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C57BL/6小鼠大脑皮层区与基底神经节隆起区神经元突触发育过程比较

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 602-611页

作者：赵艳卢广泉杜金乐潘雨绮董子意康鑫高弋婷高方杨加周延安大学医学院组织学与胚胎学教研室陕西延安716099 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室陕西西安710032

目的:观察小鼠皮层区和基底神经节隆起(GE)区神经元突触发育过程,阐明兴奋性突触和抑制性突触在不同脑区的体内外发育差异。方法:C57BL/6雌鼠于妊娠第13.5~15.5天断颈处死后,经无菌操作取胚胎小鼠,显微镜下逐步分离获取胚胎小鼠脑组织... 详细信息

目的:观察小鼠皮层区和基底神经节隆起(GE)区神经元突触发育过程,阐明兴奋性突触和抑制性突触在不同脑区的体内外发育差异。方法:C57BL/6雌鼠于妊娠第13.5~15.5天断颈处死后,经无菌操作取胚胎小鼠,显微镜下逐步分离获取胚胎小鼠脑组织皮层区和GE区。体外原代培养胚胎小鼠神经元,于培养3、7、14和21 d分别收集细胞样品,并将其作为培养3、7、14和21 d组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠皮层区和GE区原代培养神经元中突触后表达蛋白突触后密度蛋白95(PSD95)及桥尾蛋白(Gephyrin) mRNA表达水平。免疫荧光法检测各组小鼠皮层区和GE区原代培养神经元中囊泡谷氨酸转运蛋白1(vGLUT1)、 PSD95、囊泡γ-氨基丁酸(GABA)转运蛋白(vGAT)及Gephyrin蛋白表达水平。免疫荧光法检测胚胎小鼠脑组织皮层区和GE区神经元中vGLUT1及vGAT蛋白表达水平。结果:与培养3 d组比较,培养14和21 d组小鼠皮层区和GE区原代培养神经元中PSD95及Gephyrin mRNA表达水平明显升高(P神经元中Gephyrin mRNA表达水平明显降低(P神经元中兴奋性突触及抑制性突触均初步发育,相关蛋白呈阳性表达;其中兴奋性突触相关蛋白阳性表达在皮层区神经元中更为明显,且突触前分子vGLUT1和突触后分子PSD95在皮层区神经元的胞体及突起部位均呈现共定位的特征;抑制性突触前分子vGAT蛋白和突触后分子Gephyrin蛋白在GE区神经元胞体及突起中也呈现共定位的特征,且突触前分子较相应的突触后分子蛋白阳性表达更明显。与皮层区比较,培养14 d组小鼠GE区原代培养神经元中vGLUT1和PSD95蛋白表达水平明显降低(P神经元突触相关蛋白阳性表达增加,兴奋性突触和抑制性突触进一步成熟并完善。皮层区和GE区原代培养神经元的胞体及突起部位均形成了丰富的突触前后对应的表达模式,突触结构逐步发育良好,且突触前分子较相应的突触后分子蛋白阳性表达更明显。与皮层区比较,培养21 d组小鼠GE区原代培养神经元中vGLUT1和PSD95蛋白表达水平均明显降低(P神经元中vGLUT1蛋白表达水平明显降低(P神经元的突触发育具有明显的差异性,皮层区兴奋性突触发育较早,GE区抑制性突触发育较早。突触的脑区特异性发育提示不同细胞类型的神经疾病可能具有不同的发育来源。

关键词：神经元发育兴奋性突触抑制性突触皮层区基底神经节隆起区

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成年大鼠脑桥三叉神经束局部脱髓鞘诱发三叉神经痛样行为

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陆军军医大学学报 2024年第17期46卷 1943-1950页

作者：文菊梅齐建国四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

目的探究成年大鼠脑桥三叉神经束(pontine trigeminal tract,PTT)局部脱髓鞘能否诱发三叉神经痛样行为。方法利用脑立体定位微量注射技术向250~270 g雄性SD大鼠PTT区域注射1%溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)或1×PBS,分别... 详细信息

