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小鼠中缝背核向屏状核投射神经通路的形态学特征

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解剖学报 2024年第4期55卷 414-421页

作者：巩涛蔡志平史娟李云庆包头医学院人体解剖学教研室内蒙古包头014040 空军军医大学人体解剖学与组织学胚胎学教研室梁銶琚脑研究中心西安710032

目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神... 详细信息

目的探索小鼠中缝背核(DRN)向屏状核(CLA)投射神经通路的形态学特征。方法分别将逆行示踪剂594 retrobeads和顺行示踪剂生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入CLA(n=3)和DRN(n=3),结合5-羟色胺(5-HT)免疫荧光染色,观察逆行标记神经元的分布和神经化学特征以及顺标神经纤维和终末在全脑和CLA内的分布;利用钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)-Cre、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)-Cre动物结合狂犬逆行跨突触病毒(RV)标记,观察DRN-CLA通路的下游靶神经元类型。结果DRN的吻、中、尾段均能观察到594 retrobeads阳性神经元的胞体,中段的腹侧亚核(DRV)分布较多,且90%以上的逆行标记神经元为5-HT阳性。BDA顺标纤维密集分布于腹侧被盖区、束旁核、腹侧苍白球、杏仁中央核等区,CLA内的神经纤维和终末相对稀疏。RV跨突触逆行标记结果显示,CaMKⅡ-Cre动物的DRN中含有较多的突触前神经元,而GAD67-Cre动物DRN中突触前逆行标记神经元较少。结论DRN-CLA通路是以DRV分布为主的5-HT能投射通路,其在CLA内的纤维和终末较为稀疏,主要与CLA内的CaMKⅡ阳性神经元形成突触联系。

关键词：中缝背核屏状核 5-羟色胺能神经元钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ阳性神经元神经束路示踪免疫荧光小鼠

调控内侧前额叶皮质向丘脑室旁核投射通路对小鼠痛信息传递的影响

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解剖学报 2024年第4期55卷 430-436页

作者：朱柯桦吴凤玲孙寒雪洪洁陈思海史娟李云庆西北工业大学医学研究院西安710072 空军军医大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

目的探讨小鼠内侧前额叶皮质(mPFC)-丘脑室旁核(PVT)通路的投射神经元的性质及调控该通路对生理痛和急性痛的影响。方法谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠3只,用于形态学追踪实验,C57小鼠27只,用于行为学观察实验。... 详细信息

目的探讨小鼠内侧前额叶皮质(mPFC)-丘脑室旁核(PVT)通路的投射神经元的性质及调控该通路对生理痛和急性痛的影响。方法谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠3只,用于形态学追踪实验,C57小鼠27只,用于行为学观察实验。将霍乱毒素B亚基(CTB)注入GAD67-GFP转基因小鼠的PVT内,观察向PVT投射的mPFC神经元的性质,使用化学遗传学方法调控mPFC-PVT通路,观察其对小鼠机械痛、热痛、冷痛以及辣椒素诱导的急性炎性痛的影响。结果mPFC内CTB标记神经元主要分布于Ⅴ层和Ⅵ层,且与GAD67-GFP不共标;化学遗传学方法激活mPFC-PVT通路可显著降低小鼠的机械痛阈值(P<0.0001),缩小热痛潜伏期(P<0.001),对冷痛无明显的影响;抑制此通路则可显著提高动物的机械性痛阈(P<0.05);辣椒素诱导急性炎性痛模型下激活此通路引起小鼠舔爪时间增加(P<0.05)。结论mPFC-PVT通路为非γ-氨基丁酸(GABA)能的神经通路,激活该通路可促进小鼠的机械痛、热痛和急性炎性痛反应。

关键词：内侧前额叶皮质丘脑室旁核生理痛急性炎性痛化学遗传学小鼠

小鼠丘脑背内侧核内VGLUT2阳性神经元传入联系的形态学研究

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神经解剖学杂志 2024年第3期40卷 287-294页

