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M2型小胶质细胞移植促进小鼠脊髓损伤修复的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第2期38卷 198-205页

作者：张静张潇月江琪曲迪胡羽生戚超付海涛青岛大学青岛医学院山东青岛266073 青岛大学附属医院运动医学科山东青岛266103

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培... 详细信息

目的探讨M2型小胶质细胞(M2 microglia,M2-MG)移植促进小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复的效果。方法取15只新生2~3 d C57BL/6乳鼠大脑皮质,通过胰蛋白酶消化法分离原代细胞并进行Iba1免疫荧光染色鉴定为MG后,以IL-4极化诱导培养48 h(实验组),通过精氨酸酶1(Arginase 1,Arg-1)、Iba1免疫荧光染色鉴定其是否极化为M2-MG;以正常培养MG作为对照组。另取5只新生1周C57BL/6乳鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)与M2-MG共培养5 d,观测轴突长度;以单纯DRG作为对照。取42只6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=6)、SCI组(n=18)及SCI+M2-MG组(n=18)。手术暴露脊柱T10节段后,假手术组仅切除椎板,SCI组及SCI+M2-MG组行SCI造模后,SCI+M2-MG组同时注射M2-MG。术后观测各组小鼠存活情况,并于术后当天(0)、3、7、14、21、28 d采用BMS(Basso Mouse Scale)评分评价小鼠运动功能恢复情况,28 d行足迹实验评价小鼠步态。术后取SCI组及SCI+M2-MG组脊髓组织行免疫荧光染色,其中7、14、28 d胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)染色观测SCI损伤区域面积,28 d神经元核抗原染色观察神经元存活情况,7、14 d GFAP/C3双重荧光染色观察表示A1星形胶质细胞数量变化。结果免疫荧光染色鉴定体外培养细胞为MG且纯度可达90%,经IL-4诱导培养后Arg-1免疫荧光染色示极化为M2表型。M2-MG与DRGs体外共培养5 d后可促进轴突生长(P<0.05)。动物实验示,术后各组小鼠均存活至实验完成。SCI组及SCI+M2-MG组小鼠术后后肢运动功能随时间延长逐渐恢复,其中21、28 d SCI+M2-MG组BMS评分较SCI组更高(P<0.05),28 d时拖曳步态明显减轻,但尚未达假手术组水平。免疫荧光染色示,与SCI组相比,SCI+M2-MG组在7、14、28 d损伤区域面积均缩小,28 d时存活神经元数量增加,7、14 d时A1星形胶质细胞减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论M2-MG移植可促进小鼠SCI神经元存活和轴突再生,改善小鼠后肢运动功能,分析这种神经保护作用与A1星形胶质细胞极化被抑制有关。

关键词：脊髓损伤 M2型小胶质细胞星形胶质细胞细胞移植小鼠

尺骨“Z”形缩短截骨联合腕关节镜下三角纤维软骨复合体深层修复治疗尺骨撞击综合征伴中度以上下尺桡关节不稳定的疗效

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中华创伤杂志 2024年第7期40卷 605-613页

作者：林倩赵夏郝筱坤于腾波陈进利青岛大学附属医院运动医学科青岛266000 康复大学青岛医院(青岛市立医院)骨科青岛266011 青岛大学运动医学与健康研究所青岛266000

目的比较尺骨“Z”形缩短截骨联合腕关节镜下缝线锚钉三角纤维软骨复合体(TFCC)深层修复与单纯尺骨“Z”形缩短截骨治疗尺骨撞击综合征伴中度以上下尺桡关节不稳定的疗效。方法采用回顾性队列研究分析2016年1月至2023年6月青岛大学附属... 详细信息

