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龟鹿二仙胶对膝骨关节炎大鼠软骨细胞IHH-GLI信号通路的影响

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中华中医药杂志 2024年第4期39卷 1747-1752页

作者：郑珍萍吴伟欣李晔王和鸣耿秋东李楠福建中医药大学中医学院福州350122 福建中医药大学附属康复医院福州350003 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福州350122

目的:观察龟鹿二仙胶含药血清对白介素-1β(IL-1β)诱导大鼠肥大软骨细胞印度刺猬蛋白-胶质细胞瘤转录因子(IHH-GLI)信号通路的作用,探讨龟鹿二仙胶对膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:制备含药血清,提取大鼠软骨细胞,分为空白组、模型组、... 详细信息

目的:观察龟鹿二仙胶含药血清对白介素-1β(IL-1β)诱导大鼠肥大软骨细胞印度刺猬蛋白-胶质细胞瘤转录因子(IHH-GLI)信号通路的作用,探讨龟鹿二仙胶对膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:制备含药血清,提取大鼠软骨细胞,分为空白组、模型组、龟鹿组、抑制剂组,构建大鼠KOA软骨细胞肥大模型,免疫荧光观察GLI入核情况。CCK-8检测含药血清干预最佳时效及量效关系。含药血清干预24 h后,Real-time PCR、Western Blot检测软骨细胞IHH、平滑蛋白(Smo)、Runt相关转录因子2(Runx2)、X型胶原(COL10A1)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)的mRNA及蛋白表达情况。结果:荧光显微镜下,模型组GLI信号进入细胞核。与模型组比较,龟鹿组及抑制剂组IHH、Smo、Runx2、COL10A1、MMP-13 mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),IHH、Smo、Runx2蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:龟鹿二仙胶调控肥大软骨细胞的分解合成代谢平衡,减少细胞外基质的降解和钙化,改善失稳态环境,可能与其抑制IHH-GLI信号通路有关。

关键词：膝骨关节炎软骨细胞肥大龟鹿二仙胶 IHH-GLI信号通路

龙胆泻肝汤对胆囊胆固醇结石小鼠胆固醇代谢的影响

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中华中医药杂志 2024年第7期39卷 3410-3415页

作者：闵莉章小燕王素英梁文娜沈建英王荷颖福建中医药大学中医学院福州350122 中医证研究福建省高校重点实验室福州350122

目的:通过小鼠胆固醇代谢中密切相关基因尼曼-匹克C1样蛋白(NPC1L1)、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ABC)G5、ABCG8的表达变化,探讨龙胆泻肝汤对胆囊胆固醇结石(CS)小鼠胆固醇代谢的影响。方法:将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组12只,... 详细信息

目的:通过小鼠胆固醇代谢中密切相关基因尼曼-匹克C1样蛋白(NPC1L1)、腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ABC)G5、ABCG8的表达变化,探讨龙胆泻肝汤对胆囊胆固醇结石(CS)小鼠胆固醇代谢的影响。方法:将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组12只,造模组20只,采用胆固醇致石饲料诱导法塑造CS小鼠模型,8周后,两组各随机取4只小鼠取材查看胆囊结石情况。造模成功后,造模组随机分为模型组(8只)和龙胆泻肝汤组(8只),龙胆泻肝汤组予龙胆泻肝汤13.8g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,空白组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,干预4周。HE染色观察各组小鼠肝脏与小肠的组织形态;ELISA检测血清胆固醇(TC)与甘油三酯(TG)、胆汁TC与胆汁酸(TBA)含量;q-PCR及Western Blot分别检测小鼠肝脏和小肠组织中NPC1L1、ABCG5/ABCG8 mRNA与蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清TC、TG和胆汁TC、TBA均显著升高(P<0.01,P<0.05);模型组小肠NPC1L1mRNA与蛋白表达显著上调(P<0.01),ABCG5/G8mRNA与蛋白表达显著下调(P<0.01);肝组织中NPC1L1mRNA与蛋白表达均显著下调(P<0.01),而ABCG5/G8mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.01)。与模型组比较,龙胆泻肝汤组小鼠肝和小肠组织病理形态均明显改善;龙胆泻肝汤组血清中TC、TG和胆汁中TC、TBA显著降低(P<0.01,P<0.05);龙胆泻肝汤组小肠NPC1L1mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01,P<0.05),小肠ABCG5/G8mRNA和蛋白表达均显著上调(P<0.01,P<0.05);肝NPC1L1 mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01),肝ABCG5/G8mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:龙胆泻肝汤能够改善CS模型小鼠胆固醇代谢异常,肠、肝组织NPC1L1、ABCG5/G8表达异常引起胆固醇过饱和可能是CS湿热蕴结的分子生物学基础之一。