目的探究成年大鼠脑桥三叉神经束(pontine trigeminal tract,PTT)局部脱髓鞘能否诱发三叉神经痛样行为。方法利用脑立体定位微量注射技术向250~270 g雄性SD大鼠PTT区域注射1%溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)或1×PBS,分别建立PTT脱髓鞘模型组(LPC组)和对照组。通过髓鞘荧光染色评估PTT区域脱髓鞘改变情况。采用行为学实验检测大鼠缩头反应机械刺激阈值、单侧眼睑缩窄时间和快速抚面次数。通过腹腔注射给予大鼠卡马西平(50 mg/kg)药物处理,评估其行为学改变。结果以Bregma为坐标原点,于前后径(axterior-posterior,AP)-9.86 mm、内外径(medial-lateral,ML)0 mm和背腹径(dorsal-ventral,DV)0 mm处左侧18°倾斜脑立体定位仪的操作臂,使玻璃微电极下行9.22 mm后,以250 nL/min的速度注射250 nL的1%LPC,能够稳定可靠地建立成年大鼠PTT局部脱髓鞘模型。髓鞘荧光染色结果显示成年大鼠PTT局部脱髓鞘模型中脱髓鞘峰点为造模后第7天。行为学实验发现,与对照组相比,引发LPC组大鼠缩头反应的Air-puff气体刺激阈值和von Frey纤维丝刺激阈值显著降低(P神经痛样行为。

关键词：三叉神经痛脑桥三叉神经束脱髓鞘溶血磷脂酰胆碱

神经调节蛋白1在孤独症谱系障碍发病中的作用

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中国临床解剖学杂志 2024年第3期42卷 353-355页

作者：邓亚楠李延芳张应花新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003 新乡市分子神经病学重点实验室河南新乡453003

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)是儿童时期常见的神经发育障碍性疾病,其特征是社交行为障碍,重复的行为和兴趣。ASD的病因尚未明确。神经调节蛋白1(neuregulin1,NRG1)参与ASD发病的过程越来越引起学者重视。NRG1在神经... 详细信息

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder,ASD)是儿童时期常见的神经发育障碍性疾病,其特征是社交行为障碍,重复的行为和兴趣。ASD的病因尚未明确。神经调节蛋白1(neuregulin1,NRG1)参与ASD发病的过程越来越引起学者重视。NRG1在神经发育、可塑性和修复中起重要作用。NRG1通过影响γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)能神经元及雪旺细胞参与ASD的发病过程,这可能与其参与调节突触可塑性、神经元兴奋性、髓鞘形成及神经系统发育与修复等作用有关。

关键词：孤独症谱系障碍神经调节蛋白1 GABA能神经元雪旺细胞

mTOR和ERK/MAPK信号通路调控自噬在孤独症发病中的作用

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中国临床解剖学杂志 2024年第2期42卷 225-228页

作者：李延芳邓亚楠王婷张应花新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系河南新乡453003 新乡市分子神经病学重点实验室河南新乡453003

孤独症是一种以重复刻板样行为和社交缺陷为主要特征的神经发育障碍性疾病,发病率高的特点使其逐渐成为研究的热点。中国与西方国家孤独症的发病率相似,约为1%,位于儿童精神疾病的前列^([1])。目前认为孤独症由环境和遗传因素共同决定,... 详细信息

孤独症是一种以重复刻板样行为和社交缺陷为主要特征的神经发育障碍性疾病,发病率高的特点使其逐渐成为研究的热点。中国与西方国家孤独症的发病率相似,约为1%,位于儿童精神疾病的前列^([1])。目前认为孤独症由环境和遗传因素共同决定,病因复杂,具体机制尚不明确。随着研究的深入,自噬在孤独症发病机制中的作用受到广泛关注。

关键词：孤独症自噬 mTOR信号通路 ERK/MAPK信号通路

多参数MRI随访观察遗传性痉挛性截瘫5型患者脊髓微结构改变

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中国医学影像技术 2024年第1期40卷 14-21页

作者：林晨琳张帆李猛城付莹刘颖福建医科大学附属第一医院医学影像科福建福州350005 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心医学影像科福建福州350212 福建医科大学附属第一医院神经内科神经病学研究所福建省分子神经病学重点实验室福建福州350005

