小鼠非酒精性脂肪肝形成的预防作用

食品科学 2010年第3期31卷 258-261页

作者：李斌刘朝奇史继静董满满李梦培刘茜覃晓琳吕佰瑞三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002

目的:复制小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察木瓜对此模型的影响。方法:高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝模型,在高脂饮食中添加木瓜对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养5周后检测血清肝脏酶学(ALT、AST)、血... 详细信息

目的:复制小鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察木瓜对此模型的影响。方法:高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制小鼠非酒精性脂肪肝模型,在高脂饮食中添加木瓜对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养5周后检测血清肝脏酶学(ALT、AST)、血脂(TG、CHO)水平;肝组织切片染色,显微镜观察肝组织病理变化;提取肝脏总RNA检测TLR-2、TLR-4、IL-1β、TGF-β、PD-L1等基因的表达情况,并进行统计学分析。结果:与正常组相比,模型组血清的肝功能和脂质水平上升,肝细胞形态明显改变,肝索消失或不清晰,相应基因表达水平上调;与模型组相比,木瓜干预组血清肝功能指标和脂质水平均显著下降,肝细胞气球样变较少,无明显肝细胞坏死,肝索存在,肝组织TLR和炎性因子表达水平明显下调。结论:木瓜对高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝有一定预防效果,该效应的发挥可能是通过调节TLR受体及死亡配受体表达,炎性因子的分泌而实现的。

关键词：木瓜非酒精性脂肪肝预防基因表达

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高效液相色谱法测定细胞裂解液中多胺的含量

中国医院药学杂志 2010年第13期30卷 1159-1161页

作者：刘小琴何毓敏任玉珊蔡富强王艳林三峡大学医学院湖北宜昌443002 三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002

目的:建立肿瘤细胞样品中多胺的HPLC测定法。方法:取处理好的肿瘤细胞裂解液样品,以1,7-庚二胺(DAH)为内标,经苯甲酰氯柱前衍生,乙醚提取衍生物。HPLC分析条件:LunaC18柱(150mm×4.6mm,5μm)为固定相,乙腈-水(62∶38)为流动相,流速为1.... 详细信息

目的:建立肿瘤细胞样品中多胺的HPLC测定法。方法:取处理好的肿瘤细胞裂解液样品,以1,7-庚二胺(DAH)为内标,经苯甲酰氯柱前衍生,乙醚提取衍生物。HPLC分析条件:LunaC18柱(150mm×4.6mm,5μm)为固定相,乙腈-水(62∶38)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长为254nm。结果:多胺中的腐胺、精脒和精胺能较好分离。腐胺的检测限为35.36μg.L-1,精脒为88.90μg.L-1,精胺为77.74μg.L-1。多胺各对照品中,腐胺在1.04～3.12mg.L-1之间,精脒在2.54～7.62mg·mL-1之间,精胺在2.99～8.97mg·mL-1之间,其线性关系均良好,相关系数(r)均大于0.999。腐胺、精脒和精胺平均加样回收率分别为96.84%,92.70%,90.05%。结论:建立了测定细胞多胺含量的HPLC方法,该方法简便、灵敏,能够满足肿瘤细胞样品中多胺含量测定的需要。

关键词：高效液相色谱法细胞裂解液多胺

米索前列醇预防非甾体抗炎药引起的小鼠肠黏膜损伤

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第7期31卷 928-932页

作者：金锦莲吴发明肖朝朝刘朝奇谢晓晶周海燕三峡大学第三临床医学院葛洲坝中心医院消化内科三峡大学分子生物学研究所湖北宜昌443002

目的探讨米索前列醇对非甾体抗炎药(NSAID)肠黏膜损伤的预防性保护作用。方法双氯芬酸钠灌胃建立NSAID肠黏膜损伤模型。雄性BABL/c小鼠60只随机分组,分别标记为:正常对照组、模型组、(200、400、800μg/kg)米索前列醇组。连续6 d灌胃处... 详细信息

目的探讨米索前列醇对非甾体抗炎药(NSAID)肠黏膜损伤的预防性保护作用。方法双氯芬酸钠灌胃建立NSAID肠黏膜损伤模型。雄性BABL/c小鼠60只随机分组,分别标记为:正常对照组、模型组、(200、400、800μg/kg)米索前列醇组。连续6 d灌胃处理。于第4天下午,除正常组外,其他用5 mg/kg双氯芬酸(10 m L/kg)灌胃处理。第7天对小鼠进行处理:采用FITC标记的葡聚糖检测肠黏膜通透性,分别取小肠组织标本进行HE染色,反转录PCR检测肠黏膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达,Western blot法检测以上分子的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小肠黏膜损伤严重,黏膜通透性显著升高,小肠黏膜绒毛发生变性、坏死、脱落、炎细胞浸润。而不同浓度米索前列醇给药组的肠黏膜损伤有不同程度的减轻,通透性改善;小肠GRP78蛋白的表达及GRP78、TNF-α、CHOP mRNA的表达与模型组相比明显下调。结论米索前列醇对NSAID肠病的预防有一定的作用。

