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Humanin对鱼藤酮诱导的多巴胺神经元毒性的保护作用研究

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 670-677页

作者：单耀辉张启夫程晋叶枫张玺余文珮王晓刚赵远鹏但国蓉陈明亮赛燕陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系防化医学教研室重庆400038

目的探讨Humanin(HN)对鱼藤酮(rotenone,Rot)诱导的多巴胺神经元毒性损伤的保护作用和机制。方法构建Rot染毒PC12细胞模型,实验设对照组、Rot染毒组、HN预处理Rot染毒组、单独HN处理组。采用ELISA检测Rot染毒细胞内外HN的含量,CCK-8法... 详细信息

目的探讨Humanin(HN)对鱼藤酮(rotenone,Rot)诱导的多巴胺神经元毒性损伤的保护作用和机制。方法构建Rot染毒PC12细胞模型,实验设对照组、Rot染毒组、HN预处理Rot染毒组、单独HN处理组。采用ELISA检测Rot染毒细胞内外HN的含量,CCK-8法检测细胞活性,ATP检测试剂盒检测细胞内ATP含量,DCFH-DA探针检测细胞内ROS水平,Western blot分别检测线粒体自噬调控蛋白Pink1、Parkin、p-Parkin、p62、LC3,线粒体生物发生调控蛋白PGC1α和分裂/融合调控蛋白OPA1、MFN2、DRP1、p-DRP1以及抗氧化应激调控蛋白Keap1、Nrf2的表达。采用HBAD-mcherry-EGFP-LC3腺病毒转染细胞观察自噬体和自噬溶酶体的数量。结果Rot染毒组PC12细胞内HN浓度显著高于对照组(P<0.05);与对照组比较,Rot染毒组PC12细胞活性下降,ATP含量下降,ROS的生成增加,Rot染毒后PC12细胞内Pink1、p-Parkin表达升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,p62表达下降,细胞线粒体生物发生蛋白PGC1α和线粒体融合蛋白MFN2、OPA1表达下降,而线粒体分裂蛋白p-DRP1表达升高,抗氧化应激蛋白Keap1和Nrf2表达下降(P均<0.05);与对照组比较,Rot染毒组PC12细胞中自噬体和自噬溶酶体数量增多(P<0.05),而20μmol/L HN预处理可以改善Rot染毒引起的上述变化(P<0.05)。结论HN通过抑制线粒体自噬和线粒体分裂、促进线粒体生物发生和融合以及抗氧化应激,改善Rot诱导的多巴胺神经元毒性损伤。

关键词： Humanin 鱼藤酮多巴胺神经元线粒体

热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元的损伤作用

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陆军军医大学学报 2024年第18期46卷 2029-2035页

作者：李萍罗雪罗珍何根林王泽泽申婷婷刘晓倩谭雨龙杨学森陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系热带医学教研室重庆400038

目的探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响。方法热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡。利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1... 详细信息

目的探究热刺激后小胶质细胞细胞外囊泡对神经元损伤的影响。方法热刺激BV2小胶质细胞后收集上清,通过不同的超速离心速度获取细胞外大囊泡和小囊泡。利用纳米粒度分析仪检测粒径,利用Western blot检测囊泡上TSG101、CD63和flotillin-1的表达。PKH67标记BV2来源的囊泡后与N2a细胞共孵育,检测神经元对小胶质细胞细胞外囊泡的摄取情况。分别将热刺激后BV2来源的大囊泡和小囊泡与N2a共孵育,通过CCK-8、细胞外乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、台盼蓝染色和TUNEL染色法评价热刺激后N2a的损伤情况。结果小囊泡粒径介于30~120 nm,高表达TSG101和CD63,大囊泡粒径介于90~1000 nm,高表达flotillin-1;BV2来源的细胞外囊泡可被N2a细胞摄取并参与热刺激对N2a细胞损伤的调节,其中CCK-8检测结果表明小胶质细胞来源的大小囊泡均能降低热刺激后N2a细胞的活力(P<0.05)。LDH检测、台盼蓝染色及TUNEL检测结果表明大囊泡(P<0.05)和小囊泡(P<0.01)均能显著提高热刺激后N2a细胞LDH的释放水平、N2a细胞的蓝染水平及凋亡程度,且小囊泡处理组中N2a细胞的LDH释放水平、蓝染和凋亡水平高于大囊泡处理组。结论热刺激后小胶质细胞通过细胞外囊泡加剧了神经元的损伤。

