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细胞的训练免疫在免疫疾病中的作用及进展

海南医学院学报 2025年

作者：袁润达卢芳刘树民于栋华黑龙江中医药大学中医药研究院

研究发现，固有免疫细胞在受到病原微生物及其产物刺激后，再次遭遇感染时，会对二次刺激做出增强或减弱的应答，这种现象被定义为训练免疫。这一概念的提出突破了以往只有适应性免疫具有免疫记忆的传统观念。与适应性免疫记忆相比，训... 详细信息

研究发现，固有免疫细胞在受到病原微生物及其产物刺激后，再次遭遇感染时，会对二次刺激做出增强或减弱的应答，这种现象被定义为训练免疫。这一概念的提出突破了以往只有适应性免疫具有免疫记忆的传统观念。与适应性免疫记忆相比，训练免疫在参与细胞种类、反应特异性、持续时间等方面存在差异。本文从训练免疫的特征、训练免疫产生的机制、训练免疫对免疫性疾病中的作用进行了梳理，旨在为今后探寻免疫类疾病治疗的新方法以及助力相关药物研发提供重要理论依据。

关键词：训练免疫固有免疫表观遗传重编程免疫性疾病

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线粒体稳态在类风湿关节炎致病中的作用

中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：贾东晔潘志长春中医药大学人参科学研究院

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是慢性炎症过程相关的自身免疫性疾病，可损害关节和关节外器官，包括心脏、肾脏、肺、消化系统、眼睛、皮肤和神经系统。在RA期间，线粒体稳态发生改变并通过影响软骨和滑膜组织，导致炎症因... 详细信息

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是慢性炎症过程相关的自身免疫性疾病，可损害关节和关节外器官，包括心脏、肾脏、肺、消化系统、眼睛、皮肤和神经系统。在RA期间，线粒体稳态发生改变并通过影响软骨和滑膜组织，导致炎症因子的产生和关节损伤，从而加速RA的发展。调控线粒体稳态是延缓RA发病的关键环节之一。本文以“类风湿关节炎”和“线粒体稳态”作为主题词进行检索近十年的相关文献，归纳分析RA导致线粒体稳态失衡的原因及调控线粒体稳态在改善RA中的作用，以期对RA的治疗提供新的思路和方法。

关键词：类风湿关节炎线粒体稳态线粒体动力学能量代谢

补肾强筋胶囊含药血清对膝骨关节炎软骨细胞模型自噬影响的实验研究

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中医正骨 2025年

作者：胡子旋姚楠黄丹娥黄雪君甘海宁赵自明陈玉兴广东省第二中医院广东省中医药工程技术研究院广东省中医药研究开发重点实验室

目的:基于腺苷一磷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）通路探讨补肾强筋胶囊含药血清对膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）软骨细胞模型自噬的影响。方法:将体外培养的人软骨细胞分为4组。正常组给予10%空白血清,模型组给予10%空白血清和10 ng·mL-1白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）,补肾强筋胶囊组给予10%补肾强筋胶囊含药血清和10 ng·mL-1IL-1β,AMPK抑制剂组给予10%补肾强筋胶囊含药血清、10 ng·mL-1L-1β及10μmol·L-1Dorsomorphin（AMPK抑制剂）。干预24 h后以CCK-8法检测细胞增殖率,以膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,以丹酰尸胺法检测细胞自噬率,以实时荧光定量PCR技术检测Beclin1、微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B）、UNC-51样自噬激活激酶1（UNC-5 1 like autophagy activating kinase 1,ULK1）的mRNA表达水平,以Western blot技术检测Beclin1、LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、ULK1、磷酸化AMPKα（phospho-AMPKα,p-AMPKα）、磷酸化mTOR（phospho-mTOR,p-mTOR）的蛋白表达水平。结果:（1）软骨细胞增殖率。模型组的细胞增殖率低于正常组（P=0.000）,补肾强筋胶囊组的细胞增殖率高于模型组（P=0.019）,AMPK抑制剂组的细胞增殖率低于补肾强筋胶囊组（P=0.002）。（2）软骨细胞凋亡率。模型组的细胞凋亡率高于正常组（P=0.000）,补肾强筋胶囊组的细胞凋亡率低于模型组（P=0.000）,AMPK抑制剂组的细胞凋亡率高于补肾强筋胶囊组（P=0.000）。（3）软骨细胞自噬率。模型组的细胞自噬率低于正常组（P=0.000）,补肾强筋胶囊组的细胞自噬率高于模型组（P=0.000）,AMPK抑制剂组的细胞自噬率低于补肾强筋胶囊组（P=0.000）。（4）软骨细胞自噬相关基因的mRNA表达水平。模型组Beclin1、LC3B、ULK1的mRNA表达水平均低于正常组（P=0.002,P=0.001,P=0.003）,补肾强筋胶囊组Beclin1、LC3B、ULK1的mRNA表达水平均高于模型组（P=0.008,P=0.005,P=0.012）,AMPK抑制剂组Beclin1、LC3B、ULK1的mRNA表达水平均低于补肾强筋胶囊组（P=0.000,P=0.038,P=0.004）。（5）软骨细胞自噬相关基因的蛋白表达水平。模型组Beclin1、ULK1、p-AMPKα的蛋白表达水平及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值均低于正常组（P=0.028,P=0.019,P=0.007,P=0.044）,p-mTOR的蛋白表达水平高于正常组（P=0.025）;补肾强筋胶囊组Beclin1、ULK1、p-AMPKα的蛋白表达水平及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值均高于模型组（P=0.004,P=0.048,P=0.040,P=0.043）,p-mTOR的蛋白表达水平低于模型组（P=0.031）;AMPK抑制剂组Beclin1、ULK1、p-AMPKα的蛋白表达水平及LC3β-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值均低于补肾强筋胶囊组（P=0.032,P=0.005,P=0.035,P=0.047）,p-mTOR的蛋白表达水平高于补肾强筋胶囊组（P=0.033）。结论:补肾强筋胶囊含药血清可能通过AMPK/mTOR通路上调KOA软骨细胞模型的自噬水平,从而延缓KOA病程。

