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中年男性精子DNA碎片率对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

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解剖学报 2024年第3期55卷 345-348页

作者：王平王静陈先兵陈曦北京大学人民医院妇产科生殖医学中心北京100044

目的探讨中年男性精子DNA碎片率(DFI)与精液质量和体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法共收集180例接受常规体外受精-胚胎移植治疗且男性年龄>38岁的精液标本。根据DFI的阈值分成(0.05)。结论DFI可以作为中年男性精液常规分析的重要... 详细信息

目的探讨中年男性精子DNA碎片率(DFI)与精液质量和体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法共收集180例接受常规体外受精-胚胎移植治疗且男性年龄>38岁的精液标本。根据DFI的阈值分成(0.05)。结论DFI可以作为中年男性精液常规分析的重要参考指标,虽然DFI影响优质胚胎率,但与辅助生殖治疗的临床妊娠结局无关。

关键词：精子DNA碎片率精子活力精子染色质扩散形态学观察人

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第1期32卷 51-58页

作者：王睿郭清民尹正芳熊正方青海省人民医院生殖医学中心西宁810000 青海省人民医院妇科西宁810000

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-I... 详细信息

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

关键词： miR-27a 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 颗粒细胞多囊卵巢综合征

早卵泡期长效长方案促排卵过程中内源性黄体生成素升高后拮抗剂的应用对临床结局的影响

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郑州大学学报（医学版） 2024年第2期59卷 212-215页

作者：张宜瑄王淑娜路锦张翠莲张少娣河南省人民医院生殖医学中心郑州450003

目的:探讨早卵泡期长效长方案控制性促排卵过程中出现内源性黄体生成素(LH)升高后拮抗剂的应用对新鲜周期移植临床结局的影响。方法:回顾性分析2016年9月至2022年12月于河南省人民医院生殖医学中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎... 详细信息

目的:探讨早卵泡期长效长方案控制性促排卵过程中出现内源性黄体生成素(LH)升高后拮抗剂的应用对新鲜周期移植临床结局的影响。方法:回顾性分析2016年9月至2022年12月于河南省人民医院生殖医学中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植助孕的早卵泡期长效长方案出现内源性LH升高的240个周期,根据是否添加拮抗剂分为两组,并采用倾向性评分匹配进行1∶1匹配,最终纳入194个周期,其中A组(添加拮抗剂)97个周期,B组(未添加拮抗剂)97个周期。比较两组患者促排卵过程中相关临床指标及新鲜周期移植临床结局的差异。结果:A组Gn应用时间、Gn启动日LH、 hCG前日LH水平、成熟卵数均高于B组,但hCG日LH水平低于B组(P0.05)。结论:早卵泡期长效长方案控制性促排卵出现内源性LH升高时添加拮抗剂可以有效抑制LH水平,获得较为理想的临床结局。

关键词：早卵泡期长效长方案黄体生成素拮抗剂新鲜周期倾向性评分

丈夫淋巴细胞主动免疫治疗对不明原因复发性流产和反复着床失败的疗效

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武汉大学学报（医学版） 2024年第6期45卷 710-716页

作者：张燕赵璟李洁肖卓妮武汉大学人民医院生殖医学中心湖北武汉430060

目的:观察分析丈夫淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)对不明原因复发性流产(uRSA)和反复着床失败(RIF)的妊娠结局的影响。方法:回顾性收集、分析具有uRSA、RIF的女性接受丈夫外周血淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体转归情况及其妊娠结局,共收集2... 详细信息

