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大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响

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中国比较医学杂志 2024年第1期34卷 1-7页

作者：陶柏楠王咏兰洪岚袁林湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北恩施445000

目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MD... 详细信息

目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、P62和Beclin-1的蛋白表达水平。结果MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING和P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。

关键词：大黄素 MH7A细胞 cGAS/STING信号通路自噬类风湿关节炎

鲁米诺-还原金纳米粒子/碳纳米管三维复合材料基电化学发光传感器检测血清中的乳酸

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分析试验室 2024年第6期43卷 785-792页

作者：赵慧娄方明石晓冉张涵李群芳湖北民族大学化学与环境工程学院恩施445000 风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室恩施445000

采用一锅水热法制备了鲁米诺-还原金纳米粒子/碳纳米管三维复合材料(Lu-AuNPs/CNTs),用其制备固态电化学发光(ECL)传感器,并用于血清中乳酸的检测。采用场发射扫描电子显微镜(FSEM)、透射电子显微镜(TEM)、X射线粉末衍射仪(XPS)和X射线... 详细信息

采用一锅水热法制备了鲁米诺-还原金纳米粒子/碳纳米管三维复合材料(Lu-AuNPs/CNTs),用其制备固态电化学发光(ECL)传感器,并用于血清中乳酸的检测。采用场发射扫描电子显微镜(FSEM)、透射电子显微镜(TEM)、X射线粉末衍射仪(XPS)和X射线光电子能谱仪(EDS)对Lu-AuNPs/CNTs的形貌、结构、尺寸进行了表征。结果表明,碳纳米管(CNTs)为三维立体网状结构,鲁米诺-还原金纳米粒子(Lu-AuNPs)尺寸均一地分布在CNTs的表面。将Lu-AuNPs/CNTs固定在玻碳电极表面制成固态ECL传感器,其电化学发光信号约是Lu-AuNPs的2倍。该传感器的电化学发光强度与溶液中H2O2浓度成正比,线性范围为0.5~200μmol/L,检测限为0.2μmol/L。Lu-AuNPs/CNTs可用于固定乳酸氧化酶,所制备的传感器对乳酸的检测限为3.0μmol/L。该生物传感器可用于人血清样品中乳酸的测定。

关键词：一步水热合成鲁米诺-还原金纳米粒子/碳纳米管三维复合材料过氧化氢乳酸

基于网络药理学与实验验证探讨土家药大风藤醇提物干预L-精氨酸诱导急性胰腺炎的机制研究

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中国现代应用药学 2024年第15期41卷 2033-2042页

作者：吴昊韩文轩陈宗祥冯雅欣朱耀乾向阳湖北恩施学院湖北恩施445000 湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北恩施445000

目的基于网络药理学与实验验证探讨土家药大风藤醇提物干预L-精氨酸诱导的急性胰腺炎大鼠的作用和机制。方法通过文献检索获取大风藤醇提物的主要化学成分,使用多重数据库分析预测大风藤醇提物的药理机制。将小鼠随机分成4组,每组8只,... 详细信息

目的基于网络药理学与实验验证探讨土家药大风藤醇提物干预L-精氨酸诱导的急性胰腺炎大鼠的作用和机制。方法通过文献检索获取大风藤醇提物的主要化学成分,使用多重数据库分析预测大风藤醇提物的药理机制。将小鼠随机分成4组,每组8只,分别为空白对照组、模型组和大风藤低剂量(150 mg·kg^(-1))、高剂量(300 mg·kg^(-1))组,通过大体标本与组织病理检查、生化检查以及分子生物学检查验证大风藤干预L-精氨酸诱导急性胰腺炎的药效及药理机制。结果大风藤醇提物调治急性胰腺炎的核心活性成分为木兰碱、木兰花碱、木防己碱等,核心靶点有SRC、MAKP8、STAT3、AKT1等,GO功能富集分析得到GO条目2093个(P实验中,大风藤醇提物干预组的胰腺评分和胰腺长度均较模型组降低,组织病理学检测细胞炎症浸润情况改善。同时,大风藤醇提物能降低NLRP3的表达水平,减少Caspase-1的激活和GSDMD-N的生成,抑制炎性物质(IL-1β、IL-18)的释放,从而抑制细胞焦亡。结论大风藤醇提物对L-精氨酸诱导的急性胰腺炎小鼠有治疗作用,其机制可能与通过调控细胞焦亡,抑制炎性因子的释放有关。

