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钩毛茜草素C靶向cathepsin D诱导自噬体积累抑制胃癌的作用研究

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中国中药杂志 2024年

作者：张亮陈俊杰顾曼香钟一帆司渊刘莹湖北医药学院基础医学院湖北医药学院武当特色中药研究湖北省重点实验室湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室

探讨钩毛茜草素C（RuC）抑制胃癌的分子机制。选取AGS和MGC803细胞株作为细胞模型。用不同浓度的RuC处理细胞后，通过CCK-8法、实时无标记细胞分析技术（RTCA）和克隆形成实验检测RuC对胃癌细胞增殖能力的影响；透射电镜检测亚细胞结构... 详细信息

探讨钩毛茜草素C（RuC）抑制胃癌的分子机制。选取AGS和MGC803细胞株作为细胞模型。用不同浓度的RuC处理细胞后，通过CCK-8法、实时无标记细胞分析技术（RTCA）和克隆形成实验检测RuC对胃癌细胞增殖能力的影响；透射电镜检测亚细胞结构变化；免疫荧光技术检测LC3荧光聚点；吖啶橙染色法检测细胞内溶酶体状态；蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3II、P62的表达及溶酶体组织蛋白酶D（CTSD）的表达；SuperPred在线预测与RuC结合的靶点蛋白；通过分子对接分析RuC与CTSD的作用位点；采用靶点稳定性药物亲和反应实验检测RuC与CTSD的直接结合作用。结果发现，RuC在低浓度剂量下能够显著抑制胃癌细胞的增殖及克隆形成，RuC对AGS和MGC803细胞24 h半数抑制浓度分别为3.422、2.697 μmol·L-1。1.0、2.0、3.0 μmol·L-1RuC处理24 h后，AGS细胞克隆形成率分别为61.0%±1.5%、28%±0.5%、18.2%±0.5%，MGC803细胞克隆形成率分别为56.0%±0.5%、23.3%±1.0%、11.8%±1.0%，均明显减少。透射电镜检测显示RuC促进胃癌细胞自噬体增加；免疫荧光检测显示胃癌细胞LC3荧光聚点随RuC剂量增加。RuC上调胃癌细胞自噬相关蛋白LC3II、P62的表达。吖啶橙染色表明RuC可致溶酶体酸性环境改变。SuperPred在线预测发现CTSD是RuC的潜在靶点蛋白。蛋白免疫印迹分析发现RuC诱导胃癌细胞中CTSD的非活性前体表达上调。CTSD活性检测表明RuC可降低CTSD的活性。分子对接模拟发现RuC与CTSD的底物结合区域结合，与其中的Tyr205、Asp231氨基酸残基形成氢键。微量热泳动实验、靶点稳定性的药物亲和反应实验进一步确证RuC与CTSD具有直接结合作用。综上表明，RuC通过靶向结合下调CTSD表达而抑制溶酶体活性，进而诱导胃癌细胞自噬体积累。

关键词：钩毛茜草素C 胃癌 cathepsin D 自噬体自噬

不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮对肉牛瘤胃发酵、瘤胃细菌与真菌菌群结构的影响

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动物营养学报 2024年第4期36卷 2475-2486页

作者：樊启文陈芳杜恩存陶文静赵娜黄少文郭万正黄静金枫魏金涛湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室武汉430064

本研究旨在探究不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮对肉牛瘤胃发酵、瘤胃细菌与真菌菌群结构的影响。选取体重为(287.45±22.63)kg、日龄相近的西门塔尔杂交公牛30头,随机分为3组,分别为对照组、NT1和NT2组,每组10个重复。对照组给予基础饲... 详细信息

