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人脂肪间充质干细胞治疗急性肝功能衰竭大鼠疗效的探索

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人脂肪间充质干细胞治疗急性肝功能衰竭大鼠疗效的探索

作者：金银鹏贵阳医学院

学位级别：硕士

目的分离培养人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stemcells,hADSCs)并探讨脂肪间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠生存情况和肝功能重建的影响;观察其在大鼠体内各脏器中的分布、迁移及其对受体肝脏的再生的促进作用;探索干细胞... 详细信息

目的分离培养人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stemcells,hADSCs)并探讨脂肪间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠生存情况和肝功能重建的影响;观察其在大鼠体内各脏器中的分布、迁移及其对受体肝脏的再生的促进作用;探索干细胞移植影响肝衰竭大鼠生存率的可能机制。方法采用胶原酶消化的方法，从人腹部皮下脂肪中分离出脂肪间充质干细胞，经贴壁筛选法纯化细胞，无血清培养基体外培养扩增。以D-氨基半乳糖（D-gal）大鼠腹腔内一次性注射构建SD大鼠急性肝衰竭模型。30只肝衰竭SD大鼠随机分为脂肪间充质干细胞治疗组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组，治疗组大鼠经脾脏注射5×106个脂肪间充质干细胞，对照组向脾脏注射相同体积PBS，动态检测多项血生化指标和肝脏组织学表现。20只肝衰竭SD大鼠随机分为脾脏移植组和股静脉移植组，分别经脾脏和股静脉途径注入5×106个通过慢病毒感染表达ZsGreen的脂肪间充质干细胞，采用免疫组织化学方法，检测两种移植途径中脂肪间充质干细胞在大鼠心、肝、脾、肾、肺等器官的分布和迁移情况;检测肝、脾组织中Ki-67蛋白的表达情况，TUNNEL法检测受体肝细胞凋亡情况。40只肝衰竭大鼠随机分为DMEM-F12对照组、干细胞移植组、干细胞浓缩培养基移植组、干细胞裂解液移植组。经股静脉途径分别注入100ul DMEM-F12、5×106个脂肪干细胞、浓缩培养基、干细胞裂解液。动态检测大鼠血中HGF、VEGF表达情况。结果1、通过体外分离人体脂肪组织，可获得脂肪间充质干细胞，该细胞表达间充质干细胞相关表面抗原并且能被诱导分化成脂肪细胞和软骨细胞，证明我们成功分离出脂肪间充质干细胞;2、脾脏移植脂肪间充质干细胞治疗肝衰竭大鼠，大鼠总体病死率明显低于PBS对照组，同时，我们观察到治疗组大鼠的肝功能得到明显改善，血清丙氨酸氨基转移酶（Alanine Transaminase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶（Aspartate Transaminase,AST)等血液生化指标显著低于PBS对照组，HE染色显示肝脏组织形态明显改善;3、脂肪间充质干细胞经脾脏、股静脉移植后，大部分迁移至肝脏、脾脏及肺部，其中经股静脉移植组细胞向肝脏趋化的效率更高，但差异无统计学意义;4、外源性脂肪间充质干细胞移植可促进急性肝衰竭大鼠肝脏细胞的再生，并抑制其凋亡;5、干细胞浓缩培养基移植组和干细胞裂解液移植组大鼠的72小时生存率较DMEM-F12对照组明显提高。干细胞移植组、干细胞浓缩培养基移植组和干细胞裂解液移植组大鼠血清HGF浓度明显高于DMEM-F12对照组，而VEGF浓度无明显变化。结论1、体外分离脂肪组织进行贴壁培养可获取脂肪间充质干细胞;2、一次性腹腔注射D-氨基半乳糖可成功构建大鼠急性肝衰竭模型，脂肪间充质干细胞移植可改善急性肝衰竭模型大鼠的肝功能情况，提高其存活率，有望用于肝衰竭的治疗;3、经脾脏和股静脉途径移植脂肪间充质干细胞均可用于肝衰竭治疗，具有促进内源性肝脏细胞再生和抑制凋亡的作用;4、干细胞可能通过旁分泌途径分泌某些细胞因子如HGF促进细胞再生，改善肝衰竭大鼠生存率。