关键词：小胶质细胞细胞外囊泡热刺激神经元损伤

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公共卫生实践中的队列研究及其意义

上海预防医学 2024年第1期36卷 2-4页

作者：张宏伟海军军医大学流行病学教研室上海200433

队列研究在阐明危险因素与疾病关联中发挥着重要的作用,广泛应用于病因研究、疾病预后评估、疾病自然史以及新药上市后监测等方面。队列研究提供的数据具有非常强的科学性,可为公共卫生实践提供所需要的依据。队列研究实施前一定要进行... 详细信息

队列研究在阐明危险因素与疾病关联中发挥着重要的作用,广泛应用于病因研究、疾病预后评估、疾病自然史以及新药上市后监测等方面。队列研究提供的数据具有非常强的科学性,可为公共卫生实践提供所需要的依据。队列研究实施前一定要进行科学设计。队列研究设计时应当重点考虑样本量、暴露和非暴露人群的选择、随访、结局判断以及研究的时长、分析的指标和方法等。队列研究已经成为获取科学依据的重要途径。国际知名的人群研究队列如中国慢性病前瞻性研究和弗雷明汉心脏研究队列等,为促进人类的健康提供了大量的具有科学价值的证据。队列研究所提供数据的质量极为重要,队列研究要不断纳入新技术和新方法,以提供客观、准确、可靠的手段来确定暴露和结局,并控制偏倚。队列研究有着非常大的应用空间,必将为维护人类健康的策略和措施的制定提供更多高水平的科学证据。

关键词：公共卫生队列研究危险因素病因研究疾病预后评估疾病自然史

前列腺癌早期筛查风险预测模型的建立与验证研究

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中国全科医学 2024年第20期27卷 2483-2490页

作者：李宏基赵晓龙胡伟韩东晖王安辉秦卫军空军军医大学第一附属医院泌尿外科陕西省西安市710032 空军军医大学军事预防医学系流行病学教研室陕西省西安市710032

背景前列腺癌作为常见的恶性肿瘤,威胁中老年男性生命健康,其预后与初诊时肿瘤级别与分期密切相关。前列腺特异性抗原(PSA)是前列腺癌早期筛查的重要分子,但非肿瘤负荷的前列腺良性疾病或操作也会引起PSA升高,盲目穿刺常导致过度诊疗。... 详细信息

背景前列腺癌作为常见的恶性肿瘤,威胁中老年男性生命健康,其预后与初诊时肿瘤级别与分期密切相关。前列腺特异性抗原(PSA)是前列腺癌早期筛查的重要分子,但非肿瘤负荷的前列腺良性疾病或操作也会引起PSA升高,盲目穿刺常导致过度诊疗。依据患者穿刺活检前的临床指标构建前列腺癌风险预测模型,可以为早筛可疑患者是否进行穿刺活检提供重要参考。目的寻找前列腺穿刺活检阳性的独立危险因素,构建前列腺癌发生的风险预测模型,预测前列腺癌发生风险。方法选取2011年1月—2023年6月于空军军医大学第一附属医院泌尿外科住院并进行前列腺穿刺活检的患者1138例,排除351例临床数据不完整病例后,剩余787例病例通过R语言split函数随机分为训练集(n=548)与验证集(n=239)(划分比例为7∶3)。收集患者的基本信息以及穿刺活检前生化检查指标,依据患者穿刺活检病理结果判断是否发生前列腺癌。应用LASSO回归筛选前列腺癌发生的独立危险因素,对独立危险因素进行多因素Logistic回归分析,利用分析结果构建前列腺癌早期筛查的风险预测模型并绘制列线图。依据训练集与验证集数据对模型进行验证。结果使用LASSO回归分析筛选出6个预测变量,包括年龄、总PSA(tPSA)、碱性磷酸酶、总蛋白、钙、尿素。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁(OR=3.769,95%CI=2.393~5.937)、tPSA≥10μg/L(OR=2.259,95%CI=1.419~3.596)、碱性磷酸酶≥45 U/L[45~学差异的6个预测变量绘制列线图,建立预测模型。预测模型预测训练集前列腺癌发生的ROC曲线下面积(AUC)为0.778(95%CI=0.740~0.816),灵敏度为53.2%,特异度为85.5%,验证集前列腺癌发生的AUC为0.770(95%CI=0.708~0.832),灵敏度为61.2%,特异度为80.0%。拟合优度检验显示训练集P=0.543,验证集P=0.372,具有较好的拟合度。决策曲线分析(DCA)显示训练集高风险阈值<10%,验证集的高风险阈值约为15%,在临床实践中有一定的指导意义。结论本研究建立了包含年龄、tPSA、碱性磷酸酶、总蛋白、钙、尿素共6项穿刺前指标的前列腺癌列线图风险预测模型,可用于预测早期筛查可疑患者的前列腺癌发生风险。