关键词：急性胰腺炎 NLRP3 Caspase-1 GSDMD 细胞焦亡

姜黄素通过调控p53/SLC7A11/GPX4通路抑制脂多糖诱导的RAW264.7源性破骨细胞分化

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1268-1275页

作者：李明陈宗海朱青颜丽君张宗星邹权陈龙菊风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北民族大学医学部湖北恩施445000 川北医学院四川南充637000

目的:探讨姜黄素(Cur)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7源性破骨细胞的作用及其机制。方法:用LPS诱导RAW264.7细胞建立破骨细胞模型。CCK-8法检测RAW264.7细胞活力;TRAP染色鉴定破骨细胞形成;TRAP活性测定检测破骨细胞活力;生化检测细胞活性... 详细信息

目的:探讨姜黄素(Cur)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7源性破骨细胞的作用及其机制。方法:用LPS诱导RAW264.7细胞建立破骨细胞模型。CCK-8法检测RAW264.7细胞活力;TRAP染色鉴定破骨细胞形成;TRAP活性测定检测破骨细胞活力;生化检测细胞活性氧(ROS)、Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察细胞线粒体形态;RT-qPCR检测p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平;Western blot检测p53、SLC7A11及GPX4蛋白水平。结果:LPS成功诱导RAW264.7细胞为破骨细胞。TRAP染色及TRAP活性结果显示,与LPS组相比,Cur组破骨细胞数量及TRAP活性呈剂量依赖式下降(P<0.01);与Con组相比,LPS+Erastin组TRAP活性显著升高(P<0.01),经Cur处理后,TRAP活性呈剂量依赖式下降(P<0.01)。生化检测结果显示,与Con组比较,LPS+Erastin组ROS、Fe^(2+)及MDA水平显著升高,GSH水平显著降低(P<0.01);与LPS+Erastin组相比,Cur组ROS、Fe^(2+)及MDA水平呈剂量依赖式下降(P<0.01),GSH水平呈剂量依赖式上升(P<0.01)。电镜结果显示,与LPS组比较,LPS+Erastin组细胞线粒体嵴减少,膜密度增加;经Cur处理后,细胞线粒体嵴明显增加,膜密度减小。RT-qPCR和Western blot结果显示,与Con组比较,LPS+Erastin组p53的mRNA和蛋白水平显著升高,SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);经Cur处理后,p53的mRNA和蛋白水平显著降低,SLC7A11和GPX4的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论:Cur可抑制LPS诱导的RAW264.7源性破骨细胞分化,其机制可能与p53/SLC7A11/GPX4信号通路被抑制有关。

关键词：骨质疏松铁死亡破骨细胞 p53/SLC7A11/GPX4信号通路姜黄素

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基于网络药理学及实验验证探讨飞龙掌血治疗缺血性脑卒中的作用机制

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1375-1383页

作者：高建红杨丹王刚宋天英赵方毓陈显兵湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北恩施445000 湖北省肾脏病临床医学研究中心湖北民族大学医学部湖北恩施445000

目的基于网络药理学、分子对接技术以及动物实验,阐释飞龙掌血治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作用机制。方法利用数据库筛选飞龙掌血化学成分和IS靶点,构建PPI网络,建立KEGG通路富集分析,进行成分与靶点的分子对接,最后通过动... 详细信息

目的基于网络药理学、分子对接技术以及动物实验,阐释飞龙掌血治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作用机制。方法利用数据库筛选飞龙掌血化学成分和IS靶点,构建PPI网络,建立KEGG通路富集分析,进行成分与靶点的分子对接,最后通过动物实验,验证药物对PI3K/AKT/mTOR通路及自噬的影响。动物实验中,制备MCAO大鼠模型,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、飞龙掌血组,并设假手术组,观察药物对大鼠海马区、皮质区神经元的病理变化情况,免疫组化检测mTOR表达及定位,Western blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR以及自噬标识物LC3-Ⅱ、p62表达情况。结果最终筛选到22个活性成分,AKT1、MAPK3等29个核心靶点,PI3K/AKT、MAPK等194条信号通路。活性成分与IS相关靶点的结合稳定。动物实验结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠海马区、皮质区神经元分布稀疏紊乱,尼氏小体数量减少,胞质空泡化,海马区、皮质区mTOR阳性细胞表达减少,海马组织p-PI3K、p-AKT、mTOR和p62表达降低(P实验表明,飞龙掌血可以保护海马区、皮质区神经元结构,这可能与抑制PI3K/AKT/mTOR通路介导的过度自噬有关。