关键词：肝衰竭干细胞脂肪间充质干细胞间充质干细胞细胞移植

卡瑞利珠单抗联合化疗方案治疗复发或转移性鼻咽癌的成本效果分析

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药物评价研究 2024年第7期47卷 1624-1630页

作者：郭晓丹魏晓霞周建华褚延乐吴文华林慧婷郑州大学第二附属医院药学部河南郑州450001 福建医科大学省立临床医学院福建福州350001

目的评价卡瑞利珠单抗联合化疗方案一线治疗复发或转移性鼻咽癌的经济性。方法构建分区生存模型,模拟患者的质量调整生命年(QALY)和增量成本效果比(ICER),并进行单因素敏感性分析、概率敏感性分析和情境分析来检验模型的不确定性。结... 详细信息

目的评价卡瑞利珠单抗联合化疗方案一线治疗复发或转移性鼻咽癌的经济性。方法构建分区生存模型,模拟患者的质量调整生命年(QALY)和增量成本效果比(ICER),并进行单因素敏感性分析、概率敏感性分析和情境分析来检验模型的不确定性。结果基础分析结果显示,相较于传统安慰剂联合化疗方案,使用卡瑞利珠单抗联合化疗方案一线治疗复发或转移性鼻咽癌的ICER为91 570.87元/QALY,远低于我国3倍人均GDP;单因素敏感性分析显示对模型结果影响程度最大的3个因素分别是无进展生存状态(PFS)的效用值、卡瑞利珠单抗成本及疾病进展后成本;概率敏感性分析显示,当意愿支付值大于15万元,卡瑞利珠单抗对比安慰剂联合顺铂和吉西他滨(GP方案)更具经济性的概率为100%;情境分析验证了基础分析的稳健性。结论在我国3倍人均GDP的意愿支付值下,使用卡瑞利珠单抗联合GP方案一线治疗复发或转移性鼻咽癌更具经济性。

关键词：鼻咽癌卡瑞利珠单抗成本效果分析分区生存模型质量调整生命年

阿德福韦膦酸酯衍生物的肾毒性及抗HBV活性评价

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华西药学杂志 2013年第1期28卷 45-47页

作者：刘影裴健颖李靖董永喜傅晓钟查雨锋兰燕宇王永林贵阳医学院药学院贵州贵阳550004

目的研究单非甾体抗炎药羧酸酯衍生物阿德福韦单硫代L-氨基酸酯的肾细胞毒性及抗HBV活性。方法采用HK-2人肾小管上皮细胞株,从细胞形态学、细胞生长和增殖活性及细胞结构损伤检测几方面评价了目标化合物的肾细胞毒性;采用HepG2.2.15细胞... 详细信息

目的研究单非甾体抗炎药羧酸酯衍生物阿德福韦单硫代L-氨基酸酯的肾细胞毒性及抗HBV活性。方法采用HK-2人肾小管上皮细胞株,从细胞形态学、细胞生长和增殖活性及细胞结构损伤检测几方面评价了目标化合物的肾细胞毒性;采用HepG2.2.15细胞株,从细胞毒性与HBV-DNA抑制率方面评价了目标化合物抗HBV的作用效果。结果化合物均具有不同程度抗HBV的活性,其中,5a、5c、5e活性较强(EC50为22.73～29.72μmol.L-1);化合物5c、5d作用24、48 h后对HK-2细胞产生的形态学改变、细胞毒性(IC50>1 mmol.L-1)及不同浓度下LDH释放率均明显优于阳性对照Adefovir dipiv-oxil作用细胞24、48 h后的形态学、细胞毒性(827.18、446.99μmol.L-1)及LDH释放率。结论设计的化合物5c、5d具有抗病毒活性及较低的肾细胞毒性,有进一步研究的价值。

关键词：阿德福韦前药 HK-2细胞肾细胞毒性非甾体抗炎药

抗抑郁剂对抑郁症患者骨密度及骨代谢的影响机制研究

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抗抑郁剂对抑郁症患者骨密度及骨代谢的影响机制研究

作者：王彦飞贵阳医学院

学位级别：硕士

目的探讨抗抑郁剂对抑郁症患者骨密度及骨代谢的影响机制。方法选取贵阳医学院心理科患者，符合美国精神障碍诊断和统计手册（Diagnostic and Statistical Manual of mental disorders,4th edition, DSM-IV）抑郁症的诊断标准，同时用SC... 详细信息

