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不同炮制工艺制备广地龙可溶性蛋白对HaCaT细胞的影响

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时珍国医国药 2024年第6期35卷 1402-1404页

作者：宁盈悦田林华姚琳冯丽娜高辛王伟明董坤黑龙江省中医药科学院黑龙江哈尔滨150036

目的以鲜广地龙及其不同炮制品包括净制品、炒制品及低温炮制品为研究对象,进一步考察不同炮制工艺对广地龙中可溶性蛋白含量、种类及HaCaT细胞增殖的影响。方法采用Bradford法和SDS-PAGE法,检测广地龙不同炮制品中蛋白质的含量和种类;... 详细信息

目的以鲜广地龙及其不同炮制品包括净制品、炒制品及低温炮制品为研究对象,进一步考察不同炮制工艺对广地龙中可溶性蛋白含量、种类及HaCaT细胞增殖的影响。方法采用Bradford法和SDS-PAGE法,检测广地龙不同炮制品中蛋白质的含量和种类;用CCK-8法进行活性筛选,测定其对HaCaT细胞增殖的影响结果4种广地龙炮制样品可溶性蛋白含量由高到低排序为:鲜品>低温炮制品>净制品>炒制品。鲜品的蛋白条带数目最多,主要集中在27.75~145.07KD低分子量区;低温炮制品与鲜品的蛋白质主带基本一致,净制品和炒制品低分子量区蛋白条带数目明显少于其他两种炮制品。不同广地龙样品给药48 h,净制品组HaCaT细胞基本死亡,炒制品组HaCaT细胞全部死亡,鲜品组和低温炮制组均能促进HaCaT细胞增殖,且鲜品组促细胞增殖效果更显著。结论广地龙中促进HaCaT细胞增殖的主要活性成分是存在于低分子量区的蛋白质,其促增殖活性与蛋白质的含量和种类呈正相关。

关键词：广地龙炮制方法可溶性蛋白 HaCaT细胞

基于Nrf2/HO-1通路探讨捏脊改善孤独症大鼠行为障碍的机制研究

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湖南中医药大学学报 2024年第4期44卷 592-599页

作者：苏丽红郭榕蕙洪燕玲林丽莉福建中医药大学福建福州350122 福建省中医药科学院福建福州350003

目的从氧化应激及核因子NF-E2相关因子-2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路探讨捏脊改善孤独症大鼠行为障碍的作用机制。方法将孤独症模型大鼠随机分为模型组、捏脊组,每... 详细信息

目的从氧化应激及核因子NF-E2相关因子-2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路探讨捏脊改善孤独症大鼠行为障碍的作用机制。方法将孤独症模型大鼠随机分为模型组、捏脊组,每组9只;同时纳入9只正常大鼠为空白组。捏脊组进行捏脊,21次/d,持续28 d。干预结束,各组大鼠进行行为学检测后处死取材,灌注固定后Nissl染色检测海马CA1、CA2区神经元损伤情况,取海马以生化试剂盒检测还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)表达,Western blot检测Nrf2及其磷酸化指标p-Nrf2、HO-1、NAD(P)H:醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]表达。结果与空白组比较,模型组社交指数、站立次数均显著降低(P<0.01),理毛次数显著增多(P<0.01);与模型组比较,捏脊组社交指数、站立次数均明显提升(P<0.01),理毛次数减少(P<0.05)。空白组神经元细胞排列紧密,形态规则,尼氏体数量丰富;模型组有大量神经元受损,细胞核固缩深染,细胞膜破裂、边界模糊,尼氏体偏移、溶解,尼氏体阳性细胞数量减少;捏脊组细胞排列基本整齐,核固缩形态有所改善,细胞形态可,尼氏体阳性细胞数量增加。与空白组比较,模型组GSH、SOD、CAT、p-Nrf2/Nrf2、HO-1、NQO1表达量均降低(P<0.05或P<0.01),MDA表达量明显升高(P<0.01);与模型组比较,捏脊组GSH、SOD、CAT、p-Nrf2/Nrf2、HO-1、NQO1表达量均升高(P<0.05或P<0.01),MDA表达量显著下降(P<0.01)。结论捏脊能改善孤独症大鼠行为障碍,与其活化Nrf2/HO-1通路、引起抗氧化因子表达、改善氧化应激、减轻神经元损伤有关。

