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肠道微生物与线粒体互作调控动物脂肪沉积的研究进展

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畜牧兽医学报 2024年第6期55卷 2293-2303页

作者：陈倩玲沙玉柱刘秀邵鹏阳王翻兄陈小伟杨文鑫谢转回高敏黄薇甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃省草食动物生物技术重点实验室兰州730070

脂肪含量是影响家畜肉品质的主要因素之一。肌肉中的脂肪分布与肉的颜色、适口性、风味、嫩度和系水力等关系密切,肌内脂肪是评价肉品质的关键指标。肠道微生物和线粒体作为机体最庞大的微生态系统和细胞的“动力工厂”,在脂质代谢和细... 详细信息

脂肪含量是影响家畜肉品质的主要因素之一。肌肉中的脂肪分布与肉的颜色、适口性、风味、嫩度和系水力等关系密切,肌内脂肪是评价肉品质的关键指标。肠道微生物和线粒体作为机体最庞大的微生态系统和细胞的“动力工厂”,在脂质代谢和细胞代谢间起到了重要的桥梁作用。目前,有关肠道微生物组及线粒体组的研究较为广泛,但两者的互作对脂肪沉积的影响尚不明确。本文通过综述肠道微生物及其代谢物功能与脂肪酸代谢,脂肪沉积与线粒体功能研究,以及肠道微生物及其代谢物与线粒体互作对脂肪沉积的调控机制,为通过肠道微生物及线粒体改善动物肉品质提供参考和思路。

关键词：肠道微生物线粒体代谢物脂肪沉积

刺梨多糖抑制PI3K/Akt/mTOR通路和抗氧化作用诱导前列腺癌DU145细胞凋亡

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中国中药杂志 2024年

作者：杨紫焰李自霖张翠香黄丽金王涵李雪英陈贵元大理大学基础医学院云南省昆虫生物医药研发重点实验室

基于磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(proteinkinaseB，Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOR)信号通路，和通路相关分子磷酸酯酶与张力蛋白同源物(phosphataseandtensinhomolog，PTEN)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-celllymphoma-2，Bcl-2) 、与BCL-2同源的水溶性相关蛋白(Bcl-2-associatedXprotein，BAX)，探究刺梨多糖抑制前列腺癌DU145细胞增殖，诱导细胞凋亡的作用机制，并探讨刺梨多糖的抗氧化活性。使用不同浓度的刺梨多糖处理前列腺癌DU145细胞，采用CCK-8法检测刺梨多糖对DU145细胞增殖的影响；细胞划痕实验检测刺梨多糖对DU145细胞迁移的影响；Transwell实验检测刺梨多糖对DU145细胞侵袭能力的影响；流式细胞术检测刺梨多糖诱导DU145细胞的凋亡情况；real-timePCR技术和Western blot技术检测刺梨多糖对DU145 细胞PI3K、Akt、mTOR、 PTEN、BAX、Bcl-2 的mRNA及蛋白表达水平的影响。DPPH和ABTS实验检测刺梨多糖的体外抗氧化活性。实验结果表明，刺梨多糖对DU145 细胞的增殖、迁移和侵袭均有抑制作用。流式细胞术结果显示，与对照组相比，经刺梨多糖处理后的各组DU145 细胞凋亡率随着多糖浓度的增加而升高；抑制性与多糖浓度呈正相关。刺梨多糖对PI3K/Akt/mTOR通路有抑制作用，通过上调PTEN、BAX基因和蛋白的表达，下调Akt、PI3K、mTOR和Bcl-2 的表达，诱导DU145 细胞凋亡。刺梨多糖对ABTS和DPPH自由基均有一定的清除作用，提示刺梨多糖可能通过清除细胞内ROS诱导DU145 细胞凋亡。刺梨多糖可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路和清除细胞内ROS抑制DU145 细胞增殖，诱导细胞凋亡。

关键词：刺梨多糖 PI3K/Akt/mTOR通路前列腺癌DU145细胞细胞凋亡抗氧化

牦牛六个多能性相关转录因子OSKMNL的克隆和多顺反子慢病毒载体的构建

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畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1579-1591页