作者：冯慧洁彭霏薛美琪阮彩莲董玉琳空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 延安大学基础医学院人体解剖学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院学员五大队西安710032

目的:利用狂犬病病毒(RV)介导的逆行跨单级突触追踪技术,观察丘脑背内侧核(MD)内囊泡膜谷氨酸转运体2(VGLUT2)阳性神经元的全脑突触前神经元分布。方法:将RV的辅助病毒注射至VGLUT2-ires-Cre转基因小鼠右侧MD,两周后将RV注入相同区域。... 详细信息

目的:利用狂犬病病毒(RV)介导的逆行跨单级突触追踪技术,观察丘脑背内侧核(MD)内囊泡膜谷氨酸转运体2(VGLUT2)阳性神经元的全脑突触前神经元分布。方法:将RV的辅助病毒注射至VGLUT2-ires-Cre转基因小鼠右侧MD,两周后将RV注入相同区域。一周后灌注取材,进行全脑扫描,观察RV标记的突触前神经元在全脑的分布。结果:将RV病毒注入VGLUT2-ires-Cre小鼠MD后,在皮质和脑干内可观察到密集的突触前神经元。皮质内逆标神经元多分布于运动皮质、内侧前额叶皮质、眶额皮质和岛叶;丘脑内多见于丘脑网状核和下丘脑外侧区等;而脑干逆标神经元则主要分布在臂旁外侧核、中脑导水管周围灰质和中缝核等部位。结论:MD内VGLUT2阳性神经元一方面可接受来自脑干的上行纤维的投射,或丘脑网状核的信息调控;另一方面作为高阶丘脑也可接受皮质的下行投射,参与脑内的多种功能。以上结果为研究MD的功能及相关神经环路的机制提供了形态学基础。

关键词：丘脑背内侧核狂犬病病毒囊泡膜谷氨酸转运体2 小鼠

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结缔组织生长因子在神经系统中的功能与作用

中国组织工程研究 2024年第4期28卷 615-620页

作者：马思聪陈晶李云庆遵义医科大学基础医学院人体解剖学教研室贵州省遵义市563006 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心陕西省西安市710032

背景:近期有研究表明,结缔组织生长因子不仅参与神经元的发育,而且参与神经退行性疾病、抑郁症、癫痫等的发病过程,还可作为治疗靶点开发相关药物,从而改善患者的生活质量。目的:总结结缔组织生长因子的生物学功能和参与神经退行性疾病... 详细信息

背景:近期有研究表明,结缔组织生长因子不仅参与神经元的发育,而且参与神经退行性疾病、抑郁症、癫痫等的发病过程,还可作为治疗靶点开发相关药物,从而改善患者的生活质量。目的:总结结缔组织生长因子的生物学功能和参与神经退行性疾病、抑郁症等其他神经系统疾病的机制,以及干预结缔组织生长因子改善疾病症状和相关新兴治疗手段的进展。方法:由第一作者检索PubMed及Web of Science数据库中收录的相关文献,检索词为“connective tissue growth factor,nervous system,depression,Alzheimer disease,Parkinson disease,epilepsy,amyotrophic lateral sclerosis,FG-3019”,文献检索时限为1996年1月至2022年12月,经过阅读并筛选整理,选择与综述内容相符的文献,最终确定整理出51篇文献进行综述。结果与结论:①结缔组织生长因子通过4个不同的结构域在不同条件下参与纤维化、细胞黏附、细胞发育等多项生物学活动;②结缔组织生长因子在神经退行性疾病、抑郁和癫痫等其他神经系统疾病的病变相关脑区和部位发生上调,干预结缔组织生长因子的表达后症状好转或消失,提示结缔组织生长因子在这些疾病发展过程中发挥重要作用;③围绕结缔组织生长因子开发新的治疗策略和干预靶点是非常有前景的治疗研究,要实现由基础研究到临床转化应用还需要更多机制方面的研究,以达到更安全有效的治疗效果。

