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丝裂霉素对膀胱癌EJ细胞作用机制的研究

中华泌尿外科杂志 2002年第6期23卷 368-369页

作者：梁丽莉张强李钟陈琳丁义张志文郭应禄北京大学第一医院泌尿外科北京大学泌尿外科研究所 100034 美国芝加哥西北大学泌尿分子生物学系福建医科大学协和医院

目的　从诱导坏死和凋亡角度探讨丝裂霉素 (MMC)对膀胱癌EJ细胞的作用机制。　方法　将不同浓度的MMC作用于膀胱癌EJ细胞 ,在不同时间内采用流式细胞术 (FCM )和 3’末端脱氧核苷酸转移介导生物素 (TUNEL)及伊红排斥实验检测EJ细胞的凋... 详细信息

目的　从诱导坏死和凋亡角度探讨丝裂霉素 (MMC)对膀胱癌EJ细胞的作用机制。　方法　将不同浓度的MMC作用于膀胱癌EJ细胞 ,在不同时间内采用流式细胞术 (FCM )和 3’末端脱氧核苷酸转移介导生物素 (TUNEL)及伊红排斥实验检测EJ细胞的凋亡情况和对其的杀伤作用。　结果　不同浓度的MMC在 2 4h内可以持续诱导EJ细胞凋亡 ,MMC 0 .1mg/ml组 2 4h时凋亡率为 71% ,对EJ细胞的杀伤作用与剂量呈正比。

关键词：膀胱癌 EJ细胞膀胱肿瘤丝裂霉素C 细胞凋亡药理学

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中华泌尿外科杂志 2001年第10期22卷 581-583页

作者：张强艾军魁梁丽莉张志文郭晓健李钟那彦群郭应禄北京大学第一医院北京大学泌尿外科研究所100034 北京大学医学部生理系美国芝加哥西北大学泌尿分子生物学系

目的　探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18在肾癌发生发展中的作用机制。　方法　采用逆转录PCR方法检测GYLZ RCC18在肾癌和正常肾细胞系中的表达 ,将第一编码区起始处的2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC 1,连续观察对肾癌细... 详细信息

目的　探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18在肾癌发生发展中的作用机制。　方法　采用逆转录PCR方法检测GYLZ RCC18在肾癌和正常肾细胞系中的表达 ,将第一编码区起始处的2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC 1,连续观察对肾癌细胞生长、增殖凋亡、死亡率、形态学的影响。　结果　GYLZ RCC18在肾癌细胞系中表达明显高于正常肾细胞系 ;导入GYLZ RCC18反义寡核苷酸后 ,GRC 1细胞的核分裂可明显减少 ,导致GRC 1细胞死亡 ,抑制癌细胞的生长和增殖活性 ,并可特异诱导GRC 1连续凋亡。　结论　GYLZ RCC18是肾癌发生发展密切相关的癌基因 ,其表达可促进肾癌细胞的生长和增殖 ,并通过抗癌细胞死亡和凋亡机制对癌细胞起保护作用。

关键词：肾肿瘤癌基因 GYLZ-RCC18反义苷酸转染肾癌细胞系GRC-1

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中华外科杂志 2001年第5期39卷 398-400页

作者：张强张志文陈琳李钟梁丽莉郭晓建那彦群郭应禄北京大学泌尿外科研究所 100034 北京大学医学部生理系福建医科大学血液病研究所美国芝加哥西北大学泌尿分子生物学系

目的　应用反义基因转染技术探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18与肾癌细胞死亡 (包括坏死及凋亡 )之间的关系 ,并探讨肾癌基因疗法的新途径。　方法　用脂质体包裹的新基因GYLZ RCC18第一编码区起始处的 2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入... 详细信息

目的　应用反义基因转染技术探讨肾癌相关新基因GYLZ RCC18与肾癌细胞死亡 (包括坏死及凋亡 )之间的关系 ,并探讨肾癌基因疗法的新途径。　方法　用脂质体包裹的新基因GYLZ RCC18第一编码区起始处的 2 0个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC 1,应用流式细胞技术和伊红排斥实验连续检测GYLZ RCC18反义寡核苷酸对肾癌细胞凋亡、坏死的影响。　结果　导入GYLZ RCC18反义寡核苷酸后 ,可大量杀伤GRC 1细胞并明显促进GRC 1细胞坏死 ,于第 4天达到杀伤高峰约 6 0 % ;同时可连续 8d诱导凋亡峰 ,最高于第 2天达到约 2 2 5 % ,两种作用曲线形状和峰值不完全一致。　结论　GYLZ RCC18是肾癌相关的重要的新的癌基因 ,GYLZ RCC18的表达可通过两种不同的机制即抗癌细胞坏死机制和抗凋亡机制发挥对肾癌细胞的保护作用 ,GYLZ RCC18可能对肾癌细胞生存和耐药至关重要。通过导入反义基因的方法阻断肾癌细胞中GYLZ RCC18的表达 ,可有效地杀伤肾癌细胞。对此新基因的研究将有助于为肾癌的基础研究和临床治疗提供新的思路和途径。

