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CRISPR-Cas系统在病原微生物分子诊断中的研究进展

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检验医学与临床 2024年第5期21卷 687-691,717页

作者：龙文巧许永杰(综述) 张华(审校) 遵义医科大学贵州遵义563000 贵州省人民医院检验科贵州贵阳550000

快速、灵敏、准确的病原微生物检测方法对感染性疾病的诊治及防控至关重要。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白(Cas)系统的检测技术在病原微生物核酸检测中具有高灵敏度和高特异度的特点,该文概述了CRISPR-Cas系... 详细信息

快速、灵敏、准确的病原微生物检测方法对感染性疾病的诊治及防控至关重要。基于成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白(Cas)系统的检测技术在病原微生物核酸检测中具有高灵敏度和高特异度的特点,该文概述了CRISPR-Cas系统的作用机制及不同Cas的核酸酶活性,总结了基于CISPR-Cas系统的检测技术在病原微生物核酸检测中的研究现状,对该系统在核酸检测应用中的挑战进行了综合分析,并提出了目前存在的一些解决方案。目前基于CRISPR-Cas系统的非核酸分析物检测仍处于前期研究阶段,但其在扩大检测范围、缩短检测时间、提高检测灵敏度等方面具有较大潜力,为开发基于CRISPR-Cas系统的病原微生物检测平台提供新思路。

关键词：成簇规律间隔短回文重复序列-成簇规律间隔短回文重复序列相关蛋白系统病原微生物核酸检测非核酸分析物检测应用

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MEF2C在APP/PS1双转基因小鼠脑中表达及对炎症的调节作用

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中国老年学杂志 2024年第3期44卷 669-674页

作者：任家谋徐贵全叶文仙郭义尘坚贵阳市第四人民医院检验科贵州贵阳550004 贵阳市第四人民医院消化内科贵州贵阳550004

目的探讨肌细胞增强因子(Mef)2c在APPswe/PSEN1dE9(以下简称APP/PS1)转基因小鼠中表达及对小鼠大脑中炎症的调节作用。方法采用免疫组织化学方法,检测APP/PS1转基因小鼠中Mef2c和β淀粉样蛋白(Aβ)的表达及分布;Western印迹检测APP/PS... 详细信息

目的探讨肌细胞增强因子(Mef)2c在APPswe/PSEN1dE9(以下简称APP/PS1)转基因小鼠中表达及对小鼠大脑中炎症的调节作用。方法采用免疫组织化学方法,检测APP/PS1转基因小鼠中Mef2c和β淀粉样蛋白(Aβ)的表达及分布;Western印迹检测APP/PS1转基因小鼠脑中Mef2c蛋白表达;将沉默病毒Ad-shRNA-Mef2c及空载病毒Ad-shRNA-NC通过侧脑室注射方法分别处理6月龄和10月龄的APP/PS1转基因小鼠和C57BL/6J(以下简称C57)野生小鼠;刚果红染色检测各组脑组织皮质中老年斑变化;免疫荧光检测各组小胶质细胞特异性蛋白(IBA)1、白细胞介素(IL)-6在各组脑皮质中的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠皮质中IL-6表达水平。结果与同月龄C57野生小鼠相比,6月龄和10月龄APP/PS1转基因小鼠皮质中,免疫组化结果显示,Mef2c表达显著降低,Aβ沉积明显(P<0.05,P<0.01);Western印迹结果显示,小鼠皮质中Mef2c蛋白表达显著降低(P<0.05);刚果红染色显示,皮质中老年斑沉积明显;免疫荧光结果显示,皮质中IBA1和IL-6表达明显增加(P<0.05);ELISA结果显示,皮质中IL-6蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 Mef2c在APP/PS1转基因小鼠脑中表达降低且在下调Mef2c水平后能够增加Aβ沉积,促进炎症因子释放。

关键词：肌细胞增强因子2c APPswe/PSEN1dE9 β淀粉样蛋白

自动化软式内镜通道刷洗系统对内镜清洗质量的影响

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中华消化内镜杂志 2024年第2期41卷 142-146页

作者：王缃兰商任铎刘军黄兴民骆孜蔡璇于红刚武汉大学人民医院消化内镜中心武汉430060 武汉大学人民医院检验科武汉430060

目的评估自动化软式内镜通道刷洗系统在内镜再处理中的效果。方法采用随机对照设计,诊疗后的内镜使用随机数字表法分为自动组和手动组,每组200条。自动组内镜清洗时采用自动化软式内镜通道刷洗系统对每个管道刷洗3次,手动组内镜清洗时... 详细信息