关键词：结缔组织生长因子神经系统转化生长因子β 神经退行性疾病抑郁症癫痫综述

小鼠蓝斑内酪氨酸羟化酶阳性神经元向丘脑室旁核投射的形态学研究

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神经解剖学杂志 2024年第4期40卷 405-412页

作者：张蓬鑫朱慧彭霏吕培源冯慧洁薛美琪薛懿珈董玉琳空军军医大学基础医学院人体解剖学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 空军军医大学基础医学院学员四大队西安710032 延安大学基础医学院人体解剖学教研室延安716000 西北工业大学医学研究院西安710072 空军军医大学基础医学院学员五大队西安710032

目的:观察蓝斑(LC)内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元向丘脑室旁核(PVT)内速激肽-1(TAC1)阳性神经元的投射,并从形态学上观察该通路是否参与伤害性信息的传递或调控。方法:利用TAC1-ires-Cre与Rosa26:CAG-LSL-tdTomato(Ai9)小鼠杂交,繁育TAC... 详细信息

目的:观察蓝斑(LC)内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元向丘脑室旁核(PVT)内速激肽-1(TAC1)阳性神经元的投射,并从形态学上观察该通路是否参与伤害性信息的传递或调控。方法:利用TAC1-ires-Cre与Rosa26:CAG-LSL-tdTomato(Ai9)小鼠杂交,繁育TAC1-ires-Cre::Ai9小鼠,并制备坐骨神经分支损伤(SNI)模型,观察PVT内TAC1阳性神经元与FOS免疫阳性产物的共存情况,以及TAC1/FOS双标神经元与TH阳性轴突终末之间的密切接触。其次在C57BL/6小鼠PVT内注入荧光金(FG),在显微镜下观察LC内TH阳性神经元与FG逆标神经元的共标情况。最后在TAC1-ires-Cre小鼠的PVT注射RV逆行跨单突触三联病毒,观察LC内TH阳性神经元与RV逆标神经元之间的共存情况。结果:在TAC1-ires-Cre::Ai9小鼠脑内,TAC1阳性神经元为红色荧光所标记。SNI模型下PVT内可观察到部分TAC1阳性神经元同时表达FOS蛋白,且与TH阳性轴突终末之间形成密切接触。将FG注射入小鼠PVT后,在LC内可观察到大量的FG逆标神经元,且部分FG标记神经元同时表达TH阳性。利用RV逆行跨单突触示踪病毒,也可在LC内观察到PVT内TAC1阳性神经元的突触前神经元,且大部分突触前神经元为TH阳性。结论:LC内TH阳性神经元可向PVT内TAC1阳性神经元发出投射,形成LC^(TH+)-PVT^(TAC1+)神经通路,该通路可以被伤害性信息激活,提示其可能在痛觉信息的传递或调控过程中发挥一定的作用。

关键词：蓝斑丘脑室旁核酪氨酸羟化酶速激肽-1 伤害性信息小鼠

小鼠中央内侧核向前额叶和岛叶皮质发出分支投射的形态学研究

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空军军医大学学报 2024年

作者：薛美琪窦雪瑛刘楚涵王珊杨彦玲董玉琳延安大学基础医学院人体解剖学教研室空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心

目的观察小鼠丘脑中央内侧核（CM）向不同皮层区域的分支投射情况，并为其参与伤害性信息传递提供形态学证据。方法将荧光金（FG）分别注射到前额叶皮质（PFC）或岛叶皮质（IC）并建立完全弗氏佐剂（CFA）炎性痛模型，观察FG逆标神经元... 详细信息