目的评估多参数MRI随访观察遗传性痉挛性截瘫5型(SPG5)患者脊髓微结构改变的价值。方法前瞻性纳入11例接受颈胸段脊髓MR检查及痉挛性截瘫评价量表(SPRS)评分的SPG5患者,随访1年后进行第2次MR检查及SPRS评分,比较2次SPRS评分、脊髓整体... 详细信息

目的评估多参数MRI随访观察遗传性痉挛性截瘫5型(SPG5)患者脊髓微结构改变的价值。方法前瞻性纳入11例接受颈胸段脊髓MR检查及痉挛性截瘫评价量表(SPRS)评分的SPG5患者,随访1年后进行第2次MR检查及SPRS评分,比较2次SPRS评分、脊髓整体结构及脊髓微结构变化。结果11例SPG5患者2次SPRS评分结果差异无统计学意义(P>0.05)。相比首次颈胸段脊髓MRI,第2次MRI显示脊髓萎缩程度加重;首次与第2次MRI所测C4右侧皮质脊髓束(CST)轴向弥散系数(AD)差异有统计学意义(t=3.987,P学意义(P均>0.05);其余椎体脊髓白质、后索、左/右侧CST的各向异性分数(FA)、平均弥散系数(MD)、AD、径向弥散系数(RD)及T1值,以及C1~T9椎体截面积(CSA)、左右径及前后径差异均无统计学意义(P均>0.05)。第2次MRI显示颈段脊髓白质、后索及CST的FA均低于、而RD均高于首次(P均>0.05)。结论多参数MRI可用于随访观察SPG5患者脊髓微结构变化。

关键词：痉挛性截瘫,遗传性脊髓磁共振成像

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《神经精神系统疾病》整合课程期末考试实践研究

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中国继续医学教育 2024年第3期16卷 11-16页

作者：陈彦如刘继红李小凤陈阳美重庆医科大学第二临床学院神经病学教研室重庆400072

目的探讨《神经精神系统疾病》整合课程应用美国执业医师考试(United States Medical Licensing Examination,USMLE)模式试题实施期末考试的可行性及有效性。方法选取重庆医科大学第二临床学院2016级临床医学“5+3”学制学生130名为研... 详细信息

目的探讨《神经精神系统疾病》整合课程应用美国执业医师考试(United States Medical Licensing Examination,USMLE)模式试题实施期末考试的可行性及有效性。方法选取重庆医科大学第二临床学院2016级临床医学“5+3”学制学生130名为研究对象,于2020年2—9月通过分析USMLE试题特点、梳理课程知识点、开发USMLE模式试题、召开命题教研会等步骤编排USMLE模式期末考试题,以保证期末试题均符合USMLE模式并覆盖课程所有需“掌握”的知识点,观察分析考试结果。结果学生平均成绩(111.57±15.72)分,全卷难度适中(0.74)、区分度良好(0.31)、信度适中(0.72),有效达到考试目的。USMLE模式试题受到学生广泛好评(好评率91%)。结论USMLE模式试题契合器官系统整合教学宗旨,实践证实应用其实施期末考试的可行性及有效性,期待USMLE模式试题在中国医学本科教育期末考试中的应用。

关键词：器官系统整合教学医学本科教育期末考试 USMLE 课程改革神经精神系统

脱细胞异体神经移植物联合电针对坐骨神经损伤大鼠脊神经节的保护作用及机制

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解剖学报 2024年第2期55卷 143-149页

作者：周泽宇马蕴涵李佳瑞胡余梦袁博张银娟于晓敏付秀美承德医学院基础医学院人体解剖学教研室河北承德067000 承德医学院中医系针灸推拿教研室河北承德067000 承德医学院教务处河北承德067000 河北省神经损伤与修复重点实验室河北承德067000

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除1... 详细信息

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除10 mm制备SNI模型。ANA组将制备好的ANA连接在损伤神经的两断端处。联合组于ANA连接术后2 d采用电子针疗仪电针“环跳穴”和“阳陵泉穴”,15 min/d,7 d为1个疗程,共4个疗程。电生理检测各组大鼠坐骨神经传导速度,评估受损轴突再生情况;尼氏染色观察脊神经节中神经元的形态结构;Western blotting和免疫荧光法检测脊神经节中神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经传导速度明显降低(P神经节神经元中的尼氏体因肿胀、溶解导致结构不完整,数量显著减少(P神经传导速度明显增加(P神经节神经元中尼氏体损伤减弱,数量明显增加(P神经传导速度显著增加(P神经节神经元中尼氏体形态较规则,数量明显增加(P神经传导速度,改善神经节中神经元的形态结构,发挥对脊神经节神经元的保护作用,其机制可能与提高神经元中NGF和BDNF蛋白的表达,尤其是NGF蛋白的表达相关。

