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结核分枝杆菌免疫逃逸机制研究进展

科学通报 2024年第4期69卷 531-541页

作者：李娜宋银娟储岳峰兰州大学动物医学与生物安全学院中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室兰州730000

结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的一种对全球人类健康和经济社会发展具有重大影响的人兽共患病.结核分枝杆菌感染人类已有数千年的历史,在其与人类宿主共同进化的过程中,Mtb已发展... 详细信息

结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的一种对全球人类健康和经济社会发展具有重大影响的人兽共患病.结核分枝杆菌感染人类已有数千年的历史,在其与人类宿主共同进化的过程中,Mtb已发展出多种巧妙的策略以逃避宿主的免疫防御,从而建立持续性感染.然而,我们对其免疫逃逸的分子机制以及细菌的毒力因子在Mtb不同感染阶段下发挥的作用了解有限.研究表明,在Mtb感染的早期阶段,肺泡巨噬细胞无法控制Mtb的感染,在进入肺间质后,Mtb可通过调控细胞内感染、损害抗原提呈、破坏巨噬细胞和T细胞功能等手段达到免疫逃逸的目的.本文详细回顾并综述了近年来结核分枝杆菌调控巨噬细胞自噬、凋亡以及适应性免疫应答等过程的分子机制,这些分子机制对于开发新的宿主导向疗法以及保护性疫苗至关重要.

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞免疫逃逸宿主导向疗法

抗金黄色葡萄球菌肠膜明串珠菌细菌素的生物学特性分析

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微生物学通报 2024年

作者：王嘉悦潘果钟忻桐苏惠路雨李国江董文龙吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心吉林农业科技学院动物科技学院吉林省预防兽医学重点实验室

【背景】金黄色葡萄球菌是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散法筛选产细菌素的乳酸菌；... 详细信息

【背景】金黄色葡萄球菌是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散法筛选产细菌素的乳酸菌；通过16S rRNA基因测序鉴定菌株，并利用MEGA 11构建系统发育树；排除酸和过氧化氢影响后，经生物学特性分析确定菌株细菌素的抗酶解性、pH稳定性、热稳定性；对菌株的生长曲线、产酸能力进行研究并观察其生长特性；对菌株进行模拟胃液耐受能力检测。【结果】从延吉南瓜中分离获得一株肠膜明串珠菌WJY-6，该菌株分泌的细菌素对不同源金黄色葡萄球菌表现出抑菌效果，并且具有良好的抗酶解性，在100 ℃和121 ℃处理后抑菌活性仍能维持在35%以上，该细菌素在pH 3.0-5.0条件下抑菌活性最佳；该菌株在18 h进入生长稳定期，培养8 h时pH值下降到5.0以下，抑菌效果稳步增加；该菌株在模拟胃液中有极强的存活能力，并能够大幅增殖。【结论】肠膜明串珠菌WJY-6有着极强的产酸能力，在模拟胃液中耐受能力良好，其所分泌的细菌素具备优异的理化特性，且对金黄色葡萄球菌存在显著的抑制活性，有望成为金黄色葡萄球菌病防治的新型替抗产品。

关键词：金黄色葡萄球菌乳酸菌肠膜明串珠菌细菌素生物学特性

猪圆环病毒3型四川株Cap蛋白的截短表达及其抗体间接ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医 2024年第7期51卷 3056-3066页

作者：欧云文潘琴汪洋代军飞任绍科张洋翟佳佳张杰开江县动物疫病预防控制中心达州636250 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室兰州730046 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室秦皇岛066004

【目的】原核截短表达猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),并建立其抗体间接ELISA检测方法,为PCV3血清学调查提供材料。【方法】以PCV3四川分离株基因组为模板,PCR扩增获得Cap蛋白编码基因片段... 详细信息

【目的】原核截短表达猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),并建立其抗体间接ELISA检测方法,为PCV3血清学调查提供材料。【方法】以PCV3四川分离株基因组为模板,PCR扩增获得Cap蛋白编码基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中构建重组质粒pET30a-PCV3-Cap。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,获得具有良好抗原性的重组Cap蛋白。基于纯化的重组Cap蛋白建立间接ELISA方法,确定最佳抗原包被浓度、待检血清最佳稀释比例、酶标抗体稀释比例和阴阳性临界值,对间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性、相关性和符合率进行分析,并对2018-2022年采自川东北地区猪场的351份临床猪血清进行检测,分析该区域PCV3流行情况。【结果】试验成功构建pET30a-PCV3-Cap重组表达载体,实现重组Cap蛋白(1-197位氨基酸)的原核截短表达,蛋白大小约为26 ku,可与PCV3阳性猪血清发生特异性反应;确定最佳抗原包被浓度为1 ng/μL,待检血清最佳稀释比例为1∶100,酶标抗体稀释比例为1∶60000,阴阳性临界值D_(450 nm)为0.684;建立的间接ELISA方法与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)和猪细小病毒1型(PPV1)阳性猪血清均不发生交叉反应,敏感度达1∶1600,批内变异系数和批间变异系数均<10%,与病毒中和试验(VNT)结果呈正相关,与Western blotting方法的阳性符合率为95.8%;2018-2022年川东北地区的351份猪血清样品阳性率为7.12%。【结论】本研究成功截短表达了PCV3四川株Cap蛋白(1-197位氨基酸),建立了特异性强、灵敏度高、重复性好和符合率高的PCV3间接ELISA方法,为PCV3的血清学调查和检测试剂盒的开发提供了材料。

