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基于柔性基底的表面增强拉曼光谱应用研究进展

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中国激光 2024年

作者：王楠刘艺张竣何绍华侯仕宏冯尚源林多福建师范大学光电与信息工程学院医学光电科学与技术教育部重点实验室福建省光子技术重点实验室

表面增强拉曼光谱（SERS）是一种基于局域表面等离子共振的超灵敏光谱分析技术，在生物医学、食品安全、环境监测等应用方面均展现出广泛的应用潜力。近年来，柔性SERS基底的发展受到了极大的关注。柔性材料具有较好的柔韧性和可塑性，... 详细信息

表面增强拉曼光谱（SERS）是一种基于局域表面等离子共振的超灵敏光谱分析技术，在生物医学、食品安全、环境监测等应用方面均展现出广泛的应用潜力。近年来，柔性SERS基底的发展受到了极大的关注。柔性材料具有较好的柔韧性和可塑性，在面对各种复杂形状和不规则表面的应用场景时可以按需被切割设计成任何所需的形状和尺寸，结合具有高灵敏度的SERS技术，在非破坏性和原位检测方面具有极大的优势。本文综述了近年来基于柔性基底的SERS技术研究进展，从不同柔性材料构造SERS基底的常用方法，到柔性SERS基底在生物医学方面、食品安全方面、环境监测方面的最新应用，并对柔性SERS基底的发展进行了总结与展望。

关键词：表面增强拉曼光谱柔性SERS基底生物医学食品安全环境监测

冀北地区养殖场奶/肉犊牛腹泻中志贺菌的分离鉴定及特征分析

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中国兽医学报 2024年第3期44卷 477-483页

作者：张召兴赵允清王珍珊张妍衡江鸿李佩国张艳英河北旅游职业学院畜牧兽医系河北承德067000 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室河北秦皇岛066604

为鉴定引起冀北地区养殖场中奶/肉犊牛腹泻的病原菌并分析其生物学特征,本研究于2022-2023年采集冀北地区养殖场患腹泻病奶/肉犊牛腹泻的肛拭子、粪便及病料组织273份,采用细菌分离培养、生化鉴定及PCR方法对志贺菌(Shigella)进行分离鉴... 详细信息

为鉴定引起冀北地区养殖场中奶/肉犊牛腹泻的病原菌并分析其生物学特征,本研究于2022-2023年采集冀北地区养殖场患腹泻病奶/肉犊牛腹泻的肛拭子、粪便及病料组织273份,采用细菌分离培养、生化鉴定及PCR方法对志贺菌(Shigella)进行分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、玻板凝集试验、PCR法和K-B药敏纸片法分别检测志贺菌的致病性、血清型、毒力基因,用人工感染小鼠试验和改良寇氏法测定其优势血清型代表株的半数致死量(LD50);采用RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛诺瓦病毒(bovine norovirus,BNoV)和牛纽布病毒(bovine nebovirus,BNeV)5种病原检测。结果表明,5种病毒性病原检测为阴性;从采集的病料组织中分离得到94株志贺菌,其中52株志贺菌引起小白鼠发病与致死,为致病性志贺菌,对小鼠致死率在40%以上;52株致病性志贺菌中以福氏志贺菌F2a型(21.2%)、F1b型(25.0%),宋内志贺菌Ⅰ相(19.2%)和痢疾志贺菌(13.5%)为优势流行血清型;52株致病性志贺菌毒力基因ipaH、ipa BCD、ial、Set1A、Set1B、sen、Sat、sigA的检出率在51.9%~100.0%之间;52株致病性志贺菌对磺胺间甲氧嘧啶、土霉素、多西环素等12种药物的耐药率在51.9%以上,其他药物的耐药率在5.8%~34.6%之间,分离的菌株呈现MDR且至少耐4类药物,4株优势血清型代表株HS-1(福氏志贺菌F2a型)、HS-2(福氏志贺菌F1b型)、HS-3(宋内志贺菌Ⅰ相)、HS-4(痢疾志贺菌)的LD50分别为2.51×10^(6)、5.01×10^(6)、6.68×10^(6)和2.11×10^(7)CFU/mL。本研究为冀北地区养殖场中奶/肉犊牛源志贺菌病的流行病调查与防控提供参考依据。

关键词：犊牛志贺菌血清型毒力基因耐药性 LD50

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没食子酸抑制生物被膜机制的初步研究

中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 35-42页

作者：梁桂星张文婷汪最张腾飞郭云清卢琴罗青平杨玉莹长江大学动物科学学院荆州434025 农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室武汉430064 畜禽病原微生物学湖北省重点实验室武汉430064 兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150069

鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌是危害家禽养殖业和公共卫生的重要病原菌,生物被膜的形成是其持续和反复感染的重要原因。为探究没食子酸对二者生物被膜形成的影响,本研究采用微量稀释法测定没食子酸对鸡白痢沙门菌CVCC519和金黄色葡萄球... 详细信息

鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌是危害家禽养殖业和公共卫生的重要病原菌,生物被膜的形成是其持续和反复感染的重要原因。为探究没食子酸对二者生物被膜形成的影响,本研究采用微量稀释法测定没食子酸对鸡白痢沙门菌CVCC519和金黄色葡萄球菌ATCC 25923的最小抑菌浓度MIC、最小杀菌浓度MBC,共孵育测定最小生物被膜抑制浓度(MBIC)和最小生物被膜清除浓度(MBEC);采用结晶紫染色和硫酸-苯酚法分别测定其对试验菌生物被膜及胞外多糖(EPS)的抑制率,并利用环境扫描电镜观察生物被膜形态;最后采用qRT-PCR方法检测其对试验菌生物被膜形成相关基因表达量的影响。结果显示,没食子酸对CVCC519和ATCC 25923的MIC分别为4 mg/mL和8 mg/mL,MBC分别为8 mg/mL和16 mg/mL,MBIC均为8 mg/mL,MBEC均为16 mg/mL。此外,没食子酸在不显著影响试验菌生长的浓度下,能有效抑制其生物被膜形成和EPS的产生。环境扫描电镜观察发现,没食子酸处理使生物被膜生成量显著减少,结构松散、变薄。qRT-PCR检测结果显示,没食子酸在不显著影响试验菌生长的浓度下,能显著抑制CVCC519菌毛基因csgA、csgD,纤维素基因bcsA、adrA,群体感应系统相关基因luxS的表达,而对ATCC 25923的ica操纵子和luxS并无显著调控作用。以上结果表明,没食子酸在不显著影响鸡白痢沙门菌生长的浓度下,可通过下调其生物被膜形成相关基因的表达,减少胞外基质的合成,产生抗生物被膜的作用;也能通过ica非依赖途径有效抑制金黄色葡萄球菌胞外多糖的分泌和生物被膜的形成。本研究为没食子酸防控鸡白痢沙门菌和金黄色葡萄球菌生物被膜提供理论基础。

关键词：没食子酸生物被膜鸡白痢沙门菌金黄色葡萄球菌机制

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厨余垃圾废液中解钾菌的筛选及液体菌肥制备

龙岩学院学报 2024年第5期 69-74+87页

作者：许涵秋胡冰冰詹艺舒林标声龙岩市产品质量检验所龙岩学院预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室

从厨余垃圾废液中筛选得到的一株高效解钾菌株LYBM04,解钾效率为65.67%,经16S rDNA确定其为胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。LYBM04菌株在LB培养基和解钾菌复筛培养基具有相似的生长曲线，但在解钾菌复筛培养基中整体速度稍慢。... 详细信息

从厨余垃圾废液中筛选得到的一株高效解钾菌株LYBM04,解钾效率为65.67%,经16S rDNA确定其为胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。LYBM04菌株在LB培养基和解钾菌复筛培养基具有相似的生长曲线，但在解钾菌复筛培养基中整体速度稍慢。通过正交试验，确定了LYBM04菌株可与解磷菌、固氮菌以2∶2∶1(V/V)比例、接种量5%的最优条件下，接入到厨余废液中，30℃好氧发酵40 h制备出液体微生物菌肥，其总磷、氨氮、总氮、总钾等营养成分经过检测，比厨余垃圾废液含量更高，对盆栽玉米的株高、根长、根重均有显著的促生作用，在液态微生物菌肥的开发与应用方面具有一定的应用前景。

关键词：厨余垃圾解钾菌胶质芽孢杆菌液体菌肥

中美李斯特菌病流行特点和食品溯源及对我国的启示

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中国人兽共患病学报 2024年第7期40卷 636-643页

作者：张智芳刘雪杰吴生根李曲文陈伟伟邓艳琴福建省疾病预防控制中心/福建省人兽共患病重点实验室福州350012

目的分析比较美国和中国李斯特菌病(Listeriosis)的流行特点,为我国李斯特菌病的防控提供参考依据。方法对美国2009-2021年李斯特菌病监测资料进行描述性统计分析,并根据美国疫情监测数据进行食品归因估计。国内数据来源:搜集中国知网... 详细信息