关键词：骨关节炎,膝补肾强筋胶囊白细胞介素-1β 软骨细胞自吞噬腺苷—磷酸蛋白激酶类 TOR丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶

基于HPLC-DAD-CAD的恒制咳喘胶囊质量均一性分析

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期 168-174页

作者：马倩刘安许青霞郭丛章军王茂青寇晓娣刘艳天津中医药大学中国中医科学院中药研究所

目的：建立15批次恒制咳喘胶囊的指纹图谱，对其中10种指标性成分进行定量分析，并评价恒制咳喘胶囊不同批次产品的质量均一性。方法：采用高效液相色谱-二级管阵列检测器-电喷雾检测器联用法（HPLC-DAD-CAD）建立恒制咳喘胶囊指纹图谱... 详细信息

目的：建立15批次恒制咳喘胶囊的指纹图谱，对其中10种指标性成分进行定量分析，并评价恒制咳喘胶囊不同批次产品的质量均一性。方法：采用高效液相色谱-二级管阵列检测器-电喷雾检测器联用法（HPLC-DAD-CAD）建立恒制咳喘胶囊指纹图谱及含量测定方法；选择腺苷、鸟苷、香草酸、羟基红花色素A、沉香四醇、柚皮苷、橙皮苷、1,4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯、人参皂苷Rb1、甘草酸共10种成分作为质量属性指标，对来自2022—2024年共15批（每批3盒）45份恒制咳喘胶囊样品进行定性和定量分析；以批内均一性差异参数（PA）和批间均一性差异参数（PB）表征厂家质量均一性水平；采用聚类热分析表征不同年份样品质量属性指标的同质性和差异性。结果：建立了恒制咳喘胶囊HPLC指纹图谱及定量方法，经方法学考证，方法稳定可靠，可用于该制剂的定性、定量分析；15批样品的指纹图谱相似度0.887～0.975，共标定共有峰13个，指定10个共有峰，均为质量属性指标成分。定量分析结果显示，样品中的腺苷、鸟苷、香草酸、羟基红花色素A、沉香四醇、柚皮苷、橙皮苷、1,4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯、人参皂苷Rb1、甘草酸的质量分数分别为0.038～0.078、0.115～0.251、0.007～0.018、0.291～0.673、0.122～0.257、0.887～1.905、1.841～3.364、1.412～2.450、2.207～3.112、0.650～1.161 mg·g-1，其中人参皂苷Rb1、甘草酸均符合2020年版《中华人民共和国药典》对该制剂的限度要求；15个批次10种指标成分的PA均研究建立了恒制咳喘胶囊的指纹图谱和多指标含量测定方法，可用于更准确、高效的质量控制和标准提升。