关键词：网络药理学飞龙掌血缺血性脑卒中 PI3K/AKT/mTOR信号通路自噬实验

湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移、侵袭和铁死亡的影响

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中国病理生理杂志 2024年第2期40卷 274-281页

作者：陈国庆董倩男杨锐高瑛刘人嘉袁林向阳吴昊湖北恩施学院医学部湖北恩施445000 湖北恩施学院附属恩施慧宜中西医结合风湿医院湖北恩施445000 湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北恩施445000

目的:探究湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移与侵袭及铁死亡的影响及机制。方法:将A549细胞分为:对照组,低、中、高剂量(100、150和200μg/mL)枫杨总黄酮组,铁死亡抑制剂liproxstatin-1(Lip-1)组,Lip-1+高剂量枫杨总黄酮组。采... 详细信息

目的:探究湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移与侵袭及铁死亡的影响及机制。方法:将A549细胞分为:对照组,低、中、高剂量(100、150和200μg/mL)枫杨总黄酮组,铁死亡抑制剂liproxstatin-1(Lip-1)组,Lip-1+高剂量枫杨总黄酮组。采用CCK-8法检测细胞活力;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测细胞脂质过氧化水平;RT-qPCR检测细胞溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平;Western blot检测SLC7A11、GPX4、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,各剂量枫杨总黄酮组A549细胞活力降低(P湖北枫杨总黄酮能抑制A549细胞迁移与侵袭并且通过调控Keap-1/Nrf2/HO-1通路诱导肺癌A549细胞铁死亡。

关键词：湖北枫杨总黄酮非小细胞肺癌铁死亡 Keap-1/Nrf2/HO-1通路

基于网络药理学及实验验证探讨三百棒治疗类风湿性关节炎骨破坏的作用机制

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中国药理学通报 2024年第10期 1979-1990页

作者：江露张宗星李玮怡刘道忠包卓玛聂青云袁林湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室湖北民族大学医学部湖北省肾脏病临床医学研究中心

目的通过网络药理学及体外实验探讨三百棒（Toddalia asiatica, TA）对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）骨破坏的影响及可能的作用机制。方法使用网络药理学分析TA抗RA骨破坏的有效成分及作用靶点；利用AutoDock和PyMOL软... 详细信息

目的通过网络药理学及体外实验探讨三百棒（Toddalia asiatica, TA）对类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）骨破坏的影响及可能的作用机制。方法使用网络药理学分析TA抗RA骨破坏的有效成分及作用靶点；利用AutoDock和PyMOL软件进行分子对接。体外培养MC3T3-e1细胞，通过CCK-8检测三百棒醇提物（Toddalia asiatica alcohol extract, TAAE）对细胞活力的影响，并筛选出合适的药物浓度及干预时间；用成骨诱导培养基诱导成骨细胞模型，ALP染色、活性检测及茜素红染色检测其成骨分化情况；Western blot检测通路相关蛋白Wnt3a、β-catenin蛋白的表达，并采用通路抑制剂DKK-1进一步验证TAAE是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞分化。结果共筛选出TA抗RA骨破坏的靶点158个，核心靶点56个。KEGG信号通路富集主要有癌症通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、cAMP信号通路。CCK-8检测结果显示：1 g·L-1TAAE可显著提高细胞存活率；ALP染色及ALP活性检测结果示：TAAE能显著增加成骨诱导培养基诱导的细胞的染色阳性率及ALP活性；Western blot检测结果显示：TAAE可增加Wnt3a、β-catenin蛋白的表达；使用DKK-1抑制剂后上述蛋白的表达降低。结论 TAAE可通过Wnt/β-catenin信号通路调控成骨细胞分化以达到治疗RA骨破坏的作用。