目的评估自动化软式内镜通道刷洗系统在内镜再处理中的效果。方法采用随机对照设计,诊疗后的内镜使用随机数字表法分为自动组和手动组,每组200条。自动组内镜清洗时采用自动化软式内镜通道刷洗系统对每个管道刷洗3次,手动组内镜清洗时洗消人员对每个管道常规手动刷洗3次。主要终点指标为内镜清洗质量合格率,次要终点指标为洗消人员刷洗内镜用时。结果内镜整体清洗合格率自动组为90.0%(180/200),手动组为81.0%(162/200),差异有统计学意义(χ^(2)=6.534,P=0.011),其中,胃镜清洗合格率自动组明显高于手动组[92.0%(127/138)比81.6%(120/147),χ^(2)=6.658,P=0.010],肠镜清洗合格率自动组与手动组比较差异无统计学意义[85.5%(53/62)比79.2%(42/53),χ^(2)=0.774,P=0.379]。自动组5条内镜刷洗用时(5.17±0.42)min,手动组为(9.60±0.53)min,自动组用时明显少于手动组(t=92.644,P<0.001)。结论自动化软式内镜通道刷洗系统相比手动刷洗,可以提高内镜的清洗合格率,提高洗消人员的工作效率,值得临床推广应用。

关键词：内窥镜清洗刷洗微生物监测

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中华神经科杂志 2024年第8期57卷 881-889页

作者：张玉薇张杰文娄桂予张冰陈玉升梅文丽祁娜雷星星杨科河南省人民医院医学遗传研究所郑州450003 河南省人民医院神经内科郑州450003 河南省人民医院神经外科郑州450003 河南省人民医院神经电生理科郑州450003

目的分析3个在儿童期起病的复杂型遗传性痉挛性截瘫(HSP)5型家系先证者的临床表型和遗传学特征,同时对HSP5型的遗传学诊断方法进行探索,以提高临床对此病的诊断及鉴别诊断能力。方法收集2020年6月至2023年1月就诊于河南省人民医院的3个H... 详细信息

目的分析3个在儿童期起病的复杂型遗传性痉挛性截瘫(HSP)5型家系先证者的临床表型和遗传学特征,同时对HSP5型的遗传学诊断方法进行探索,以提高临床对此病的诊断及鉴别诊断能力。方法收集2020年6月至2023年1月就诊于河南省人民医院的3个HSP5型家系的临床资料,对家系中的患者进行全外显子组测序(WES),分析与表型相关的基因变异类型,包括单核苷酸变异(SNV)和小片段插入/缺失变异(INDEL)分析,同时对特定基因的动态突变区域进行分析。结果3个家系中的先证者均为复杂型HSP:家系1先证者临床表现为双下肢无力、尿急、共济失调;家系2先证者表现为智力稍低、双下肢无力、构音障碍,头颅磁共振成像示脑白质病变;家系3先证者表现为双下肢肌无力、痉挛、尿频、共济失调。测序结果显示:先证者1及其弟弟存在CYP7B1基因c.1171G>T(父源)及c.1249C>T(母源)复合杂合变异;先证者2及其妹妹存在CYP7B1基因c.334C>T(父源)及c.259+2T>C(母源)复合杂合变异;先证者3存在CYP7B1基因c.334C>T(父源)及c.1082G>A(母源)复合杂合变异。其中c.1171G>T为未报道过的新变异。基因动态突变分析结果显示,患儿的ATXN1/2/3/6/7/8/12、DRPLA、TBP基因的CAG重复次数均在正常范围内。根据患儿的临床表现及基因检测结果,HSP5型诊断明确。结论本研究中的3个家系均为CYP7B1基因复合杂合变异导致的复杂型HSP5型。WES可同时分析SNV、INDEL和动态突变进而明确相关疾病的诊断,可以作为HSP5型的一种有效的检测方法。

关键词：痉挛性截瘫,遗传性 CYP7B1基因突变

超声医师与重症医师联合急会诊模式对急性呼吸循环衰竭患者的诊疗研究

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中国超声医学杂志 2024年第3期40卷 257-260页