目的分析比较美国和中国李斯特菌病(Listeriosis)的流行特点,为我国李斯特菌病的防控提供参考依据。方法对美国2009-2021年李斯特菌病监测资料进行描述性统计分析,并根据美国疫情监测数据进行食品归因估计。国内数据来源:搜集中国知网、万方医学、维普等数据库报道的李斯特菌病病例,并对散发病例的流行病学特征进行描述性统计,同时对食品溯源成功的案例进行回顾性分析。结果美国2009—2021年共报告1037例李斯特菌病病例,住院902人,死亡165人。因单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,***)污染食品引起的发病高峰在7月份,其发病人数、住院人数和死亡人数分别占总数的18.4%(191/1037)、20.5%(185/902)和22.4%(37/165)。大多数李斯特菌病的暴发被归因于3类食物:乳制品、行作蔬菜和水果,归因百分比的范围在73.8%~89.6%。中国李斯特菌病的总体发病数量不高,2009-2021年共报告619例,有详细发病年份记载的仅177例,其中2018年最多为26例。有详细发病月份报道的病例有220例,其中4月份发病人数最多为30例。中国的李斯特菌病病例资料不完善,且多散在发生,仅7例病例成功追溯到原因食品。结论美国对Lm的监测资料比较完善,食源性暴发病例较多,乳制品、行作蔬菜和水果是最容易引起疾病暴发的原因食品,中国仅有散发病例报道。中国应逐步完善多部门协作机制,实现数据共享并加深对数据的挖掘,加快推进食源性致病微生物的检测技术的进步,防止Lm污染食品引起疾病的暴发,保障食品安全和人民健康。

关键词：食源性疾病单增李斯特菌归因估计全基因组测序李斯特菌病食品召回

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深龋的治疗策略

中华口腔医学杂志 2024年第1期59卷 23-29页

作者：张露陈智武汉大学口腔医(学)院、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079

龋病进展到牙本质深层时即为深龋,进一步发展存在牙髓暴露的风险,严重危害牙髓活力,影响牙齿寿命。目前深龋的诊断缺乏客观标准,其治疗方案强调彻底去尽龋坏组织,导致牙髓暴露的风险较高。去龋后如何处理剩余牙本质观点不一,深龋露髓后... 详细信息

龋病进展到牙本质深层时即为深龋,进一步发展存在牙髓暴露的风险,严重危害牙髓活力,影响牙齿寿命。目前深龋的诊断缺乏客观标准,其治疗方案强调彻底去尽龋坏组织,导致牙髓暴露的风险较高。去龋后如何处理剩余牙本质观点不一,深龋露髓后多直接采用根管治疗。近年由于牙髓生物学、生物活性盖髓材料和临床循证医学的发展,深龋的治疗原则转变为优先保护牙髓。本文基于国际上最新研究进展、循证医学证据和专家共识,对深龋的命名、深龋下的牙髓病理学变化和牙髓修复防御机制、深龋的治疗原则、去龋的技术策略以及深龋露髓后治疗方案的选择等进展进行梳理,旨在加深口腔医师对深龋的认识和理解,为深龋的临床诊疗提供依据。

关键词：龋齿牙髓牙髓暴露深龋治疗方案分步去龋选择性去龋

与鸡内皮血管瘤病例相关的禽白血病病毒K亚群分离及其gp85基因演化分析

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1127-1136页

作者：梁灿新郑小雪舒雪利周婉怡廖明曹伟胜华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业部兽用疫苗创制重点实验室广州510642

本研究在华南地区某规模化种禽场调查中发现其部分花鸡品系头部鸡冠下缘及眼睑上缘部位出现白色、质地坚硬且形状不规则的肿块,为了解患病鸡的发病特征及致病因子而开展了实验室诊断及相关病原研究。结果表明该规模化养殖场主要发病鸡... 详细信息

