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制何首乌对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞的影响

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中国老年学杂志 2024年第15期 3666-3673页

作者：杨婷婷韦思佳许永劼黄昶煜东陈钢林海容卢虞夫张兢之朱丽英李兴潘卫贵州医科大学附属医院产前诊断中心贵州医科大学医学检验学院贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州中医药大学基础医学院

目的研究制何首乌对糖尿病性白内障(DC)大鼠晶状体上皮细胞的保护作用。方法随机选取60只健康SD雄性大鼠通过腹腔一次性注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型，造模成功后随机分为对照(NC)组、DC模型(DC)组、制何首乌低剂量(低RPM)组和制何... 详细信息

目的研究制何首乌对糖尿病性白内障(DC)大鼠晶状体上皮细胞的保护作用。方法随机选取60只健康SD雄性大鼠通过腹腔一次性注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型，造模成功后随机分为对照(NC)组、DC模型(DC)组、制何首乌低剂量(低RPM)组和制何首乌高剂量(高RPM)组，每组15只；裂隙灯监测大鼠白内障的形成情况；苏木素-伊红(HE)染色观察晶状体的病理学变化；TUNEL染色检测晶状体上皮细胞凋亡；RT-聚合酶链反应(PCR)和Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2和胱天蛋白酶(Caspase)-3 mRNA和蛋白表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晶状体中白介素(IL)-1β和IL-6含量。结果与NC组相比，DC组晶状体混浊程度明显加重，甚至完全混浊，糖尿病大鼠出现白内障；相反，低RPM和高RPM组晶状体混浊程度得到缓解。HE染色显示，NC组晶状体上皮细胞形态规则、排列整齐，DC组晶状体上皮细胞形态大小不一，排列紊乱；制何首乌干预后晶状体上皮细胞损伤程度得到明显缓解。与NC组比较，DC组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白水平、IL-6及IL-1β含量明显升高，Bcl-2 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.05);与DC组比较，高RPM组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白水平、IL-6及IL-1β含量明显降低，Bcl-2 mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论糖尿病引起的白内障与Bax、Caspase-3表达增加、Bcl-2的抑制及炎症因子的激活有关。制何首乌可通过上调Bcl-2表达，降低Bax和Caspase-3表达和炎症因子的水平从而延缓白内障发生。

关键词：制何首乌糖尿病性白内障晶状体上皮细胞细胞凋亡炎症因子

肾移植受者代谢标志物与血脂水平的相关性研究

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器官移植 2024年第4期15卷 599-606页

作者：徐媛侯霜陈乾牛玉林李海洋贵州医科大学附属医院器官移植科贵阳550004 贵州省器官移植中心

目的分析肾移植受者血脂代谢、高脂血症、他克莫司药物代谢中共表达的基因及其与血脂水平的相关性。方法从比较毒理基因组学数据库(CTD)中筛选出共表达的基因。收集25例肾移植受者的一般资料,检测ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、过氧化... 详细信息

目的分析肾移植受者血脂代谢、高脂血症、他克莫司药物代谢中共表达的基因及其与血脂水平的相关性。方法从比较毒理基因组学数据库(CTD)中筛选出共表达的基因。收集25例肾移植受者的一般资料,检测ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、糖基磷脂酰肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)的表达情况。对肾移植受者进行跟踪随访,收集术后1、3、6、12个月空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、总蛋白、白蛋白、球蛋白、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、他克莫司血药浓度,并分析受者高脂血症的发生情况。分析ABCA1、GPIHBP1、PPAR-γ与临床指标的相关性,及其与相关指标对肾移植术后高脂血症的诊断效能。结果共筛选出3个共表基因ABCA1、PPAR-γ、GPIHBP1。ABCA1与术后6个月胆固醇、术后3个月他克莫司血药浓度成正相关,与术后3个月空腹血糖呈负相关(均为P诊断肾移植术后高甘油三酯血症的效果较好(AUC=0.900)。ABCA1、GPIHBP1、PPAR-γ联合术后1、6个月他克莫司血药浓度及术后6个月血糖水平诊断肾移植术后高胆固醇血症的效果较好(AUC=0.931)。结论ABCA1、GPIHBP1、PPAR-γ与肾移植术后血脂、他克莫司血药浓度等指标存在不同程度的相关关系,但用于预测肾移植术后高脂血症尚无确切依据。提升机体免疫力、规范的血糖管理可能是控制高脂血症的有益因素。