目的:观察分析丈夫淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)对不明原因复发性流产(uRSA)和反复着床失败(RIF)的妊娠结局的影响。方法:回顾性收集、分析具有uRSA、RIF的女性接受丈夫外周血淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体转归情况及其妊娠结局,共收集2019年1月—2020年12月在武汉大学人民医院生殖中心250例因uRSA和RIF而行LIT的患者作为研究对象,其中uRSA组181例,RIF组69例。结果:(1)经过LIT后,治疗患者的整体封闭抗体转阳率为86.8%;其中uRSA组的封闭抗体转阳率为86.2%,RIF组的封闭抗体转阳率为88.4%;(2)经过LIT治疗后,uRSA患者的妊娠率为90.06%,流产率为7.66%,活产率为89.57%;RIF患者的妊娠率为66.67%,流产率为6.52%,活产率为93.48%。uRSA患者封闭抗体转阳组(+)与持续阴性组(-)的临床妊娠率、流产率、活产率差异无统计学意义(P>0.05);RIF患者封闭抗体转阳组(+)与持续阴性组(-)相比,临床妊娠率明显提高(72.1%vs 25.0%,P0.05);(3)57名uRSA患者经过LIT治疗后行IVF助孕,其中<38岁的患者47名,与≥38岁患者相比,其获卵数(14.38±6.31 vs 9.20±5.08)、2PN受精数(10.28±4.89 vs 6.20±3.82)、囊胚形成率(56.61%vs 38.64%)、胚胎着床率(51.04%vs 22.73%)、临床妊娠率(85.11%vs 50.00%)、活产率(92.5%vs 60.0%)明显升高,流产率降低(7.5%vs 40.0%),差异具有统计学意义(均P<0.05);(4)64名RIF患者经过LIT治疗后行IVF助孕,其中<38岁的患者56名,与≥38岁患者相比,其获卵数(13.39±6.48 vs 6.50±5.10,P=0.006)、2PN受精数(9.98±5.23 vs 4.75±3.07,P=0.008)、可移植胚胎数(6.18±3.54 vs 2.88±1.27,P=0.012)较高且有统计学差异;而胚胎着床率(44.74%vs 20.00%,P=0.068)、临床妊娠率(69.64%vs 37.50%,P=0.073)、活产率(94.87%vs 100%,P=0.688)较高,流产率较低(5.13%vs 0%,P=0.688),但差异没有统计学意义。结论:LIT能明显改善uRSA与RIF患者的妊娠结局。LIT强化治疗后封闭抗体的转阳情况对于RIF患者的临床妊娠率明显相关。uRSA和RIF经过LIT治疗后行IVF助孕的患者中,<38岁的患者妊娠结局有明显改善,≥38岁高龄患者由于胚胎非整倍体高,PGT-A联合LIT对改善这部分患者预后更好。

关键词：淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产反复着床失败妊娠结局

骨髓干细胞来源外泌体通过促进海马能量代谢和微血管新生改善小鼠抑郁样行为

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中华神经医学杂志 2024年第1期23卷 2-9页

作者：胡维佳蔡黎黎朱小兰罗一烽曹志宏李月峰江苏大学附属宜兴医院影像科宜兴214200 江苏大学附属第四医院生殖医学中心镇江212001

目的:观察骨髓间充质干细胞来源外泌体(BMSC-Exo)对抑郁症模型小鼠的海马微血管、能量代谢及其行为学的改善作用。方法:(1)分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,提取BMSC-Exo。采用透射电镜观察BMSC-Exo的形态,采用Zetaview分析仪测定BMSC-Ex... 详细信息

