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线粒体未折叠蛋白反应在棕榈酸诱导肾小管上皮细胞脂质聚集中的作用

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第3期45卷 419-427页

作者：温睿智杜晓刚重庆医科大学附属第一医院肾内科重庆400042

目的探讨线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein reaction,UPR^(mt))对肾小管上皮细胞(human kidney 2,HK-2)脂代谢的影响。方法采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导HK-2细胞内脂质聚集,分别予siRNA抑制UPR^(mt)或巴多索隆(the 2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oic acid,CDDO)增强UPR^(mt)。油红染色观察细胞内脂质聚集情况,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测定线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),Mito-SOX测定线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,Western blotting检测HSP60、LONP1、CLPP、ACOX1、PPARα、PGC1α、CPT1α蛋白表达。结果PA诱导HK-2细胞脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多及UPR^(mt)关键蛋白HSP60、LONP1表达降低;抑制UPR^(mt)可加剧PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多,HSP60、LONP1表达进一步降低;增强UPR^(mt)可缓解PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多以及HSP60、LONP1表达降低。结论PA诱导的HK-2细胞脂质聚集可能与线粒体功能障碍有关,UPR^(mt)在该过程中对HK-2细胞具有保护作用。

关键词：线粒体未折叠蛋白反应(UPR^(mt)) 棕榈酸(PA) 肾小管上皮细胞(HK-2) 脂质聚集活性氧(ROS)

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不同分期慢性肾脏病患者骨质疏松与心血管钙化的横断面调查

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四川大学学报（医学版） 2021年第2期52卷 334-339页

作者：蔡志岳胡显芳陈利群李正荣杜晓刚重庆医科大学附属第一医院肾内科重庆400042

目的了解不同分期慢性肾脏病(CKD)患者骨质疏松与心血管钙化的情况,分析其与骨代谢标志物之间的相关性。方法选择2017年7月-2018年1月就诊于重庆医科大学附属第一医院和重庆市涪陵中心医院的368例CKD3~5期患者,另选60例同期于本院和重... 详细信息

目的了解不同分期慢性肾脏病(CKD)患者骨质疏松与心血管钙化的情况,分析其与骨代谢标志物之间的相关性。方法选择2017年7月-2018年1月就诊于重庆医科大学附属第一医院和重庆市涪陵中心医院的368例CKD3~5期患者,另选60例同期于本院和重庆市涪陵中心医院体检的健康者为对照组。收集所有研究对象入组时的年龄、性别、体质量指数(BMI);检测估算肾小球滤过率(eGFR)、血清钙(Ca)、磷(P)、白蛋白(ALB)、全段甲状旁腺素(iPTH)、骨性碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型前胶原氨基端肽(PINP)和β-胶原特殊序列(β-CTX)水平,采用双能X线吸收法和心脏彩色多普勒超声心动图分别检测患者骨质疏松、血管钙化和心脏瓣膜钙化的发生情况;采用胸腹部CT评估所有纳入对象的主动脉及冠状动脉钙化情况。Pearson相关性分析e GFR、血清骨代谢标志物与骨质疏松、心血管钙化之间的相关性。结果与对照组相比,CKD 3~5期组患者血P、iPTH、BALP、PINP、β-CTX水平升高(P<0.05),eGFR、血Ca水平降低(P<0.05),且随着肾功能损害加重,上述指标变化更为明显(P<0.05);CKD 5期血液透析组患者血管钙化和心脏瓣膜钙化的发生率高于CKD 3~4期组和CKD 5期未透析组(P<0.05);CKD 3~5期患者的eGFR与血Ca呈正相关(P<0.05),与血P、iPTH、BALP、PINP和β-CTX呈负相关(P<0.05);CKD 3~5期患者骨质疏松、血管钙化、心脏瓣膜钙化的发生与eGFR和血Ca水平下降呈负相关(P<0.05),与血P、iPTH、BALP、PINP和β-CTX水平增加呈正相关(P<0.05)。结论血清骨代谢标志物和eGFR水平与CKD 3~5期患者骨质疏松和心血管钙化的发生密切相关。