作者：赵浩天任珊刘奕龙玲赵鹤龄河北省人民医院超声科河北省人民医院重症医学科

目的探究超声医师与重症医学科医师联合急会诊模式对急性呼吸循环衰竭患者的诊疗价值。方法将120例接受急会诊的急性呼吸衰竭和(或)循环衰竭(休克)患者随机分为实验组(超声医师+重症医师)和对照组(单独重症医师)各60例。实验组经超声... 详细信息

目的探究超声医师与重症医学科医师联合急会诊模式对急性呼吸循环衰竭患者的诊疗价值。方法将120例接受急会诊的急性呼吸衰竭和(或)循环衰竭(休克)患者随机分为实验组(超声医师+重症医师)和对照组(单独重症医师)各60例。实验组经超声医师检查心脏(结构、功能、心输出量等指标)、下腔静脉和肺，协助重症医师诊断，对照组采用重症医师传统会诊方式。记录转入重症医学科例数并随访转入重症医学科后诊疗过程、并发症和预后等资料。结果实验组37例、对照组42例转入重症医学科。实验组转入重症医学科后48 h液体入量、48 h液体平衡量、7 d内肺水肿发生、容量过负荷发生比例均低于对照组(P<0.05);实验组对休克正确诊断比例高于对照组(P<0.05)。结论超声医师与重症医师联合急会诊模式对休克诊断和并发症预防具有一定应用价值。

关键词：肺超声呼吸衰竭心功能重症诊断

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下咽部脂肪肉瘤1例

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第5期59卷 492-494页

作者：魏晓泉王莉莉李娟丽杨蒙生甘肃省人民医院耳鼻咽喉头颈外科兰州730000 甘肃省人民医院放射科兰州730000

本文报道1例发生于中年男性下咽部的脂肪肉瘤(Hypopharyngeal liposarcoma)。患者,男,47岁,主因“夜间睡眠打鼾、憋气1年余伴不能平卧位睡眠1个月”就诊,完善电子喉镜检查提示下咽部新生物、喉梗阻,完善MRI提示颈深部咽旁间隙肿物,部分... 详细信息

本文报道1例发生于中年男性下咽部的脂肪肉瘤(Hypopharyngeal liposarcoma)。患者,男,47岁,主因“夜间睡眠打鼾、憋气1年余伴不能平卧位睡眠1个月”就诊,完善电子喉镜检查提示下咽部新生物、喉梗阻,完善MRI提示颈深部咽旁间隙肿物,部分突入下咽部,边界清楚。行颈部开放手术完整切除肿物,病理检查提示高分化脂肪肉瘤,术后未进一步行放化疗。术后2年内定期复查,未见复发,恢复良好。

关键词：脂肪肉瘤下咽部喉梗阻定期复查中年男性平卧位开放手术完整切除

产前诊断9q34微重复综合征合并22q13微缺失综合征1例

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中华医学遗传学杂志 2024年第8期41卷 1019-1020页

作者：赵晶晶赵向宇李琳临沂市人民医院妇产科临沂276003 临沂市人民医院遗传检验科临沂276003

孕妇25岁,第1次妊娠人工流产,第2次孕8周胚胎停止发育,第3次妊娠无创产前筛查检测结果提示9q34.11-9q34.3区段存在5.81 Mb的重复,于2023年6月13日到临沂市人民医院遗传咨询门诊就诊。孕妇于孕17^(+6)周行羊膜腔穿刺,羊水细胞行染色体核... 详细信息

孕妇25岁,第1次妊娠人工流产,第2次孕8周胚胎停止发育,第3次妊娠无创产前筛查检测结果提示9q34.11-9q34.3区段存在5.81 Mb的重复,于2023年6月13日到临沂市人民医院遗传咨询门诊就诊。孕妇于孕17^(+6)周行羊膜腔穿刺,羊水细胞行染色体核型分析和染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA);夫妻行外周血高分辨染色体和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测。

关键词：遗传咨询门诊胚胎停止发育临沂市人民医院羊膜腔穿刺羊水细胞人工流产高分辨染色体产前诊断

2022年全国血流感染细菌耐药监测报告:革兰阴性菌

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中华临床感染病杂志 2024年第1期17卷 42-57页

