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癫痫对幼年小鼠大脑皮质和海马神经元突起及突触的影响

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神经解剖学杂志 2024年第4期 478-484页

作者：邓同兴王敏丽常成江丽范文娟漯河医学高等专科学校解剖教研室漯河医学高等专科学校第二附属医院儿科郑州大学基础医学院人体解剖学系

目的:探讨癫痫持续状态(SE)对幼年小鼠大脑皮质和海马区神经元突起及突触的影响。方法:利用腹腔注射氯化锂和匹罗卡品方法制备幼年SE小鼠模型，用Morris水迷宫实验检测小鼠行为学变化，免疫荧光染色法观察小鼠大脑皮质和海马区神经元轴... 详细信息

目的:探讨癫痫持续状态(SE)对幼年小鼠大脑皮质和海马区神经元突起及突触的影响。方法:利用腹腔注射氯化锂和匹罗卡品方法制备幼年SE小鼠模型，用Morris水迷宫实验检测小鼠行为学变化，免疫荧光染色法观察小鼠大脑皮质和海马区神经元轴突、树突及突触连接形态学变化，透射电镜观察小鼠海马区锥体神经元突触的超微结构变化。结果:小鼠Ⅳ级以上发作率为80%,死亡率为25%。SE小鼠逃逸潜伏期延长(P<0.05),探寻平台路程轨迹明显延长且复杂化，且目标象限停留时间和穿越平台次数均明显减少(P<0.05)。两组小鼠大脑皮质和海马区均发现轴突神经丝标记蛋白SMI312和微管相关蛋白2(MAP2)阳性表达，且SE组轴突神经丝和神经元树突长短不一，排列比较密集散乱。SE组小鼠大脑海马区突触素(SYP)阳性表达增多，且SYP阳性斑点数量明显增加(P<0.01)。SE组突触囊泡数量增加，且突触后致密带(PSD)厚度明显降低(P<0.01)。结论:SE可能导致幼年小鼠大脑皮质和海马区突触急性损伤，诱发突触囊泡循环障碍，进而引起轴突和树突网络广泛的破坏和紊乱，突触发生反应性或代偿性重建。

关键词：癫痫持续状态海马突触突触囊泡突触重建小鼠

芍药苷调控血管内皮生长因子对小鼠宫颈癌组织病理变化的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第19期40卷 2875-2879页

作者：程亚高伟王钟辉商丘医学高等专科学校病理教研室

目的探讨芍药苷通过靶向调控血管内皮生长因子（VEGF）对宫颈癌移植瘤小鼠肿瘤组织病理变化的影响。方法将小鼠随机分为模型组（构建宫颈癌移植瘤小鼠模型）、芍药苷组(建模后给予100 mg·kg-1芍药苷)、Vector组(建模后给予100 mg·k... 详细信息

目的探讨芍药苷通过靶向调控血管内皮生长因子（VEGF）对宫颈癌移植瘤小鼠肿瘤组织病理变化的影响。方法将小鼠随机分为模型组（构建宫颈癌移植瘤小鼠模型）、芍药苷组(建模后给予100 mg·kg-1芍药苷)、Vector组(建模后给予100 mg·kg-1芍药苷+瘤体注射Vector质粒)、VEGF组(建模后给予100 mg·kg-1芍药苷+瘤体注射过表达VEGF质粒),建模成功后每隔7 d测量肿瘤体积，用免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）,用蛋白质印迹法检测肿瘤组织增殖、凋亡及转移相关蛋白的表达水平，用原位末端转移酶标记法检测肿瘤组织的细胞凋亡率。结果模型组、芍药苷组、Vector组和VEGF组建模成功后第28天的肿瘤体积分别为（1 025.50±81.38）、（722.89±49.67）、（720.36±64.01）和（946.79±89.77） mm3,CD34-MVD水平分别为118.92±6.93、71.67±7.45、72.14±5.55和86.74±8.86,VEGF蛋白相对表达水平分别为1.08±0.09、0.56±0.09、0.54±0.06和0.88±0.13,细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）蛋白相对表达水平分别为0.93±0.14、0.44±0.03、0.46±0.07和0.81±0.09,基质金属蛋白9（MMP-9）蛋白相对表达水平分别为1.17±0.12、0.62±0.07、0.64±0.08和0.90±0.07,细胞凋亡率分别为（4.13±0.47）%、（22.16±2.84）%、（21.24±3.42）和（8.60±0.96）%;芍药苷组的上述指标与VEGF组和模型组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P学变化，抑制肿瘤生长，从而缓解小鼠宫颈癌进程。