关键词：肾移植高脂血症胆固醇甘油三酯他克莫司 ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1) 过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ) 糖基磷脂酰肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)

慢病毒干扰HDAC4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响及稳转株建立

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中国老年学杂志 2024年第16期 3919-3923页

作者：许永劼陈钢林海容黄昶煜东韦思佳杨婷婷朱丽英李兴潘卫贵州医科大学附属医院产前诊断中心贵州医科大学医学检验学院贵州医科大学公共卫生与健康学院贵州中医药大学基础医学院

目的观察慢病毒干扰组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 CCK-8法检测慢病毒感染后神经元细胞活性的变化；确定慢病毒载体感染最适感染复数(MOI);确定最适嘌呤霉素浓度；筛选干扰HDAC4表达效率最高序列，... 详细信息

目的观察慢病毒干扰组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 CCK-8法检测慢病毒感染后神经元细胞活性的变化；确定慢病毒载体感染最适感染复数(MOI);确定最适嘌呤霉素浓度；筛选干扰HDAC4表达效率最高序列，构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株；CCK-8法检测干扰HDAC4表达对神经元活性的影响；流式细胞术和Western印迹检测干扰HDAC4表达对神经元凋亡的影响。结果慢病毒载体对神经元活性无显著影响；最适MOI为20;最适嘌呤霉素浓度为2μg/ml;成功筛选稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株，干扰效率为71%;干扰HDAC4表达导致神经元活性降低和凋亡增加。结论成功构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株，干扰HDAC4表达可导致HT-22神经元凋亡水平增加。

关键词：慢病毒载体 HT-22海马神经元组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4 稳转株建立

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白大衣性高血压的分型诊断与治疗

中华高血压杂志(中英文) 2024年

作者：余振球李治菁贵州省高血压诊疗中心贵州医科大学附属医院高血压科

一百年前人们就注意到诊室血压变化、诊室血压与家庭血压的差异,直到40年前才提出白大衣性高血压的概念。目前,对白大衣性高血压的完整定义与分型仍没有清晰和精准的表述,白大衣性高血压对人类的危害没有得到充分认识,导致对白大衣性高...

一百年前人们就注意到诊室血压变化、诊室血压与家庭血压的差异,直到40年前才提出白大衣性高血压的概念。目前,对白大衣性高血压的完整定义与分型仍没有清晰和精准的表述,白大衣性高血压对人类的危害没有得到充分认识,导致对白大衣性高血压者是否接受抗高血压药物治疗没有明确要求,从而影响对白大衣性高血压者科学合理的规范诊疗。本文系统复习和总结近年来国内外白大衣性高血压流行病学、基础研究及对靶器官损害的影响,结合笔者临床实践,提出白大衣性高血压分型诊断与治疗规范。

关键词：

超声联合增强CT对BethesdaⅠ、Ⅲ类甲状腺结节的诊断价值

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中国临床医学影像杂志 2024年第9期 618-624页

作者：曾微单李艾樾赵丽娜曹红娟李莎廖春雁赵悦瑶黄权丰范玉冰张蓓贵州医科大学医学影像学院贵州医科大学附属医院超声中心

目的：探讨超声联合增强CT（CECT）对经超声引导下细针穿刺（US-FNAB）细胞学检查结果为BethesdaⅠ、Ⅲ类甲状腺结节的诊断价值。方法：选取2020年1月—2023年4月在贵州医科大学附属医院行US-FNAB检查诊断为BethesdaⅠ、Ⅲ类并取得手术... 详细信息