关键词：肾肿瘤基因表达 CYLZ-RCC18 基因转染 GRC-1

Clusterin在膀胱癌细胞中的表达及作用机制

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中华泌尿外科杂志 2001年第8期22卷 499-501页

作者：梁丽莉张强李钟曾荔丁义郭晓健张志文郭应禄北京大学第一医院泌尿外科北京大学泌尿外科研究所100034 美国芝加哥西北大学泌尿分子生物学系

目的　探讨抗细胞凋亡因子Clusterin在膀胱癌EJ细胞中的表达及抗凋亡机制。　方法　应用免疫细胞化学染色检测Clusterin在EJ细胞中的表达 ,应用 3′末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)检测Clusterin对EJ细胞的抗凋亡作用。... 详细信息

目的　探讨抗细胞凋亡因子Clusterin在膀胱癌EJ细胞中的表达及抗凋亡机制。　方法　应用免疫细胞化学染色检测Clusterin在EJ细胞中的表达 ,应用 3′末端脱氧核苷酰转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)检测Clusterin对EJ细胞的抗凋亡作用。　结果　Clusterin在EJ细胞中有明显的阳性表达。细胞外加入Clusterin后 ,EJ细胞胞浆内染色加深 ,呈颗粒状 ,为强阳性染色。提示细胞外加入小剂量Clusterin可以明显抑制MMC诱导的EJ细胞凋亡作用。　结论　Clusterin在细胞外可以通过细胞膜进入细胞浆内发挥抗凋亡作用。检测Clusterin的表达特性有助于临床评估膀胱癌复发、耐药等生物学特性。

关键词：膀胱肿瘤癌细胞凋亡 Clusterin 抗细胞凋亡因子

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卵巢原位癌的起源和发展:面临的挑战和希望

山东大学学报（医学版） 2011年第10期49卷 34-42,47页

作者：魏建军美国西北大学医学院病理系芝加哥il60611

卵巢癌的组织发生和起源研究正面临着临床和病理学的挑战。越来越多的事实发现提示,长久以来认为的高恶度浆液卵巢癌(H-PSC),可能既不来源于卵巢,也不产生于卵巢的上皮分化细胞。最近在输卵管伞部发现的早期H-PSC病变,被称为输卵管浆液... 详细信息

卵巢癌的组织发生和起源研究正面临着临床和病理学的挑战。越来越多的事实发现提示,长久以来认为的高恶度浆液卵巢癌(H-PSC),可能既不来源于卵巢,也不产生于卵巢的上皮分化细胞。最近在输卵管伞部发现的早期H-PSC病变,被称为输卵管浆液原位癌(STIC),提供了研究卵巢癌早期发生的全新的概念和材料。例如,STIC的发现让我们有可能进一步研究和确定一些与浆液癌发生密切相关的分子改变,包括P53,BRCAl,HMGA2和微小RNA(microRNAs)。同时,STIC的发现又为我们提供进一步的思考和疑问:其他类型的卵巢癌(包括子宫内膜样的、透明细胞、黏液细胞和部分低恶度浆液癌)是否应重新定义。因为它们大都源于子宫内膜异位症、组织化生或输卵管分泌细胞,并非来自卵巢上皮细胞。显然,进一步的分子和细胞病理学研究将提供认识卵巢癌的钥匙。特别是发现那些与早期癌变有关的癌基因改变将有助于正确认识这种致命肿瘤的发生与分类,并提供早期监测和治疗的新途径。

关键词：卵巢原位癌组织学起源

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前列腺组织特异性启动基因载体的建立与鉴定

中华泌尿外科杂志 1997年第2期18卷 93-96页

作者：张学军 Chung Lee Carl Olsson Ralph Buttyan 马腾骧美国纽约哥伦比亚大学泌尿外科芝加哥西北大学泌尿外科天津医科大学第二医院泌尿外科

采用基因工程技术，构建出前列腺组织特异性的基因载体新型Ｃ３（１）。利用该载体和转基因技术，培殖出人ｂｃｌ２基因的前列腺组织特异性转基因鼠。用ＲＮＡ酶保护法和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测发现，雄鼠中转基因人ｂｃｌ２的ｍＲ... 详细信息

采用基因工程技术，构建出前列腺组织特异性的基因载体新型Ｃ３（１）。利用该载体和转基因技术，培殖出人ｂｃｌ２基因的前列腺组织特异性转基因鼠。用ＲＮＡ酶保护法和Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测发现，雄鼠中转基因人ｂｃｌ２的ｍＲＮＡ和蛋白只在前列腺和睾丸中有表达。ＲＮＡ组织原位杂交检测证实人ｂｃｌ２在鼠前列腺上皮细胞中的过量表达。该实验构建和检测了新型Ｃ３（１）作为前列腺组织特异性的基因启动载体的可行性，为前列腺疾病基因治疗研究打下了基础。

关键词：前列腺基因载体C3(1)

Renal cell carcinoma related novel gene, GYLZ-RCC18: cloning and functional studies

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Chinese Medical Journal 2002年第5期115卷 746-749,155-156页