目的比较尺骨“Z”形缩短截骨联合腕关节镜下缝线锚钉三角纤维软骨复合体(TFCC)深层修复与单纯尺骨“Z”形缩短截骨治疗尺骨撞击综合征伴中度以上下尺桡关节不稳定的疗效。方法采用回顾性队列研究分析2016年1月至2023年6月青岛大学附属医院收治的30例尺骨撞击综合征伴中度以上下尺桡关节不稳定患者的临床资料,其中男16例,女14例;年龄27~58岁[(42.4±9.9)岁]。患者均为TFCCⅠB型损伤并累及TFCC深层,存在尺骨正变异。15例采用单纯尺骨“Z”形缩短截骨治疗(单纯截骨组),15例采用尺骨“Z”形缩短截骨联合腕关节镜下缝线锚钉TFCC深层修复治疗(截骨联合修复组)。比较两组手术时间、术中出血量、尺骨截骨长度;术前,术后6、12个月及末次随访时前臂旋转度、尺桡偏角、掌背屈角、握力、视觉模拟评分(VAS)、患者自评腕关节功能状况(PRWE)评分、改良Mayo腕关节评分和上肢功能障碍评定量表(DASH)评分;术后并发症发生率。结果患者均获随访6~24个月[(15.8±4.9)个月]。截骨联合修复组手术时间为3.0(2.3,3.0)h,长于单纯截骨组的1.5(1.3,2.0)h(P0.05)。两组术前前臂旋转度、尺桡偏角、掌背屈角、握力、VAS、PRWE评分、改良Mayo腕关节评分和DASH评分差异均无统计学意义(P>0.05)。截骨联合修复组术后6、12个月及末次随访时前臂旋转度为(130.3±8.8)°、(135.2±7.9)°、(141.9±6.9)°,尺桡偏角为23.0(23.0,26.5)°、33.0(30.0,36.0)°、36.0(32.5,41.5)°,均大于单纯截骨组的(120.5±9.4)°、(123.7±10.2)°、(130.9±8.5)°和22.0(20.0,23.0)°、23.0(23.0,28.0)°、25.0(23.0,33.5)°(P0.05)。截骨联合修复组术后6个月握力为(14.6±1.0)N,大于单纯截骨组的(12.8±1.8)N(P0.05)。截骨联合修复组术后6、12个月及末次随访时VAS为(4.3±1.9)分、(2.7±1.1)分、(2.1±0.7)分,PREW评分为(57.6±4.1)分、(47.3±2.4)分、(35.0±3.4)分,均低于单纯截骨组的(6.5±2.5)分、(4.7±1.4)分、(4.3±0.9)分和(67.8±4.5)分、(53.1±4.4)分、(43.5±4.1)分(P0.05)。两组术后各时间点前臂旋转度、尺桡偏角、掌背屈角、握力和改良Mayo腕关节评分均大于术前(P<0.05),VAS、PREW评分和DASH评分均低于术前(P<0.05),且术后各时间点差异均有统计学意义(P<0.01)。截骨联合修复组术后并发症发生率为6.7%(1/15),低于单纯截骨组的46.7%(7/15)(P<0.05)。结论与单纯尺骨“Z”形缩短截骨术相比,尺骨“Z”形缩短截骨联合腕关节镜下缝线锚钉TFCC深层修复治疗尺骨撞击综合征伴中度以上下尺桡关节不稳定,具有术后腕关节活动度增加、疼痛减轻、功能改善和并发症发生率低等优势。

关键词：尺骨腕损伤缩短截骨术关节镜检查

前扣带回至伏隔核GABA能神经通路调控小鼠肠易激综合征及潜在机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 815-826页

作者：郭瑞晓高胜利冯旭菲刘华明星孙金秋栾心驰刘震宇刘蔚毅郭菲菲青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系山东青岛266071 青岛大学生物医学中心山东青岛266071 青岛大学附属医院消化内科山东青岛266071 青岛大学青岛医学院山东青岛266071

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和... 详细信息

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和腹部退缩反射评分观察小鼠IBS样症状。(2)采用荧光金(FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测ACC-NAc的GABA能通路和IBS小鼠ACC中GABA神经元兴奋性(均n=8)。(3)在正常和IBS小鼠NAc分别注射1.5μL生理盐水(NS)、GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)或激动剂异四氢烟酸(Isog),并据此将小鼠分为3组(均n=8):NS组、BIC组和Isog组,观察其IBS样症状。(4)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-iCre-WPRE-pA定向注射于ACC,AAV2/2Retro Plus-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-eGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为4组(均n=8):NS(腹腔注射)+NS(NAc注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组;或AAV2/2Retro-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-EGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为3组(均n=8):NS+NS组、NS+BIC组和CNO+NS组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织中组胺和5-羟色胺(5-HT)的表达,并观察ACC-NAc的GABA能神经通路对小鼠IBS样症状的影响。结果:CACS诱导小鼠出现IBS样症状;FG逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,ACC的GABA神经元可以投射至NAc。NAc注射BIC后IBS小鼠的焦虑样行为、腹泻样症状和内脏超敏反应显著减轻(P<0.05)。化学遗传法抑制投射至NAc的ACC内GABA能神经元可显著减轻IBS小鼠的症状(P<0.05)。结论:ACC^(GABA)-NAc神经通路可参与小鼠IBS样症状的调控,其机制可能与肠道组胺和5-HT的释放有关。