目的探讨抗抑郁剂对抑郁症患者骨密度及骨代谢的影响机制。方法选取贵阳医学院心理科患者，符合美国精神障碍诊断和统计手册（Diagnostic and Statistical Manual of mental disorders,4th edition, DSM-IV）抑郁症的诊断标准，同时用SCID(DSM-IV-TR障碍用临床定式检查研究版)筛查排除精神分裂症，器质性疾病所致的抑郁障碍，物质依赖等选取入组的患者。依据HAMD-24(Hamilton Depression Scale)评分标准≥20分;确定为入组抑郁症患者，随机分为舍曲林组（31例）、西酞普兰组（33例）、文拉法辛组（30例）、瑞波西汀组（31例）4组。分别于入组时及治疗1年后采用汉密尔顿（HAMD）抑郁量表评定抑郁症严重程度，采用ELISA方法测定患者血清5-HT、骨钙素、I型胶原C、肿瘤坏死因子-a、骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配基含量，采用双能X线骨密度仪测定股骨颈部、腰椎L1-L4的骨密度。结果（1）临床症状：①与治疗前比较，抗抑郁治疗1年后各组HAMD评分减分显著，(P＜0.05);②与对照组比较，药物组HAMD量表评分减分明显，（P＜0.05），药物组间两两比较，（P＞0.05），具体趋势为舍曲林、西酞普兰、文拉法辛、瑞波西汀＞对照组。（2）骨密度变化：①与治疗前比较，抗抑郁治疗1年后舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度均降低，(P＜0.05)，瑞波西汀组、对照组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度无明显变化，(P＞0.05);②与对照组比较，舍曲林组、西酞普兰组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅明显增大（P＜0.05），文拉法辛组、瑞波西汀组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅无明显变化（P＞0.05）;与舍曲林组比较，文拉法辛组、瑞波西汀组、对照组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅明显减小（P＜0.05），西酞普兰组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅无明显变化（P＞0.05）;与西酞普兰组比较，文拉法辛组、瑞波西汀组、患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅明显减小（P＜0.05）;与文拉法辛组比较，瑞波西汀组患者股骨颈部骨密度、L1-L4骨密度降幅降幅无明显变化（P＞0.05）;具体下降趋势为舍曲林组、西酞普兰组＞文拉法辛组、瑞波西汀组、对照组。（3）抗抑郁治疗1年后骨代谢生化指标水平变化:①血清5-HT浓度1）与治疗前比较，治疗后舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组、瑞波西汀组血清5-HT浓度均升高，（P＜0.05），对照组血清5-HT浓度无明显变化（P＞0.05）;2）与对照组比较，药物组血清5-HT浓度明显升高，（P＜0.05），药物组间两两比较，（P＜0.05）。具体升高趋势为舍曲林组＞西酞普兰组＞文拉法辛组＞瑞波西汀组＞对照组。②血清BGP浓度1）与治疗前比较，舍曲林组、西酞普兰组患者血清BGP浓度降低，（P＜0.05），文拉法辛组、瑞波西汀组血清BGP浓度无明显变化，（P＞0.05），对照组患者血清BGP浓度升高，（P＜0.05）;2）与对照组比较，舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清BGP降幅明显增大，（P＜0.05），与舍曲林组比较，文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清BGP降幅明显减小，（P＜0.05），西酞普兰组患者血清BGP降幅无明显变化，（P＞0.05）;与西酞普兰组比较，文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清BGP降幅明显减小，（P＜0.05）;与文拉法辛组比较，瑞波西汀组患者血清BGP降幅无明显变化，（P＞0.05）。具体下降趋势为舍曲林组、西酞普兰组＞文拉法辛组、瑞波西汀组＞对照组。③血清TNF-α浓度1）与治疗前比较，舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组、瑞波西汀组、对照组患者血清TNF-α浓度降低，（P＜0.05）;2）与对照组比较，舍曲林组、西酞普兰组患者患者血清TNF-α降幅明显增大，（P＜0.05），文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清TNF-α降幅无明显变化，（P＞0.05）;与舍曲林组比较，西酞普兰组、文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清TNF-α降幅明显减小，（P＜0.05），与西酞普兰组比较，文拉法辛组、瑞波西汀组患者血清TNF-α降幅明显减小，（P＜0.05），与文拉法辛组比较，瑞波西汀组患者血清TNF-α降幅无明显变化，（P＞0.05）。具体下降趋势为舍曲林组＞西酞普兰组＞文拉法辛组、瑞波西汀组、对照组。④血清CTX-I浓度1）与治疗前比较，舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组患者血清CTX-I浓度升高，（P＜0.05），瑞波西汀组、对照组患者血清CTX-I浓度无明显变化，（P＞0.05）;2）与对照组比较，舍曲林组、西酞普兰组、文拉法辛组患者血清升幅明显