关键词：胆囊胆固醇结石尼曼-匹克C1样蛋白1 腺苷三磷酸结合盒转运蛋白G5/G8 龙胆泻肝汤胆固醇代谢机制

龟鹿二仙胶对IL-1β诱导的AMPK/mTOR/ULK1通路介导的体外培养软骨细胞自噬的影响

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时珍国医国药 2024年第4期35卷 799-804页

作者：吴伟欣郑珍萍顾富城杨美鑫耿秋东沈默金王和鸣李楠福建中医药大学中医学院福建福州350122 福建中医药大学福建福州350122 中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建福州350122

目的探讨龟鹿二仙胶对IL-1β诱导的AMPK/mTOR/ULK1通路介导的体外培养软骨细胞自噬的影响。方法采用酶消法体外培养野生型小鼠和mTOR-KO小鼠软骨细胞。将软骨细胞分为空白组、模型组、龟鹿组、CKO组和龟鹿+CKO组。干预24h后,采用CCK-8... 详细信息

目的探讨龟鹿二仙胶对IL-1β诱导的AMPK/mTOR/ULK1通路介导的体外培养软骨细胞自噬的影响。方法采用酶消法体外培养野生型小鼠和mTOR-KO小鼠软骨细胞。将软骨细胞分为空白组、模型组、龟鹿组、CKO组和龟鹿+CKO组。干预24h后,采用CCK-8法检测各组软骨细胞活性;TUNEL法检测各组软骨细胞凋亡情;激光共聚焦显微镜观察各组软骨细胞LC3B蛋白表达;Western blotting和qRT-PCR检测mTOR、ULK1、AMPK、LC3B、ATG5、PARP-1蛋白及mRNA的表达。结果与空白组比较,模型组软骨细胞活性显著下降(P0.05)。结论龟鹿二仙胶可通过激活AMPK/mTOR/ULK1通路发生自噬,促进退变软骨细胞的增殖,进而减少软骨细胞凋亡。

关键词：龟鹿二仙胶 AMPK/mTOR/ULK1信号通路软骨细胞自噬 C57BL/6小鼠

“中医状态”纵向视域下方证相应理论内涵新释

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北京中医药大学学报 2024年第6期47卷 760-764页

作者：乔世杰付超蔡姿尧唐文王章林王志斌童康李明珠韩海瑞林多多张少栋雷黄伟王洋李灿东福建中医药大学中医学院福州350122 四川省南充卫生学校福建中医药大学人文与管理学院安徽中医药大学中医学院福建中医药大学办公室

方证相应是中医治病的优势和特色,但临床疾病病机复杂、病情多变,在现有方证相应的认知下,临床具体运用难以达到疗效的最大化。本文引入“中医状态”纵向分类的生理特点、病理特点、体质、证、病5种范畴于方证相应中,在“中医状态”纵... 详细信息

方证相应是中医治病的优势和特色,但临床疾病病机复杂、病情多变,在现有方证相应的认知下,临床具体运用难以达到疗效的最大化。本文引入“中医状态”纵向分类的生理特点、病理特点、体质、证、病5种范畴于方证相应中,在“中医状态”纵向视域下,将方证相应理论内涵诠释为“方态相应”,即“方-生理特点”相应、“方-病理特点”相应、“方-体质”相应、“方-证”相应、“方-病”相应,以期准确把握方证相应的内涵,深化中医临床思维模式。