目的:观察骨髓间充质干细胞来源外泌体(BMSC-Exo)对抑郁症模型小鼠的海马微血管、能量代谢及其行为学的改善作用。方法:(1)分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,提取BMSC-Exo。采用透射电镜观察BMSC-Exo的形态,采用Zetaview分析仪测定BMSC-Exo的粒径分布范围,采用Western blotting实验检测BMSC-Exo中CD9和CD63的表达。(2)取2只小鼠,采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁症模型后于海马分别注射磷酸盐缓冲液(PBS)、DiR标记的BMSC-Exo,24 h后采用活体成像系统检测小鼠体内摄取BMSC-Exo情况。(3)将36只小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和BMSC-Exo组,每组12只。后2组小鼠采用CUMS建立抑郁症模型。造模后BMSC-Exo组小鼠海马注射1 μL BMSC-Exo,对照组小鼠注射等量PBS。采用强迫游泳实验(FST)、悬尾实验(TST)及开放旷场实验(OFT)检测小鼠的行为学。采用碱性磷酸酶染色检测小鼠海马微血管数量及长度。采用微正电子发射断层显像/X线计算机体层成像(mPET/CT)检测小鼠海马的能量代谢情况。采用Western blotting实验检测小鼠海马葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达。结果:(1)BMSC-Exo呈典型的盘状囊泡样结构,粒径为(100.5±1.4) nm。Western blotting实验结果证实BMSC-Exo表达CD9、CD63。(2)活体成像检测结果显示注射PBS后小鼠的脑和肝脏未见明显荧光,注射BMSC-Exo后小鼠的脑和肝脏呈现显著局部荧光。(3)与对照组比较,模型组和BMSC-Exo组小鼠FST、TST的静止时间较长,OFT的中央区域运动路程、中央区域运动时间较短,差异均有统计学意义( P<0.05);与模型组比较,BMSC-Exo组小鼠FST、TST的静止时间较短,OFT的中央区域运动路程、中央区域运动时间较长,差异均有统计学意义( P<0.05)。与对照组比较,模型组和BMSC-Exo组小鼠海马标准摄取值(SUV)、微血管长度及微血管数量、海马GLUT1的表达较低,差异均有统计学意义( P<0.05);与模型组比较,BMSC-Exo组小鼠海马SUV值、微血管长度及微血管数量、GLUT1的表达较高,差异均有统计学意义( P<0.05)。3组小鼠海马微血管长度与SUV值呈正相关关系( r=0.540, P<0.001),海马微血管数量与SUV值呈正相关关系( r=0.600, P<0.001)。结论:BMSC-Exo可促进抑郁症模型小鼠海马微血管新生,提高海马葡萄糖代谢,从而改善抑郁样行为。

关键词：抑郁症微血管葡萄糖代谢外泌体

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生物支架应用于改善卵巢衰老的研究进展

中华生殖与避孕杂志 2024年第9期44卷 980-985页

作者：熊泽宇钱卫平张春晖北京大学深圳医院生殖医学中心深圳

随着社会生育率下降, 卵巢衰老引发的不孕问题逐渐凸显。再生医学结合组织工程技术是目前改善卵巢衰老的研究焦点, 主要是利用细胞、生物支架以及生长因子达到修复或再生器官的目的。其中制备支架材料是非常关键的环节之一, 大量研究表... 详细信息

随着社会生育率下降, 卵巢衰老引发的不孕问题逐渐凸显。再生医学结合组织工程技术是目前改善卵巢衰老的研究焦点, 主要是利用细胞、生物支架以及生长因子达到修复或再生器官的目的。其中制备支架材料是非常关键的环节之一, 大量研究表明进行干细胞移植或体外组织培养, 运用合适的生物支架可以极大地提高细胞或组织的存活率及功能维持时间。本文综述了现阶段应用于改善卵巢衰老的生物支架的相关研究, 为此类患者不孕症的治疗提供一个新的策略。

关键词：再生医学不孕症卵巢衰老生物支架组织工程技术

脐带间充质干细胞外泌体对子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎性因子表达的影响

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中国免疫学杂志 2024年

作者：王琳米旭光林秀英付建华刘磊王爱乔杜茜张文琦范美娇方艳秋吉林省人民医院生殖医学中心长春中医药大学

目的：探讨脐带间充质干细胞外泌体（hUCMSCs-Exo）对双酚AF（bisphenol AF，BPAF）诱导的子宫内膜基质细胞（hESCs）氧化损伤和炎性因子释放的影响。方法：将hESCs分为Control组、BPAF组（25μmol/L BPAF处理）、BPAF+Exo组（25μmol/L... 详细信息

