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微生态学与微生态制剂的研究进展

中国兽医学报 1997年第1期17卷 101-103页

作者：王兴龙解放军农牧大学基础部

微生态学与微生态制剂的研究进展王兴龙（解放军农牧大学基础部，长春１３００６２）自从１９７７年联邦德国ＶｏｅｋｅｒＲｕｓｃｈ博士首先提出“微生态学（ｍｉｃｒｏｅｃｏｌｏｇｙ）”这一术语，并在德国建立起世界上第一个微生态... 详细信息

微生态学与微生态制剂的研究进展王兴龙（解放军农牧大学基础部，长春１３００６２）自从１９７７年联邦德国ＶｏｅｋｅｒＲｕｓｃｈ博士首先提出“微生态学（ｍｉｃｒｏｅｃｏｌｏｇｙ）”这一术语，并在德国建立起世界上第一个微生态学研究所以来，微生态学以生命科学中...

关键词：微生态学微生态制剂

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赤芝子实体三萜酸化学成分研究

中国兽医学报 1997年第5期17卷 511-513页

作者：蔡辉王芳生杨峻山张聿梅胡奎赵英举白燕张祚新解放军农牧大学基础部

自赤芝〔Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（ｌｅｙｓ．ｅｘＦｒ．）ｋａｒｓｔ〕子实体的二氯甲烷提取液中分离得到１种新的三萜酸化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭⅠ）。同时还分到１种已知化合物灵芝酸Ｅ... 详细信息

自赤芝〔Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（ｌｅｙｓ．ｅｘＦｒ．）ｋａｒｓｔ〕子实体的二氯甲烷提取液中分离得到１种新的三萜酸化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭⅠ）。同时还分到１种已知化合物灵芝酸Ｅ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＥⅡ）。根据各自的光谱（ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ和２ＤＮＭＲ）数据分析，确定其结构为：３，７－二氧化－８，２４（Ｅ）－二稀－羊毛甾－２６－酸和３，７，１１，１５，２３－五氧化－５α－羊毛甾－８－稀－２６－酸。以上２种化合物均为首次从赤芝子实体中得到。

关键词：赤芝灵芝酸三萜内酯化合物

IL-2对体外培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响

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中国兽医学报 1997年第3期17卷 294-297页

作者：罗国玲杨维泰刘波赖良学解放军农牧大学基础部

观察了不同浓度ＩＬ－２对原代分离培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响。结果表明，２０～５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２能促进鸡胚脑纹状体神经元的存活，增加神经元胞体的短直径，提高纹状体神经元中ＮＰＹ阳性反应神经元数目，其中５０... 详细信息

观察了不同浓度ＩＬ－２对原代分离培养鸡胚脑纹状体神经元生长发育的影响。结果表明，２０～５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２能促进鸡胚脑纹状体神经元的存活，增加神经元胞体的短直径，提高纹状体神经元中ＮＰＹ阳性反应神经元数目，其中５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２的作用最明显。而１５００Ｕ／ｍＬＩＬ－２对鸡胚脑纹状体神经元的存活、生长及分化具有抑制作用。由此认为，ＩＬ－２对鸡胚纹状体神经元生长发育可能具有正。

关键词：鸡胚脑纹状体神经元体外培养发育

生长激素释放因子(GRF)的基因改造及化学合成

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中国兽医学报 1998年第6期18卷 538-540页

作者：冯立文张永亮张玉静欧阳红生刘松财岳军明申建新刘万臣解放军农牧大学基础部

为了提高生长激素释放因子（ＧＲＦ）的体内活性，根据猪ＧＲＦ的天然序列，设计了改造后ＧＲＦ（１～３２）的基因序列（含信号肽），两端加设ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ的粘性末端，分４段由ＤＮＡ合成仪合成，每段长度分别为９５、９７... 详细信息