本研究旨在探究不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮对肉牛瘤胃发酵、瘤胃细菌与真菌菌群结构的影响。选取体重为(287.45±22.63)kg、日龄相近的西门塔尔杂交公牛30头,随机分为3组,分别为对照组、NT1和NT2组,每组10个重复。对照组给予基础饲粮,NT1和NT2组分别以10%和20%发酵饲料桑等量替代基础饲粮。试验预试期14 d,正试期116 d。结果表明:1)与对照组相比,NT1组和NT2组瘤胃液戊酸的含量显著提高(P<0.05)。2)与对照组相比,在门水平上,NT2组厚壁菌门与拟杆菌门比值(F/B)显著增加(P<0.05);在属水平上,NT2组普氏菌属(Prevotella)细菌相对丰度显著降低(P<0.05),未分类颤螺旋菌科(unclassified_Oscillospiraceae)和毛螺旋菌科UCG-008(Lachnospiraceae_UCG-008)细菌相对丰度显著提高(P<0.05)。此外,与对照组相比,NT2组中瘤胃细菌富集于环境信息处理途径、信号转导途径、双组分系统和耐药性:抗菌途径的相对丰度显著上升(P<0.05),而富集于其他次级代谢产物生物合成途径和抗生素生物合成途径的相对丰度显著降低(P<0.05)。3)NT1组真菌样本测序鉴定的物种数、ACE、Chao1及香农指数均显著高于对照组(P<0.05);此外,在属水平上,与对照组相比,NT1组中青霉菌属(Penicillium)、葡萄孢盘菌属(Botryotinia)、丝衣霉菌属(Byssochlamys)、木霉菌属(Trichoderma)真菌相对丰度均显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01),而红酵母属(Rhodotorula)、锥盖伞属(Conocybe)、未分类角担菌科(unclassified_Ceratobasidiaceae)真菌相对丰度均显著或极显著下调(P<0.05或P<0.01);同时NT2组中红酵母属、锥盖伞属真菌相对丰度相较于对照组也显著下降(P<0.05),未分类角担菌科真菌相对丰度极显著下降(P<0.01)。综上所述,使用不同比例发酵饲料桑替代基础饲粮可提高瘤胃液中戊酸的含量,增加瘤胃真菌菌群的多样性,改变瘤胃细菌和真菌组成结构,从而调节改善瘤胃内环境。

关键词：发酵饲料桑肉牛瘤胃发酵参数菌群结构

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14份乡土狼尾草材料幼苗的耐冷性综合评价

草业学报 2024年第8期33卷 98-111页

作者：陆姣云田宏熊军波吴新江刘洋张鹤山动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430064

为了探究低温胁迫对不同狼尾草材料幼苗生理特性的影响及综合评价不同材料的抗寒性。本研究采用泥炭土花盆培养法,对采集的14份乡土狼尾草种子发芽后的幼苗进行低温胁迫(25、4、0、-5℃)处理,并测定叶绿素含量、类胡萝卜素含量、抗氧化... 详细信息

为了探究低温胁迫对不同狼尾草材料幼苗生理特性的影响及综合评价不同材料的抗寒性。本研究采用泥炭土花盆培养法,对采集的14份乡土狼尾草种子发芽后的幼苗进行低温胁迫(25、4、0、-5℃)处理,并测定叶绿素含量、类胡萝卜素含量、抗氧化酶活性、丙二醛含量、渗透调节物质含量。采用主成分分析和隶属函数法对14份材料进行抗寒性评价。随低温胁迫的不断加重,供试狼尾草幼苗的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、可溶性糖和脯氨酸含量以及过氧化氢酶活性呈先升后降的趋势,类胡萝卜素含量呈逐渐增大的趋势,超氧化物歧化酶活性呈逐渐增加的趋势,可溶性蛋白呈先升后降再略升的趋势,而过氧化物酶活性变化趋势不一致。光合作用相关的各指标之间显著正相关。主成分分析结果表明,低温胁迫下狼尾草的光合因子、质膜系统因子、渗透调节因子可作为抗寒性评价的综合指标。隶属函数综合评价D值结果显示,L10材料的抗寒性较强,L4、L1和L2材料的抗寒性相对较弱。采用隶属函数综合评价法所得结果更加准确客观、可靠性高,研究结果可为狼尾草抗寒性评价及耐低温种质资源的筛选提供参考。

关键词：狼尾草抗寒性生理特性主成分分析隶属函数法

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聚赖氨酸抗菌肽改性明胶多功能水凝胶的构建与应用

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高等学校化学学报 2024年第1期45卷 164-172页

作者：江云静黄童黛曹玉玉白荣先吴杰王祖曦孙红梅湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室国家细胞调控与分子药物“111”引智基地工业微生物湖北省重点实验室湖北省工业发酵协同创新中心武汉430068

将ε-聚赖氨酸(EPL)抗菌肽接枝到明胶上,合成ε-聚赖氨酸改性明胶(GEL-E)后,以GEL-E、羧甲基壳聚糖(CMC)和氧化硫酸软骨素(OCS)为原料,制备了一种具有可注射性、自愈合性及抗菌性的多功能快速凝胶化水凝胶——GEL-E/CMC/OCS水凝胶.该水... 详细信息

将ε-聚赖氨酸(EPL)抗菌肽接枝到明胶上,合成ε-聚赖氨酸改性明胶(GEL-E)后,以GEL-E、羧甲基壳聚糖(CMC)和氧化硫酸软骨素(OCS)为原料,制备了一种具有可注射性、自愈合性及抗菌性的多功能快速凝胶化水凝胶——GEL-E/CMC/OCS水凝胶.该水凝胶具有较高的储能模量、弹性形变性能、自愈合性能、可注射性能以及抗菌性能.将甘草酸二钾(DG)载入水凝胶,赋予水凝胶抗炎特性以及促伤口愈合能力.初步评价了水凝胶的释药行为.结果表明,药物释放可达100%.同时,评价了载药后水凝胶的细胞相容性以及促细胞迁移能力,发现水凝胶对细胞的毒性很低,且可以促进细胞迁移.研究结果表明,该水凝胶具有良好的力学性能、生物相容性以及促细胞迁移能力,在促进伤口愈合领域具有广阔的应用前景.