关键词：脱细胞异体神经移植物电针脊神经节神经生长因子脑源性神经营养因子坐骨神经损伤免疫印迹法大鼠

采用流式细胞分选术区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞

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海军军医大学学报 2024年第4期45卷 448-453页

作者：周锦涛俞仲望曹莉海军军医大学(第二军医大学)基础医学院神经生物学教研室上海200433

目的建立通过流式细胞分选术区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞的方法。方法用成年C57BL/6小鼠建立双侧颈总动脉狭窄模型,分别采用集落刺激因子1受体抑制剂PLX5622或氯膦酸盐脂质体处理。将分离、匀浆、重悬后的小鼠脑和脊髓... 详细信息

目的建立通过流式细胞分选术区分中枢神经系统内小胶质细胞和浸润巨噬细胞的方法。方法用成年C57BL/6小鼠建立双侧颈总动脉狭窄模型,分别采用集落刺激因子1受体抑制剂PLX5622或氯膦酸盐脂质体处理。将分离、匀浆、重悬后的小鼠脑和脊髓组织进行Percoll密度梯度离心,得到单核细胞悬液。采用CD45、CD11b和淋巴细胞抗原6家族成员C(Ly6C)抗体进行流式分选,获得小胶质细胞(CD11b^(+)CD45^(low)Ly6C^(-)细胞)和浸润巨噬细胞(CD11b^(+)CD45^(high)Ly6C^(+)细胞),并验证PLX5622和氯膦酸盐脂质体2种给药范式获得的处理效果。结果通过CD45、CD11b和Ly6C抗体可以有效区分中枢神经系统中小胶质细胞和浸润巨噬细胞。与对照组比较,PLX5622处理后小胶质细胞数量减少(P=0.001),而氯膦酸盐脂质体处理后浸润巨噬细胞数量减少(P神经系统中小胶质细胞和浸润巨噬细胞,PLX5622和氯膦酸盐脂质体2种给药范式可分别选择性清除中枢神经系统内的小胶质细胞和浸润巨噬细胞。

关键词：小胶质细胞浸润巨噬细胞流式细胞分选术双侧颈总动脉狭窄 PLX5622 氯膦酸盐脂质体

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方剑乔教授针灸治疗带状疱疹后遗神经痛经验

World Journal of Acupuncture-Moxibustion 2024年第1期34卷 63-66页

作者：王晨烨边致远李晓宇孙若晗陈炜吉梁宜方剑乔浙江中医药大学第三临床医学院针灸神经生物学实验室浙江省针灸神经病学重点实验室杭州310053 浙江中医药大学附属第三医院杭州310053

This article introduces the clinical experience of Professor Jian-qiao FANG in treatment of postherpetic neuralgia(PHN)with acupuncture and ***-qiao FANG believes that PHN is characterized by“stagnation”and“deficiency”in pathogenesis and it is treated by“resolving stasis”and“replenishing for deficiency”.Electroacupuncture is predominated in treatment and the combined regimen of various techniques of acupuncture and moxibustion is adopted in therapeutic *** to the pain characteristics of patients,the acupuncture and moxibustion prescription is drafted for resolving stasis and masses,replenishing for deficiency and regulating the *** acupoints include Ashi points,Jiaji(EX-B2),Hegu(LI4),Waiguan(TE5),Zusanli(ST36),Sanyinjiao(SP6),Shenting(GV24),Baihui(GV20)and Sishencong(EX-HN1).In treatment with electroacupuncture,the stimulation parameters are selected flexibly according to different pain *** frequency of 2/100 Hz is the first option,100 Hz is used for the acute seizure and 2 Hz is for mild *** electric stimulation,the treatment with roller type of dermal needle and moxibustion can be applied to ensure clinical efficacy.

关键词： Postherpetic neuralgia Acupuncture-moxibustion Electroacupuncture Experience Dose-effect relation