关键词：非甾体抗炎药物肠黏膜损伤米索前列醇内质网应激小鼠

基于机器学习的冠心病风险预测模型构建与比较

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中国全科医学 2025年第4期28卷 499-509页

作者：岳海涛何婵婵成羽攸张森诚吴悠马晶清华大学医院管理研究院广东省深圳市518055 清华大学医院管理研究院、清华大学医学院北京市100084

背景冠状动脉粥样硬化性心脏病(以下简称冠心病)是全球重要的死亡原因之一。目前关于冠心病风险评估的研究在逐年增长。然而,在这些研究中常忽略了数据不平衡的问题,而解决该问题对于提高分类算法中识别冠心病风险的准确性至关重要。目... 详细信息

背景冠状动脉粥样硬化性心脏病(以下简称冠心病)是全球重要的死亡原因之一。目前关于冠心病风险评估的研究在逐年增长。然而,在这些研究中常忽略了数据不平衡的问题,而解决该问题对于提高分类算法中识别冠心病风险的准确性至关重要。目的探索冠心病的影响因素,通过使用2种平衡数据的方法,基于5种算法建立冠心病风险相关的预测模型,比较这5种模型对冠心病风险的预测价值。方法基于2021年美国国家行为风险因素监测系统(BRFSS)横断面调查数据筛选出112606名研究对象的健康相关风险行为、慢性健康状况等24个变量信息,结局指标为自我报告是否患有冠心病并据此分为冠心病组和非冠心病组。通过进行单因素分析和逐步Logistic回归分析探索冠心病发生的影响因素并筛选出纳入预测模型的变量。随机抽取112606名受访者的10%(共计11261名),以8∶2的比例随机划分为训练与测试的数据集,采用随机过采样和合成少数过采样技术(SMOTE)两种过采样的方法处理不平衡数据,基于k最邻近算法(KNN)、Logistic回归、支持向量机(SVM)、决策树和XGBoost算法分别建立冠心病预测模型。结果两组年龄、性别、BMI、种族、婚姻状态、教育水平、收入水平、家里有几个孩子、是否被告知患高血压、是否被告知处于高血压前期、是否被告知患妊娠高血压、现在是否在服用高血压药物、是否被告知患有高脂血症、是否被告知患有糖尿病、吸烟情况、过去30 d内是否至少喝过1次酒、是否为重度饮酒者、是否为酗酒者、过去30 d内是否有体育锻炼、心理健康状况以及自我健康评价比较,差异有统计学意义(P研究不仅确认了已知冠心病的影响因素,还发现了自我健康评价水平、收入水平和教育水平对冠心病具有潜在影响。在使用2种数据平衡方法后,5种算法的性能显著提高。其中XGBoost模型表现最佳,可作为未来优化冠心病预测模型的参考。此外,鉴于XGBoost模型的优异性能以及逐步Logistic回归的操作便捷和可解释性,推荐在冠心病风险预测模型中结合使用数据平衡后的XGBoost和逐步Logistic回归分析。

关键词：冠心病机器学习风险预测模型 Logistic回归 k最邻近算法支持向量机决策树 XGBoost

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大孔吸附树脂清除模拟中分子物质的研究

中国生物医学工程学报 1989年第1期8卷 15-19页

作者：王惠明童明容陈长治俞耀庭南开大学分子生物学研究所

本文采用模拟中分子物质——维生素B_(12)、细胞色素C和菊糖及不同的吸附剂(活性碳和合成树脂)进行了体外吸附实验。试图筛选出对于中分子量有毒物质具有优良吸附性能的吸附树脂。并对中分子量物质的吸附过程进行了初步研究。结果表明:... 详细信息

本文采用模拟中分子物质——维生素B_(12)、细胞色素C和菊糖及不同的吸附剂(活性碳和合成树脂)进行了体外吸附实验。试图筛选出对于中分子量有毒物质具有优良吸附性能的吸附树脂。并对中分子量物质的吸附过程进行了初步研究。结果表明:吸附树脂与被吸附物质极性相近时,树脂孔径大小是影响吸附过程的主要因素。当吸附剂孔径大于360(?)时,对分子量在1,000～10,000之间的非极性物质吸附3小时可以取得比较显著的效果。其中以X-5型吸附树脂的吸附效果最好。

关键词：中分子吸附树脂尿毒症