目的：探讨超声联合增强CT（CECT）对经超声引导下细针穿刺（US-FNAB）细胞学检查结果为BethesdaⅠ、Ⅲ类甲状腺结节的诊断价值。方法：选取2020年1月—2023年4月在贵州医科大学附属医院行US-FNAB检查诊断为BethesdaⅠ、Ⅲ类并取得手术病理结果的184名甲状腺结节患者，所有患者术前均行甲状腺超声及CECT检查。收集甲状腺结节的超声及CECT特征，测量甲状腺结节、周围腺体及颈部肌的动、静脉期CT值。根据甲状腺结节术后病理结果将患者分为良性组、恶性组，单因素分析良、恶性结节超声及CECT的特征，将经单因素分析差异有统计学意义的超声、CECT特征建立多因素二元Logistic回归模型，模型1为超声组，模型2为CECT组，模型3为C-TIRADS分类组，模型4为模型1+模型2联合诊断组，模型5为模型2+模型3联合诊断组。以甲状腺结节术后病理结果为金标准，构建ROC曲线、校准曲线和决策曲线，对模型的诊断性能进行比较。结果：良性组和恶性组间超声特征中结节最大径、结构、方位、边缘、边界、局灶性强回声、后方回声、包膜完整性及淋巴结的差异具有统计学意义（P诊断模型中模型4具有最佳的诊断能力。决策曲线结果表明模型4在临床预测中为患者带来最佳的临床净获益。校准曲线结果显示模型4具有较好的诊断效果。结论：超声联合CECT的诊断效能均高于单独一种诊断方式，CECT可做为BethesdaⅠ、Ⅲ类无明确诊断结节常规超声检查的辅助检查方法，提高良、恶性结节的诊断准确率。

关键词：甲状腺结节体层摄影术,X线计算机超声检查,介入性

人脐带间充质干细胞上调Nrf2信号改善衰老小鼠睾丸功能

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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 579-586页

作者：王圆圆薛函李林艳刘娟吴雨瞳何青余丽梅遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室、贵州省产前诊断分中心、贵州省干细胞临床应用与药物开发工程研究中心(遵义医科大学) 遵义563003 遵义医科大学教育部组织损伤修复与再生医学协同创新中心遵义563003

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)移植对氧化损伤衰老小鼠睾丸功能的影响及分子机制。方法共纳入18只6~8周SPF级C57BL/C雄性小鼠,完全随机分组法分为3组,对照组:小鼠注射等量生理盐水... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)移植对氧化损伤衰老小鼠睾丸功能的影响及分子机制。方法共纳入18只6~8周SPF级C57BL/C雄性小鼠,完全随机分组法分为3组,对照组:小鼠注射等量生理盐水;模型组:颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周,造模第4周末,每只小鼠尾静脉注射生理盐水;hUCMSCs组:颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周,造模第4周末,每只小鼠尾静脉注射hUCMSCs。9周后,称取小鼠体质量和睾丸重量,计算睾丸指数,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测小鼠血清睾酮水平、睾丸组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量。肉眼观察睾丸外观,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察睾丸组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号转导相关基因和蛋白表达。结果模型组小鼠睾丸指数[(0.64±0.05)%]较对照组[(0.81±0.13)%,P=0.006]降低,睾丸体积缩小,生精小管完整性破坏,生精细胞和精子减少,间质稀疏;血清睾水平[(4.10±0.67)μg/L]、睾丸组织SOD活性[(48.87±6.40)U/mg Prot]较对照组[(5.71±0.81)μg/L,P=0.002;(78.53±9.70)U/mg Prot,P=0.001]均降低,而MDA含量[(1.11±0.19)nmol/mg Prot]较对照组[(0.77±0.07)nmol/mg Prot,P=0.001]增加。Keap1 mRNA和蛋白表达量较对照组均增高(P=0.006,P=0.043),Nrf2、SOD和NQO1 mRNA表达量较对照组减少(P=0.002,P0.05)。结论hUCMSCs明显改善氧化损伤所致衰老小鼠睾丸结构和功能损伤,其作用机制与上调Nrf2信号转导及其相关下游抗氧化活性SOD、HO-1蛋白表达,减少Keap1介导的Nrf2降解有关。

关键词：睾丸核因子E2相关因子2 衰老人脐带间充质干细胞 D-半乳糖抗氧化

单中心先天性胆总管囊肿根治术术后早期并发症影响因素分析及治疗体会

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中华实用儿科临床杂志 2024年第3期39卷 209-214页