为了提高生长激素释放因子（ＧＲＦ）的体内活性，根据猪ＧＲＦ的天然序列，设计了改造后ＧＲＦ（１～３２）的基因序列（含信号肽），两端加设ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ的粘性末端，分４段由ＤＮＡ合成仪合成，每段长度分别为９５、９７、８６、１０６ＮＴ，２条链间有１５个碱基的粘端。用尿素变性ＰＡＧＥ纯化合成片段，用Ｔ４多核苷酸激酶对合成ＤＮＡ磷酸化，混合４个片段复性，然后用Ｔ４连接酶连接。提取ｐＢｌｕｓｃｒｉｐｔ质粒，用ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ在Ｍｕｌｔｉｃｏｒｅｂｕｆｅｒ中酶切完全后，琼脂糖电泳，由ＧｅｎｅＥｌｕｔｅＡｇｒｏｓｅＳｐｉｎＣｏｌｕｍｓ回收酶切大片段。将该酶切片段与上述合成的ＧＲＦ基因由Ｔ４连接酶连接，并转化至氯化钙致敏的ＤＨ５α。选取重组菌落，提取质粒，用ＰＣＲ及双酶切鉴定阳性克隆。用Ｍｉｎｉｐｒｅｐ提取重组质粒，ＡＢＩ３７３自动测序仪测序。测序结果表明已克隆到合成的ＧＲＦ基因。

关键词：生长激素释放因子 GRF 基因改造化学合成

鸡肝脏β-羟-β-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶的提纯和性质

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中国兽医学报 1997年第3期17卷 248-250页

作者：董朝辉张玉静刘万臣崔建华欧阳红生赵建军汪玉松解放军农牧大学基础部

采用超速离心、热变性处理、硫酸铵沉淀和亲和层析方法，从鸡肝脏中分离提纯了β－羟－β－甲戊二酸单酰辅酶Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）还原酶。提纯倍数为２０９倍，比活力１８８．５Ｕ／ｍｇ，Ｋｍ值１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。ＳＤＳ－... 详细信息

采用超速离心、热变性处理、硫酸铵沉淀和亲和层析方法，从鸡肝脏中分离提纯了β－羟－β－甲戊二酸单酰辅酶Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）还原酶。提纯倍数为２０９倍，比活力１８８．５Ｕ／ｍｇ，Ｋｍ值１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为３．２×１０４。温度对该酶活性影响较大，３７℃时活性最高。最适反应ｐＨ为７．２。甘氨酸在１０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时对该酶呈现明显抑制作用，ｌ－组氨酸、ｌ－精氨酸则无明显抑制作用。Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋离子对该酶有明显抑制作用，Ｚｎ２＋在１．５ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｃｕ２＋和Ｍｇ２＋在２．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时抑制作用明显。

关键词： HMG-CoA还原酶鸡肝脏纯化

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猪致病性大肠杆菌的质粒指纹图谱分析

中国兽医学报 1998年第5期18卷 475-478页

作者：江文正韩文瑜王世若梁焕春王兴龙邹尔新雷连成冯来坤解放军农牧大学基础部

在系统鉴定和药敏试验的基础上，对７０株致病性大肠杆菌进行了质粒指纹图谱分析。结果，菌株的质粒得率为１００％，可分为３２种质粒谱型。分离菌株在遗传距离０．１４０处聚成４类，在遗传距离０．２２４处聚成一大类。来源相同的菌... 详细信息

在系统鉴定和药敏试验的基础上，对７０株致病性大肠杆菌进行了质粒指纹图谱分析。结果，菌株的质粒得率为１００％，可分为３２种质粒谱型。分离菌株在遗传距离０．１４０处聚成４类，在遗传距离０．２２４处聚成一大类。来源相同的菌株具有相同或非常相似的质粒图谱和质粒酶切图谱，来源不同的菌株具有不同的质粒图谱和质粒酶切图谱。来源相同菌株的质粒谱相同，而耐药谱可相同亦可不同，两者之间无明显规律。

关键词：大肠杆菌质粒图谱质粒酶切图谱耐药谱

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凋亡素基因的克隆

中国兽医学报 1998年第5期18卷 421-423页

作者：谭芳张玉静徐彦波刘万臣张永亮欧阳红生解放军农牧大学基础部

为了探索应用凋亡素杀死肿瘤细胞的可能性，用ＰＣＲ方法扩增了鸡贫血病毒（ｃｈｉｃｋｅｎａｎｅｍｉａｖｉｒｕｓ，ＣＡＶ）的ＶＰ３基因（凋亡素）片段，然后将该片段重组于ｐＵＣ１９载体，并进行了限制性内切酶鉴定与序列分析，证... 详细信息