作者：黄显朋邢嘉仪白媛媛姜雨婷麻志伟付伟兰道亮西南民族大学畜牧兽医学院成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室成都610041

旨在克隆牦牛6个多能性相关转录因子Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Nanog、Lin28(OSKMNL),构建多顺反子慢病毒载体FUW-teto-OSM-EGFP和FUW-teto-KNL-mCherry。本研究以1头3~5月龄健康雌性牦牛胎儿的生殖嵴组织为研究材料,利用RT-PCR技术克隆牦牛6个多能性相关转录因子OSKMNL的完整编码区序列,并对其进行生物信息学分析;应用无缝克隆技术构建慢病毒载体FUW-teto-OSM-EGFP和FUW-teto-KNL-mCherry;用293T细胞包装慢病毒,将包装好的慢病毒感染293T细胞和牦牛成纤维细胞,通过观察荧光表达和RT-PCR技术检测病毒感染情况(试验分为病毒感染组和空白对照组,每个组设置3个重复)。结果表明,克隆的牦牛OSKMNL基因的编码区大小分别为1 083、963、1 434、1 320、903、618 bp;序列分析发现牦牛OSKMNL氨基酸序列与黄牛的同源性在99%以上,其中Sox2、Klf4、c-Myc与黄牛的同源性为100%;进化树结果显示牦牛与黄牛、瘤牛、水牛的亲缘关系最近,与小鼠的亲缘关系最远;蛋白结构预测发现牦牛的6个转录因子OSKMNL都具有该基因家族相应蛋白功能的结构,比如POU结构域、HOX结构域、HMG结构域、Znf-C2H2结构域、HLH结构域、CSP结构域等;构建了慢病毒载体FUW-teto-OSM-EGFP和FUW-teto-KNL-mCherry;慢病毒感染293T细胞发现试验组表达红色和绿色荧光;慢病毒感染牦牛成纤维细胞发现试验组表达红色和绿色荧光,RT-PCR结果显示预期大小的条带。本研究成功克隆了牦牛的6个多能性相关转录因子OSKMNL;构建了分别携带牦牛3个转录因子的慢病毒载体FUW-teto-OSM-EGFP和FUW-teto-KNL-mCherry;包装的慢病毒能感染牦牛成纤维细胞。有利于推动多能性相关转录因子OSKMNL在牦牛干细胞中的应用,也为后续研究牦牛iPSC做准备。

关键词：牦牛基因克隆序列分析慢病毒载体

三株鸡传染性支气管炎病毒优势流行毒株全基因组分析及其致病性

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畜牧兽医学报 2024年第5期55卷 2109-2122页

作者：熊挺何献铭赵希雅庄婷婷黄美珍梁世金余传照梁雪静陈瑞爱岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心肇庆526238 华南农业大学兽医学院广州510642

为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S... 详细信息

为调查研究禽传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及优势毒株致病特性,本研究对实验室分离的IBV毒株进行了遗传演化研究和致病性研究,旨在了解我国当下IBV流行毒株基因型、生物学特性以及为新疫苗的研制提供借鉴参考。首先对56株IBV分离毒株S1全长核苷酸序列进行遗传演化分析,从中挑选了MH20、KC和JS96 3株优势基因型毒株进行全基因组测序分析,然后选取毒力较强的JS96毒株进行了SPF鸡致病性试验。结果表明:遗传演化分析结果显示GI-19是我国主要流行毒株,占比约53.57%,同时变异毒不断涌现,GVI(新基因型)明显的流行增多。3株优势基因型分离毒株的全长基因组与QX-like毒株相似性最高,达到97%以上,但与国内外疫苗株、经典毒株的相似性低,仅为77%左右。抗原表位分析同样表明了分离株与疫苗毒株、经典毒株的B细胞抗原表位数量和序列都存在差异。3株分离毒株均可导致SPF鸡胚矮化和致死,其中JS96对1日龄SPF鸡的致病率高于15日龄SPF鸡,1日龄SPF鸡100%死亡率,15日龄SPF鸡出现生长显著迟缓和个别鸡症状明显,发病鸡剖检均可见“花斑肾”。本研究表明,QX-like基因型IBV毒株是现下IBV的主要流行毒株,对低日龄鸡致病性强,易发生基因重组,与疫苗毒株、经典毒株S蛋白相似性低,适配性较差,急需选择合适疫苗及研发新型疫苗,才能控制当下IBV疫病流行,减少养禽业的损失。