关键词：恒制咳喘胶囊高效液相色谱法(HPLC) 二极管阵列检测器(DAD) 电喷雾检测器(CAD) 质量均一性指纹图谱

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原发性痛经寒凝血瘀证相关腧穴体表微循环敏化研究

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北京中医药大学学报 2025年

作者：李旭欣王雪松林杪张明健高渊博张细芬陈豪李海平郑晓军范玺胜刘君张俊茶佘延芬河北中医药大学针灸推拿学院北京京煤集团总医院河北省中医针灸优势病症国际联合研究中心

目的采用激光散斑血流成像技术探究原发性痛经寒凝血瘀证患者腧穴微循环动态变化规律。方法 2020年10月—2022年7月于河北中医药大学招募符合纳入标准的原发性痛经寒凝血瘀证患者（n=53）和健康对照（n=57)。在经前和经期第1天，采用... 详细信息

目的采用激光散斑血流成像技术探究原发性痛经寒凝血瘀证患者腧穴微循环动态变化规律。方法 2020年10月—2022年7月于河北中医药大学招募符合纳入标准的原发性痛经寒凝血瘀证患者（n=53）和健康对照（n=57)。在经前和经期第1天，采用激光散斑血流成像系统于腹部和腰骶部任脉、冲脉、督脉、胃经、脾经、膀胱经相关腧穴体表微循环血流灌注量，微循环动态变化量以各腧穴平均血流灌注量在月经来潮前后的差值计算；采用ROC曲线分析各腧穴体表微循环动态变化量的诊断效能；计算腧穴微循环敏化率。结果与对照组比较，痛经组任脉（阴交、关元）、左冲脉（左肓俞、左中注、左四满、左气穴、左大赫、左横骨）、左胃经（左天枢、左外陵、左归来、左气冲）、左脾经（左大横、左腹结）、右冲脉（右肓俞、右中注、右四满、右气穴、右大赫、右横骨）、右胃经（右天枢、右外陵、右大巨、右水道、右归来、右气冲）、右脾经（右腹结）的微循环动态变化量均升高（P＜0.05）。任脉（阴交、关元）、冲脉（右四满、左肓俞、右气穴、右中注、右大赫、左中注、左四满、右肓俞、左气穴、右横骨、左横骨、左大赫）、胃经（左天枢、右归来、左外陵、右水道、右大巨、右外陵、右气冲、左气冲）、脾经（左大横、左腹结、右腹结）的ROC曲线下面积为0.610～0.682（P＜0.05）。与对照组比较，痛经组部分腧穴敏化率升高（P＜0.05）。结论随月经来潮，原发性痛经寒凝血瘀证患者腹部（冲脉、任脉、胃经、脾经）部分腧穴血流灌注量增加，腧穴状态由静息态向激活态转变，这部分腧穴在原发性痛经寒凝血瘀证患者中存在敏化现象，且有一定诊断效能，为进一步分析针灸治疗原发性痛经寒凝血瘀证的疗效和作用机理提供了穴位选择的依据。

关键词：原发性痛经寒凝血瘀证穴位敏化激光散斑血流成像技术血流灌注量

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脂肪酸种类及含量与膝骨关节炎的发病风险

中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3724-3731页

作者：汤熙然陈伟坚姜涛谭羡允刘文刚广州中医药大学广东省广州市510405 广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院) 广东省广州市510095

背景:近年来,流行病学研究显示肥胖是膝骨关节炎的危险因素,而脂肪酸的摄入、代谢和生物合成与肥胖的发生发展密切相关,但脂肪酸与膝骨关节炎之间是否存在因果关联仍未知。目的:应用孟德尔随机化分析方法探讨5种脂肪酸表型与膝骨关节炎... 详细信息