关键词：猪圆环病毒3型(PCV3) Cap蛋白截短表达 ELISA

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生物安全在养猪业的发展与应用

黑龙江畜牧兽医 2024年第3期 38-44页

作者：李树稳李永锋张交儿孙元张新黄淑坚仇华吉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069 佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528231

随着规模化养猪的快速发展,烈性传染病造成的经济损失越来越大,而建立科学、高效的生物安全体系是有效预防和控制动物传染病的重要措施。在养猪生产过程中采取生物安全措施可以阻止或减少外部病原的引入(外部生物安全)及病原在养殖场内... 详细信息

随着规模化养猪的快速发展,烈性传染病造成的经济损失越来越大,而建立科学、高效的生物安全体系是有效预防和控制动物传染病的重要措施。在养猪生产过程中采取生物安全措施可以阻止或减少外部病原的引入(外部生物安全)及病原在养殖场内的传播(内部生物安全)。同时,科学的生物安全体系还有助于提高养殖生产效率、减少药物和疫苗的使用量。文章综述了目前国内养猪业主要采取的生物安全措施,同时系统分析了美洲和欧洲国家生物安全措施在猪场应用的发展历程,以期为完善我国养猪业生物安全防控体系提供借鉴。

关键词：生物安全养猪业疾病预防发展生物安全规范

肠膜明串珠菌细菌素抗金黄色葡萄球菌的生物学特性分析

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微生物学通报 2024年第9期 3562-3571页

作者：王嘉悦潘果钟忻桐苏惠路雨李国江董文龙吉林农业科技学院动物科技学院吉林省预防兽医学重点实验室吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心

【背景】金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散... 详细信息

【背景】金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是导致全球耐药负担加重的重要原因，乳酸菌细菌素是治疗致病性细菌感染的一种新型的手段，具有广阔的应用前景。【目的】筛选抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌细菌素。【方法】采用琼脂扩散法筛选产细菌素的乳酸菌；通过16S r RNA基因测序鉴定菌株，并利用MEGA 11构建系统发育树；排除酸和过氧化氢影响后，经生物学特性分析确定菌株细菌素的抗酶解性、p H稳定性和稳定性；测定菌株的生长曲线、产酸能力并观察其生长特性；对菌株进行模拟胃液耐受能力的检测。【结果】从延吉南瓜中分离获得一株肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides) WJY-6，该菌株分泌的细菌素对不同源金黄色葡萄球菌表现出抑菌效果，并且具有良好的抗酶解性，在100℃和121℃处理后抑菌活性仍能维持在35%以上，该细菌素在p H 3.0-5.0条件下抑菌活性最佳；该菌株培养8 h时pH值下降到5.0以下，抑菌效果稳步增加，在18 h进入生长稳定期；该菌株在模拟胃液中有极强的存活能力，并能够大幅增殖。【结论】肠膜明串珠菌WJY-6有着极强的产酸能力，在模拟胃液中耐受能力良好，其所分泌的细菌素具备优异的理化特性，并且对金黄色葡萄球菌存在显著的抑制活性，有望成为防治金黄色葡萄球菌感染相关疾病的新型替代抗生素产品。

关键词：金黄色葡萄球菌乳酸菌肠膜明串珠菌细菌素生物学特性

猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物信息学分析及原核表达

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华南农业大学学报 2024年第4期45卷 469-476页

作者：叶欣欧璇黄仪娟陆肖翁亚彪林瑞庆华南农业大学兽医学院广东广州510642 佛山市正典生物技术有限公司广东佛山528138

[目的]预测分析猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物学特性、结构及功能,并构建AMA1基因的原核表达载体,表达、纯化AMA1蛋白。[方法]本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列,使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进... 详细信息

[目的]预测分析猪等孢球虫顶膜抗原蛋白AMA1的生物学特性、结构及功能,并构建AMA1基因的原核表达载体,表达、纯化AMA1蛋白。[方法]本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列,使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进行分析。构建原核表达载体pET23a-AMA1,并将其转入至大肠埃希菌表达菌株BL21 (DE3)中,对诱导时间、温度及IPTG浓度进行优化,确定最佳诱导表达条件。采用镍柱亲和层析法进行蛋白纯化,获得AMA1重组蛋白并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定分析。[结果]生物信息学预测显示,AMA1蛋白由317个氨基酸组成,蛋白分子式为C1 512H2 310N394O490S14,是不稳定的亲水性蛋白;其二级结构α螺旋占17.74%,β折叠占30.65%,转角占30.65%,无规则卷曲占20.96%;属于无信号肽的跨膜蛋白,具有5个B细胞抗原表位。成功构建pET23a-AMA1重组表达质粒,经诱导表达条件优化后,确定最佳诱导表达条件为0.2 mmol/L IPTG浓度下于28℃诱导12 h,主要以可溶性蛋白形式存在,蛋白相对分子质量约为25 800,纯化蛋白质量浓度为0.25 mg/mL。[结论]阐明了猪等孢球虫AMA1蛋白的结构特征,通过原核诱导表达获得了重组蛋白,为建立猪等孢球虫病的免疫学诊断方法奠定了基础,并为后续疫苗的研发提供了新的候选基因。