关键词：孤独症捏脊氧化应激 Nrf2/HO-1通路社交行为海马区

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铁皮石斛CCO基因家族鉴定及其在花发育中的表达分析

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园艺学报 2024年第9期51卷 2075-2088页

作者：赵佳莹曾周婷岑欣颖施姣淇李效贤沈晓霞俞振明浙江中医药大学药学院杭州311402 浙江中医药大学中医药科学院杭州310053

为了解铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)中类胡萝卜素裂解氧化酶(carotenoidcleavage oxygenase,CCO)基因家族的功能,通过生物信息的方法鉴定铁皮石斛CCO家族成员,同时分析它们在不同组织、不同发育时期的花及茉莉酸甲酯(methyl jasmonat... 详细信息

为了解铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)中类胡萝卜素裂解氧化酶(carotenoidcleavage oxygenase,CCO)基因家族的功能,通过生物信息的方法鉴定铁皮石斛CCO家族成员,同时分析它们在不同组织、不同发育时期的花及茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理后幼苗叶片中的表达量。结果表明,铁皮石斛有12个CCO家族成员,10个属于CCD亚家族,2个属于NCED亚家族,不均匀定位于7条染色体上,且存在串联重复基因对。该家族基因启动子上存在大量激素响应和逆境响应元件。DoCCO家族基因在铁皮石斛各组织中均有表达,多数在花粉和根中高表达,它们在不同发育时期的花和MeJA处理后叶片中呈现差异化表达,可能参与不同组织的生长发育及MeJA响应,其中DoCCD1b可能在花发育中发挥重要作用。

关键词：铁皮石斛类胡萝卜素裂解氧化酶基因家族花发育表达分析

铁皮石斛14-3-3基因家族鉴定及表达分析

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生物技术通报 2024年第3期40卷 229-241页

作者：江林琪赵佳莹郑飞雄姚馨怡李效贤俞振明浙江中医药大学药学院杭州311402 浙江中医药大学中医药科学院杭州310053

【目的】14-3-3蛋白,亦称通用调节因子(GRF),由多基因家族编码,在植物生长发育和逆境应答发挥关键的作用。鉴定铁皮石斛(Dendrobium officinale)GRF基因家族,为铁皮石斛GRF基因功能研究及遗传改良提供理论依据。【方法】通过生物信息学... 详细信息

【目的】14-3-3蛋白,亦称通用调节因子(GRF),由多基因家族编码,在植物生长发育和逆境应答发挥关键的作用。鉴定铁皮石斛(Dendrobium officinale)GRF基因家族,为铁皮石斛GRF基因功能研究及遗传改良提供理论依据。【方法】通过生物信息学的方法鉴定铁皮石斛14-3-3家族成员,分析其理化性质、染色体定位、系统进化发育、基因结构和启动子顺式作用元件等,同时通过荧光定量PCR技术检测它们在不同组织、低温处理及盐胁迫处理后的表达量。【结果】铁皮石斛有17个GRF家族成员,分为ε类和非ε类亚族,不均匀地分布在7条染色体上,且存在7对串联复制基因。同一亚族成员基因结构、保守基序和蛋白质二级结构相类似。DoGRF家族基因的启动子区域存在大量激素和环境胁迫应答相关的调控元件。DoGRF家族基因在铁皮石斛各组织中均有表达,具有组织表达特异性,大多数基因在花器官中表达最高,其次是茎和根。同时,在低温处理、盐胁迫处理下呈现差异化表达,可能受到低温和盐胁迫的调控,特别是DoGRF2在铁皮石斛逆境应答过程中起着关键的作用。【结论】在全基因组水平从铁皮石斛中鉴定出17个DoGRF家族成员,不同基因对非生物胁迫响应不一,并具有器官表达特异性。DoGRF2对低温和盐胁迫呈现正向响应。

关键词：铁皮石斛 14-3-3家族基因表达非生物胁迫

中药通过免疫调节抗外阴阴道念珠菌病研究进展

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中草药 2024年第13期55卷 4588-4597页

作者：吴惠吴大强邵菁汪天明汪长中安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽省中医药科学院中西医结合研究所安徽合肥230012