关键词：前列腺肿瘤前列腺增生筛查危险因素列线图

临床流行病学研究中多因素分析时的变量选择方法

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中华内科杂志 2024年第5期63卷 462-467页

作者：聂朦邬娜袁志权夏婷婷向颖李亚斐陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室临床流行病学和循证医学中心重庆400038 贵州医科大学公共卫生与健康学院环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳561113

变量选择是多因素分析时必不可少的环节,在控制混杂因素或者使模型达到高预测性能方面起着至关重要的作用。目前常用的变量筛选方法主要分为数据驱动和知识驱动两大类别,不同的变量筛选方法在识别混杂因素的作用、适用条件方面各不相同... 详细信息

变量选择是多因素分析时必不可少的环节,在控制混杂因素或者使模型达到高预测性能方面起着至关重要的作用。目前常用的变量筛选方法主要分为数据驱动和知识驱动两大类别,不同的变量筛选方法在识别混杂因素的作用、适用条件方面各不相同。本文介绍了临床流行病学中常用的变量筛选方法,并分析了这些方法优势和局限性,尤其是详细介绍了基于“知识驱动”的变量筛选方法在因果推断的临床研究中识别混杂变量的重要性,是当前国际上提高多因素分析结果的准确性和因果推断有效性的重要手段之一。本文也指出了国内研究者采用的变量筛选方法和国际上高质量研究的差别,并对不同临床研究情况下的变量筛选方法提出了合理的建议,旨在帮助临床研究者更好地了解和选择合适的变量筛选方法,提高临床研究的质量。

关键词：变量选择混杂因素有向无环图效应改变法

环状RNA mmu_circ_0005019影响小鼠心肌细胞钙激活钾通道电流及动作电位

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陆军军医大学学报 2024年第2期46卷 100-109页

作者：杨岚清邬娜陈鹏慧袁志权李成英吴龙钟理李亚斐陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系军队流行病学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院神经生物学教研室重庆400038 重庆医科大学附属第三医院心血管疾病中心重庆401120

目的探索环状RNA mmu_circ_0005019调控小电导钙激活钾(small-conductance calcium-activated potassium, SK)通道蛋白亚基SK3编码基因Kcnn3的表达,以及对小电导钙激活钾通道电流(IK,Ca)和动作电位时程(action potential duration, APD)的影响。方法在小鼠HL-1细胞中分别构建mmu_circ_0005019过表达和干扰模型,分为过表达组(n=3)、空质粒组(n=3)、干扰1组(n=3)、干扰2组(n=3)、对照组(n=3),通过RT-qPCR、Western blot分析mmu_circ_0005019调节Kcnn3表达的分子机制,应用膜片钳技术电流钳模式记录全细胞的IK,Ca,并用电压钳模式记录APD。结果成功构建了环状RNA mmu_circ_0005019过表达和干扰的HL-1细胞模型。过表达组的Kcnn3基因表达与空质粒组相比明显上调(P<0.05);干扰1组和干扰2组的Kcnn3基因表达与对照组相比均明显下调(P<0.05)。电生理发现过表达mmu_circ_0005019增加了HL-1细胞IK,Ca电流密度,APD显著缩短;相反,干扰mmu_circ_0005019减少了IK,Ca电流密度,APD显著延长。结论 mmu_circ_0005019可以上调小鼠HL-1细胞Kcnn3的表达水平,从而改变IK,Ca和APD,提示环状RNA mmu_circ_0005019可能在房颤发生中起到促进作用。

关键词：环状RNA 心肌细胞小电导钙激活钾通道动作电位时程膜片钳

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国内外结核病临床在研疫苗最新研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2024年第2期36卷 201-206,218页

作者：周方斌张逸龙张冬梅海军军医大学海军医学系热带病学教研室上海200433

结核病是全球最大的传染病杀手之一,接种疫苗是预防结核病最理想的方法,但此前广泛用于预防结核病的卡介苗保护效果存在局限性,亟需开发新型结核病疫苗。目前,国内外已有包括减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗及病毒载体疫苗等在内的15种... 详细信息