关键词：抗抑郁剂骨密度 5-HT BGP CTX-I TNF-α OPG RANKL

抑郁症患者外周血BDNF、IDO、CORT及Treg细胞的研究

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抑郁症患者外周血BDNF、IDO、CORT及Treg细胞的研究

作者：喻云平贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:本文主要检测对比抑郁症患者和健康体检者体内脑源性神经营养因子(BDNF)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、皮质醇(CORT)及调节性T细胞(Treg细胞)等指标的改变;分析上述物质与抑郁症的相关性;寻找可能引起抑郁症的相关通路,为抑郁症的发... 详细信息

目的:本文主要检测对比抑郁症患者和健康体检者体内脑源性神经营养因子(BDNF)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、皮质醇(CORT)及调节性T细胞(Treg细胞)等指标的改变;分析上述物质与抑郁症的相关性;寻找可能引起抑郁症的相关通路,为抑郁症的发病机制提供新的理论依据。方法:选取2013年9月到2014年1月期间贵阳医学院附属医院、贵阳市第一人民医院抑郁症住院病人60例,另选取30例健康体检者做对照组;应用流式细胞技术检测静脉全血中的Treg细胞,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测静脉血清中BDNF、IDO、CORT等物质的含量;应用SPSS11.5软件对以上指标的检测数值进行统计学分析。结果:1.健康对照组与抑郁症患者结果比较如下:抑郁症患者血清中检测到的BDNF浓度为(6.72±1.33)μg/L,与健康对照的(13.11±2.16)μg/L比较明显降低,P0.05)。3.对各组的指标进行相关性分析结果如下:健康对照组中BDNF与IDO(r=0.433,P=0.017),BDNF与CORT(r=0.547,P=0.002),IDO与CORT(r=0.454,P=0.012);抑郁症患者组BDNF与IDO(r=-0.825,P系在一起,作为抑郁症发病机制的一个重要环节。

关键词：抑郁症脑源性神经营养因子吲哚胺2,3-双加氧酶皮质醇调节性T细胞

响应面BBD法优化红瑞木果多糖的超声提取工艺

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中医临床研究 2024年第19期16卷 44-49页

作者：高长久梁启超李文超王春辉孟令锴张朝立牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011

目的:运用响应面Box-Behnken实验设计(Box-Behnken Design,BBD)法分析提取时间、功率、温度和液料比4种因素对红瑞木果多糖提取率的影响,优化超声辅助提取工艺。方法:首先进行超声辅助提取红瑞木果多糖的单因素试验,获得提取时间、功率... 详细信息

目的:运用响应面Box-Behnken实验设计(Box-Behnken Design,BBD)法分析提取时间、功率、温度和液料比4种因素对红瑞木果多糖提取率的影响,优化超声辅助提取工艺。方法:首先进行超声辅助提取红瑞木果多糖的单因素试验,获得提取时间、功率、温度和液料比的最佳范围,进一步利用BBD建造模型,进行多糖提取率的测定,建立回归模型,进行方差分析,然后构建响应面和等高线图,最后进行最优参数的检验,从而确定4种因素的影响大小和最佳提取条件。结果:单因素实验显示,当温度、时间、功率和液料比分别为50℃、15 min、400 W和(20∶1)mL/g时,多糖提取率最大;拟合分析方程显示,影响红瑞木果多糖提取率的因素依次为提取功率>时间>温度>液料比;选取提取温度(40℃、50℃、60℃)、时间(10 min、15 min、20 min)、功率(300 W、400 W、500 W)、液料比(15∶1、20∶1、25∶1) mL/g进行响应面与等高线图分析,每两个因素的交互作用对红瑞木果多糖提取率的影响均呈椭圆形,交互作用均明显;最佳提取工艺条件显示,当温度、时间、功率和液料比分别为50℃、17 min、416 W、(19∶1)mL/g时,提取率为6.36%,与BBD模型的预测结果相当。结论:采用响应面BBD法所优化的红瑞木果多糖超声提取工艺具有良好的预测效果和较高的提取率,值得推广应用。

