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木瓜总三萜和吲哚美辛联用对弗氏完全佐剂诱导大鼠类风湿性关节炎的治疗作用研究

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中药药理与临床 2024年第8期 42-50页

作者：贺君宇覃诗颖郑婧琪罗识熊致远余清泉三峡大学基础医学院南通大学医学院三峡大学生物与制药学院

目的:观察木瓜总三萜和吲哚美辛联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用，并探寻其可能作用机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、吲哚美辛5 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg+吲哚美辛5 mg/kg联用组。除... 详细信息

目的:观察木瓜总三萜和吲哚美辛联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用，并探寻其可能作用机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、吲哚美辛5 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg+吲哚美辛5 mg/kg联用组。除正常对照组外，各组大鼠右后脚底皮下注射弗氏完全佐剂（CFA）。14 d后，灌胃给予相应药物，1次/d,连续28 d,计算足肿胀度及关节炎指数评分。末次给药次日，取血和踝关节滑膜组织，检测血清中活性氧（ROS）、乳酸脱氢酶（LDH）和内源性抗氧化酶活性，踝关节中炎症因子含量、滑膜组织和溶酶体中组织蛋白酶B和D、β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶活性及形态学分析；实时定量PCR和Western blot法检测踝关节组织中Toll样受体4/核因子κB/NOD样受体家族3（TLR4/NF-κB/NLRP3）通路相关的mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较，模型对照组大鼠足肿胀度、关节炎指数评分显著增加（P三萜100 mg/kg和吲哚美辛5 mg/kg联用组大鼠足肿胀度、关节炎指数评分显著降低（P三萜100 mg/kg和吲哚美辛5 mg/kg联用对模型大鼠有显著的治疗作用，其作用机制可能与抑制CFA诱导AA模型大鼠氧化应激和TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活，减轻炎症反应及纠正溶酶体功能障碍有关。

关键词：木瓜总三萜吲哚美辛佐剂性关节炎炎症反应溶酶体功能 Toll样受体4/核因子κB/NOD样受体家族3信号通路

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竹节参及珠子参非药用部位研究进展

中华中医药学刊 2024年

作者：温媛刘畅郭佳龙原琪王锐李雪晴袁丁袁成福何毓敏三峡大学国家中医药管理药理科研三级实验室三峡大学健康医学院三峡大学基础医学院

竹节参作为国家重点二级保护野生植物，兼具北药人参和南药三七的特点；珠子参作为秦巴特色中草药资源“太白七药”之一，是药效好、价格高的药食两用野生名贵药材。但是目前对竹节参、珠子参的研究主要集中在药用部位，从而忽略地上部... 详细信息

竹节参作为国家重点二级保护野生植物，兼具北药人参和南药三七的特点；珠子参作为秦巴特色中草药资源“太白七药”之一，是药效好、价格高的药食两用野生名贵药材。但是目前对竹节参、珠子参的研究主要集中在药用部位，从而忽略地上部位的药用价值，导致资源浪费。竹节参、珠子参地上部位含有皂苷类、黄酮类、挥发油等化学成分，具有抗血栓、抗癌、护肝、抗炎镇痛、提高免疫力等药理活性，开发前景广阔。本文通过查询中草药书籍及中国知网、Web of Science、Pub Med、中国中医药数据库、中药材植物网等科学数据库，对竹节参、珠子参非药用部位的化学成分、药理作用及资源利用方面进行梳理与归纳，旨在为竹节参和珠子参非药用部位的化学研究、资源价值发现、产品开发利用等方面提供参考和依据。

关键词：竹节参珠子参非药用部位皂苷类资源利用

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软骨细胞在类风湿关节炎中的双重角色

中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 924-930页

作者：周俨淋张晓丽艾正文曹郡李世刚三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节疼痛和肿胀为主要特征的慢性自身免疫性疾病,其本质是滑膜增生和软骨被破坏。多年来,相比其他巨噬细胞,淋巴细胞等,软骨细胞受到的关注较少,人们普遍把RA中的软骨细胞作为反映病症特... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节疼痛和肿胀为主要特征的慢性自身免疫性疾病,其本质是滑膜增生和软骨被破坏。多年来,相比其他巨噬细胞,淋巴细胞等,软骨细胞受到的关注较少,人们普遍把RA中的软骨细胞作为反映病症特点的工具细胞。然而越来越多的研究表明,作为关节软骨中唯一的细胞,在RA中软骨细胞不仅仅作为靶细胞,被多种细胞因子从不同信号通路致使其发生细胞损伤或细胞凋亡;同时,软骨细胞自身也会产生基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)促炎因子,以及协同其他相关细胞调控关节内环境,参与RA进展。软骨细胞在RA中的重要作用,或许可能为RA临床预防和治疗提供帮助。

