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NLRP3炎症小体在心力衰竭中的作用及中医药干预的研究进展

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 894-901页

作者：王栋李芳赫于雪高阔郭淑贞北京中医药大学中医学院北京102488

心力衰竭存在高发病率、高病死率的特征,寻求针对心力衰竭的有效治疗策略并进一步提升临床疗效一直是重要的研究方向。炎症失衡已被证明是心力衰竭的重要病理环节之一,与心功能障碍、心肌纤维化等不良事件呈正相关。近些年研究证实NOD... 详细信息

心力衰竭存在高发病率、高病死率的特征,寻求针对心力衰竭的有效治疗策略并进一步提升临床疗效一直是重要的研究方向。炎症失衡已被证明是心力衰竭的重要病理环节之一,与心功能障碍、心肌纤维化等不良事件呈正相关。近些年研究证实NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain-associated protein 3,NLRP3)炎症小体激活在不同因素诱导心力衰竭的炎症失衡环节中具有共性调控机制,并且部分中药及其有效成分能够显著抑制NLRP3炎症小体激活而改善心力衰竭。该文首先概述了NLRP3炎症小体的基本情况,然后总结了NLRP3炎症小体在不同因素诱导心力衰竭中的调控机制,最后介绍了近年来抑制NLRP3炎症小体而改善心力衰竭的中药及有效成分的研究进展,以期为中西医结合防治心力衰竭的创新药物研究提供参考。

关键词：心力衰竭炎症 NLRP3炎症小体中药

艾灸预处理通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路减轻脑缺血再灌注损伤大鼠炎性反应

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针刺研究 2024年第3期49卷 238-246页

作者：于燕艳杨越蒋洁新疆医科大学中医学院乌鲁木齐830011

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路,探讨艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠炎性因子的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸预处理3 d组(艾灸1组)、艾灸预处理5 d... 详细信息

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路,探讨艾灸预处理对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠炎性因子的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸预处理3 d组(艾灸1组)、艾灸预处理5 d组(艾灸2组)和艾灸预处理7 d组(艾灸3组),每组15只。各艾灸预处理组在造模前分别艾灸“百会”“大椎”“足三里”3、5、7 d,20 min/次,1次/d。末次艾灸干预20 min后,模型组和各艾灸组采用线栓法制备大脑中动脉阻塞模型。采用神经功能缺损评分评估大鼠脑神经损伤程度;TTC染色法观察脑梗死体积;HE染色法观察缺血区大脑皮层的形态变化;ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、S-100β蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量;免疫组织化学法和Western blot法检测缺血区大脑皮层PI3K、磷酸化(p)-PI3K、AKT、mTOR蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分、脑梗死体积明显升高(P<0.01),血清中IL-1β、TNF-α、S-100β、NSE含量明显升高(P<0.01),大脑皮层缺血区PI3K、p-PI3K、AKT、mTOR蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各艾灸预处理组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积下降(P<0.01),血清中IL-1β、TNF-α、S-100β、NSE含量降低(P<0.01),大脑皮层缺血区PI3K、p-PI3K、AKT、mTOR蛋白表达升高(P<0.01)。与艾灸1组和艾灸2组比较,艾灸3组血清中IL-1β、TNF-α、S-100β、NSE含量降低(P<0.05),大脑皮层缺血区PI3K、p-PI3K、AKT、mTOR蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸预处理可明显改善CIRI大鼠的神经功能,抑制血清炎性因子IL-1β、TNF-α,抑制脑组织损伤标志物S-100β蛋白和NSE,可能与激活PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。其中艾灸预处理7 d对CIRI的保护作用优于5 d和3 d。

关键词：艾灸预处理脑缺血再灌注损伤磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

西黄丸抑制卵巢癌细胞线粒体能量代谢的效应及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 70-76页