作者：刘志盈陈云波嵇金如应超群杨青孔海深茆海丰丁卉田鹏鹏宋江勤刘永云王际亮金炎戴媛媛周义正耿燕陈凤訇王璐李岩岩刘丹张鹏曹俊敏李小燕宋迪静强鑫华李艳红张秋莹廖国林黄颖张保华郭良李爱云康海全黄东红满思金李卓尹佑东梁坤鹏董海新刘东华徐红云董银樵徐荣郑琳虎淑妍李建刘强栾亮沈继录张利侠全博颜小平戚晓燕乔登嫣刘卫平夏修三孟灵梁金花沈萍肖永红浙江大学医学院附属第一医院传染病重症诊治全国重点实验室杭州310003 感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003 江苏省连云港市第一人民医院检验科连云港222002 浙江省丽水市中心医院检验科丽水323000 湖北省荆州市第一人民医院检验科荆州434000 湖北省天门市第一人民医院检验科天门431799 山东省滨州医学院附属医院检验科滨州256603 山东省胜利油田中心医院检验科东营257034 山东省立医院检验科济南250021 安徽省立医院检验科合肥230036 湖北省荆州市中心医院检验科荆州434020 西安交通大学第二附属医院检验科西安710004 福建省莆田市第一医院检验科莆田351100 安徽省六安市人民医院检验科六安237000 山东省淄博市中心医院检验科淄博255036 江西省九江市第一人民医院检验科九江332000 安徽省皖南医学院第一附属医院检验科芜湖241001 浙江省中医院检验科杭州310006 南方医科大学第五附属医院检验科广州510900 浙江省海宁市人民医院检验科海宁314400 浙江省湖州市第一人民医院检验科湖州313099 河南省安阳地区医院检验科安阳455000 湖北省随州市中心医院检验科随州441300 湖北省武汉市普仁医院检验科武汉430081 安徽医科大学第一附属医院检验科合肥230022 安徽省黄山市人民医院检验科黄山245000 福建省宁德市闽东医院检验科福安355000 浙江大学医学院附属妇产科医院检验科杭州310006 江苏省徐州医科大学附属医院检验科徐州220005 福建医科大学附属第二医院检验科泉州362002 山东省滕州市中心人民医院检验科滕州277500 西安医学院第一附属医院检验科西安710077 云南省盈江县人民医院检验科盈江679301 安徽省蚌埠医科大学第二附属医院检验科蚌埠233040 山东省济宁医学院附属医院检验科济宁272000 湖北省孝感市中心医院检验科孝感432009 云南省第二人民医院检验科昆明650021 安徽省天长市人民医院检验科天长239300 江西省宜春市人民医院检验科宜春336000 浙江省宁波大学附属第一医院检验科宁波315211 甘肃省庆阳市人民医院检验科庆阳745000 安徽省六安世立医院检验科六安237000 河南大学淮河医院检验科开封475000 中国人民解放军北部战区总医院检验科沈阳110015 安徽医科大学第一附属医院北区检验科合肥230041 陕西省人民医院检验科西安710068 湖北省荆州市第二人民医院检验科荆州530031 四川省自贡市第三人民医院检验科自贡643000 安徽省六安市金安区妇幼保健院检验科六安237006 甘肃省中医院检验科兰州730000 内蒙古自治区人民医院检验科呼和浩特010000 安徽省庐江县人民医院检验科巢湖231500 兰州大学第二医院检验科兰州730099 黑龙江省牡丹江医学院附属红旗医院检验科牡丹江157011

目的监测全国血流感染革兰阴性菌病原谱分布及其耐药趋势,为临床血流感染治疗及细菌耐药防控提供参考。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟成员单位2022年1至12月所有分离自血培养阳性的革兰阴性菌,按照美国临床和实验室标准化研究所... 详细信息