关键词：骨代谢标志物估算肾小球滤过率慢性肾脏病矿物质和骨代谢异常

成人原发肾病综合征并发急性肾损伤危险因素分析

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中国医学科学院学报 2020年第4期42卷 436-443页

作者：周燕琳杜晓刚重庆医科大学附属第一医院肾内科重庆400042

目的探讨成人原发肾病综合征患者继发急性肾损伤(AKI)的危险因素,为临床早期发现肾病综合征继发AKI并及早防治提供指导。方法纳入符合标准的185例成人原发性肾病综合征患者为研究对象,按照是否并发AKI分为AKI组(n=51)和非AKI组(n=134)... 详细信息

目的探讨成人原发肾病综合征患者继发急性肾损伤(AKI)的危险因素,为临床早期发现肾病综合征继发AKI并及早防治提供指导。方法纳入符合标准的185例成人原发性肾病综合征患者为研究对象,按照是否并发AKI分为AKI组(n=51)和非AKI组(n=134)。比较AKI组和非AKI组患者入院时的临床病理特征,通过多因素Logistics回归分析评价患者发生AKI的独立危险因素。结果51例原发肾病综合征并发AKI的患者中,发生AKI的病理类型依次为肾小球轻微病变(29.4%)、IgA肾病(25.5%)、膜性肾病(17.6%),且肾脏病理中AKI组出现肾小管蛋白管型、上皮细胞空泡变显著高于非AKI组(P=0.004,P=0.030)。与女性相比,男性肾病综合征患者更易发生AKI(P=0.000)。与非AKI组比较,AKI组患者白蛋白水平更低(P=0.015),随机尿蛋白、入院时血肌酐、尿酸、尿素氮、三酰甘油水平更高(P=0.030,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.006),且更易伴随多浆膜腔积液、少尿、高血压及感染(P=0.000,P=0.002,P=0.035,P=0.000)。多因素Logistics回归分析显示,入院时白蛋白(96μmol/L)、尿素氮(≥6.8 mmol/L)、尿酸(≥400μmol/L)、糖尿病、感染、肾小管蛋白管型是影响AKI发生的独立危险因素。结论成人原发肾病综合征并发AKI与多种因素相关,其中入院时白蛋白、血肌酐、尿素氮及尿酸水平、糖尿病、感染、肾小管蛋白管型为AKI发生的独立危险因素。

关键词：肾病综合征原发肾病综合征急性肾损伤急性肾衰竭成人

以外周水肿及腹水为主要临床表现的POEMS综合征一例

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中国医学科学院学报 2023年第1期45卷 167-170页

作者：刘雯张秉强重庆医科大学附属第一医院消化内科重庆400016

POEMS综合征是一种罕见的单克隆浆细胞增殖性疾病,经典五联征包括多发性周围神经病、器官肿大、内分泌病变、M蛋白血症和皮肤改变,但在实际临床工作中,其表现复杂多变,并不典型,极易造成误诊和漏诊。本文报道1例以外周水肿及腹水为主要... 详细信息

POEMS综合征是一种罕见的单克隆浆细胞增殖性疾病,经典五联征包括多发性周围神经病、器官肿大、内分泌病变、M蛋白血症和皮肤改变,但在实际临床工作中,其表现复杂多变,并不典型,极易造成误诊和漏诊。本文报道1例以外周水肿及腹水为主要临床表现的POEMS综合征。