为了探索应用凋亡素杀死肿瘤细胞的可能性，用ＰＣＲ方法扩增了鸡贫血病毒（ｃｈｉｃｋｅｎａｎｅｍｉａｖｉｒｕｓ，ＣＡＶ）的ＶＰ３基因（凋亡素）片段，然后将该片段重组于ｐＵＣ１９载体，并进行了限制性内切酶鉴定与序列分析，证实该片段与鸡贫血病毒Ｃｕｘ－１株的ＶＰ３ＤＮＡ序列一致，该ＤＮＡ全长３６３ｂｐ，编码１２１个氨基酸。

关键词：凋亡素 VP3 鸡贫血病毒聚合酶链反应克隆

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日本七鳃鳗血细胞显微及亚显微结构

中国兽医学报 1998年第6期18卷 614-617页

作者：文兴豪张凯李德雪郭文场王铁恒岳占碰张仁成李子义邹啸环杜惜明解放军农牧大学基础部

用光镜和透射电镜技术对１０尾日本七鳃鳗的血细胞进行了观察。结果表明：红细胞为圆形或椭圆形，胞质不很均匀，电子密度较低，含有板状嵴线粒体，核呈圆形或椭圆形。中性粒细胞表面有伪足，形态各异，胞质内含有Ａ、Ｂ２种颗粒（Ａ型... 详细信息

用光镜和透射电镜技术对１０尾日本七鳃鳗的血细胞进行了观察。结果表明：红细胞为圆形或椭圆形，胞质不很均匀，电子密度较低，含有板状嵴线粒体，核呈圆形或椭圆形。中性粒细胞表面有伪足，形态各异，胞质内含有Ａ、Ｂ２种颗粒（Ａ型颗粒为圆形，电子密度较低；Ｂ型颗粒为长椭圆形，电子密度较高）。嗜酸粒细胞数量较少，胞质内含有Ａ、Ｂ、Ｃ３种形态各异的有膜颗粒（Ａ型颗粒为圆形，电子密度较高，均质；Ｂ型为长椭圆形，颗粒中央有电子密度较高的长椭圆形致密芯；Ｃ型内含有电子密度较高的杆状致密芯，位于颗粒一侧）。单核细胞表面有伪足，胞质内含有粗面内质网、板状嵴线粒体、溶酶体和液泡。淋巴细胞为圆形，核较大，胞质内含有板状嵴线粒体、粗面内质网和嗜天青颗粒。血栓细胞体积较小，形态各异，胞质内含有线粒体、粗面内质网和细小颗粒。

关键词：日本七鳃鳗血细胞显微结构亚显微结构

催产素和加压素在犬泡状绦虫的免疫组化定位和分布

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中国兽医学报 1998年第2期18卷 176-178页

作者：刘波杨维泰杨振国成军文兴豪解放军农牧大学基础部

应用免疫组化ＡＢＣ法研究了催产素和加压素在犬泡状绦虫的定位和分布。在犬泡状绦虫中枢神经系统的脑神经节、２条主要纵神经索和环神经内观察到大量阳性纤维和少量阳性细胞。周围神经系统可见阳性神经纤维在皮层和实质形成神经网。从... 详细信息

应用免疫组化ＡＢＣ法研究了催产素和加压素在犬泡状绦虫的定位和分布。在犬泡状绦虫中枢神经系统的脑神经节、２条主要纵神经索和环神经内观察到大量阳性纤维和少量阳性细胞。周围神经系统可见阳性神经纤维在皮层和实质形成神经网。从纵神经索和环神经发出的阳性纤维向生殖器官和皮层的肌肉分布。顶突的小钩之间的肌肉存在阳性反应物，小钩周围有较明显的阳性反应环。生殖器官呈现着色深浅不同的阳性反应，以卵囊—梅氏腺复合体最为明显。结果表明，催产素和加压素的免疫反应物具有相同的分布，它们可能参与虫体的神经内分泌调节。

关键词：催产素加压素免疫组化定位犬泡状绦虫