关键词：多功能水凝胶聚赖氨酸抗菌肽伤口敷料

小鼠大脑皮层及海马中OTX1表达分布特征及其在睡眠剥夺学习记忆损伤中的变化

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中国老年学杂志 2024年第21期 5249-5255页

作者：杨茜张盈杰王熙蕊李兴元吕靖姚路远吴艳唐俊明李和湖北医药学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室湖北省妇幼保健院麻醉科胚胎干细胞研究湖北省重点实验室华中科技大学同济医学院组织学与胚胎学系

目的通过检测人同源盒基因(OTX)1在小鼠大脑皮质和海马中的表达与定位特征及睡眠剥夺(SD)导致学习记忆损伤时大脑皮层与海马中OTX1表达和定位分布的变化，分析OTX1与SD诱导的认知损害的关系。方法将成年雄性C57小鼠随机分为对照(Ctrl... 详细信息

目的通过检测人同源盒基因(OTX)1在小鼠大脑皮质和海马中的表达与定位特征及睡眠剥夺(SD)导致学习记忆损伤时大脑皮层与海马中OTX1表达和定位分布的变化，分析OTX1与SD诱导的认知损害的关系。方法将成年雄性C57小鼠随机分为对照(Ctrl)组和SD组，采用多平台水环境法建立SD模型；Morris水迷宫评价定位航行和空间搜索能力的变化；新事物认知实验评价认知指数变化；Western印迹法、免疫荧光染色法检测大脑皮层及海马OTX1蛋白表达及定位分布特征。结果在Ctrl组中OTX1呈中至高水平表达在大脑皮层和海马CA1区、CA3区、DG区中：在大脑皮层，OTX1主要位于神经元核内，细胞质内OTX1免疫荧光强度较弱；而在海马CA1区、CA3区和DG区中，OTX1则主要位于神经元胞质内，神经元核内OTX1免疫荧光强度较弱；而在SD组，OTX1的核质荧光强度在大脑皮层及海马体均呈现出与Ctrl组相反的结果；SD组大脑皮层神经元细胞质内OTX1水平显著高于Ctrl组，而海马神经元细胞核内OTX1水平显著高于Ctrl组(P<0.01,P<0.001)。结论 OTX1在小鼠大脑皮层及海马神经元中的表达分布特征及在SD致学习记忆损伤时的变化提示，OTX1可能参与正常学习记忆的形成与维持及在SD等病理条件下学习记忆等认知功能损伤。

关键词：睡眠剥夺人同源盒基因(OTX)1 认知功能障碍大脑皮层海马

酵母抽提物与姜黄素复合对急性酒精性肝损伤小鼠肠道菌群的调节作用

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食品工业科技 2024年第15期45卷 25-33页

作者：黄晓英余海立郑明山刘晓雯张彦农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北宜昌443000 酵母功能湖北省重点实验室湖北宜昌443000 三峡大学基础医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002

目的:研究酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤的预防保护作用及其对肠道菌群的调节作用,并探讨其保护作用机制。方法:建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,分别给予酵母抽提物和姜黄素+酵母抽提物复合物,检测小鼠血... 详细信息

目的:研究酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤的预防保护作用及其对肠道菌群的调节作用,并探讨其保护作用机制。方法:建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,分别给予酵母抽提物和姜黄素+酵母抽提物复合物,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotrans-ferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)和肝组织中总谷胱甘肽(Toal glutathione,T-GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(Malonicdialdehyde,MDA)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)的变化,观察肝组织病理切片损伤情况,分析肠道菌群等指标。结果:与模型组相比,酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物能够降低小鼠ALT、AST、MDA、TC和TG的水平,提高GSH-Px、TGSH的水平;肝组织切片表明,受试物明显改善酒精引起的肝细胞脂肪浸润和炎症浸润;肠道菌群分析表明,酒精性肝损伤小鼠肠道菌群结构发生变化,姜黄素+酵母抽提物复合物能有效恢复因酒精改变的不动杆菌属、普雷沃菌属、瘤胃球菌属的相对丰度,效果优于酵母抽提物。结论:酵母抽提物、姜黄素+酵母抽提物复合物对小鼠急性酒精性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与调节氧化应激、脂质代谢、肠道菌群有关。