关键词：前扣带回伏隔核 γ-氨基丁酸焦虑样行为肠易激综合征内脏超敏反应

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肿瘤相关巨噬细胞:调节肿瘤微环境的新靶点

中国肺癌杂志 2024年第3期27卷 231-240页

作者：周银雪任敦强毕焕焕易冰倩张彩王红梅孙家兴青岛大学附属医院呼吸与危重症医学科青岛266000 青岛大学医学部青岛266000

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)在肺癌免疫微环境中扮演着重要的角色。它们通过自身的表型和吞噬功能的变化,在肺癌的发生和进展中发挥作用,通过促进肺癌免疫抑制型微环境的形成和肿瘤异常血管的生长加速肺癌的侵... 详细信息

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)在肺癌免疫微环境中扮演着重要的角色。它们通过自身的表型和吞噬功能的变化,在肺癌的发生和进展中发挥作用,通过促进肺癌免疫抑制型微环境的形成和肿瘤异常血管的生长加速肺癌的侵袭和扩散。巨噬细胞在应对不同刺激时,可以极化为具有不同功能和特征的亚型,分为抗肿瘤M1型和促肿瘤的M2型。在肿瘤组织中,TAM通常极化为交替活化型的M2表型,表现出对肿瘤免疫的抑制作用。本文综述了抗血管生成药物在调节TAM表型方面的作用,它们可以通过将M2型TAM重编程为M1型来发挥抗肿瘤作用。同时,TAM的功能改变在抗血管生成治疗和免疫治疗策略中也起到重要作用。研究证实,TAM通过极化及功能改变可能成为调节肿瘤微环境的新靶点,开辟肺癌治疗的新途径。

关键词：肿瘤相关巨噬细胞极化抗血管生成治疗肺肿瘤

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大鼠肩袖撕裂重建过程中色氨酸代谢的变化

中华创伤骨科杂志 2024年第5期26卷 435-443页

作者：朱东旭黄晓红朱馨蕊于腾波张英泽青岛大学医学部青岛266000 青岛大学附属医院运动医学科青岛266100 青岛大学附属医院医学研究中心山东省创伤骨科研究所青岛266100 河北医科大学第三医院骨科医院石家庄050051 青岛市市立医院骨外科青岛266071 青岛大学附属医院骨科青岛266100

目的比较骨重塑能力正常和骨重塑能力缺陷大鼠肩袖撕裂(RCT)修复术后色氨酸代谢的差异,探讨色氨酸代谢是否与骨长入有关。方法共选取50只成年雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠进行研究,随机选择18只大鼠接受双侧卵巢摘除手术(OVX),设为OVX组;... 详细信息

目的比较骨重塑能力正常和骨重塑能力缺陷大鼠肩袖撕裂(RCT)修复术后色氨酸代谢的差异,探讨色氨酸代谢是否与骨长入有关。方法共选取50只成年雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠进行研究,随机选择18只大鼠接受双侧卵巢摘除手术(OVX),设为OVX组;余32只大鼠接受双侧卵巢摘除假手术,设为假手术组。术后3个月,OVX组和假手术组各自随机选择4只大鼠,采用显微计算机断层扫描(Micro-CT)鉴定肱骨头的骨量流失情况。OVX组剩余大鼠进行RCT造模,并接受急性冈上肌横断修复术,设为OVX+RCT组(n=14);假手术组剩余大鼠分别选取14只接受急性冈上肌横断修复术和RCT假手术,分别设为RCT组(n=14)和SO组(n=14)。修复手术后2周检测大鼠抓力,并取出冈上肌腱骨复合体,通过实时荧光定量多聚酶链式反应(qPCR)检测、苏木素伊红(HE)染色和免疫组化(IHC)染色评估新骨生成和骨长入情况,采用超高效液相色谱(UPLC)分析检测色氨酸代谢。结果抓力测试结果表明,SO组大鼠抓力最大,RCT组次之,OVX+RCT组抓力最小,三组间差异有统计学意义(P0.05)。qPCR结果表明,犬尿酸代谢途径的吲哚胺2,3-双加氧酶2的表达量在SO组、RCT组、OVX+RCT组呈递增趋势:OVX+RCT组显著高于SO组,OVX+RCT组的3-羟基邻氨基苯甲酸3,4-双加氧酶的表达量显著高于RCT组和SO组,5-羟色胺代谢途径的单胺氧化酶A亚型和B亚型在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增,OVX+RCT组吲哚代谢途径的多巴脱羧酶的表达量显著高于SO组,而细胞色素P450氧化还原酶的表达量在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增,以上项目组间差异有统计学意义(P<0.001)。结论大鼠正常肩袖和RCT后修复的肌腱复合体中色氨酸代谢以犬尿酸代谢为主,5-羟色胺代谢次之;在RCT骨重塑中,5-羟色胺代谢途径改变最大,吲哚途径次之。犬尿酸代谢途径的烟酸、黄尿酸含量和5-羟色胺代谢途径的5-羟色氨酸、5-羟色胺、羟基吲哚乙酸、褪黑素及吲哚代谢途径的色氨醇、吲哚乳酸均与骨长入有关。因此,色氨酸代谢与骨长入有关,为RCT寻找潜在治疗靶点。