关键词：软骨细胞类风湿关节炎靶细胞效应细胞

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稀有人参皂苷的应用基础与开发利用研究进展

中国中药杂志 2024年第2期49卷 304-314页

作者：郭佳龙刘畅王瑶袁成福袁丁何毓敏三峡大学健康医学院湖北宜昌443002 三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北宜昌443002 三峡大学基础医学院湖北宜昌443002

稀有人参皂苷是一类天然含量稀少、生物利用度较高、生物学活性较突出的次生皂苷,其获得途径通常是由人参属植物中直接提取的原型皂苷经生物学或化学方法转化得到,近来年还出现了利用代谢工程与合成生物学技术创建的微生物细胞工厂合成... 详细信息

稀有人参皂苷是一类天然含量稀少、生物利用度较高、生物学活性较突出的次生皂苷,其获得途径通常是由人参属植物中直接提取的原型皂苷经生物学或化学方法转化得到,近来年还出现了利用代谢工程与合成生物学技术创建的微生物细胞工厂合成的途径。稀有人参皂苷因其在提高机体免疫功能、抗肿瘤等方面的显著生物活性而受到广泛关注。目前关于稀有人参皂苷综述多数集中在转化制备、工艺优化及药理活性等方面,而在产业化分析方面有所不足。该文结合国内外相关文献整理总结了目前常见稀有人参皂苷的结构类型、药理活性、获取来源以及转化途径,并概括了目前已有稀有人参皂苷制备过程中存在的问题,讨论了未来的研究与利用展望,以期为提升稀有人参皂苷的基础研究水平,并促进其产业化发展提供理论依据。

关键词：人参属稀有人参皂苷应用基础开发利用

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桂附地黄丸改善自然衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的研究

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中国药学杂志 2024年第16期 1513-1521页

作者：郭煜晖潘冯缘李梅唐小涵张长城童乐三峡大学健康医学院国家中医药管理局中药药理科研三级实验室湖北省功能性消化系统疾病中医临床医学研究中心/三峡大学中医医院三峡大学基础医学院

目的探究桂附地黄丸对衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将26只SPF级雄性11月龄雄性C57BL/6J小鼠饲养至21月龄，随后分为衰老模型组（Model组）和桂附地黄丸给药组(GFDHW,1.17 g·kg-1),给药组小鼠采用... 详细信息

目的探究桂附地黄丸对衰老小鼠肠道脂质吸收功能减退的改善作用及可能的作用机制。方法将26只SPF级雄性11月龄雄性C57BL/6J小鼠饲养至21月龄，随后分为衰老模型组（Model组）和桂附地黄丸给药组(GFDHW,1.17 g·kg-1),给药组小鼠采用饲料给药的方法，持续给药3个月，给药期间自由饮水，Model组小鼠给予正常饲料饲养，期间自由饮水，记录各组小鼠每周的体质量变化，于24月龄时进行处理取材；9只SPF级雄性8月龄雄性C57BL/6J小鼠作为青年对照组（Con组）,适应性饲养1周后进行处理取材。取材处理前，各组小鼠禁食24h,禁食结束后各组小鼠灌胃0.2 mL橄榄油，取材处理前30 min,各组小鼠灌胃0.2 mL半固体营养液。小肠推进运动实验检测小鼠小肠运动能力；生化试剂盒检测各组小鼠血清甘油三酯（triacylglycerol, TG）、总胆固醇（total cholesterol, TC）和低密度脂蛋白（low-density lipoprotein, LDL）的含量；透射电镜观察各组肠上皮细胞中脂滴数量变化；钙钴法碱性磷酸酶染色检测各组肠道碱性磷酸酶（intestinal alkaline phosphatase, IAP）活性；苏木素-伊红（hematoxylin eosin, HE）染色观察各组肠上皮形态；免疫组织化学法检测各组小鼠小肠Olfm4、Lgr5、PCNA、Notch1、Hes1以及Villin的表达；免疫印记法（Western blot）检测各组小鼠小肠脂质吸收相关分子蛋白表达水平。结果与Con组小鼠相比，Model组小鼠体质量下降较快，小肠运动能力下降，血清TG、TC、LDL含量增加，肠上皮细胞中脂滴数量增多，GFDHW组小鼠较衰老小鼠小肠运动能力有所提升，血清TG、TC、LDL含量降低，肠上皮细胞中脂滴数量减少；HE染色Model组小鼠小肠绒毛排列紊乱、断裂，绒毛长度缩短，隐窝深度降低，隐窝数量减少，与衰老小鼠相比，GFDHW组小鼠小肠绒毛排列整齐、连续，绒毛长度增加，隐窝深度升高，隐窝数量增多；免疫组化结果显示，与Con组小鼠相比，Model组小鼠小肠Olfm4、PCNA、Notch1、Hes1、Villin蛋白表达降低，与衰老小鼠相比，GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高；Western blot结果显示，与Con组小鼠相比，Model组小鼠小肠CD36、FATP4、SR-BI、ACAT2、FABP1和MTTP蛋白表达下降，与衰老小鼠相比GFDHW组小鼠上述指标蛋白水平升高。结论 GFDHW通过提高Notch1表达促使肠干细胞向吸收细胞分化以及提高脂质吸收途径中相关分子蛋白表达水平，从而改善衰老小鼠小肠脂质吸收功能。