关键词：红瑞木果多糖超声提取响应面工艺优化

孕期妇女全氟辛烷磺酸和全氟辛酸血清负荷水平研究

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孕期妇女全氟辛烷磺酸和全氟辛酸血清负荷水平研究

作者：刘淳婷贵阳医学院

学位级别：硕士

目的描述某地孕期妇女的全氟辛烷磺酸(PFOS)和全氟辛酸(PFOA)血清负荷水平,为进一步探讨与孕期妇女血清中PFOS和PFOA水平相关的因素提供数据支持。方法于孕早期或孕中期采集孕期妇女的肘部静脉血,分离血清,经液液萃取,通过超高效液相色... 详细信息

目的描述某地孕期妇女的全氟辛烷磺酸(PFOS)和全氟辛酸(PFOA)血清负荷水平,为进一步探讨与孕期妇女血清中PFOS和PFOA水平相关的因素提供数据支持。方法于孕早期或孕中期采集孕期妇女的肘部静脉血,分离血清,经液液萃取,通过超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),对217例孕期妇女的血清标本进行PFOS和PFOA含量的检测。根据资料类型选用合适的统计方法,描述分析PFOS和PFOA血清负荷水平在不同年龄、民族、居住地区、居住时间、文化程度、孕次、子女数的孕期妇女群体间的分布。结果检测结果显示,某地孕期妇女血清中PFOS和PFOA含量的中位数分别为2.854 ng/mL(N=187)和7.966ng/mL(N=201),两种物质单项检出率分别为86.18%、92.63%,双项检出率为80.18%,孕期妇女血清中PFOS、PFOA两种物质的含量呈正相关(Y =0.305)。孕期妇女血清中的PFOS含量在不同年龄组间分布不同;孕期妇女血清中的PFOA含量在不同居住时间、已有子女数的群体间分布不同。结论研究表明,与国内外部分地区研究水平相比,调查地区孕期妇女血清中PFOS的负荷水平较低,PFOA的负荷水平较高。年龄是孕期妇女PFOS血清负荷水平的影响因素;居住时间、已有子女数是孕期妇女PFOA血清负荷水平的影响因素。

关键词：全氟辛烷磺酸(PFOS) 全氟辛酸(PFOA) 孕期血清

2021-2022年贵州省贵阳市肺结核患者灾难性支出及影响因素研究

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疾病监测 2024年第5期39卷 647-654页

作者：梁祖花潘春柳汪俊华黄延白璐璐陈洪张彬兵张敏张颢严贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳561113 贵阳市疾病预防控制中心贵州贵阳550024 天津医科大学公共卫生学院天津300070

目的评估贵州省贵阳市肺结核患者家庭灾难性支出发生情况及其影响因素,为减轻肺结核患者经济负担提供建议和依据。方法采用问卷调查与查询医院信息系统相结合的方式对患者进行回顾性调查,灾难性支出采用率描述,通过χ^(2)检验和Log-bino... 详细信息

目的评估贵州省贵阳市肺结核患者家庭灾难性支出发生情况及其影响因素,为减轻肺结核患者经济负担提供建议和依据。方法采用问卷调查与查询医院信息系统相结合的方式对患者进行回顾性调查,灾难性支出采用率描述,通过χ^(2)检验和Log-binomial回归分析其影响因素。结果贵阳市471例患者因治疗肺结核所支出的平均自付总费用为8201.00(3900.02,14809.33)元,53.72%(49.22%~58.22%)的肺结核患者发生了灾难性支出。多因素分析显示,人均年收入高(≥18000元)发生灾难性支出的风险低[患病率比(PR)=0.78,95%置信区间(CI):0.66~0.93],确诊延迟(PR=1.17,95%CI:1.02~1.35)、首诊机构为非结核病定点医院(PR=1.21,95%CI:1.04~1.40)、就诊次数≥3次(PR=1.42,95%CI:1.16~1.74)及住院次数≥2次(PR=2.37,95%CI:1.86~3.04)是患者发生灾难性支出的危险因素。分层分析结果显示,住院≥2次是城乡及不同职业、不同年龄段患者共有的危险因素,医保是农村患者特有的保护因素。结论贵阳市肺结核患者灾难性支出的发生率较高,需进一步加强人均年收入低、确诊延迟、首诊机构为非定点医院、多次就诊及住院患者的社会保障措施和健康教育宣传力度。针对农村患者要做好医保与其他救助政策的配合,同时实施主动筛查保证患者早发现、早诊断、早治疗,从而降低患者经济负担,减少发生灾难性支出情况。