关键词：色氨酸撕裂伤骨质疏松肩袖撕裂骨插入

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共轭亚麻酸的生理功能及制备方法研究进展

中国油脂 2024年第3期49卷 54-61页

作者：鲍雅婷赵瑶瑶郑洲缪锦来自然资源部第一海洋研究所山东青岛266061 青岛大学基础医学院山东青岛266071

旨在为共轭亚麻酸(CLNA)在功能食品、保健品和药品等领域的应用提供科学的理论参考,综述了CLNA的生理功能和制备方法。CLNA具有抗癌、调节脂质代谢、抗炎、抗氧化、抗糖尿病等多种生理功能,在预防和治疗许多常见疾病中具有较大的研究潜... 详细信息

旨在为共轭亚麻酸(CLNA)在功能食品、保健品和药品等领域的应用提供科学的理论参考,综述了CLNA的生理功能和制备方法。CLNA具有抗癌、调节脂质代谢、抗炎、抗氧化、抗糖尿病等多种生理功能,在预防和治疗许多常见疾病中具有较大的研究潜力,特别是糖尿病、肥胖症以及乳腺癌、结肠癌等常见癌症。物理提取法制备CLNA时提取率较低,不适用于工业上大规模生产,化学合成法制备CLNA因需要底物和催化剂,后续纯化步骤烦琐,生物合成法和基因工程法可得到较高含量的CLNA,具有良好的发展前景。

关键词：共轭亚麻酸生理功能制备方法保健品

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三种手术方式治疗胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折的疗效比较

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中华创伤骨科杂志 2024年第7期26卷 569-574页

作者：林倩陈明瑞王天瑞曲迪张英泽于腾波陈进利青岛大学附属医院运动医学科青岛266000 泰安市中心医院脊柱外科泰安271000 青岛大学附属医院骨科青岛266000 青岛大学运动医学与健康研究所青岛266000

目的比较髓内钉、单纯钢板、钢板+后前螺钉联合固定治疗胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折的疗效。方法回顾性分析2015年6月至2022年6月青岛大学附属医院骨科收治的78例胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折患者资料。男46例,女32例;年龄为(4... 详细信息

目的比较髓内钉、单纯钢板、钢板+后前螺钉联合固定治疗胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折的疗效。方法回顾性分析2015年6月至2022年6月青岛大学附属医院骨科收治的78例胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折患者资料。男46例,女32例;年龄为(48.9±14.6)岁。根据固定方式不同分为3组:A组18例,胫骨端骨折采用髓内钉固定;B组40例,胫骨端骨折采用钢板固定;C组20例,胫骨端骨折采用钢板固定,后踝骨折采用后前螺钉固定。比较3组患者的手术时间、术中出血量、骨折愈合时间、术前及术后末次随访时美国足踝外科协会(AOFAS)踝-后足评分、Baird-Jackson评分、术后并发症发生情况。结果3组患者术前临床基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。所有患者术后随访(24.9±10.1)个月。A组患者的骨折愈合时间14.0(13.0,14.0)周显著长于B、C组患者的13(13,14)周,差异均有统计学意义(P所有患者末次随访时AOFAS踝-后足评分、Baird-Jackson评分均显著优于术前,差异均有统计学意义(P所有患者有7例发生并发症(骨折愈合不良3例、膝前痛4例),均为A组患者。结论与髓内钉固定治疗相比,钢板固定和钢板+后前螺钉联合固定治疗胫骨下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折可以获得更好的疗效。