外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)发生率近年来呈上升趋势,氟康唑等一线抗真菌药物因长期使用导致菌株耐药现象日益严重。中药治疗VVC具有低不良反应和低复发率、不易耐药等优势,其对于VVC的治疗除了一定程度直接作用于... 详细信息

外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)发生率近年来呈上升趋势,氟康唑等一线抗真菌药物因长期使用导致菌株耐药现象日益严重。中药治疗VVC具有低不良反应和低复发率、不易耐药等优势,其对于VVC的治疗除了一定程度直接作用于菌体外,主要通过调节机体免疫功能发挥效应。通过对近年来中药从免疫调节角度对VVC作用机制的最新研究进展进行综述,为中药干预VVC提供新的思路或借鉴。

关键词：外阴阴道念珠菌病免疫调节固有免疫适应性免疫苦参蛇床子姜黄素

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四氢姜黄素脂质制剂处方优化

中成药 2024年第1期46卷 225-231页

作者：朱宁凌海燕杨安东赵军宁李小芳四川省中医药科学院四川成都610041 成都中医药大学药学院四川成都611137

目的优化四氢姜黄素脂质制剂处方。方法考察四氢姜黄素在不同类型脂质处方中的溶解度和溶出度,以确定适宜的处方类型,采用D-最优混料设计考察不同处方在简化体外消化试验中四氢姜黄素时间-浓度曲线的曲线下面积(AUC),探索不同载药量对... 详细信息

目的优化四氢姜黄素脂质制剂处方。方法考察四氢姜黄素在不同类型脂质处方中的溶解度和溶出度,以确定适宜的处方类型,采用D-最优混料设计考察不同处方在简化体外消化试验中四氢姜黄素时间-浓度曲线的曲线下面积(AUC),探索不同载药量对脂解条件下制剂体外性能的影响。结果最佳条件为蓖麻油7.6%,吐温8080%,Transcutol HP 12.4%,载药处方具有体外消化试验中最大的释放曲线AUC。最佳载药量为60%饱和载药量,即213 mg/g。结论该方法稳定可靠,预测性好,可用于四氢姜黄素脂质制剂处方。

关键词：四氢姜黄素脂质制剂处方 D-最优混料设计

基于16S rDNA探讨健脾温阳解毒颗粒治疗脾肾阳虚型艾滋病相关腹泻的临床疗效Clinical Efficacy of Jianpi Wenyang Jiedu Granules (健脾温阳解毒颗粒) in the Treatment of AIDS-Related Diarrhea of Spleen-Kidney Yang Deficiency(脾肾阳虚) Based on 16S rDNA

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中药药理与临床 2024年

作者：刘晶晶彭鑫唐丽燕杨欣怡张毅阎玉萍张春梅四川省中医药科学院凉山州中西医结合医院

目的：基于16S rDNA观察健脾温阳解毒颗粒治疗脾肾阳虚型艾滋病相关腹泻的临床疗效。方法：采用随机对照临床研究，将40例患者分为治疗组（20例）和对照组（20例），治疗组给予健脾温阳解毒颗粒，对照组给予蒙脱石散，疗程4 w，观察两... 详细信息

目的：基于16S rDNA观察健脾温阳解毒颗粒治疗脾肾阳虚型艾滋病相关腹泻的临床疗效。方法：采用随机对照临床研究，将40例患者分为治疗组（20例）和对照组（20例），治疗组给予健脾温阳解毒颗粒，对照组给予蒙脱石散，疗程4 w，观察两组病例组内、组间治疗前后的临床疗效和肠道菌群变化。结果：治疗组总有效率85%（17/20），对照组为65%（13/20），两组比较差异没有统计学意义（P＞0.05）。与治疗前相比较，两组治疗后Shannon、Observed＿species、Simposo及PD＿whole＿tree指数均有上升，变形菌门及埃希氏志贺菌属丰度均下降，差异无统计学意义（P＞0.05），治疗组在门水平上，可显著减少蓝藻门丰度，在属水平上可显著增加粪杆菌属、多尔氏菌属、Anaerostipes、粪球菌＿3、丁酸球菌属丰度，减少Nakamurella、氨基酸球菌属、颤螺旋菌属丰度（P＜0.05）；治疗后，治疗组与对照组总症状积分差值比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。肠道菌群与临床症状相关性分析，胃脘痞满与氨基酸球菌、粪杆菌属丰度呈正相关，胃脘疼痛与粪杆菌属、颤螺旋菌属丰度呈正相关，食欲减退与多尔氏菌属、粪球菌-3丰度呈负相关（P＜0.05）。结论：健脾温阳解毒颗粒治疗脾肾阳虚型艾滋病相关腹泻临床疗效优于蒙脱石散，安全性好，可以改善患者临床症状，提高患者肠道菌群多样性，减轻肠道炎症，对肠道菌群有调节作用。