关键词：猪等孢球虫顶膜抗原 AMA1 原核表达生物信息学

EGCG的生物学活性及其调节卵母细胞老化的研究进展

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生物工程学报 2024年

作者：张伟莹张慧珠李钰浚兰道亮熊显荣王亚营李键何翃闳西南民族大学畜牧兽医学院青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室

表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate， EGCG)是绿茶中一类含量最高的次级代谢产物，具有抗氧化、抗癌和抗炎等多种生理活性。EGCG在调节卵母细胞老化的过程中起重要作用，主要通过增强卵母细胞的抗氧化能力、改善线粒... 详细信息

表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate， EGCG)是绿茶中一类含量最高的次级代谢产物，具有抗氧化、抗癌和抗炎等多种生理活性。EGCG在调节卵母细胞老化的过程中起重要作用，主要通过增强卵母细胞的抗氧化能力、改善线粒体功能和减少细胞凋亡来延缓卵母细胞的衰老进程。本文对EGCG主要分子特性及其调节卵母细胞老化的作用机制进行综述，为深入理解EGCG在减缓卵母细胞老化中的作用提供参考。

关键词： EGCG 抗氧化卵母细胞老化氧化应激

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基于超声导管的心输出量测量方法

声学学报 2024年第3期49卷 403-409页

作者：李俊健彭珏陈思平唐浒赵继伟孔凡凯刘晓医学超声关键技术国家地方联合工程实验室深圳518060 广东省医学信息检测与超声成像重点实验室深圳518060 深圳大学医学部生物医学工程学院深圳518060

提出了一种基于超声导管的心输出量测量方法,该超声导管具有两种不同中心频率的单振元换能器。使用超声导管、流量泵、体模等组成血流循环回路,实现了血流速度的检测与肺动脉图像管腔区域的分割,进而完成了心输出量测量。测量结果与蠕... 详细信息

提出了一种基于超声导管的心输出量测量方法,该超声导管具有两种不同中心频率的单振元换能器。使用超声导管、流量泵、体模等组成血流循环回路,实现了血流速度的检测与肺动脉图像管腔区域的分割,进而完成了心输出量测量。测量结果与蠕动泵预设流量值的平均相对误差小于2%,表明超声导管用于心输出量测量是可行的。

关键词：超声导管多普勒超声心输出量血流动力学

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猪源葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

动物医学进展 2024年第5期45卷 8-13页

作者：李燕玲陈渊泉谢明杰周伦江陈秋勇连春红李健王隆柏福建农林大学福建省兽医中药与动物保健重点实验室福建福州350002 福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 仙游县畜牧兽医局福建莆田351299

为明确从福建某规模猪场分离到的病原菌及其生物学特性、致病性与耐药等特征,为疫病的防治提供参考依据。对分离菌进行纯化,采用革兰氏染色、PCR鉴定、药敏试验、消毒剂消杀试验、耐药基因检测及动物攻毒试验等,对分离菌进行生物学特性... 详细信息

为明确从福建某规模猪场分离到的病原菌及其生物学特性、致病性与耐药等特征,为疫病的防治提供参考依据。对分离菌进行纯化,采用革兰氏染色、PCR鉴定、药敏试验、消毒剂消杀试验、耐药基因检测及动物攻毒试验等,对分离菌进行生物学特性、耐药等相关检测。结果显示,分离菌为猪源葡萄球菌。该菌对30种常用抗菌药物中的苯唑西林、诺氟沙星、头孢类等14种药物高度敏感,对阿米卡星、庆大霉素、四环素、万古霉素、氟苯尼考5种药物中度敏感,对氨苄西林、哌拉西林、卡那霉素等11种药物不敏感,检测cfr、tetM、floR、mcr-1、bla NDM-1、optrA 6种耐药基因均为阴性;该菌对26种中药中的单宁酸高度敏感,对五味子、五信子多酚中度敏感,对叶下珠、厚朴、虎杖低度敏感,对半边莲、铁苋菜、艾叶、重楼等20种中药不敏感;在8种消毒剂中,84消毒液对该分离菌的消杀效果差,新洁尔灭、月苄三甲氯铵、复合酚3种消毒剂对该分离菌消杀效果好;动物攻毒试验表明,该菌对25日龄健康断奶仔猪具有强致病性,能导致猪出现典型的葡萄球菌病临床症状和病理特征,攻菌猪组织病理可见脾脏红髓淤血、肺泡腔内见红细胞渗出及少量粉染的渗出物。研究结果可为在养殖饲料端禁止添加抗生素的背景下,为猪葡萄球菌病的防治提供理论参考和技术支撑。

关键词：猪葡萄球菌分离鉴定致病性耐药性