作者：杜青金祝郑泽兵黄露汤成艳刘远梅遵义医科大学附属医院贵州省儿童医院小儿外科遵义563000

目的探讨单中心先天性胆总管囊肿(CCC)根治术术后早期并发症影响因素,为减少术后并发症提供一定临床依据及指导。方法病例对照研究。分析遵义医科大学附属医院2010年9月至2019年10月诊断明确并已行根治术的124例CCC患儿的临床资料,男29... 详细信息

目的探讨单中心先天性胆总管囊肿(CCC)根治术术后早期并发症影响因素,为减少术后并发症提供一定临床依据及指导。方法病例对照研究。分析遵义医科大学附属医院2010年9月至2019年10月诊断明确并已行根治术的124例CCC患儿的临床资料,男29例,女95例,根据术后是否发生并发症(胆漏、肠肠吻合口瘘、出血、切口裂开、胆管炎、腹腔感染、胰腺炎、淋巴瘘)分为并发症组(A组)和无并发症组(B组),对2组患儿的年龄、实验室指标(术前白细胞计数、血红蛋白、丙氨酸转氨酶、前白蛋白及术后白蛋白)以及2组患儿手术方式、手术时间、术中失血量、囊肿类型、囊肿直径、肝总管直径,是否合并腹部手术史、胆泥结石、肝胆管解剖变异、胆胰合流等相关临床因素进行统计分析,并对其中的计量资料符合正态分布的行t检验,非正态分布行非参数秩和检验,多因素分析采用Logistic回归分析。结果124例手术病例发生并发症25例(20.16%),未发生并发症99例(79.84%),其中胆漏14例(11.29%),7例再次手术,7例保守治愈;肠肠吻合口瘘2例(1.61%),1例再次手术,1例保守治愈;出血1例(0.81%),再次手术治愈;切口裂开2例(1.61%),1例再次手术,1例保守治愈;胆管炎2例(1.61%)、腹腔感染2例(1.61%)、胰腺炎1例(0.81%)、淋巴瘘1例(0.81%)均保守治愈。其中非正态分布指标:2组年龄及白细胞计数比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);2组失血量及囊肿直径比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);符合正态分布指标的术后白蛋白(27.84±4.62)g/L比(32.45±3.72)g/L,2组比较差异有统计学意义(t=5.254,P<0.05)。Logistic多因素回归分析:术前贫血(OR=7.922,95%CI:1.468~42.757)、合并胆泥结石(OR=1.295,95%CI:1.075~4.359)是术后并发症发生的独立危险因素,术后白蛋白(OR=0.055,95%CI:0.012~0.244)是术后并发症发生的保护因素,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胆总管囊肿直径越大、术中出血量越多,越增加手术风险。术前纠正贫血、术中精细操作清理肝胆管淤泥、减少出血及加强围术期白蛋白、血红蛋白的监测,可预防及减少CCC根治术后早期并发症发生。

关键词：先天性胆总管囊肿外科手术并发症影响因素治疗体会

骨髓增生异常综合征与急性髓系白血病之间免疫浸润相关基因的筛选及验证

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中国组织工程研究 2024年第13期28卷 2082-2089页

作者：邓发滑胡华丽王斯奇许建霞禄婷婷黄海韦四喜贵州医科大学医学检验学院临床生化教研室贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省贵阳市550004

背景:骨髓增生异常综合征具有较高的急性髓系白血病转化风险,有研究表明免疫浸润在二者之间发挥重要作用,但免疫细胞浸润与相关差异表达基因的调控关系仍需更多研究证实。目的:通过生物信息学分析方法,寻找与骨髓增生异常综合征和急性... 详细信息