背景:近年来,流行病学研究显示肥胖是膝骨关节炎的危险因素,而脂肪酸的摄入、代谢和生物合成与肥胖的发生发展密切相关,但脂肪酸与膝骨关节炎之间是否存在因果关联仍未知。目的:应用孟德尔随机化分析方法探讨5种脂肪酸表型与膝骨关节炎的因果关联。方法:使用来自英国生物银行(met-D)的脂肪酸比例的全基因组关联研究数据和来自EBI-A数据库的膝骨关节炎的全基因组关联研究数据进行汇总,将单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)作为工具变量并选择敏感的SNPs进行分析,通过双样本孟德尔随机化分析,以评估脂肪酸与膝骨关节炎结局风险的因果关系。采用逆方差加权法、MR-Egger回归法、加权中位数法、加权模型法和简单模型法来研究脂肪酸与膝骨关节炎之间的因果关系。进一步以同样方法进行反向孟德尔随机化分析,确保结果的有效性。结果与结论:①正向分析逆方差加权法结果表明,共有3种脂肪酸表型与膝骨关节炎有因果关系,其中饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例(OR=1.825,95%CI:1.230-2.706,P=0.003)与膝骨关节炎的发病风险呈正相关、Ω3多不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例(OR=0.822,95%CI:0.689-0.981,P=0.03)与膝骨关节炎的发病风险呈负相关以及Ω6多不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例(OR=1.268,95%CI:1.079-1.491,P=0.004)与膝骨关节炎的发病风险呈正相关;有2种脂肪酸表型与膝骨关节炎不具有因果关系,为总脂肪酸(OR=0.925,95%CI:0.804-1.066,P=0.283)、单不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例(OR=0.877,95%CI:0.756-1.018,P=0.084)。②反向分析结果表明,当膝骨关节炎作为暴露数据时,与脂肪酸的表型均不具有显著因果关系。③敏感性分析结果显示:双向孟德尔随机化的Cochran’s Q检验和MR-Egger回归法的结果P值均大于0.05,表明脂肪酸表型与膝骨关节炎之间的因果效应分析不存在显著的异质性和多效性。④上述结果证实,降低饱和脂肪酸、Ω6多不饱和脂肪酸的含量和提升Ω3多不饱和脂肪酸的含量能降低膝骨关节炎发病的风险,这为研究膝骨关节炎的生物学机制以及探索膝骨关节炎的早期防治提供有价值的线索,也为干预性药物的开发提供了新的方向。

关键词：膝骨关节炎孟德尔随机化因果关系敏感性分析逆方差加权法饱和脂肪酸多不饱和脂肪酸促炎细胞因子脂质代谢膝关节内收力矩

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基于代谢组学和转录组学探究安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制

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中国中药杂志 2025年

作者：朱晓瞳田良良张晶晶杨洪军广东药科大学中医药研究院中国中医科学院中药研究所中国中医科学院中医药健康产业研究所中药药理江西省重点实验室北京脑科学与类脑研究中心中国中医科学院医学实验中心中医药防治重大疾病基础研究北京市重点实验室

该研究结合代谢组学和转录组学探讨安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制。利用经过优化处理的Feeney自由落体撞击技术成功构建了大鼠创伤性颅脑损伤（TBI）模型，依据随机数字表法将实验大鼠分为假手术（sham）组，模型（Mo... 详细信息

该研究结合代谢组学和转录组学探讨安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制。利用经过优化处理的Feeney自由落体撞击技术成功构建了大鼠创伤性颅脑损伤（TBI）模型，依据随机数字表法将实验大鼠分为假手术（sham）组，模型（Mod）组，阳性药物（吡拉西坦，piracetam）组，安宫牛黄丸低、高剂量（ANP-L、ANP-H）组。通过尼氏染色、免疫荧光检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、半胱天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）和肿瘤蛋白53（TP53）在脑组织的表达，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测大鼠脑组织中炎症因子前列腺素内过氧化物合成酶2（PTGS2）表达水平。对sham组、Mod组和AGP-H组大鼠脑组织进行代谢组学与转录组学的分析，通过基因本体（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）进行富集分析，表示安宫牛黄丸干预TBI的作用机制。同时，整合代谢组学和转录组学分析发现了安宫牛黄丸干预TBI的代谢途径。结果表明，安宫牛黄丸显著增高TBI大鼠脑组织尼氏小体的数量，明显增高Bcl-2的表达量，明显减低caspase-3、TP53、PTGS2等蛋白的表达水平。与Mod组对比，AGP-H组明显上调12个差异代谢产物（DMs），下调了25个DMs，筛选出了5条关键的代谢路径，包括甘油磷脂代谢、嘧啶代谢，以及甘氨酸、苏氨酸和丝氨酸代谢，还有精氨酸与脯氨酸代谢、D-氨基酸代谢。转录组学发现了730个表达上调的差异基因（DEGs），以及612个表达下调的差异基因。富集分析显示，与炎症反应（inflammatory responses）及凋亡过程（apoptotic processes）紧密相关的生物学功能和包括磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）及MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）等关键信号通路得到了显著富集。结合转录组和代谢组的数据分析，识别出甘油磷脂、嘧啶和甘氨酸、苏氨酸及丝氨酸代谢等3个关键代谢路径。