关键词：桂附地黄丸衰老脂质吸收小肠肠吸收细胞

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踝关节扭伤模型及相关危险因素研究进展

中国运动医学杂志 2024年第2期43卷 142-148页

作者：王颉周游三峡大学附属仁和医院骨科三峡大学运动医学研究所宜昌市运动损伤与修复临床医学研究中心湖北宜昌443001

踝关节扭伤(ankle sprain,AS)是日常生活和运动中最常见的运动损伤之一,部分患者会出现反复扭伤并发展为慢性踝关节不稳(chronic ankle instability,CAI),严重的还会导致踝关节骨关节炎的发生。AS和CAI是多因素共同作用的结果。充分了... 详细信息

踝关节扭伤(ankle sprain,AS)是日常生活和运动中最常见的运动损伤之一,部分患者会出现反复扭伤并发展为慢性踝关节不稳(chronic ankle instability,CAI),严重的还会导致踝关节骨关节炎的发生。AS和CAI是多因素共同作用的结果。充分了解这些危险因素,可以在损伤发生前进行保护和预防,减少损伤的发生。本文总结AS和CAI发生发展的危险因素,并提出AS和CAI的综合损伤模型,以期对AS和CAI的早期预防提供参考。

关键词：踝关节扭伤慢性踝关节不稳危险因素病因预防

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抑制自噬增敏天花粉蛋白诱导HeLa细胞凋亡的作用机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：王慧李格李玲妍杜育乐鲁华唐勤彩刘涛王晓星尤程程黄益玲肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室(三峡大学) 三峡大学基础医学院病理学系三峡大学基础与临床病理学研究中心

探讨天花粉蛋白（trichosanthin， TCS）诱导宫颈癌HeLa细胞发生细胞自噬和凋亡的作用和机制。两步层析法制备TCS，MTT法检测TCS抑制HeLa细胞的增殖情况；透射电镜下观察TCS处理HeLa细胞后自噬囊泡和凋亡小体的形成；激光共聚焦显微镜... 详细信息

探讨天花粉蛋白（trichosanthin， TCS）诱导宫颈癌HeLa细胞发生细胞自噬和凋亡的作用和机制。两步层析法制备TCS，MTT法检测TCS抑制HeLa细胞的增殖情况；透射电镜下观察TCS处理HeLa细胞后自噬囊泡和凋亡小体的形成；激光共聚焦显微镜下观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein， GFP)-自噬微管相关蛋白轻链β3（microtubule-associated protein 1 light chain beta 3， LC3B）融合蛋白定位的改变；Western blot检测细胞自噬和凋亡相关蛋白表达的变化情况。研究发现制备的TCS纯度高，且具有生物学活性。TCS能明显抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性。透射电镜下观察TCS作用12 h后有明显的自噬囊泡形成，48 h后有典型的凋亡小体形成。激光共聚焦显微镜下观察到LC3B蛋白在胞浆中由弥散分布转向斑点状聚集分布。Western blot 结果显示，TCS处理HeLa细胞12 h后自噬活化蛋白LC3BⅡ 表达开始升高，且随药物浓度的增加而增加。TCS作用24 h 后凋亡相关蛋白多腺苷二磷酸多聚酶（poly ADP-ribose polymerase， PARP）开始出现活性剪切带，TCS 与3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine， 3-MA）联用后进一步促进PARP的剪切活化。结果表明，TCS能明显抑制宫颈癌 HeLa细胞的生长，诱导HeLa细胞发生自噬和凋亡，且TCS 诱导的 HeLa细胞自噬早于凋亡，抑制自噬能够增敏天花粉蛋白诱导的HeLa细胞凋亡，表明 TCS 诱导的细胞自噬是一种保护性细胞反应，与自噬抑制剂联用可增强TCS的抗宫颈癌作用。