关键词： POEMS综合征水肿腹水

局部枸橼酸抗凝在儿童连续肾脏替代治疗中的应用进展

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中华儿科杂志 2022年第3期60卷 250-253页

作者：李娜缪晓林邬步云南京医科大学第一附属医院儿科南京210029 南京医科大学第一附属医院肾内科南京210029

局部枸橼酸抗凝是儿童连续性肾脏替代治疗的首选抗凝方式,但国内普及率仍较低。本文回顾国内外枸橼酸抗凝相关文献,针对局部枸橼酸抗凝的应用要点包括适应证及禁忌证、血流量及枸橼酸的输入速度、治疗剂量和液体成分、补钙量、代谢并发... 详细信息

局部枸橼酸抗凝是儿童连续性肾脏替代治疗的首选抗凝方式,但国内普及率仍较低。本文回顾国内外枸橼酸抗凝相关文献,针对局部枸橼酸抗凝的应用要点包括适应证及禁忌证、血流量及枸橼酸的输入速度、治疗剂量和液体成分、补钙量、代谢并发症的防治等及相关进展进行综述。

关键词：连续性肾脏替代治疗局部枸橼酸抗凝连续肾脏替代治疗输入速度禁忌证血流量液体成分枸橼酸

抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎患者的临床特征及预后分析

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第二军医大学学报 2020年第1期41卷 49-56页

作者：施嘉杜晓刚重庆医科大学附属第一医院肾内科

目的分析抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)患者的临床特征及预后因素。方法回顾性分析我院2008年7月至2016年12月初诊的168例AAV患者的一般情况、临床表现及实验室指标,并对所有患者进行随访,中位随访时间为12(1,96)个月,... 详细信息

目的分析抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)患者的临床特征及预后因素。方法回顾性分析我院2008年7月至2016年12月初诊的168例AAV患者的一般情况、临床表现及实验室指标,并对所有患者进行随访,中位随访时间为12(1,96)个月,终点事件为死亡。结果 168例患者中,显微镜下多血管炎(MPA)、肉芽肿性多血管炎(GPA)及嗜酸细胞性肉芽肿性多血管炎(EGPA)分别为152、14、2例;MPO-ANCA阳性145例(86.3%),PR3-ANCA阳性20例(11.9%);49例患者死亡,91例患者存活,28例失访。与GPA患者相比,MPA患者间质性肺病[50.7%(77/152)vs 14.3%(2/14)]及肾脏受累[78.9%(120/152)vs 50.0%(7/14)]常见,估计的肾小球滤过率(eGFR)更低[14.23(7.27,71.49)mL/(min·1.73 m^2)vs 104.08(16.61,135.72)mL/(min·1.73 m^2)],差异均有统计学意义(P均<0.05)。与PR3-ANCA阳性组相比,MPO-ANCA阳性组患者年龄较大[(64.01±10.62)岁vs(50.50±16.88)岁],肾脏受累更多见[77.9%(113/145)vs 50.0%(10/20)],eGFR更低[19.00(9.40,42.85)mL/(min·1.73 m^2)vs 149.40(86.75,249.45)mL/(min·1.73 m^2)],差异均有统计学意义(P均<0.05)。与非死亡组相比,死亡组AAV患者年龄更大[(67.45±10.61)岁vs (61.98±12.52)岁],间质性肺病发病率更高[59.2%(29/49)vs 41.8%(38/91)],伯明翰系统性血管炎活动评分(BVAS)更高[(18.53±8.02)分vs(13.68±5.98)分],eGFR更低[8.58(5.73,22.07)mL/(min·1.73 m^2)vs 45.15(11.54,120.79)mL/(min·1.73 m^2)],血钠浓度[137.00(134.00,140.00)mmol/L vs 139.00(136.00,141.00)mmol/L]及白蛋白水平[(28.41±5.24)g/L vs(31.92±5.91)g/L]更低,血清D-二聚体水平更高[2.84(1.20,6.28)mg/L vs2.24(0.80,3.69)mg/L],差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析显示年龄、eGFR、血清白蛋白水平及BVAS是AAV患者死亡的独立影响因素(HR=1.058、0.987、0.932、1.086,P均<0.05)。结论 AAV患者临床表现以肾脏受累和肺受累多见,年龄、eGFR、血清白蛋白水平及BVAS是AAV患者死亡的独立影响因素,间质性肺病、血清D-二聚体水平高、低钠血症也可能与AAV预后有关。