关键词：安宫牛黄丸代谢组学转录组学创伤性颅脑损伤甘油磷脂代谢

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植物遗传转化技术在药用植物中的研究进展

中国实验方剂学杂志 2025年第2期 323-330页

作者：张昊熙昱林龙飞袁媛刘宇灵李慧中国中医科学院中药研究所江西中医药大学药学院中国中医科学院中药资源中心中国中医科学院中医药健康产业研究所

药用植物种类繁多、杂合度高且育种目标特殊，常规杂交技术难以满足其育种需求。而植物遗传转化技术具有高度选择性，能够特异性地改变植株性状，是药用植物育种研究的重要技术手段。常用的植物遗传转化技术有农杆菌转化法和粒子轰击法... 详细信息

药用植物种类繁多、杂合度高且育种目标特殊，常规杂交技术难以满足其育种需求。而植物遗传转化技术具有高度选择性，能够特异性地改变植株性状，是药用植物育种研究的重要技术手段。常用的植物遗传转化技术有农杆菌转化法和粒子轰击法，农杆菌转化法应用最为广泛，但其特异性强，并非所有药用植物均适用；粒子轰击法无特异性，但其转化效率低、外力损伤细胞及组织等问题也显而易见。随着纳米技术的兴起与发展，新兴的纳米材料介导转化法很好地解决了以上2种技术的难题，但受限于其发展较晚，纳米材料介导遗传物质进入植物细胞的机制尚不明确，因此在药用植物中应用较少。该文就农杆菌转化法、粒子轰击法、纳米材料介导转化法几种常用或新兴的植物遗传转化技术的发展现状及在不同药用植物中的应用情况进行概述，展望了植物遗传转化技术发展趋势及其在药用植物和中药资源未来发展中的应用前景，以期为药用植物的遗传改良和种质创新提供新的技术思路，为中药资源的可持续发展注入新的动力。

关键词：植物遗传转化技术药用植物农杆菌粒子轰击纳米材料基因组编辑

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裸花紫珠提取物体外抗乙型肝炎病毒作用及机制探究

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天然产物研究与开发 2025年

作者：苏小玉陈岩侯林山东中医药大学海洋中药研究院山东中医药大学青岛中医药科学院

本研究以裸花紫珠（Callicarpae Nudiflorae Folium，CNF）的水提取物（CNF water extract，WCNF）和醇提取物（CNF ethanol extract，ECNF）作用于HepG2.2.15细胞，体外评价CNF提取物对HBV的抑制作用，同时结合网络药理学探究CNF抗HBV的潜在作用机制。体外实验采用CCK-8法测定CNF提取物对细胞的毒性；酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法检测乙型肝炎病毒e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）和乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）分泌量，实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-PCR）法测定乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）DNA及关键靶点基因表达量。通过文献调研、TCMSP数据库检索CNF化学成分、Gene Cards数据库检索HBV相关靶点开展网络药理学研究；运用String数据库构建蛋白互作网络，DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析，Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络可视化并进行拓扑学分析，AutoDock Vina软件进行CNF抗HBV关键成分与核心靶点的分子对接分析，并通过RT-PCR实验对关键靶点进行实验验证。体外实验结果表明CNF水醇提取物均可抑制HbeAg和HBsAg的分泌量，抑制HBV DNA的复制水平，并且水提物的抑制作用明显地强于醇提物。网络药理学结果显示，熊果酸、槲皮素、木犀草素、咖啡酸等化合物为CNF抗HBV的关键活性成分，肿瘤蛋白53（tumor protein 53，TP53）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、热休克蛋白90Alpha家族A类成员1（heat shock protein 90 alpha family class A member 1，HSP90AA1）为核心靶点，涉及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase /protein kinase B，PI3K/AKT）、丝裂原蛋白活化激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）等信号通路。此外，实验结果显示CNF提取物可抑制HBV关键基因IL-6、TNF及HSP90AA1表达并提高TP53基因的mRNA表达水平。以上研究揭示了CNF通过多成分、多靶点、多途径发挥抗HBV的作用。后续将以本研究为基础，进一步对其药效物质基础及作用机制进行深入探讨，为CNF抗HBV的临床应用及新药开发提供坚实的理论依据。

关键词：裸花紫珠抗乙型肝炎病毒 HepG2.2.15 网络药理学