背景:骨髓增生异常综合征具有较高的急性髓系白血病转化风险,有研究表明免疫浸润在二者之间发挥重要作用,但免疫细胞浸润与相关差异表达基因的调控关系仍需更多研究证实。目的:通过生物信息学分析方法,寻找与骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病具有预后意义的差异表达基因,探讨差异基因与免疫浸润细胞调控在疾病发生发展中的可能作用及机制。方法:利用GEO数据集筛选差异表达基因用于生物信息学分析,对差异表达基因进行DO、GO、KEGG和GSEA分析。利用TCGA预后数据库绘制差异表达基因的K-M曲线,并对预后相关的差异基因进行受试者工作特征曲线分析判断基因的临床诊断性能。最后,采用CIBERSORT分析预后相关关键基因与免疫浸润细胞分布之间的相关性,利用RT-qPCR检测健康对照、骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病患者外周血样本对筛选出的关键基因进行初步验证。结果与结论:①在骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病之间共获得150个差异表达基因,其中16个基因表达上调,134个基因表达下调;②DO、GO、KEGG及GSEA分析结果提示差异表达基因可能通过调节免疫应答促进骨髓增生异常综合征向急性髓系白血病发展,CIBERSORT分析显示骨髓增生异常综合征与急性髓系白血病之间存在免疫浸润差异,其中CD4+T细胞、单核细胞、中性粒细胞、M1巨噬细胞在急性髓系白血病患者中分布降低,而炎症抑制细胞M2巨噬细胞在急性髓系白血病患者中分布增加,可能与急性髓系白血病免疫抑制有关;③利用K-M曲线及受试者工作特征曲线从150个差异基因中筛选出4个与免疫和预后相关且具有较好诊断性能的基因:MANSC1、FLT3、BMX及CXCR2;④RT-qPCR检测结果显示MANSC1、BMX及CXCR2在急性髓系白血病患者中低表达,而FLT3在急性髓系白血病患者中高表达。结果表明,MANSC1、FLT3、BMX及CXCR2在骨髓增生异常综合征与急性髓系白血病患者间差异表达,不仅与患者预后显著相关,还可能通过调节患者的免疫浸润影响骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的发生和进展,它们可作为骨髓增生异常综合征向急性髓系白血病转化的潜在生物标志物和治疗靶点,为骨髓增生异常综合征“转白”的临床诊疗研究提供新的方向。

关键词：骨髓增生异常综合征急性髓系白血病免疫浸润预后生物信息学

核纤层蛋白A基因通过MAPK通路调控胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡

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贵州医科大学学报 2024年第6期49卷 781-790,802页

作者：王双王正蓉朱丽英张艺琼段云峰黄昶煜东杨思远潘卫贵州医科大学附属医院产前诊断中心贵州贵阳550025 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550025 贵州医科大学公共卫生学院贵州贵阳550025 贵州医科大学附属医院心外科贵州贵阳550025

目的探究敲低核纤层蛋白A基因(LMNA)对人胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡的影响和可能的作用机制。方法通过生信分析LMNA基因在胃正常组织与胃癌组织中的表达情况;取对数生长期的人胃癌细胞HGC27,根据是否敲低LMNA基因分为敲低LMNA组(s... 详细信息

目的探究敲低核纤层蛋白A基因(LMNA)对人胃癌细胞HGC27的增殖、迁移及凋亡的影响和可能的作用机制。方法通过生信分析LMNA基因在胃正常组织与胃癌组织中的表达情况;取对数生长期的人胃癌细胞HGC27,根据是否敲低LMNA基因分为敲低LMNA组(si-1、si-2、si-3组)和对照组(si-NC组)共4组,取瞬时转染率最高的si-2组为si-LMNA组;采用CCK-8实验检测细胞活力,Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力,流式检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase3、Bcl-2和丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)通路中的p38、p-p38、ERK1/2及pERK1/2的表达;在si-LMNA组加入MAPK通路的特异性激活剂Chicoric acid,进一步验证LMNA的表达情况。结果生信分析结果提示LMNA基因在胃癌组织中高表达,LMNA低表达患者生存率更高;与si-NC组相比,si-LMNA组细胞活力下降(P<0.05),凋亡蛋白Bax、Caspase3表达升高、抗凋亡蛋白Bcl-2降低及细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞周期阻滞在G0/G1期、S期细胞减少(P<0.05),侵袭与迁移能力降低(P<0.05),p38、ERK1/2磷酸化水平降低(P<0.05);加入激活剂后,LaminA/C表达量增高,p38、ERK1/2磷酸化水平升高,凋亡相关蛋白的表达被逆转,侵袭迁移能力被促进(P<0.05)。结论敲低LMNA基因后能促进胃癌细胞的凋亡,细胞周期被阻滞在G0/G1期,增殖、侵袭及迁移能力被抑制,其作用机制可能与MAPK信号通路密切相关。

关键词：核纤层蛋白A基因细胞胃肿瘤丝裂源活化蛋白激酶信号通路增殖迁移