关键词：类风湿性关节炎骨破坏三百棒网络药理学作用机制

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一步法制备铁氮掺杂碳点荧光探针用于测定丙酮酸

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分析试验室 2024年第3期43卷 314-321页

作者：石晓冉赵慧张涵李群芳娄方明湖北民族大学化学与环境工程学院恩施445000 遵义医科大学药学院恩施445000 风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室遵义563000

以邻苯二甲酸为前体,三乙烯二胺为氮源,氯化血红素为铁源,采用一步微波法制备了荧光量子产率约20.8%的新型铁氮掺杂碳点(Fe,N@CDs),并对其形貌、组成及发光性能进行了研究。Fe,N@CDs在425 nm激发波长下能够发射出500 nm的绿色荧光。基于... 详细信息

以邻苯二甲酸为前体,三乙烯二胺为氮源,氯化血红素为铁源,采用一步微波法制备了荧光量子产率约20.8%的新型铁氮掺杂碳点(Fe,N@CDs),并对其形貌、组成及发光性能进行了研究。Fe,N@CDs在425 nm激发波长下能够发射出500 nm的绿色荧光。基于Fe,N@CDs的荧光猝灭作用,建立了对丙酮酸定量测定的方法。在50~350μmol/L范围内,Fe,N@CDs的荧光猝灭程度与丙酮酸浓度呈良好的线性关系,相关系数R2=0.998,检出限(LOD)为16.7μmol/L。该方法成功应用于胎牛血清蛋白中丙酮酸含量的检测,回收率范围为99.3%~103.4%。

关键词：铁氮掺杂量子点荧光丙酮酸一步微波法

竹节参总皂苷缓解CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤:基于调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 244-251页

作者：吴广阳宋添力唐浪王一民刘绪黄胜湖北民族大学医学部湖北恩施445000 湖北恩施学院湖北恩施445000 湖北民族大学风湿性疾病发生与干预实验室湖北恩施445000

目的探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl_(4)致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组(100 mg/kg)、竹节参总皂苷低、中、高(50、100、200 mg/kg)剂量组,各组... 详细信息

目的探讨土家族药用植物竹节参提取物总皂苷对CCl_(4)致急性肝损伤的保护作用及潜在的药理学机制。方法将6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组(100 mg/kg)、竹节参总皂苷低、中、高(50、100、200 mg/kg)剂量组,各组8只,除空白组外,其余各组采用CCl_(4)诱导大鼠急性肝损伤模型,处理组于造模中给予药物灌胃干预。比较各组大鼠的血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)和碱性磷酸酶(ALP)水平;HE染色观察肝组织病理学改变;免疫组化检测肝脏组织PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子的表达;酶联免疫法测定肝脏组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平;蛋白免疫印迹法检测肝脏组织PI3K-Akt和SIRT6-NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果网络药理学分析显示,竹节参总皂苷对急性肝损伤的有治疗作用,其关键的通路为PI3K/Akt等信号通路。血清学和酶联免疫学实验结果显示,与正常组相比,模型组大鼠血清和肝组织的AST、ALT、ALP、TBil和MDA明显增高(P<0.01),T-SOD和GSHPx水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,各治疗组ALT、AST、ALP、TBIL和MDA水平显著降低(P<0.01),T-SOD和GSH-Px水平显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示,正常组大鼠肝组织细胞内未见p-NF-κB表达阳性,与正常组相比,模型组中p-NF-κB阳性表达则明显增加,阳性细胞数增多(P<0.01);与模型组比较,各治疗组阳性表达明显减少(P<0.01)。免疫印迹结果显示,相对于正常组,模型组PI3K、p-Akt蛋白的表达水平下降,p-NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白的表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,各治疗组PI3K、p-Akt和SIRT6蛋白的表达水平显著升高,p-NF-κB p65、TNF-α和IL-6的蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论竹节参总皂苷可以通过调节PI3K/Akt和NF-κB通路,有效减缓CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤,发挥其抗炎、抗氧化应激和保护肝损伤的作用。

关键词：急性肝损伤竹节参总皂苷 PI3K/Akt/NF-κB 抗炎抗氧化

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