关键词：健脾温阳解毒颗粒艾滋病相关腹泻临床疗效 16S rDNAKey words Jianpi Wenyang Jiedu Granules (健脾温阳解毒颗粒) AIDS-related diarrhea Clinical efficacy 16S rDNA

基于UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS和MALDI⁃MSI的多蒸西洋参皂苷成分识别及可视化分析

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中国中药杂志 2024年第6期49卷 1526-1539页

作者：李慧芝赵燕芳王岱杰李慧娟贺吉香陈相峰山东中医药大学青岛中医药科学院山东青岛266112 齐鲁工业大学(山东省科学院)药学院山东济南250014

为研究多次蒸晒西洋参中皂苷成分变化及其在组织中的空间分布特征,采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱仪(ultra performance liquid chromatography quadrupole time⁃of⁃flight tandem mass spectrometry,UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS)对西洋参提取液进行检测和鉴定。采用基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix⁃assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,MALDI⁃MSI)对西洋参中原型皂苷及其代谢产物的空间分布和时空变化进行可视化分析。UPLC结果显示从0~9次蒸制西洋参中共鉴定出90种主要人参皂苷,在西洋参的反复蒸晒过程中,极性人参皂苷转化成低极性或非极性人参皂苷,原型皂苷含量减少,稀有皂苷含量增加,主要为人参皂苷20(S/R)⁃Rg_(3)、20(S/R)⁃Rh_(2)、Rk_(1)、Rg_(5)、Rs_(5)、Rs_(4)等。MALDI⁃MSI组织分布结果表明生西洋参中皂苷主要分布于表皮及韧皮部,蒸晒过程导致皂苷成分发生转化,木质部和髓质中的分布增加。该研究为西洋参蒸制引起的生物活性和药理作用的变化提供了基础信息,为扩大西洋参的药用范围提供了参考。

关键词：西洋参九蒸九制人参皂苷超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱基质辅助激光解吸电离质谱成像

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桔梗多糖的制备工艺及生物活性研究进展

现代食品科技 2024年第2期40卷 338-345页

作者：孙小雯杜新颖付先军绪扩李可建山东中医药大学中医学院山东济南250355 山东中医药大学青岛中医药科学院山东青岛266114

桔梗为桔梗科多年生植物[Platycodon grandiflorum(Jacq.)***.]的根,具有悠久的食用和药用历史,是药食同源大宗品种之一,具有重要研究价值。桔梗根鲜品在中国东北和华北地区常被腌制为咸菜,市场需求量大,其干燥根则在中医临床常用于治... 详细信息

桔梗为桔梗科多年生植物[Platycodon grandiflorum(Jacq.)***.]的根,具有悠久的食用和药用历史,是药食同源大宗品种之一,具有重要研究价值。桔梗根鲜品在中国东北和华北地区常被腌制为咸菜,市场需求量大,其干燥根则在中医临床常用于治疗咳嗽痰多,胸闷不畅,咽痛音哑,肺痈吐脓等病症。现有研究表明,桔梗中含有丰富的功能性多糖,在免疫调节、抗炎、止咳等生物活性方面发挥着至关重要的作用,具有重要的研究和开发前景。然而,当前国内外主要针对其结构与生物活性进行研究,尚无关于桔梗多糖的系统文献综述。该文通过梳理国内外有关桔梗多糖提取、分离纯化以及生物活性等方面的研究文献,对桔梗多糖的最新研究进展进行了系统归纳和总结,为日后桔梗多糖类成分的研究和深度开发利用提供参考。

关键词：桔梗多糖制备提取分离纯化生物活性