关键词：天花粉蛋白 HeLa细胞自噬凋亡

D-半乳糖对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤及淫羊藿素的改善作用研究

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中国药理学通报 2024年 1634-1641页

作者：姚志丽赵海霞马小玉付国庆吴杰宋来新张长城三峡大学国家中医药管理局中药药理科研三级实验室三峡大学健康医学院三峡大学基础医学院三峡大学分析测试中心武汉市东西湖区人民医院

目的研究D-半乳糖（D-galactose,D-gal）对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤以及淫羊藿素（icaritin,ICT）的改善作用机制。方法首先将TM4细胞分为正常对照组、不同浓度D-gal处理组,Western blot检测TM4细胞连接功能相关蛋白（ZO-1、O... 详细信息

目的研究D-半乳糖（D-galactose,D-gal）对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤以及淫羊藿素（icaritin,ICT）的改善作用机制。方法首先将TM4细胞分为正常对照组、不同浓度D-gal处理组,Western blot检测TM4细胞连接功能相关蛋白（ZO-1、Occludin、β-catenin和Cx43）以及ERα/FAK信号通路相关蛋白（ERα、FAK和pY397-FAK）表达水平的变化;随后MTT筛选ICT药物浓度,并将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、D-gal处理+不同浓度ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平变化;分子对接研究ERα与ICT之间的相互作用,并预测两者之间的亲和力;最后将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、ERα抑制剂组、D-gal+ICT组、ERα抑制剂+ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平的变化。结果 D-gal可浓度依赖性下调连接功能相关蛋白（ZO-1、Occludin、β-catenin和Cx43）以及ERα/FAK信号通路相关蛋白（ERα、FAK和pY397-FAK）表达水平;给予ICT药物后,上述蛋白表达水平均明显上调;ERα和ICT分子对接结果显示,ERα的Asp351氨基酸残基与ICT之间形成2个距离为3.4?和2.4?的氢键,且两者之间的对接结合能小于-7 kcal·mol-1;ERα抑制剂处理TM4细胞后,上述蛋白表达水平均明显下调,给予ICT后,上述蛋白表达水平未有明显变化。结论 D-gal可导致TM4细胞连接功能损伤,而ICT可改善其损伤,机制可能与上调ERα/FAK信号通路相关。

关键词： D-半乳糖 TM4细胞淫羊藿素雌激素受体α 黏着斑激酶连接功能

基于Gln/GLS1/α-KG代谢轴和线粒体凋亡信号通路探讨木瓜总三萜抗D-半乳糖诱导GES-1细胞衰老的作用机制

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2230-2246页

作者：贺君宇杨家鑫覃诗颖郑婧琪国怡然马天行三峡大学基础医学院湖北宜昌443002 三峡大学生物与制药学院湖北宜昌443002 南通大学医学院江苏南通226001

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS... 详细信息

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1衰老的影响及作用机制,为TCS在临床上用于预防胃衰老提供科学数据。将体外培养的GES-1细胞和转染谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)过表达(overexpression GLS1,GLS1-OE)质粒的GES-1细胞用D-gal诱导衰老后,给予TCS和谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)抑制剂bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide(BPTES),考察各组细胞存活率、衰老标志物β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性细胞比例、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化;采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法和比色法检测各组细胞上清液和细胞内GLS1活性、谷氨酰胺(glutamine,Gln)、谷氨酸(glutamate,Glu)、α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)、尿素和氨水平;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中GLS1、线粒体凋亡信号通路相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示,与D-gal模型组和GLS1-OE D-gal模型组相比,TCS可显著降低D-gal诱导衰老GES-1细胞和GLS1-OE衰老GES-1细胞SA-β-gal染色阳性细胞率和MMP,抑制衰老细胞存活,促进其细胞凋亡(P<0.01),降低上清液和细胞内GLS1活性和Gln、Glu、α-KG、尿素、氨含量(P<0.01),降低线粒体中细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)浓度以及细胞中GLS1、增殖细胞核抗原mRNA和蛋白表达(P<0.01),降低细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达和前体半胱氨酸蛋白酶(pro-caspase)-9、pro-caspase-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值(P<0.01),升高胞质中Cyto C浓度和细胞中Bax、Bad、凋亡蛋白酶激活因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)mRNA表达及剪切型半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-9、cleaved-caspase-3、剪切型聚ADP核糖聚合酶-1(cleaved-poly ADP ribose polymerase-1,cleaved-PARP-1)蛋白表达(P<0.01)。以上结果表明,TCS可对抗D-gal诱导GES-1细胞衰老,其作用机制与抑制Gln/GLS1/α-KG代谢轴、激活线粒体凋亡通路,进而促进衰老细胞凋亡、清除衰老细胞密切相关。

关键词：木瓜总三萜 GES-1细胞 D-半乳糖衰老谷氨酰胺/谷氨酰胺酶1/α-酮戊二酸代谢轴线粒体凋亡通路

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