作者：张强梁丽莉席志军丁义佟明张志文郭应禄李钟陈琳北京大学第一医院北京大学泌尿外科研究所北京100034 美国芝加哥西北大学福建省血液研究所厦门361001

OBJECTIVE: To clone the full length of renal cell carcinoma (RCC) related novel gene GYLZ-RCC18 and study its function. METHODS: SMART RACE technology was used to clone the full length of GYLZ-RCC18. RT-PCR was used to detect its expression in renal cell carcinoma tissue at different stages and grades. We transfected the antisense oligonucleotide of GYLZ-RCC18 to renal cell carcinoma cell line, GRC-1, and analyzed proliferation activity, growth rate, apoptosis, and mortality changes. RESULTS: The full length of GYLZ-RCC18 (GenBank accession number: BE825133) cDNA was about 3.5 kb. GYLZ-RCC18 had a higher expression in higher grades and stages of renal cell carcinoma than in lower ones. The expression of GYLZ-RCC18 in renal cell carcinoma was much higher than in normal kidney. After the transfection of GYLZ-RCC18 antisense oligonucleotide, the mortality of GRC-1 increased significantly, while proliferative activity and growth rate were substantially inhibited at the same time. The antisense oligonucleotide induced apoptosis of GRC-1 through the entire observation time. CONCLUSION: GYLZ-RCC18 is an important novel gene related to renal cell carcinoma. Overexpression of this gene results in higher growth and proliferative activity and has an antiapoptosis effect on renal cell carcinoma cells. Transfection of the antisense oligonucleotide may inhibit the generation and development of renal cell carcinoma.

关键词： Apoptosis Carcinoma, Renal Cell Cell Division Cell Line Cloning, Molecular DNA, Antisense DNA, Complementary Gene Expression Regulation, Neoplastic Genes, Neoplasm Humans Kidney Neoplasms Neoplasm Proteins Oligonucleotides Research Support, Non-U.S. Gov't Sequence Analysis, DNA Transfection Tumor Cells, Cultured

Clusterin对膀胱癌细胞抗死亡作用的研究

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中华泌尿外科杂志 2000年第7期21卷 418-420页

作者：梁丽莉张强李钟丁义张志文郭应禄北京大学第一医院泌尿外科北京大学泌尿外科研究所100034 美国芝加哥西北大学医学院泌尿分子生物学系

目的　探讨Clusterin在细胞外水平抗膀胱癌细胞的自然死亡作用。　方法　应用流式细胞术 (FCM )、MTT试验和伊红染色等方法 ,通过检测不同浓度Clusterin对膀胱癌EJ细胞的自然死亡率及丝裂霉素杀伤后的膀胱癌细胞死亡率的影响 ,分析Clust... 详细信息

目的　探讨Clusterin在细胞外水平抗膀胱癌细胞的自然死亡作用。　方法　应用流式细胞术 (FCM )、MTT试验和伊红染色等方法 ,通过检测不同浓度Clusterin对膀胱癌EJ细胞的自然死亡率及丝裂霉素杀伤后的膀胱癌细胞死亡率的影响 ,分析Clusterin对EJ细胞的抗死亡作用。　结果　Clusterin可以明显降低膀胱癌细胞的自然死亡率 ,还可以对抗丝裂霉素对EJ细胞的杀伤作用。　结论　检测Clusterin的表达特性将有助于临床对膀胱癌的耐药性及用药后复发做出评估分析 ,为应用Clusterin抗体治疗膀胱癌提供理论依据。

关键词：膀胱肿瘤 Clusterin 硫酸糖蛋白治疗

Clusterin对膀胱癌细胞抗凋亡作用机制的研究

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中华泌尿外科杂志 2001年第1期22卷 31-33页

作者：梁丽莉张强李钟王建中丁义张志文郭应禄北京大学泌尿外科研究所北京大学第一医院泌尿外科100034 美国芝加哥西北大学泌尿分子生物学系北京大学第一医院检验科

目的　探讨新的抗细胞凋亡因子Clusterin对膀胱癌EJ细胞的作用机制。　方法　用丝裂霉素 (MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡 ,采用流式细胞术 (FCM)检测不同浓度的Clusterin对抗EJ细胞的凋亡率。　结果　小剂量Clusterin可以特异性抑制MMC诱导... 详细信息

目的　探讨新的抗细胞凋亡因子Clusterin对膀胱癌EJ细胞的作用机制。　方法　用丝裂霉素 (MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡 ,采用流式细胞术 (FCM)检测不同浓度的Clusterin对抗EJ细胞的凋亡率。　结果　小剂量Clusterin可以特异性抑制MMC诱导的EJ细胞凋亡作用。　结论Clusterin通过抗凋亡机制作用于膀胱癌EJ细胞 ,可能与膀胱癌细胞的复发、耐药等临床特性有关 ,此项研究对阐明膀胱癌发生发展的生物学机制以及临床应用Clusterin抗体治疗膀胱癌提供帮助。

关键词： Clusterin 膀胱肿瘤癌凋亡