作者：颜显欣洪守亿马瑞瑞王艳秋布筠艺马民暨南大学中医学院广州510632

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法... 详细信息

目的:研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞,分别加入不同质量浓度(0、5、10、15、20 g·L^(-1))西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响;用蛋白质量检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度;流式细胞术检测SKOV3和HEY细胞活性氧(ROS)含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)及印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ)的表达;Mito-Tracker Green染色观察SKOV3和HEY细胞线粒体形态学变化。结果:与空白组比较,不同浓度西黄丸浸提液给药24、48 h能明显抑制卵巢癌SKOV3和HEY细胞存活率(P<0.05,P<0.01),呈浓度依赖关系。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))的ATP水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与西黄丸浸提液组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸组(20 g·L^(-1))ATP浓度明显降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞内ROS含量明显增加(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液组(10 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ROS含量明显增加(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),且随着西黄丸浸提液浓度升高,ARHⅠ蛋白表达逐渐升高;与西黄丸组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))ARHⅠ蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与空白组比较,西黄丸浸提液组(10、15、20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞的PGC1α、TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与西黄丸浸提液组(10、15 g·L^(-1))比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))HEY细胞TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与空白组比较,西黄丸浸提液组(20 g·L^(-1))SKOV3和HEY细胞Mito-Tracker荧光强度明显降低(P<0.05)。结论:西黄丸能破坏卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体功能并降低细胞能量代谢,从而抑制SKOV3和HEY细胞增殖,其机制可能是通过上调ARHⅠ,抑制PGC1α/TFAM信号轴实现的。

关键词：西黄丸印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHⅠ) 卵巢癌线粒体能量代谢

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外泌体与肺纤维化研究进展

中国生物工程杂志 2024年第4期44卷 67-75页

作者：叶灏鑫王晓旭李明霏王宇河北大学中医学院保定071002

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,... 详细信息

肺纤维化是一种由肺泡外基质蛋白过度沉积导致的肺部不可逆的结构和功能改变的肺部疾病,表现为纤维化重构和肺泡破坏。外泌体作为一种细胞外囊泡,可通过递送特定细胞类型产生的功能性核酸和蛋白质来介导细胞间通讯。近年来的研究发现,外泌体在肺纤维化的诊断和治疗中具有重要作用,被认为是一种潜在的生物治疗方法和药物递送载体。研究外泌体在肺纤维化发生发展中的作用,以期为肺纤维化的外泌体治疗研究提供新的思路。

关键词：外泌体肺纤维化细胞外囊泡药物递送载体诊断和治疗

基于TLR4/MyD88通路探究针刺足三里对慢性阻塞性肺疾病大鼠的干预效果

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2507-2511页

作者：刘森田琳胡秋生李晓峰河北中医学院研究生学院河北以岭医院针灸科

目的基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88通路探究针刺足三里对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的干预效果。方法将40只大鼠选为实验对象，其中10只作为对照组，剩余30只用于构建COPD模型。于建模第15天在建模大鼠中随机选取10只作... 详细信息

目的基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD)88通路探究针刺足三里对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的干预效果。方法将40只大鼠选为实验对象，其中10只作为对照组，剩余30只用于构建COPD模型。于建模第15天在建模大鼠中随机选取10只作为早期模型组，烟熏55 d后将剩余20只建模大鼠分为模型组、普通COPD组各10只，普通COPD组给予针刺足三里，空白组、模型组给予生理盐水10 ml/kg。检测对比各组炎性因子、肺功能及TLR4、MyD88 mRNA及相关蛋白相对表达量。结果与对照组相比，模型组、早期模型组、普通COPD组白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平、TLR4、MyD88 mRNA及蛋白表达量明显升高，0.3 s用力呼气量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)、呼气峰流速(PEF)水平明显降低(P<0.05);与模型组相比，早期模型组、普通COPD组IL-8、TNF-α、IL-6水平、TLR4、MyD88 mRNA及蛋白表达量明显降低，FEV0.3、FVC、PEF水平明显升高(P<0.05);与早期模型组相比，普通COPD组IL-8、TNF-α、IL-6水平、TLR4、MyD88 mRNA及蛋白表达量明显升高，FEV0.3、FVC、PEF水平明显降低(P<0.05)。结论针刺足三里可改善COPD大鼠肺功能，减轻炎性反应，且干预时间越早效果越佳，这种疗效可能与TLR4/MyD88信号通路的抑制有关。

关键词：慢性阻塞性肺疾病 Toll样受体4 髓样分化因子88 炎性因子肺功能

基于PI3K/Akt/mTOR通路探讨补肾活血方对血管性痴呆大鼠突触可塑性的影响

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：杨帆赵若熙陈园春景佳星刘海叶高飞马文璨于文涛河北中医学院针灸推拿学院河北省心脑血管病中医药防治重点实验室河北中医学院基础医学院河北中医学院研究生学院河北省中医针灸优势病症国际联合研究中心