关键词：抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎显微镜下多血管炎肉芽肿性多血管炎症状和体征预后肾小球滤过率

抑制Sonic Hedgehog信号能抑制脑缺血性损伤后纤维瘢痕形成且不利于神经功能恢复

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南方医科大学学报 2022年第6期42卷 840-848页

作者：文君朱慧敏李雪梅黄家贵陈月杨琴重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的探讨抑制Sonic Hedgehog(Shh)信号对脑缺血性损伤后纤维瘢痕形成及神经功能的影响。方法构建体内成年SD大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型和体外新生24 h SD大鼠脑膜原代成纤维细胞氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)模型。成年SD大鼠随... 详细信息

目的探讨抑制Sonic Hedgehog(Shh)信号对脑缺血性损伤后纤维瘢痕形成及神经功能的影响。方法构建体内成年SD大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型和体外新生24 h SD大鼠脑膜原代成纤维细胞氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)模型。成年SD大鼠随机分成假手术组、缺血/再灌注组(I/R)、缺血再灌注腺病毒空载(rAd-NC)组和缺血再灌注腺病毒敲低Shh(rAd-ShShh)组。SD大鼠脑膜原代成纤维细胞随机分成正常组、缺血对照组、肿瘤生长因子-β1预处理组(TGF-β1)、TGF-β1预处理加环王巴明组(TGF-β1+CYC)。每组细胞被预处理24 h经OGD/R 150 min后复氧72 h。采用改良神经严重程度评分(mNSS)、改良Bederson评分评估神经功能缺损。CCK-8法测定细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,免疫荧光法检测缺血中心纤维连接蛋白(Fn)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Shh的表达,TUNEL染色检测缺血中心细胞凋亡,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测缺血中心Fn、α-SMA及Shh mRNA的表达,WB法检测OGD/R后成纤维细胞Shh、α-SMA蛋白的表达。结果体内实验中免疫荧光法及qPCR法结果显示与假手术组相比SD大鼠MCAO/R后可诱导缺血侧大脑半球Shh、α-SMA、Fn蛋白和mRNA的表达升高(P0.05)。细胞划痕实验结果显示与正常组和缺血对照组相比在24 h内TGF-β1组成纤维细胞的迁移距离增加(P<0.05),而TGF-β1+CYC组与TGF-β1组相比成纤维细胞的迁移距离减少(P<0.05)。免疫荧光实验、Westernblot及qPCR显示与正常组和缺血对照组相比TGF-β1组细胞Shh、α-SMA和Fn的表达升高(P<0.05),而TGF-β1+CYC组与TGF-β1组相比Shh、α-SMA和Fn的表达降低(P<0.05)。结论抑制Shh信号能抑制脑缺血性损伤早期纤维瘢痕的形成且不利于神经功能的恢复。

关键词：脑缺血 Shh信号成纤维细胞肌成纤维细胞

TGF-β1通过上调Shh信号诱导大鼠脑膜成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

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南方医科大学学报 2022年第2期42卷 250-255页

作者：文君朱慧敏李雪梅黄家贵陈月杨琴重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的探讨TGF-β1在诱导脑膜成纤维细胞转化为肌成纤维细胞中对Shh信号的影响。方法新生24 h SD大鼠脑膜原代成纤维细胞经Ⅳ型胶原酶提取纯化。原代脑膜成纤维细胞随机分为3个组:分别为空白对照组、10 ng/mL TGF-β1处理组(TGF-β1组)、1... 详细信息