关键词：酵母抽提物姜黄素急性酒精性肝损伤肠道菌群

蛋白磷酸酶PPM1F促进非小细胞肺癌的进展

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湖北医药学院学报 2024年第1期43卷 18-24页

作者：周阳刘家琪柳淞李子航马永清冯文筱潘中秋张慧美赵红艳湖北医药学院基础医学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室湖北十堰442000

目的:探讨蛋白磷酸酶PPM1F对非小细胞肺癌增殖和迁移的影响。方法:构建PPM1F敲低载体,通过Western blotting验证PPM1F的敲低效率。通过CCK-8实验、克隆形成实验、迁移实验、侵袭实验和流式细胞术检测PPM1F对非小细胞肺癌细胞功能的影响... 详细信息

目的:探讨蛋白磷酸酶PPM1F对非小细胞肺癌增殖和迁移的影响。方法:构建PPM1F敲低载体,通过Western blotting验证PPM1F的敲低效率。通过CCK-8实验、克隆形成实验、迁移实验、侵袭实验和流式细胞术检测PPM1F对非小细胞肺癌细胞功能的影响。结果:成功构建了PPM1F敲低质粒。敲低PPM1F抑制了非小细胞肺癌生长、增殖、迁移和侵袭能力。同时敲低PPM1F,非小细胞肺癌细胞凋亡率增加,细胞在G1期累积。结论:PPM1F在非小细胞肺癌中以癌基因的作用发挥功能。

关键词：蛋白磷酸酶 PPM1F 非小细胞肺癌

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34份狼尾草萌发期抗旱性综合评价

中国草地学报 2024年第4期46卷 11-24页

作者：田宏张鹤山熊军波陆姣云吴新江刘洋湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室湖北武汉430064

为评价狼尾草抗旱能力,筛选优异资源,以34份狼尾草材料为对象,研究其PEG-6000胁迫下种子发芽特性,采用隶属函数法和聚类分析对狼尾草抗旱性进行综合评价。结果表明,5%的PEG-6000浓度处理下,狼尾草的发芽率、萌发指数、发芽指数较对照显... 详细信息

为评价狼尾草抗旱能力,筛选优异资源,以34份狼尾草材料为对象,研究其PEG-6000胁迫下种子发芽特性,采用隶属函数法和聚类分析对狼尾草抗旱性进行综合评价。结果表明,5%的PEG-6000浓度处理下,狼尾草的发芽率、萌发指数、发芽指数较对照显著增加,表现为促进效应;随着干旱胁迫的增加,各材料发芽受抑作用明显。狼尾草胚芽长和胚根长随PEG浓度的增加呈逐渐下降趋势,其中胚芽较胚根对干旱更敏感。依据测定指标差异程度和变异系数,表明15%的PEG-6000是狼尾草萌发期抗旱性鉴定的适宜浓度。在此浓度处理下,34份狼尾草综合评价值在0.027~0.942之间,其中LW31最高,LW29最低。通过聚类分析所有材料被分为3类,其中LW4、LW9、LW11、LW31、LW42、LW20-2和LW21-1属抗旱材料,可作为狼尾草抗旱性新品种选育的基础材料。

关键词：狼尾草干旱胁迫种子萌发鉴定浓度综合评价

栽培环境下大别山北部野生鹅观草繁殖相关性状变异分析

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草业学报 2024年第9期33卷 70-80页

作者：张鹤山王志勇吴新江田宏熊军波陆姣云刘洋湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北武汉430064 信阳农林学院河南信阳464399

为研究大别山北部野生鹅观草繁殖相关性状变异,以22个野生鹅观草居群为材料,对12个繁殖相关性状进行变异分析、相关性分析、聚类分析和主成分分析。结果表明,不同居群间鹅观草繁殖相关性状存在丰富的变异,单株粒重变异系数最大,为15.97%... 详细信息

为研究大别山北部野生鹅观草繁殖相关性状变异,以22个野生鹅观草居群为材料,对12个繁殖相关性状进行变异分析、相关性分析、聚类分析和主成分分析。结果表明,不同居群间鹅观草繁殖相关性状存在丰富的变异,单株粒重变异系数最大,为15.97%,其次是芒长度(13.98%)和千粒重(13.46%);居群间遗传多样性指数平均值为0.799。相关分析表明,海拔与芒长度、小穗长度显著正相关(P研究。

关键词：大别山北部鹅观草变异

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