目的观察小鼠丘脑中央内侧核（CM）向不同皮层区域的分支投射情况，并为其参与伤害性信息传递提供形态学证据。方法将荧光金（FG）分别注射到前额叶皮质（PFC）或岛叶皮质（IC）并建立完全弗氏佐剂（CFA）炎性痛模型，观察FG逆标神经元在CM中的分布，以及CM内向PFC或IC投射的神经元是否参与伤害性信息传递；继而将FG注射到PFC，同时将四甲基罗达明（TMR）注入IC，并建立CFA模型，观察CM内FG与TMR双标神经元的分布及其与FOS蛋白的共标。结果 ①将FG注射到PFC后，在CM的吻侧和中部可观察到大量逆标神经元，尾侧的FG逆标神经元相对较少；将FG注射到IC后，可观察到CM的中尾侧有大量的FG逆标神经元分布，而在CM的吻段较少；②CM-IC或CM-PFC通路在CFA模型下均可观察到激活的神经元，但前者激活数量较后者多；③CM吻中段少量神经元可同时向PFC和IC发出分支投射，且偶见共标神经元在疼痛状态下被激活。结论 CM可以分别向PFC和IC发出大量投射，且参与伤害性信息的传递，但分支投射的情况较少见。

关键词：中央内侧核分支投射前额叶皮质岛叶疼痛神经通路

肝组织细胞外囊泡调节间充质干细胞成骨分化促进颌骨缺损愈合初探

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中华口腔医学杂志 2024年第5期59卷 435-443页

作者：李成汉雷啸郑晨曦金岩隋秉东英司奇第四军医大学基础医学院西安710032 第四军医大学口腔医院组织工程研发中心、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔疾病国际联合研究中心西安710032

目的探讨肝组织细胞外囊泡(LT-EV)促进间充质干细胞成骨分化并治疗小鼠颌骨缺损的生物学过程,以期为临床颌骨缺损治疗提供一种可行的治疗方式。方法使用酶解法和差速离心法提取小鼠LT-EV,使用扫描电镜、蛋白质印迹和纳米粒子跟踪分析仪... 详细信息

目的探讨肝组织细胞外囊泡(LT-EV)促进间充质干细胞成骨分化并治疗小鼠颌骨缺损的生物学过程,以期为临床颌骨缺损治疗提供一种可行的治疗方式。方法使用酶解法和差速离心法提取小鼠LT-EV,使用扫描电镜、蛋白质印迹和纳米粒子跟踪分析仪鉴定和表征LT-EV,并通过蛋白组学、京都基因和基因组数据库通路分析进一步探索LT-EV的生物学功能。使用流式细胞术检测LT-EV血浆浓度,计算LT-EV的血浆半衰期。使用小动物活体成像系统检测小鼠注射LT-EV 24 h后的生物学分布。通过简单随机抽样法将6只C57BL/6小鼠分为对照组和LT-EV组(每组3只),所有小鼠行颌骨缺损手术,每7天行尾静脉注射(对照组注射磷酸盐缓冲液,LT-EV组注射LT-EV),术后28 d使用显微CT检测小鼠颌骨愈合程度,通过HE染色分析LT-EV的多器官生物安全性,使用免疫荧光染色检测颌骨缺损区域成骨标志蛋白表达量。采用LT-EV处理成骨分化诱导的人颌骨间充质干细胞(hJBMSC)(取自空军军医大学第三附属医院创伤与正颌外科提供的正颌手术患者手术切除的正常颌骨骨片),并比较hJBMSC组与对照组(磷酸盐缓冲液处理)细胞成骨分化能力差异,通过碱性磷酸酶(ALP)染色和实时定量PCR(qRT-PCR)验证LT-EV的体外促成骨分化作用。结果LT-EV产量较高,蛋白组学与京都基因和基因组数据库通路分析显示,LT-EV含有调节细胞生物功能的系列蛋白质。尾静脉注射的LT-EV可到达小鼠颌骨缺损区域,并促进颌骨缺损的再生修复[LT-EV组和对照组骨体积分数分别为(36.06±4.20)%和(18.58±5.61)%;t=4.32,P=0.013],且具有良好的生物安全性。LT-EV在体外可以促进hJBMSC成骨分化,相比对照组,hJBMSC组成骨分化后ALP染色和成骨基因表达水平均显著增强(P<0.05)。结论LT-EV产量大、易获取、生物安全性高并具备优良的促成骨作用,有望成为颅颌面骨骼缺损再生的无细胞疗法新策略。