结核病是全球最大的传染病杀手之一,接种疫苗是预防结核病最理想的方法,但此前广泛用于预防结核病的卡介苗保护效果存在局限性,亟需开发新型结核病疫苗。目前,国内外已有包括减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗及病毒载体疫苗等在内的15种新型结核病疫苗进入临床试验阶段,为最终实现“终结结核病流行目标”带来了曙光。本文就国内外临床在研结核病疫苗的最新研究进展作一综述,以期为后续结核病防治提供参考。

关键词：结核病结核分枝杆菌疫苗临床试验

2006-2021年中国居民结核病死亡情况的流行特征分析与预测

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中华流行病学杂志 2024年第6期45卷 824-832页

作者：李政方乐天胡明曾慧娴陈宏森谭晓㛃海军军医大学海军医学系海军流行病学教研室上海200433 上海市医学生物防护重点实验室上海200433 生物安全防御教育部重点实验室上海200433 暨南大学基础医学院流行病学教研室广州510632

目的分析2006-2021年中国居民结核病死亡情况的流行病学特征,并对2022-2027年的结核病死亡率进行预测,为开展我国结核病防控工作提供参考依据。方法收集来自中国CDC定期公开发表的2006-2021年结核病死亡病例数据集,并依照中国2000年的... 详细信息

目的分析2006-2021年中国居民结核病死亡情况的流行病学特征,并对2022-2027年的结核病死亡率进行预测,为开展我国结核病防控工作提供参考依据。方法收集来自中国CDC定期公开发表的2006-2021年结核病死亡病例数据集,并依照中国2000年的人口结构进行年龄标化,计算结核病粗死亡率(CMR)和年龄标化死亡率(ASMR),分析结核病死亡病例年龄、性别、地区和时间的分布特征,采用Joinpoint回归分析模型分析变化趋势,并应用灰色模型预测2022-2027年的结核病CMR和ASMR。结果中国居民总人群、男女性、城乡、各年龄段(除年龄≥85岁组死亡率下降趋势不显著外)、东中西部地区2006-2021年结核病CMR和ASMR均呈下降趋势。男性CMR和ASMR均高于女性。城市CMR和ASMR均低于农村。结核病患者年龄越大,死亡率越高。CMR和ASMR西部均高于东部和中部,东部低于中部,但差距较小。东部城市ASMR低于中部城市和西部城市,中部城市在2006-2009年和2012年高于西部城市,其他年份均低于西部城市;西部农村ASMR高于东部农村和中部农村,东部农村低于中部农村,但差距较小。灰色模型预测结果显示,中国居民2022-2027年结核病CMR(/10万)分别为1.585、1.471、1.360、1.250、1.143和1.038,ASMR(/10万)分别为0.779、0.653、0.531、0.411、0.295和0.181。结论中国居民2006-2021年及预测2022-2027年结核病CMR和ASMR均持续下降,结核病防治取得了较大的成就。未来工作应重点加强农村、西部地区、男性、老年人口的结核病筛查和治疗,有针对性地制定防控措施,降低死亡率。

关键词：结核病死亡率趋势分析中国居民灰色模型

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丙型肝炎防治现状及展望

中国热带医学 2024年第1期24卷 34-39页

作者：王安辉王波黄长形闫永平空军军医大学军事预防医学系流行病学教研室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室陕西西安710032 空军军医大学唐都医院感染病科陕西西安710038

病毒性肝炎是影响我国居民健康的严重传染性疾病之一。世界卫生组织提出2030年消除病毒性肝炎的威胁作为全球公共卫生的目标。但是在丙型病毒性肝炎防控方面,由于丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)病原学特点,丙型肝炎病毒感染自然... 详细信息

病毒性肝炎是影响我国居民健康的严重传染性疾病之一。世界卫生组织提出2030年消除病毒性肝炎的威胁作为全球公共卫生的目标。但是在丙型病毒性肝炎防控方面,由于丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)病原学特点,丙型肝炎病毒感染自然史的特殊性,丙型肝炎在疫苗方面的研究目前没有突破性进展,丙肝肝炎传染源人群特殊,HCV感染后多数无临床症状等因素导致丙型肝炎的防治仍面临着诸多挑战。本文就丙型病毒性肝炎的病毒学、流行病学特征及防治过程中面临的现状等展开综述。

关键词：丙型病毒性肝炎病原学防控策略流行特征治疗措施