关键词：芍药苷宫颈癌血管内皮生长因子组织病理抗血管生成

苦杏仁苷对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第7期40卷 1019-1023页

作者：闫萌萌徐林丽刘岩岩张艳沧州医学高等专科学校内科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校外科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校儿科教研室河北沧州061000 沧州医学高等专科学校科技实验中心河北沧州061000

目的研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3mg·kg^(-1))、苦杏仁苷高剂量组(10mg·kg^(-1))... 详细信息

目的研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3mg·kg^(-1))、苦杏仁苷高剂量组(10mg·kg^(-1))、CompoundC组(2.5mg·kg^(-1)AMPK抑制药CompoundC)、苦杏仁苷高剂量+CompoundC组(10mg·kg^(-1)苦杏仁苷+2.5mg·kg^(-1)/CompoundC),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠用连续喂养高脂高糖饲料+腹腔注射60mg·kg^(-1)1%链脲佐菌素(STZ)方法进行DKD造模,造模成功后第2天给予相应药物处理,每天1次,持续给予8周,空白组、模型组均给予等体积0.9%NaCl。用二喹啉甲酸(BCA)法检测大鼠24h尿蛋白含量,用血糖仪检测大鼠空腹血糖,用全自动生化分析仪检测大鼠血肌酸酐和血尿素氮水平,用原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平,用蛋白质印迹(WesternBlot)法测定大鼠肾组织AMPK/mTOR通路、自噬及凋亡蛋白的表达水平。结果空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组、Compound C组和苦杏仁苷高剂量+CompoundC组的肾小管损伤评分分别为(0.43±0.05)、(3.26±0.24)、(1.92±0.14)、(0.73±0.06)、(3.81±0.29)和(1.78±0.12)分,细胞凋亡率分别为(5.23±0.41)%、(26.35±2.17)%、(16.76±1.42)%、(6.13±0.53)%(35.68±3.08)%和(15.92±1.15)%,磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR分别为0.31±0.03、0.80±0.08、0.60±0.06、0.38±0.04,0.92±0.08和0.69±0.07,磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK分别为0.91±0.08、0.39±0.04、0.56±0.06、0.88±0.07、0.23±0.02和0.52±0.05。模型组的上述指标与空白组、苦杏仁苷低剂量组、苦杏仁苷高剂量组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论苦杏仁苷可通过激活AMPK/mTOR信号通路,从而减轻DKD大鼠肾小管上皮细胞损伤。

关键词：苦杏仁苷腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白糖尿病肾病肾小管上皮细胞

灰树花多糖通过LncRNA HULC/miR-186-5p轴调控胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭

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食品工业科技 2024年第14期45卷 335-343页

作者：于静段子朋徐松涛漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:分析灰树花多糖(Grifola frondose polysaccharide,GFP)对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:将对数期GBC-SD细胞随机分组:对照组、GFP组(0.5、1、2µg/mL GFP)、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率;Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭;Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平;qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平;Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果:0.25~8µg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用;与对照组比较,0.5、1、2µg/mL的GFP(极)显著(P学差异(P>0.05);与shNC组比较,shHULC组HULC相对表达水平极显著(P<0.01)降低,miR-186-5p相对表达水平极显著(P<0.01)增加,细胞存活率、迁移数目、侵袭数目极显著(P<0.01)降低,Cylin D1、MMP-2和MM-9水平极显著下调(P<0.01);与GFP+pcDNA组比较,GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低(P<0.05),迁移数目、侵袭数目极显著增加(P<0.01),Cylin D1、MMP-2和MM-9水平显著上调(P<0.05);与GFP+pcDNA给药组比较,GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加(P<0.01),miR-186-5p水平极显著下调(P<0.01)。结论:GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。

关键词：灰树花多糖 LncRNA HULC miR-186-5p 胆囊癌增殖迁移侵袭

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基于Nrf2/ROS信号通路探讨岩藻多糖对食管癌细胞增殖的抑制作用