关键词：骨再生再生医学肝细胞外囊泡间充质干细胞成骨分化

基于单细胞测序分析颌骨和长骨间充质干细胞特性差异

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中华口腔医学杂志 2024年第3期59卷 247-254页

作者：王浩周泽楷隋秉东金钫周峻郑晨曦第四军医大学口腔医院口腔组织病理学教研室、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔疾病国际联合研究中心西安710032 第四军医大学基础医学院西安710032 第四军医大学口腔医院口腔正畸科、口颌系统重建与再生全国重点实验室、国家口腔疾病临床医学研究中心、陕西省口腔疾病临床医学研究中心西安710032

目的研究颌骨和长骨全骨髓细胞组成并比较下颌骨来源间充质干细胞(M-MSC)与股骨来源间充质干细胞(F-MSC)异质性,探讨不同谱系来源骨间充质干细胞(MSC)的功能特性差异。方法对文献中下颌骨与股骨全骨髓单细胞RNA测序(scRNA-seq)数据集,使... 详细信息

目的研究颌骨和长骨全骨髓细胞组成并比较下颌骨来源间充质干细胞(M-MSC)与股骨来源间充质干细胞(F-MSC)异质性,探讨不同谱系来源骨间充质干细胞(MSC)的功能特性差异。方法对文献中下颌骨与股骨全骨髓单细胞RNA测序(scRNA-seq)数据集,使用R语言的Seurat包进行数据处理,参考既往文献报道标记基因对亚群进行细胞注释。计算M-MSC与F-MSC的差异表达基因,并对MSC与其他亚群间的相互作用进行细胞通讯分析。分别对上下调差异基因进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并对M-MSC和F-MSC的所有基因进行基因集富集分析(GSEA)。结果scRNA-seq分析显示下颌骨与股骨骨髓细胞组成相同,但特定细胞亚群所占比例存在差异。差异基因计算显示M-MSC和F-MSC间存在显著差异基因。细胞通讯分析显示M-MSC和F-MSC与骨髓其他细胞亚群相互作用的配受体对数存在差异。进一步GO、KEGG、GSEA分析显示相比于F-MSC,M-MSC具有更高的细胞外基质生成潜能,但对骨髓其他细胞,尤其是免疫细胞的调控能力较低。结论M-MSC和F-MSC在基因表达模式与上调信号通路上存在较大差异,这些差异可能与颌骨和长骨发育来源以及功能特性不同密切相关。

关键词：干细胞骨髓间充质干细胞单细胞RNA测序下颌骨股骨

糖皮质激素类药物在瘙痒性皮肤病治疗中的应用

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神经解剖学杂志 2024年第4期40卷 525-527页

作者：曹泽湘李雨西刘思涵王晓东李辉空军军医大学基础医学院学员一大队西安710032 武警内蒙古总队医院急诊医学科呼和浩特010010 空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032

瘙痒是临床上最为常见的症状之一,可由皮肤病(如特应性皮炎、荨麻疹、皮肤干燥等)或非皮肤病引起。其中,非皮肤病引起的瘙痒又可分为系统性疾病源性瘙痒(如晚期慢性肾脏疾病、胆汁淤积、甲状腺功能亢进等)、神经疾病源性瘙痒和药物副作... 详细信息

瘙痒是临床上最为常见的症状之一,可由皮肤病(如特应性皮炎、荨麻疹、皮肤干燥等)或非皮肤病引起。其中,非皮肤病引起的瘙痒又可分为系统性疾病源性瘙痒(如晚期慢性肾脏疾病、胆汁淤积、甲状腺功能亢进等)、神经疾病源性瘙痒和药物副作用源性瘙痒等。皮肤瘙痒病因不同,其针对性治疗方法也不同。糖皮质激素类药物是治疗炎性皮肤病所致瘙痒的重要手段之一。本文就糖皮质激素类药物在瘙痒性皮肤病治疗中的应用及其作用机制进行综述。

关键词：糖皮质激素神经疾病源性瘙痒皮肤病