关键词：胫骨骨折治疗踝关节髓内钉固定钢板固定后踝骨折

泛素特异性蛋白酶13(USP13)敲除对对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎性应激反应的影响

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营养学报 2024年第1期46卷 56-61页

作者：李柯颖陈旭刘慧茹杨晓明任广明青岛大学基础医学院青岛266071 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 安徽医科大学基础医学院合肥230032

目的研究泛素特异性蛋白酶13(ubiquitin-specific protease 13,USP13)在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的肝脏炎性应激反应中的作用。方法将Usp13^(+/+)小鼠和Usp13^(-/-)小鼠均设置为对照组(CON,APAP 0 h)和3个实验组(APAP 2 h、APAP 4 h和APAP 12 h),每组6对小鼠;饥饿18 h后实验组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP建立肝脏炎性应激反应模型,分别于2、4、12 h收集小鼠肝脏组织和血清;对照组在0 h收集小鼠肝脏组织和血清。HE染色观察肝脏组织病理变化;免疫组化观察肝脏组织中炎性细胞浸润情况;ELISA检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;Western blot检测肝脏细胞色素P4502E1(cytochrome p4502E1,CYP2E1)蛋白表达和谷胱甘肽(glutathione,GSH)试剂盒检测肝脏GSH变化水平;Western blot检测c-Jun N端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路的激活情况;qPCR检测炎性因子相关基因的转录水平表达。结果与对照组相比,APAP 2 h和4 h组小鼠肝脏CYP2E1蛋白表达无明显变化、GSH显著下降(P<0.0001)、JNK通路激活和炎症因子表达升高(P<0.001)。与对照组相比,APAP 12 h组小鼠肝脏发生明显坏死,F4/80^(+)细胞数量增加(P<0.001)、Ly6G^(+)细胞数量增加(P<0.01)以及血清ALT、AST水平升高(P<0.01)。但与Usp13^(+/+)小鼠相比,Usp13敲除对APAP诱导肝脏炎性应激反应的病理生理过程并无明显影响。结论USP13缺失不影响APAP诱导的肝脏炎性应激反应过程中的各种病理生理过程,这不同于USP13参与多种肝脏疾病发生发展的报道,提示USP13在肝脏疾病作用的复杂性。

关键词：泛素特异性蛋白酶13 对乙酰氨基酚小鼠肝脏炎性应激反应炎症代谢

介孔材料界面效应对混合硝酸盐复合相变材料热输运特性的影响

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复合材料学报 2024年第1期41卷 448-466页

作者：闫晨宣杨启容李昭莹马爽毛蕊贲昊玺青岛大学机电工程学院青岛266071 青岛大学生物多糖纤维成形与生态纺织国家重点实验室青岛266071 中国科学院青岛生物能源与过程研究所青岛266101

随着化石燃料的快速消耗,能源安全、气候变化问题日益突出,清洁、可持续能源发展技术及储能技术的研究成为热点。本文采用分子动力学模拟和实验研究相结合的方式,展开界面效应对混合硝酸盐复合相变材料(CPCM)热输运特性的影响研究。首... 详细信息

随着化石燃料的快速消耗,能源安全、气候变化问题日益突出,清洁、可持续能源发展技术及储能技术的研究成为热点。本文采用分子动力学模拟和实验研究相结合的方式,展开界面效应对混合硝酸盐复合相变材料(CPCM)热输运特性的影响研究。首先分别采用激光导热仪和差示扫描量热仪测试了CPCM的热导率和比热容。然后使用Materials Studio软件建立共晶状态下不同NaNO_(3)和KNO_(3)配比、不同骨架的CPCM模型,对其热导率和定压比热进行分子动力学模拟计算,通过径向分布函数、界面结合能和体热膨胀系数的变化分析了实验结果的内在机制,进而深入分析了界面效应与混合硝酸盐配比对热物性影响的竞争关系。结果表明:NaNO_(3)与KNO_(3)质量比为4∶6时离子间相互作用弱于其他配比,界面结合能最大,热导率最大。界面结合能的增加对热导率的增强强于离子间相互作用的减弱对热导率的削弱,界面效应在CPCM热导率的变化中占主导地位;CPCM定压比热受离子对比例变化及骨架材料变化的影响,界面结合能及离子间相互作用对定压比热没有明显影响。

关键词：介孔界面效应离子间相互作用热输运特性竞争关系混合硝酸盐复合相变材料