关键词：禽传染性支气管炎病毒基因测序演化与相似性分析致病性

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硫量子点的合成及其在光学传感中的应用

发光学报 2024年第09期45卷 1431-1444页

作者：廖静刘承昊朱云霄马小明南欣茹雷巧雯张汉强黄启同林小凤赣南医科大学医学信息工程学院组织工程江西省重点实验室赣州市生物医用传感器重点实验室科研中心赣南师范大学化学化工学院

随着纳米技术的快速发展，各种类型的硫纳米材料被研发出来，包括硫纳米颗粒、硫量子点以及其他杂化结构的含硫纳米复合物。作为一种新兴的“零维”纳米发光材料，硫量子点因拥有光致发光性能、低毒性和制备方便等特性，正受到越来越多... 详细信息

随着纳米技术的快速发展，各种类型的硫纳米材料被研发出来，包括硫纳米颗粒、硫量子点以及其他杂化结构的含硫纳米复合物。作为一种新兴的“零维”纳米发光材料，硫量子点因拥有光致发光性能、低毒性和制备方便等特性，正受到越来越多学者的关注。本综述首先探讨了硫量子点的合成，随后介绍了硫量子点在光学传感器中的应用，主要深入讨论了基于硫量子点光学传感器在环境污染物及生物小分子中检测方面的应用。最后，总结了硫量子点当前面临的挑战，并对其未来发展进行展望。

关键词：硫量子点光学传感环境污染物生物小分子

基于体外自连接的猪圆环病毒2型感染性克隆构建方法

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生物工程学报 2024年第7期40卷 2333-2345页

作者：孙仁杰杨永乐王雅婷谢荣辉张传亮方维焕李肖梁赵灵燕浙江省动物疫病预防控制中心浙江杭州311199 湘湖实验室浙江杭州311231 浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室浙江杭州310058

本研究旨在建立一种快速构建猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆的方法。以临床分离的PCV2 LX株为模板,利用DNA无缝克隆技术成功构建了PCV2环状感染性克隆。同时,在基因组体外自连接的构建过程以及拯救病毒的生... 详细信息

本研究旨在建立一种快速构建猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆的方法。以临床分离的PCV2 LX株为模板,利用DNA无缝克隆技术成功构建了PCV2环状感染性克隆。同时,在基因组体外自连接的构建过程以及拯救病毒的生长特性上,将本方法与常规酶切连接方法进行了比较。本方法无须分析和引入限制性内切酶位点,避免了传统酶切连接的繁琐,能更高效地进行PCV2基因组的编辑。构建的感染性克隆经脂质体转染细胞,成功拯救获得可以稳定传代的重组病毒,并且重组病毒在PK-15细胞和3D4/31细胞(猪肺泡巨噬细胞系)上具有更强的增殖能力。综上所述,本研究构建了一种基于体外自连接的PCV2反向遗传操作系统,为PCV2基因工程疫苗的研发提供新策略,为其他新发圆环病毒(PCV3和PCV4)感染性克隆的构建提供借鉴。

关键词：猪圆环病毒2型感染性克隆体外自连接病毒拯救

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动态虚拟患者技术在口腔修复领域的应用进展

中华口腔医学杂志 2024年第3期59卷 267-273页

作者：高雨童撒悦杨静文武汉大学口腔医(学)院修复科、口颌系统重建与再生全国重点实验室、口腔生物医学教育部重点实验室、口腔医学湖北省重点实验室武汉430079 北京大学口腔医学院·口腔医院修复科、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、口腔生物材料和数字诊疗装备国家工程研究中心、口腔数字医学北京市重点实验室北京100081