关键词：结核,肺费用医疗灾难性支出影响因素

葛根素预处理对缺氧/复氧损伤后人脐静脉内皮细胞的保护作用

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葛根素预处理对缺氧/复氧损伤后人脐静脉内皮细胞的保护作用

作者：粟凤贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:观察葛根素(puerarin,PUE)预处理对缺氧(Hypoxia,H)/复氧(Reoxygenation,R)损伤后人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)蛋白表达量、e NOS Ser633位点磷酸化水平、诱导型NOS(induced NOS,i NOS)表达量,以及NOS酶活性的改变,以明确PUE预处理对内皮细胞的保护作用。方法:以人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)为研究对象,用缺氧条件培养2、4或8小时然后恢复常氧条件培养4小时的方法造成细胞缺氧/复氧(H/R)损伤。将HUVECs随机分为8组:正常对照(Control)组、缺氧2小时/复氧4小时(H2/R4)组、缺氧4小时/复氧4小时(H4/R4)组、缺氧8小时/复氧4小时(H8/R4)组、葛根素预处理(PUE)组、PUE+H2/R4组、PUE+H4/R4组及PUE+H8/R4组。葛根素预处理组均用含葛根素终浓度为1.0×10-3mol/L的培养基预先处理24小时。采用western blotting方法分别检测各组细胞的e NOS总蛋白表达量、e NOS Ser633位点磷酸化水平及i NOS蛋白表达量。采用化学比色法检测各组细胞中NOS活性。结果:与Control组相比较,H/R培养后HUVECs的e NOS总蛋白表达及e NOS Ser633磷酸化水平明显下调(P<0.05),i NOS蛋白表达量明显增加(P<0.05);在H/R各组间,随着缺氧培养时间的延长,e NOS总蛋白表达量及其Ser633位点磷酸化水平逐渐下降(P<0.05),i NOS蛋白表达无明显变化;与同时间点H/R组比较,应用PUE预处理后e NOS总蛋白表达及e NOS Ser633磷酸化水平明显上调(P<0.05),i NOS蛋白表达减少(P<0.05);单纯应用PUE组与Control组相比,e NOS总蛋白表达、e NOS Ser633位点磷酸化水平及i NOS蛋白表达无明显变化。与Control组相比,H/R培养后HUVECs的总NOS(total NOS,t NOS)和i NOS活力增加(P<0.01),而结构型NOS(constitutive NOS,c NOS)活力下降(P<0.05);在H/R各组间,随着缺氧培养时间的延长,t NOS和i NOS活力无明显变化,c NOS活力逐渐下降(P<0.05);与同时间点H/R组比较,PUE预处理后i NOS活力下降(P<0.05),c NOS活力明显增加(P<0.01),t NOS活力无明显变化;单纯PUE预处理组与Control组相比,t NOS、i NOS及c NOS活力无明显变化。结论:缺氧/复氧培养后可以使HUVECs e NOS总蛋白表达及e NOS Ser633位点磷酸化水平降低、c NOS酶活力降低,同时i NOS蛋白表达增加、i NOS酶活力增强,内皮细胞功能受损。应用PUE预处理可以上调缺氧/复氧损伤后HUVECs e NOS总蛋白表达及e NOS Ser633位点磷酸化水平,并增加酶活性,并能降低i NOS蛋白表达及酶活性,从而起到保护内皮细胞的作用。

关键词：葛根素人脐静脉内皮细胞缺氧/复氧损伤内皮型一氧化氮合酶