目的探讨TGF-β1在诱导脑膜成纤维细胞转化为肌成纤维细胞中对Shh信号的影响。方法新生24 h SD大鼠脑膜原代成纤维细胞经Ⅳ型胶原酶提取纯化。原代脑膜成纤维细胞随机分为3个组:分别为空白对照组、10 ng/mL TGF-β1处理组(TGF-β1组)、10 ng/mL TGF-β1联合20μmol/L TGF-β1受体抑制剂SB-431542组(TGF-β1+SB组)。各组细胞在药物处理前均用无血清培养基培养24 h后换用加入了药物的DMEM/F12完全培养基处理72 h。采用CCK-8法检测各实验组成纤维细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测各实验组成纤维细胞的迁移能力;免疫荧光法检测各实验组纤维连接蛋白(Fn)的表达;Westernblotting检测各实验组Fn、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Shh蛋白的表达;q-PCR检测各实验组细胞Shh mRNA的表达。结果TGF-β1可促进原代脑膜成纤维细胞的增殖(P<0.05);TGF-β1可促进原代脑膜成纤维细胞的迁移(P<0.05)。TGF-β1可促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化并增加Fn的分泌(P<0.05)。TGF-β1处理后可上调Shh蛋白和mRNA的表达(P<0.05),TGF-β1受体抑制剂SB-431542则可抑制TGF-β1引起的原代脑膜成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化并减少纤维连接蛋白的分泌(P<0.05)。结论TGF-β1可通过上调Sonic Hedgehog信号通路中Shh蛋白的表达,诱导脑膜成纤维细胞转化为肌成纤维细胞。

关键词： TGF-β1信号通路成纤维细胞肌成纤维细胞 Shh信号

异基因造血干细胞移植术后巨细胞病毒感染的临床研究

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中国实验血液学杂志 2023年第2期31卷 513-521页

作者：熊艺颖刘林陈建斌唐晓琼肖青张红宾王利重庆医科大学附属第一医院血液内科重庆400016

目的:探讨异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒(CMV)和难治性CMV感染(RCI)发生的危险因素及对生存的影响。方法:回顾性分析2015-2020年在重庆医科大学附属第一医院行异基因造血干细胞移植的246例患者的临床资料,根据是否感染CMV将患者分为... 详细信息

目的:探讨异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒(CMV)和难治性CMV感染(RCI)发生的危险因素及对生存的影响。方法:回顾性分析2015-2020年在重庆医科大学附属第一医院行异基因造血干细胞移植的246例患者的临床资料,根据是否感染CMV将患者分为CMV组(67例)和non-CMV组(179例),再根据是否发生RCI将CMV患者进一步分为RCI组(18例)和non-RCI组(49例)。分析CMV感染和RCI的危险因素,并用ROC曲线验证Logistic回归模型的诊断意义,同时分析组间的总生存期(OS)和无进展生存期差异,以及影响OS的危险因素。结果:发生CMV感染的患者,首次CMV感染的中位时间为移植后48(7-183)d,感染持续的中位时间为21(7-158)d。患者年龄偏大、合并EB病毒(EBV)血症或者发生Ⅱ-Ⅳ度急性移植物抗宿主病均能显著增加CMV感染风险(P=0.032,<0.001和0.037),RCI的危险因素为EBV血症和诊断时的CMV-DNA峰值≥1×10^(4) copies/ml(P=0.039,0.006),而移植后14 d的白细胞≥4×10^(9)/L是CMV感染和RCI的保护因素(P=0.013,0.014)。CMV组的OS率显著低于non-CMV组(P=0.033),RCI组的OS率亦显著低于non-RCI组(P=0.043)。造血重建是OS的有利因素(P<0.001),而移植后60 d内CMV-DNA≥1.0×10^(4) copies/ml是OS的危险因素(P=0.005)。结论:移植后白细胞数量恢复较晚以及合并EBV血症是CMV感染和RCI的共同危险因素;CMV-DNA载量1×10^(4) copies/ml是重要临界值,高于该值可导致高RCI及低OS风险。

关键词：异基因造血干细胞移植巨细胞病毒感染危险因素难治性