随着面部扫描、口内扫描、虚拟面弓、下颌运动轨迹记录等技术在口腔修复领域的发展及应用,动态虚拟患者技术逐渐被应用于口腔修复的术前分析、美学诊断、治疗设计及修复体制作,并成为近年的研究热点。本文从口腔动静态数据获取、动态口... 详细信息

随着面部扫描、口内扫描、虚拟面弓、下颌运动轨迹记录等技术在口腔修复领域的发展及应用,动态虚拟患者技术逐渐被应用于口腔修复的术前分析、美学诊断、治疗设计及修复体制作,并成为近年的研究热点。本文从口腔动静态数据获取、动态口腔虚拟患者的构建、动态口腔虚拟患者的应用优势等方面对动态虚拟患者技术在口腔修复领域中的应用和研究展开综述,以期为相关数字化技术的临床应用提供参考。

关键词：计算机辅助设计牙修复体设计义齿修复术动态虚拟患者

一株猪流行性腹泻病毒变异株的分离、鉴定与全基因组序列分析

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湖北农业科学 2024年第7期63卷 134-140页

作者：刘曦贾相超李晨曦李自力华中农业大学动物医学院武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070

江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。... 详细信息

江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。通过全基因组序列分析,鉴定该毒株为PEDV G2b亚型变异株,并将其命名为PEDV JS-B株。

关键词：猪流行性腹泻病毒分离鉴定变异毒株分段测序序列分析

安神定志方对D-半乳糖协同AβO诱导的小鼠阿尔茨海默病样行为的改善作用及机制研究

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药学学报 2024年第1期59卷 119-134页

作者：瞿艳吴欢朱国旗王训翠新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽中医药大学科研技术中心安徽合肥230038 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽中医药大学分子生物学(脑病)重点实验室安徽合肥230012

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小... 详细信息

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小鼠AD样行为的影响;Nissl染色与透射电镜观察海马组织的病理形态改变;ELISA检测氧化应激和炎症相关因子水平;Western blot检测Aβ、Tau和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。根据TCMSP和HERB数据库筛选ADP的活性成分,利用Swiss Target Prediction平台预测活性成分的作用靶点;通过TTD、OMIM、GeneCards和DisGeNET数据库预测AD的疾病靶点;运用Metascape数据库对共有靶点进行GO、KEGG富集分析。结合GO和KEGG分析结果进行体内实验验证,从PI3K/Akt、钙信号通路以及突触功能角度探究ADP改善小鼠AD样行为的潜在机制。最后使用Autodock Vina对ADP的核心成分与已验证靶点进行分子对接。动物实验经安徽中医药大学动物伦理委员会批准(批准号:AHUCM-mouse-2021080)。结果表明,ADP中含有ginsenoside Rg1、ginsenoside Rb1、tenuifolin、poricoic acid B、α-asarone等主要化学成分。ADP显著改善D-gal协同AβO诱导的AD小鼠焦虑样行为和记忆损伤,保护海马神经元,降低氧化应激和炎症水平,抑制Aβ、磷酸化Tau表达。网络药理学结果提示PI3K/Akt、钙信号通路以及与突触后膜相关的细胞组分可能是ADP改善AD的关键因素。动物实验进一步确证ADP作用可以上调小鼠海马N-甲基-D-天氡氨酸离子型谷氨酸受体2A(GluN2A)、突触后致密蛋白95(PSD95)、钙蛋白酶1(calpain-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,抑制p-GluN2B和calpain-2表达。分子对接结果表明,ADP的核心成分panaxacol、dehydroeburicoic acid、deoxyharringtonine等与已验证靶点GRIN2A、GRIN2B、PSD95等均具有较强结合力。综上表明,ADP能够改善D-gal协同AβO诱导的小鼠AD样病理变化和行为改变,其调控机制可能和NMDAR/calpain、Akt/CREB/BDNF通路有一定的关联性。

关键词：安神定志方阿尔茨海默病氧化应激炎症反应突触缺失