本研究在华南地区某规模化种禽场调查中发现其部分花鸡品系头部鸡冠下缘及眼睑上缘部位出现白色、质地坚硬且形状不规则的肿块,为了解患病鸡的发病特征及致病因子而开展了实验室诊断及相关病原研究。结果表明该规模化养殖场主要发病鸡群为父母代花鸡,发病率约为2%,剖检无其他肉眼表观病变,病理组织学诊断为内皮血管瘤。RT-PCR检测肿瘤组织表明为K亚群禽白血病病毒(ALV-K)感染,无其他禽肿瘤性病毒感染。对患病鸡的血浆样品(32份)、肿瘤组织匀浆(6份)及脑组织匀浆(6份)进行病毒的分离鉴定,成功从脑组织样品中分离到4个ALV-K毒株(GXJL01~GXJL04)。使用特异性引物扩增GXJL01~GXJL04的env基因并测序,在与华南地区其他5个规模化种禽场中分离获得的7个ALV-K流行株的gp85基因的遗传演化分析中表明,GXJL01~GXJL04与日本的Km5844、Sp53等神经胶质瘤毒株(fowl glioma-inducing virus, FGV)及具有神经组织嗜性的ALV-K毒株JS15SG01同一进化分支上,与本研究其他7个ALV-K分离株的遗传进化关系较远。同时在针对ALV-K的gp85蛋白氨基酸位点突变分析中发现,GXJL01~GXJL04存在多个与FGV和JS15SG01参考株相似的氨基酸位点突变。本研究首次把地方黄羽鸡品种花鸡头部的肿块诊断为内皮血管瘤,且ALV-K为内皮血管瘤的主要相关病原,分离株GXJL01~GXJL04区别于现行华南地区ALV-K流行株且与FGV、JS15SG01等神经组织嗜性的毒株高度同源。

关键词：黄羽肉鸡鸡内皮血管瘤 K亚群禽白血病病毒遗传进化分析

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J亚群禽白血病病毒血液核酸筛查技术的建立

畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1115-1126页

作者：董欣怡李锦群陈钦玺廖明曹伟胜华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室农业部兽用疫苗创制重点实验室广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室广州510642

为缩短J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)检测周期,进一步加快禽白血病净化进程,本研究结合SYBR GreenⅠqPCR和混样检测,建立了一种适用于低ALV-J流行率场景下的快速筛检ALV-J的血液核酸筛查技术(ALV-J blood ... 详细信息

为缩短J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)检测周期,进一步加快禽白血病净化进程,本研究结合SYBR GreenⅠqPCR和混样检测,建立了一种适用于低ALV-J流行率场景下的快速筛检ALV-J的血液核酸筛查技术(ALV-J blood quantitative polymerase chain reaction, ALV-J-B-qPCR)。根据GenBank中ALV-J pol及env基因序列,设计ALV-J的特异性引物,并优化反应条件,建立了ALV-J SYBR GreenⅠqPCR检测方法。以ALV-J病毒分离为阳性的鸡抗凝血为实验材料,分别制备抗凝血DNA、血细胞DNA、外周血淋巴细胞DNA、外周血淋巴细胞cDNA和血浆cDNA 5类血液检测模板进行ALV-J的PCR检测,筛选最佳检测模板;进一步比较蒸馏水破裂红细胞法提取混合血液DNA的混样方法,血液混样总体积为200μL的混样方法,血液混样总体积为10μL的混样方法共3种混样方法的检测准确性,筛选最佳混样方法。综合上述qPCR方法、检测模板与混样方法,成功建立了ALV-J-B-qPCR。运用ALV-J-B-qPCR分别进行预期流行率为1%~2%、4%~5%场景下的模拟筛查试验,并与病毒分离法比较。qPCR方法的特异性、灵敏性和重复性试验显示,该方法仅特异性扩增ALV-J,对标准质粒的最低检测限度为1×10^(2)copies·μL^(-1),批内与批间变异系数均技术具有灵敏性高、检测快速和节约成本的优势,为种禽场加快ALV净化进程提供了新的思路和方法。

关键词： J亚群禽白血病病毒实时荧光定量PCR 混样检测筛查技术

靶向伪狂犬病病毒UL35基因的SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立

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中国兽医学报 2024年

作者：张心雨吴红霞李永锋孙元付强仇华吉佛山科学技术学院生命科学与工程学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

为了确定UL35基因能否作为诊断伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）感染的靶标，本研究根据PRV不同毒株UL35基因保守序列，设计合成特异性荧光定量PCR引物，扩增长度为54 bp的片段。通过优化反应条件和反应体系，结果显示，建立的P... 详细信息

为了确定UL35基因能否作为诊断伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）感染的靶标，本研究根据PRV不同毒株UL35基因保守序列，设计合成特异性荧光定量PCR引物，扩增长度为54 bp的片段。通过优化反应条件和反应体系，结果显示，建立的PRV SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有良好的重复性和特异性，其标准曲线与模板浓度呈现良好的线性关系；对猪繁殖和呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）、猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）、非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）核酸扩增均呈阴性；将所建立的方法与同类方法进行比较，敏感性无差异；组间和组内重复性试验的变异系数小于2%。用本研究所建立的方法对PRV感染小鼠的组织样品进行检测，均检测到一定的病毒载量。结果表明，UL35基因可以作为诊断PRV感染的靶标。

关键词：伪狂犬病病毒 UL35基因 SYBR Green I 定量PCR