目的：观察补肾活血方对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响，并探讨其改善血管性痴呆(VD)大鼠突触可塑性的可能机制。方法：SD大鼠40只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补肾活血方组，每组10只。除假手术组外，均采用两血管阻断法(2... 详细信息

目的：观察补肾活血方对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响，并探讨其改善血管性痴呆(VD)大鼠突触可塑性的可能机制。方法：SD大鼠40只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补肾活血方组，每组10只。除假手术组外，均采用两血管阻断法(2-VO)复制大鼠VD模型，补肾活血方组以10.14 g·kg-1体重给予补肾活血方药液灌胃，尼莫地平组大鼠以11 mg·kg-1体重尼莫地平药液灌胃。假手术组、模型组均以10 mL·kg-1体重灌服生理盐水，每日1次，连续28 d。对各组大鼠进行Morris水迷宫实验，以观察它们的学习和记忆能力；尼氏染色法观察大鼠大脑的海马病理形态变化；透射电子显微镜(TEM)观察脑海马神经元和突触超微结构变化；免疫组化测定海马CA1区突触素(SYN)及突触后密度蛋白95(PSD-95)表达；高尔基染色法(Golgi)观察海马神经元树突形态；Western blot和反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路蛋白及mRNA表达情况。结果：与假手术组相比，VD大鼠的学习和记忆能力降低，海马神经元病理损伤明显，神经元树突分支异常。海马组织中SYN、PSD-95蛋白表达降低(P<0.05)，PI3K、Akt、p-Akt和mTOR的蛋白和mRNA表达下降(P<0.05)，补肾活血方可减轻VD大鼠学习记忆损伤，改善海马神经元及突触形态，提高突触标志蛋白SYN和PSD-95表达以及信号分子PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白和mRNA表达(P<0.05)。结论：补肾活血方可以提高VD大鼠学习记忆能力，这可能与该方药调节PI3K/Akt/mTOR信号通路，改善突触可塑性有关。

关键词：补肾活血方血管性痴呆海马突触可塑性 PI3K/Akt信号通路

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青蒿鳖甲汤治疗肺部疾病的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 258-269页

作者：李燕李笑刘妍君郭平山东中医药大学中医学院济南250355

青蒿鳖甲汤出自清代吴鞠通的《温病条辨》,由青蒿、鳖甲、知母、牡丹皮、生地黄5味药组成,具有养阴透热之功效,常用于阴虚内热证的治疗。正气虚损,邪毒入侵,耗伤肺阴,虚热内生,为肺癌、肺炎等肺部疾病的病机之一,其治则为养阴益气,清肺... 详细信息

青蒿鳖甲汤出自清代吴鞠通的《温病条辨》,由青蒿、鳖甲、知母、牡丹皮、生地黄5味药组成,具有养阴透热之功效,常用于阴虚内热证的治疗。正气虚损,邪毒入侵,耗伤肺阴,虚热内生,为肺癌、肺炎等肺部疾病的病机之一,其治则为养阴益气,清肺透热。因此,青蒿鳖甲汤之功效基本契合肺部疾病之治则,故广泛应用于肺部疾病治疗,如肺癌癌性发热、咯血或合并骨转移及肺结核、社区获得性肺炎、新型冠状病毒感染合并肺炎等,疗效显著。基础实验表明,其机制可能为通过多靶点通路发挥调节炎症反应、维持免疫平衡、调节肠道菌群、抗肿瘤、调节激素分泌、调节脂类代谢、抗氧化等作用。此外,青蒿鳖甲汤单味药的主要有效活性成分青蒿素、木犀草素、谷甾醇、豆甾醇、鳖甲多糖、梓醇、芍药苷、槲皮素、丹皮酚、没食子酸、知母皂苷、芒果苷等也具有良好的抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、炎症调节和免疫调节的作用。该文通过对青蒿鳖甲汤治疗肺部疾病的临床研究和基础研究进行综述,以期为该方的临床应用提供理论依据。

关键词：青蒿鳖甲汤肺部疾病临床应用作用机制

基于中医传承辅助平台与网络药理学探析中药干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化的作用机制

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中草药 2024年第1期55卷 190-204页

作者：卫博凯胡静上海中医药大学中医学院上海201203

目的运用中医传承辅助平台V3.0软件探析中医药治疗肺纤维化的组方用药规律,获取核心药物组合;运用网络药理学探析其干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化作用机制。方法筛选2000年1月—2023年6月中医药治疗肺纤维化的临床研究文献,利用... 详细信息