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食品工业科技 2024年第11期45卷 316-322页

作者：马永超程琦吴华陆琼金少举漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻... 详细信息

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻多糖对细胞增殖以及Nrf2/ROS信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对瘤体的瘤重、瘤体积及Nrf2、HO-1、NQO-1水平的影响。结果:1~16µg/mL岩藻多糖极显著抑制ECA109细胞增殖,48 h IC50为3.26µg/mL。与对照组(0.1%DMSO)相比,1、2、4µg/mL岩藻多糖处理后的ECA109细胞出现核凝聚、染色质不规则收缩、凋亡小体等明显的凋亡特征,(极)显著促进ECA109细胞凋亡,极显著下调Bcl-2表达水平,极显著上调Bax、Cleaved-caspase-3表达水平,极显著增加ROS水平,极显著降低Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05,P<0.01);Nrf2过表达能显著下调岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖效果,显著下调ROS水平,显著上调Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05)。体内实验显示,50、100 mg/kg岩藻多糖极显著抑制瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体Nrf2、HO-1、NQO-1水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控Nrf2/ROS信号通路有关。

关键词：岩藻多糖 Nrf2/ROS 信号通路食管癌细胞增殖移植瘤

痕迹性眨眼条件反射习得和巩固阶段海马中间神经元的放电活动变化

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陆军军医大学学报 2024年第16期46卷 1874-1881页

作者：杨丹阳张维维四川中医药高等专科学校临床医学院诊断学教研室四川绵阳621000 四川中医药高等专科学校医学基础部生理学教研室四川绵阳621000

目的研究小鼠背侧海马中间神经元在联合型记忆习得和巩固2个阶段的放电活动变化及其特征。方法以痕迹性眨眼条件反射(trace eyeblink conditioning,tEBC)作为联合型记忆行为模型,将18只野生型C57BL/6小鼠(雄性,10~12周龄,体质量22~25 g... 详细信息

目的研究小鼠背侧海马中间神经元在联合型记忆习得和巩固2个阶段的放电活动变化及其特征。方法以痕迹性眨眼条件反射(trace eyeblink conditioning,tEBC)作为联合型记忆行为模型,将18只野生型C57BL/6小鼠(雄性,10~12周龄,体质量22~25 g)通过简单随机抽样分为配对组(n=9)和假配对组(n=9)。配对组每天接受配对给予的条件刺激(conditioned stimulus,CS)和非条件刺激(unconditioned stimulus,US),二者的配对关系为CS结束后250 ms给予US。假配对组每天接受同样数量的CS和US,但二者不存在时间上的配对关系。连续训练4 d,配对组小鼠建立tEBC,表现出条件眨眼反应(conditioned eyeblink response,CR)。在每天的训练过程中和训练后1.5 h,利用微电极阵列在体记录小鼠背侧海马神经元的放电活动。根据神经元的峰电位发放频率和峰电位谷-峰波宽鉴定出中间神经元(n=105),并分析其在训练期间和训练后慢波睡眠期间的放电活动变化。结果①在CR习得训练早期(第1、2天),CS能够诱发背侧海马中间神经元出现显著增强的发放活动(P学意义。结论背侧海马中间神经元在联合型记忆的习得和巩固阶段会展现出不同的放电变化。

关键词：海马中间神经元眨眼条件反射慢波睡眠尖波涟漪波

桃叶珊瑚苷对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响及机制

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中国药房 2024年第8期35卷 918-924页

作者：司运辉蒋凯钱立全陈永顺别会杰商丘医学高等专科学校解剖与组胚教研室河南商丘476000 商丘医学高等专科学校生理学教研室河南商丘476000 商丘医学高等专科学校药理学教研室河南商丘476000

目的探讨桃叶珊瑚苷(Auc)调节周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)/周期蛋白B1(CCNB1)/Polo样激酶1(PLK1)信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为对象,将其分为对照组,Auc低、中、高浓度组(Auc-L、Auc-M、Auc-H组... 详细信息