目的监测全国血流感染革兰阴性菌病原谱分布及其耐药趋势,为临床血流感染治疗及细菌耐药防控提供参考。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟成员单位2022年1至12月所有分离自血培养阳性的革兰阴性菌,按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)推荐的稀释法进行抗菌药物敏感性测定。采用WHONET 5.6和SPSS 25.0软件进行统计分析。结果共收集51家医院革兰阴性菌9035株,其中肠杆菌目细菌7895株(87.4%),非发酵菌1140株(12.6%);排在前5位的病原菌为大肠埃希菌4510株(49.9%)、肺炎克雷伯菌2340株(25.9%)、铜绿假单胞菌534株(5.9%)、鲍曼不动杆菌复合体405株(4.5%)及阴沟肠杆菌327株(3.6%)。产超广谱β-内酰胺酶(EBSLs)大肠埃希菌、EBSLs(+)肺炎克雷伯菌和EBSLs(+)变形杆菌属检出率分别为47.1%(2095/4452)、21.0%(427/2033)和41.1%(58/141);耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)检出率分别为1.3%(58/4510)和13.1%(307/2340);CREC和CRKP对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率分别为62.1%(36/58)和9.8%(30/307)。耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)复合体的检出率为59.5%(241/405),鲍曼不动杆菌复合体对替加环素和多黏菌素B的耐药率均医院的CREC、CRKP、CRPA、CRAB、ESBLs(+)大肠埃希菌及ESBLs(+)肺炎克雷伯菌检出率均高于地市级医院(χ^(2)=11.953、81.183、10.404、5.915、12.415和6.459,P医院较为突出。

关键词：革兰氏阴性菌抗药性血流感染全国范围耐药监测

多学科团队协作模式下游离股前外侧穿支皮瓣修复糖尿病足溃疡的临床效果

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第8期40卷 756-761页

作者：赵建军谢振军赵国红张建华孙华伟白辉凯张会峰张东宾肖二辉朱国松河南省人民医院(郑州大学人民医院)手足显微与创面修复外科郑州450003 河南省人民医院(郑州大学人民医院)内分泌科郑州450003 河南省人民医院(郑州大学人民医院)血管外科郑州450003 河南省人民医院(郑州大学人民医院)感染性疾病科郑州450003 河南省人民医院(郑州大学人民医院)麻醉手术部郑州450003

目的探讨多学科团队(MDT)协作模式下游离股前外侧穿支皮瓣修复糖尿病足溃疡(DFU)的临床效果。方法该研究为回顾性观察性研究。2018年6月—2022年12月,河南省人民医院(郑州大学人民医院)手足显微与创面修复外科收治49例符合入选标准的DF... 详细信息

目的探讨多学科团队(MDT)协作模式下游离股前外侧穿支皮瓣修复糖尿病足溃疡(DFU)的临床效果。方法该研究为回顾性观察性研究。2018年6月—2022年12月,河南省人民医院(郑州大学人民医院)手足显微与创面修复外科收治49例符合入选标准的DFU患者,其中男28例、女21例,年龄47~68岁,2型糖尿病病程6个月~21年。在MDT协作模式下,内分泌科医师全面评估患者、稳定患者全身情况、控制并发症,血管外科医师评估和改善患者下肢血供,感染性疾病科医师提供抗感染治疗方案,麻醉手术部医师评估患者围手术期风险、保障患者围手术期安全,心内科、神经内科、营养科、康复科等科室医师根据患者情况主动适时参与治疗。手足显微与创面修复外科医师行创基准备,采用游离股前外侧穿支皮瓣修复创面。Ⅰ期行1次或多次清创后,创面面积为5.0 cm×4.5 cm~17.0 cm×10.0 cm。行1次或2次负压封闭引流治疗后,Ⅱ期采用游离股前外侧穿支皮瓣(面积为6 cm×5 cm~18 cm×11 cm)修复创面,将皮瓣的旋股外侧动脉降支及其伴行静脉分别与受区动、静脉吻合,皮瓣供区创面直接拉拢缝合。术后观察患者是否平稳度过围手术期、皮瓣成活情况、皮瓣供受区创面愈合情况;术后随访时,观察皮瓣质地、外形,有无新发溃疡及患者的行走能力。结果患者均平稳度过围手术期。46例患者皮瓣顺利成活;2例患者皮瓣完全坏死,其中1例患者行小腿带蒂皮瓣修复后溃疡愈合,另1例患者行小腿截肢;1例患者皮瓣部分坏死,经换药、移植皮片后愈合。患者皮瓣供受区创面均愈合良好。术后随访6~24个月,皮瓣质地良好、外形较佳,无新发溃疡,患者日常行走无明显障碍。结论MDT协作模式能充分地保障DFU患者围手术期安全。采用游离股前外侧穿支皮瓣修复DFU创面,皮瓣成活率较高,可降低截肢率,临床效果较佳。

关键词：糖尿病足溃疡外科皮瓣穿支皮瓣显微外科手术多学科团队创面修复保肢