目的运用中医传承辅助平台V3.0软件探析中医药治疗肺纤维化的组方用药规律,获取核心药物组合;运用网络药理学探析其干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化作用机制。方法筛选2000年1月—2023年6月中医药治疗肺纤维化的临床研究文献,利用中医传承辅助平台的统计分析、关联规则分析等功能,归纳出中医药治疗肺纤维化的用药特点及核心药物组合,并运用网络药理学方法探寻核心药物组合干预新型冠状病毒感染及其后遗症肺纤维化的潜在有效成分、作用靶点及信号通路。结果共筛选出118首有效处方,使用中药185味,使用频次前20位中药以补气类与活血化瘀类为主,在支持度≥10、置信度≥0.6时筛选出21味重要中药组合。确定在支持度≥20、置信度≥0.8时的药物组合“黄芪-当归-川芎”为中药核心药物组合,共含有38个有效成分,121个共同靶点,涉及蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1))、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)14、MAPK1、AP-1转录因子亚基(AP-1 transcription factor subunit,JUN)等关键靶点,核心中药成分包括槲皮素、山柰酚、川芎哚等。结论临床上中医药治疗肺纤维化以活血化瘀法及补气类、活血化瘀类中药为主,中药核心药物组合“黄芪-当归-川芎”可能通过晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end products-receptor for advanced glycation end products,AGE-RAGE)信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、流体剪切力与动脉粥样硬化信号通路干预新型冠状病毒感染后遗症肺纤维化。

关键词：新型冠状病毒感染肺纤维化中医药活血化瘀法黄芪-当归-川芎槲皮素山柰酚川芎哚

乌头汤通过下调HIF-1α/VEGFA/Ang信号通路抑制AIA风寒湿痹证大鼠血管翳形成

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 10-18页

作者：欧阳丹李鑫湛港香陈正马远志邹婕曹建中湖南中医药大学中医学院长沙410208

目的:探讨乌头汤对佐剂型关节炎(AIA)风寒湿痹证大鼠血管翳形成的抑制作用及其潜在作用机制。方法:将无特定病原体(SPF)雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为空白组、AIA风寒湿痹证组[完全弗氏佐剂(CFA),200μg]、乌头汤组(15 g·kg^(-1)... 详细信息

目的:探讨乌头汤对佐剂型关节炎(AIA)风寒湿痹证大鼠血管翳形成的抑制作用及其潜在作用机制。方法:将无特定病原体(SPF)雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为空白组、AIA风寒湿痹证组[完全弗氏佐剂(CFA),200μg]、乌头汤组(15 g·kg^(-1)·d^(-1))、吲哚美辛组(10 mg·kg^(-1)),除空白组外,其余各组注射CFA前给予风寒湿刺激。连续给药30 d,期间观察AIA风寒湿痹证大鼠的基本情况、发病时间、关节炎评分、足容积。最终取外周动脉血、踝关节和滑膜组织。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGFA)蛋白含量和风湿3项,包括抗O(ASO)、C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF);苏木素-伊红(HE)染色观察关节组织形态学改变;免疫组化检测踝关节通路关键蛋白HIF-1α和VEGFA;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠滑膜组织中HIF-1α、VEGFA、血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)mRNA表达。结果:与空白组比较,AIA风寒湿痹证大鼠足肿容积和关节炎评分显著升高(P生,血管新生、血管翳形成,骨破坏程度加重,提示模型构建成功。乌头汤干预后,发病时间显著延迟(P生明显缓解,血管新生及血管翳减少,骨破坏减轻;滑膜HIF-1α、VEGFA、Ang-1、Ang-2mRNA明显降低(P<0.05,P<0.01);血清与踝关节HIF-1α和VEGFA蛋白表达显著下降(P<0.01)。在吲哚美辛组中,大鼠发病时间显著延迟(P<0.01);足容积和关节炎评分显著降低(P<0.01);血清CRP、RF、和ASO含量显著下降(P<0.01);HIF-1α/VEGFA/Ang信号通路激活,病理组织损伤改善。结论:乌头汤可延缓AIA风寒湿痹证大鼠发病时间,降低足容积、关节炎评分、风湿活动度,改善关节组织病理情况,对血管翳形成具有抑制作用,其作用机制可能与下调HIF-1α/VEGFA/Ang通路表达有关。

关键词：类风湿关节炎乌头汤血管翳缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子A(VEGFA)/血管生成素(Ang)信号通路