关键词：方证相应中医状态方态相应

超声引导下针刀松解黄韧带对兔退变腰椎间盘整合素α5、β1表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 331-338页

作者：陈灿赵宇胡斌涵杜梦凡刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰... 详细信息

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰兔,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与造模组(n=18)。造模组采用横断L5/6、L6/7节段棘上、棘间韧带并保持站立姿势对腰椎施加轴向载荷的方式建立兔腰椎间盘退变模型,造模成功后再随机分为模型组、超声针刀组、假针刀组,每组6只,超声针刀组在超声引导下使用针刀松解L7/S1右侧黄韧带,假针刀组针刀入路同超声针刀组,但不松解黄韧带,1次/周,共4次。针刀干预后30 d,利用MRI观察L7/S1椎间盘髓核信号强度变化,苏木精-伊红染色观察L7/S1椎间盘形态变化,免疫组化染色检测L7/S1椎间盘髓核内Ⅰ,Ⅱ型胶原表达,RT-PCR、Western Blot检测L7/S1椎间盘中整合素α5、β1、p38、核因子κB的表达。结果与结论:①MRI成像显示,模型组兔椎间盘髓核呈灰-黑色,髓核灰度值明显低于对照组(P<0.01);超声针刀组兔椎间盘髓核亮度较模型组升高,髓核灰度值高于模型组(P<0.01);②苏木精-伊红染色显示,模型组髓核形状不规则,髓核细胞数量减少,细胞外基质被压缩,纤维环破裂,终板结构与边界不清,软骨细胞排列紊乱;与模型组相比,超声针刀组髓核细胞数量增多,纤维环破裂情况有改善,软骨终板细胞排列较为规则;③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达增加(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达减少(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达减少(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达增加(P<0.01);④RT-PCR、Western Blot检测显示,与对照组比较,模型组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.01);⑤结果表明,超声引导下针刀松解黄韧带可改善兔腰椎间盘退变程度,该作用与通过调控整合素α5、β1表达、抑制p38和核因子κB表达有关。

关键词：腰椎间盘退变针刀黄韧带超声引导整合素

基于“肝脑相维”探讨肝失疏泄对不同月龄雌性大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2548-2553页

作者：陈惠芳龚琳李巧琳林玥王培芳王佳欣罗熠榕姚诗琦周宇婷柯月清沈建英梁文娜福建中医药大学中医学院福州350122 福建中医药大学中医证研究基地福州350122 福建省中医健康状态辨识重点实验室福州350122

目的:观察肝郁对不同月龄雌性大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响。方法:将不同月龄雌性大鼠,随机分为青年对照组、青年肝郁组、中年对照组及中年肝郁组。其中,青年肝郁组和中年肝郁组大鼠接受为期8周的慢性不可预知温和刺激;通过... 详细信息

目的:观察肝郁对不同月龄雌性大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响。方法:将不同月龄雌性大鼠,随机分为青年对照组、青年肝郁组、中年对照组及中年肝郁组。其中,青年肝郁组和中年肝郁组大鼠接受为期8周的慢性不可预知温和刺激;通过糖水偏好实验、旷场实验评价肝郁证模型;通过水迷宫和新物体识别实验评价大鼠学习记忆;尼氏染色观察海马神经元损伤情况;高尔基染色法观察海马区神经元树突损伤情况;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠海马PSD95、MecP2、P250GAP、GAP43 mRNA表达情况。结果:相较同月龄对照组,肝郁组大鼠糖水偏好率、旷场水平运动总距离、中央区域停留时间、空间探索实验平台所在象限活动路程和时间、新物体探索次数、新物体识别指数、PSD95、MecP2、P250GAP、GAP43 mRNA表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:肝失疏泄可能是通过下调突触可塑性相关基因,损伤海马神经元,进而影响雌性大鼠的学习和记忆能力。

关键词：肝失疏泄肝郁证海马突触可塑性学习记忆

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中医学预测模型研究探讨

中华中医药杂志 2024年第8期39卷 3873-3876页

作者：杨丞玮赖新梅魏佳肖雯迪房盛懿李灿东福建中医药大学中医学院福州350122 福建省中医四诊智能诊疗设备研究中心福州350122 福建省立医院福州350000 湖南中医药大学中医学院长沙410000