目的探讨桃叶珊瑚苷(Auc)调节周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)/周期蛋白B1(CCNB1)/Polo样激酶1(PLK1)信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法以人乳腺癌细胞MCF-7为对象,将其分为对照组,Auc低、中、高浓度组(Auc-L、Auc-M、Auc-H组,20、40、80μmol/L的Auc),Auc-H+pcDNA-NC组(80μmol/L的Auc+转染pcDNA-NC质粒),Auc-H+pcDNA-CDK1组(80μmol/L的Auc+转染pcDNA-CDK1质粒),检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移能力,凋亡情况及周期分布,凋亡、上皮-间充质转化(EMT)、CDK1/CCNB1/PLK1信号通路相关蛋白的表达情况。以BALB/c裸鼠为对象,通过皮下接种MCF-7细胞悬液建立移植瘤模型,并将其分为对照组和Auc组(每组12只),检测各组裸鼠肿瘤体积、质量及肿瘤组织中CDK1/CCNB1/PLK1信号通路相关蛋白的表达情况。结果与对照组细胞相比,Auc各浓度组的细胞克隆形成数、增殖率、细胞侵袭数、划痕愈合率、G1/G0期和S期细胞占比以及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、神经钙黏素、纤维连接蛋白、CDK1、CCNB1、PLK1蛋白的表达水平均显著降低(P学意义(P>0.05),而Auc-H+pcDNA-CDK1组细胞上述指标则显著逆转(P<0.05)。与对照组裸鼠相比,Auc组裸鼠肿瘤体积、质量以及肿瘤组织中CDK1、CCNB1、PLK1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论Auc能抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,诱导细胞周期阻滞,抑制EMT进程,该作用可能与抑制CDK1/CCNB1/PLK1信号通路激活有关。

关键词：桃叶珊瑚苷乳腺癌恶性生物学行为 CDK1/CCNB1/PLK1信号通路

富硒羊肚菌多糖的制备及其体外抗肿瘤活性探究

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食品工业科技 2024年第15期45卷 213-222页

作者：李贝贝王慧琴孙仪征郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试... 详细信息

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试验、集落形成试验、划痕试验和Transwell试验来评价Se-MPS的抗肿瘤活性。采用RT-qPCR法、Western blot法和免疫荧光法评价Se-MPS的潜在抗肿瘤机制。单因素和响应面试验结果显示,富硒羊肚菌粗多糖提取的最佳工艺参数为:提取时间2.5 h、液料比45:1(mL/g)、提取温度82℃,得率为7.95%。纯化后,Se-MPS的总糖含量达到95.86%,硒含量高达76.07±0.32 mg/g。此外,Se-MPS显著降低了HepG2细胞的集落形成效率、细胞迁移率和侵袭细胞数目(P<0.05)。同时,Se-MPS抑制了PI3K/Akt通路传导,下调了葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达,并降低了细胞的葡萄糖摄取量。研究结果表明,通过对提取时间、液料比及提取温度的优化,可改善富硒羊肚菌粗多糖得率。此外,通过调控PI3K/Akt通路,富硒羊肚菌多糖可发挥出较强的抗肿瘤活性。这项研究为富硒羊肚菌多糖的抗肿瘤活性提供了证据,并为相关功能性食品的开发提供了参考。

关键词：硒羊肚菌多糖化学组成响应面优化抗肿瘤活性

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六堡砖茶多糖制备及其免疫调节活性

食品工业科技 2024年第14期45卷 327-334页

作者：孙仪征王慧琴李贝贝郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖... 详细信息

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖茶多糖对RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量,检测核因子κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)和AMP依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK)信号通路相关基因及蛋白表达,评价纯化后的茶多糖的体外免疫调节活性。结果:六堡砖茶多糖的最佳提取工艺为:提取温度91.11℃,料液比1:15.45(g/mL),乙醇浓度82.84%(v/v)。在此条件下,茶多糖得率为8.62%。细胞实验显示六堡砖茶多糖可显著增强RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量(P<0.05),显著激活NF-κB和AMPK信号通路(P<0.05),显著上调诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的mRNA表达水平(P<0.05)。其中,高剂量茶多糖效果更佳。结论:通过优化提取温度、料液比及乙醇浓度条件,可有效提高六堡砖茶多糖得率,并可通过激活NF-кB/AMPK通路发挥免疫调节作用。该研究结果为六堡砖茶多糖活性深入探究和应用提供了研究基础。

关键词：六堡砖茶茶多糖提取响应面优化免疫调节

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