目的：探讨脐带间充质干细胞外泌体（hUCMSCs-Exo）对双酚AF（bisphenol AF，BPAF）诱导的子宫内膜基质细胞（hESCs）氧化损伤和炎性因子释放的影响。方法：将hESCs分为Control组、BPAF组（25μmol/L BPAF处理）、BPAF+Exo组（25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理）、BPAF+Exo+LY组（25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo+10μmol/L LY294002处理）。MTT法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平以及线粒体膜电位水平，Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3以及PI3K/AKT信号通路的蛋白表达，RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达。结果：与对照组相比，随着BPAF（≥25μmol/L）浓度升高，hESCs细胞存活率逐渐下降（P<0.01），细胞凋亡率逐渐升高。与对照组相比，BPAF组ROS水平升高，线粒体膜电位水平下降，Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达明显增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达明显减少。与BPAF组相比，BPAF+Exo组细胞存活率升高（P<0.01），ROS水平下降，线粒体膜电位水平升高，Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达减少，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达增加。与BPAF+Exo组相比，BPAF+Exo+LY组细胞Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达增加，Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达减少。与对照组相比，BPAF组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA的表达明显上调（P<0.01），与BPAF组相比，BPAF+Exo组炎症因子mRNA的表达明显下调（P<0.05）。结论：BPAF（≥25μmol/L）抑制hESCs增殖，促进细胞凋亡，hUCMSCs-Exo通过PI3K/AKT信号通路抑制BPAF诱导的子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎性因子表达。

关键词：子宫内膜基质细胞外泌体内分泌干扰物磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B 炎症因子

辅助生育夫妇的男性年龄与精液质量的关联:一项横断面研究

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 510-515页

作者：张芷陌王雅琴姬锐杨哲杨菁武汉大学人民医院生殖医学中心、湖北省辅助生殖与胚胎发育医学临床研究中心武汉430060

目的探讨辅助生育夫妇的男性年龄与精液质量及精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)的关联性。方法采用横断面研究,收集2020年1月至2023年8月期间在武汉大学人民医院生殖医学中心因非男性因素行辅助生殖技术助孕治疗的3361... 详细信息

目的探讨辅助生育夫妇的男性年龄与精液质量及精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)的关联性。方法采用横断面研究,收集2020年1月至2023年8月期间在武汉大学人民医院生殖医学中心因非男性因素行辅助生殖技术助孕治疗的3361例男性的临床资料。使用计算机辅助精液分析系统分析精液质量参数,使用精子核染色体结构检测分析DFI。将受试者按年龄分为20~29岁(A组)、30~39岁(B组)和40~59岁(C组)3组。采用多元线性回归和限制性立方样条(restricted cubic spline,RCS)法分析年龄与精液质量参数及DFI之间的关联。结果共纳入研究对象共3361例,年龄为(34.86±5.34)岁。B组和C组的精子前向运动率[(40.17±18.16)%、(37.83±16.96)%]及精子总活动率[(55.27±21.37)%、(53.09±21.14)%]显著低于A组[(43.78±18.16)%、(58.29±20.24)%];精子浓度[(78.96±63.04)×10^(6)/mL、(91.93±72.28)×10^(6)/mL]及DFI[(19.18±12.18)%、(21.73±12.52)%]显著高于A组[(71.75±57.44)×10^(6)/mL,(16.31±10.04)%],差异均有统计学意义(均P生殖助孕术的男性中,年龄超过30岁与精液量、精子前向运动率及精子总活动率下降,与精子浓度及DFI上升显著相关。

关键词：年龄因素精液分析不育症限制性立方样条

人间充质干细胞在生殖医学领域中的基础研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第3期44卷 325-330页

作者：魏仑钱菲骆超高莎莎伯乐茅彩萍苏州大学附属第一医院生殖医学中心苏州215006

生殖医学的快速发展为助力解决人口问题作出了突出贡献,但仍无法满足所有的夫妇成为遗传学层面的"完整父母"。随着再生医学研究的深入,研究者发现干细胞具有促进内源性修复、改善氧化应激水平、调节免疫微环境等特性。因此,干细胞移植... 详细信息

生殖医学的快速发展为助力解决人口问题作出了突出贡献,但仍无法满足所有的夫妇成为遗传学层面的"完整父母"。随着再生医学研究的深入,研究者发现干细胞具有促进内源性修复、改善氧化应激水平、调节免疫微环境等特性。因此,干细胞移植被认为是恢复受损生殖功能的有效疗法。由于来源广泛、容易获得和低免疫原性的特点,间充质干细胞被认为是移植治疗的理想来源,并且在大量生殖领域的科学和临床研究中被证明是有效的。本文就国内外各类间充质干细胞在生殖医学领域中的基础研究进展进行综述。

关键词：间充质干细胞生殖医学不孕,不育