临床预测模型因其对疾病诊断和预后具有预测作用而被广泛应用于医疗决策、医疗质量管理及医疗资源的配置。中医整体观念和预后思想对预测模型研究具有很好的实践指导价值。文章挖掘中医思维对预测模型构建的意义,并从研究设计类型、预... 详细信息

临床预测模型因其对疾病诊断和预后具有预测作用而被广泛应用于医疗决策、医疗质量管理及医疗资源的配置。中医整体观念和预后思想对预测模型研究具有很好的实践指导价值。文章挖掘中医思维对预测模型构建的意义,并从研究设计类型、预测因素筛选、数据偏倚以及建模方法等角度,探讨限制中医预测能力发挥的因素。高质量的中医学预测模型研究,应从中医思维出发,完善研究设计,严格筛选预测因素,将整体、动态、个性的特点融入预测模型研究。

关键词：中医预测模型预测因素中医思维

“中医状态”视域下“有故无殒”理论对降低中药毒性的应用策略

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北京中医药大学学报 2024年

作者：乔世杰韦宗辰蔡姿尧付超李书楠王章林黄丽清童康唐文王志斌韩海瑞林多多张少栋雷黄伟王洋李灿东福建中医药大学中医学院福建中医药大学人文与管理学院四川省南充卫生学校福建医科大学福建中医药大学办公室

本文基于中医“有故无殒”理论，在“中医状态”视域下，认为“有故无殒”中“故”之外延为“状态”。临床为降低中药的不良反应，应宏观、中观、微观三观并用，融宏观、中观、微观参数于一体，定性、定量结合仔细辨识人体生理特点、病... 详细信息

本文基于中医“有故无殒”理论，在“中医状态”视域下，认为“有故无殒”中“故”之外延为“状态”。临床为降低中药的不良反应，应宏观、中观、微观三观并用，融宏观、中观、微观参数于一体，定性、定量结合仔细辨识人体生理特点、病理特点、体质、证、病等“状态”，突出方与“状态”之间的联系，方与“状态”相应，则会减少中药不良反应之殒患。本文希冀着重于“有故无殒”理论对中医药研究的指导作用，发挥中医药的特色优势，辩证地看待中医药的作用。

关键词：有故无殒中医药安全性中医状态方证相应

基于数据挖掘技术探讨李灿东教授诊疗不寐用药规律研究

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福建中医药 2024年

作者：王洋唐文高弘建福建中医药大学中医学院

目的基于数据挖掘技术探讨全国名中医李灿东教授诊疗不寐用药规律。方法筛选2014年05月至2023年12月期间就诊于福建中医药大学国医堂患者的门诊病历作为处方来源，使用Excel 2016、SPSS 25.0、SPSS Modeler 18.0统计处方药物频数、性... 详细信息

目的基于数据挖掘技术探讨全国名中医李灿东教授诊疗不寐用药规律。方法筛选2014年05月至2023年12月期间就诊于福建中医药大学国医堂患者的门诊病历作为处方来源，使用Excel 2016、SPSS 25.0、SPSS Modeler 18.0统计处方药物频数、性味归经、方剂频数、关联药物与组方聚类。结果共筛选处方524例，涉及药物164种，总频次5 619次。药味以甘、辛、苦、酸为主，药性以寒为主。归经以脾、心、肺、胃、肝经为主。最常使用养心安神药，理气药。除去佐药性质的甘草，药物使用频次前5位的药物分别为酸枣仁、半夏、陈皮、茯神与竹茹。药物剂量在10-15 g之间。方剂使用频次前5位的分别为酸枣仁汤、温胆汤、百合地黄汤、磁朱丸与柴芍温胆汤。关联置信度≥99的药物组合有778组，核心药物组合共5组。结论全国名中医李灿东教授治疗不寐多从痰、郁、热、虚入手，善用温胆汤、酸枣仁汤与百合地黄汤治疗本病。

关键词：不寐数据挖掘李灿东用药规律