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不同地理种群腐食酪螨遗传变异和遗传分化分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 69-77页

作者：乔婷婷陶香林叶长江李政周笑妍孙恩涛皖南医学院检验学院安徽芜湖241002

目的分析不同地理种群腐食酪螨遗传多样性及遗传分化。方法2018年6—7月在安徽省芜湖市(WH)、阜阳市(FY)和河北省石家庄市(SJZ)、张家口市(ZJK)4个地区的面粉厂和米厂采集螨虫标本并经形态学和细胞色素C氧化酶亚基1(cox1)分子鉴定筛选... 详细信息

目的分析不同地理种群腐食酪螨遗传多样性及遗传分化。方法2018年6—7月在安徽省芜湖市(WH)、阜阳市(FY)和河北省石家庄市(SJZ)、张家口市(ZJK)4个地区的面粉厂和米厂采集螨虫标本并经形态学和细胞色素C氧化酶亚基1(cox1)分子鉴定筛选出腐食酪螨,PCR扩增腐食酪螨线粒体细胞色素b(Cytb)和核糖体DNA内转录间隔区(ITS)并测序。使用Chromas 2和DNAStar 1.00软件对基因序列进行校对和拼接,使用DnaSP 5.10.00软件计算各种群单倍型多样性(Hd)和核苷酸多态性(Pi),用MEGA 10.2软件包分析种群遗传变异和遗传分化指数(Fst)及基因流(Nm),用Arlequin3.1软件计算Tajima’s D值和Fu’s FS值并进行中性检验和分子方差分析,使用Network 10.2基于Median-joining法构建单倍型网络关系图,采用最大似然法(ML)对单倍型构建系统进化树。结果腐食酪螨呈椭圆形,表皮柔软,乳白色或黄棕色,口器高度变异或退化;本研究获得的cox1与GenBank中腐食酪螨cox1(登录号:LC190838.1)的序列一致性大于98%。腐食酪螨样本Cytb基因长度为372 bp,16个单倍型(H1~H16)中仅H4为共享单倍型(为来自WH和FY种群的9个个体共享),其余为独享单倍型。4个地理种群Hd较高,整体值为0.895(>0.5),其中以WH种群最高(Hd=0.867),SJZ种群最低(Hd=0.464)。基于Cytb序列分析显示腐食酪螨4个地理种群遗传多样性较高(Pi>0.005);分子方差分析可见腐食酪螨4个地理种群Fst>0.15(P0.05)。单倍型网络图与系统进化树结果一致,4个地理种群个体相互交织分布,仅ZJK种群个别个体聚为另外一支。ITS序列长度为1259~1405 bp,32个单倍型(G1~G2)均为独享单倍型。4个地理种群Hd较高,整体值与分别值为1.000(>0.5)。基于ITS序列分析显示腐食酪螨4个地理种群遗传多样性较高(Pi>0.005),Fst>0.25(P0.05)。单倍型网络图与系统进化树结果一致,WH、FY、SJZ种群单倍型聚为一支,ZJK的单倍型单独聚为一支。结论腐食酪螨4个地理种群遗传多样性较高,地理种群间存在较大遗传分化,FY种群可能有向WH种群扩张的历史,不同腐食酪螨地理种群间发生局部高水平基因交流,未发现明显地理分布格局。

关键词：腐食酪螨细胞色素b 内转录间隔区种群遗传多样性

维生素B_(2)、维生素C和维生素B_(6)在铜掺杂聚L-谷氨酸/功能化多壁碳纳米管传感界面上的同时电化学行为

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分析试验室 2024年第8期43卷 1109-1117页

作者：郑瑞康王榕应美辰于力山刘楠姜先浩冯德香尉艳皖南医学院药学院芜湖241002

采用电聚合结合共价键合,制备了铜掺杂聚L-谷氨酸/功能化多壁碳纳米管传感界面,构建可同时测定维生素B_(2)(VB_(2))、维生素C(VC)和维生素B_(6)(VB_(6))的传感器。该传感界面对3种维生素皆具有优良的电催化氧化性能:于0.1 mol/L的磷酸... 详细信息

采用电聚合结合共价键合,制备了铜掺杂聚L-谷氨酸/功能化多壁碳纳米管传感界面,构建可同时测定维生素B_(2)(VB_(2))、维生素C(VC)和维生素B_(6)(VB_(6))的传感器。该传感界面对3种维生素皆具有优良的电催化氧化性能:于0.1 mol/L的磷酸盐缓冲体系(pH 1.0)中,利用循环伏安法(CV)测得VB_(2),VC和VB_(6)的氧化峰电位分别为-153,264和1140 mV;采取示差脉冲伏安法(DPV)测定,VB_(2),VC和VB_(6)的线性范围分别为1~2800μmol/L、10~12000μmol/L和10~13000μmol/L,检出限分别为0.3,3.0和3.2μmol/L。该传感器应用于实际样本检测的回收率在97.8%~101.4%之间。

关键词：维生素B_(2) 维生素C 维生素B_(6) 电化学传感同时测定

MiR-6838-5p过表达下调DDR1基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖

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南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1677-1684页

作者：薛良军谈秋瑜许静文冯璐李文锦颜亮李玉磊皖南医学院第一附属医院放疗科安徽芜湖241002 皖南医学院基础医学院安徽芜湖241002

目的探索miR-6838-5p调控DDR1基因表达水平对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法采用脂质体转染方法干预乳腺癌MCF-7细胞中miR-6838-5p及DDR1基因表达,设置组别如下:Control mimic;miR-6838-5p mimic;Control inhibitor;miR-6838-5p inhibitor;Control siRNA、DDR1 siRNA、Control vector、DDR1 vector及miR-6838-5p过表达+DDR1过表达共转染组。qRT-PCR实验检测miR-6838-5p在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞中的表达;通过TargetscanV 8.0等软件预测miR-6838-5p可能作用的靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-6838-5p与DDR1存在靶向结合位点;CCK-8实验及EdU实验检测细胞增殖情况;Western blotting实验检测DDR1表达情况;通过裸鼠荷瘤实验验证miR-6838-5p通过调控DDR1表达抑制了乳腺癌MCF-7细胞增殖。结果miR-6838-5p在乳腺癌细胞中表达量低于乳腺正常上皮细胞(P<0.05);对比对照组,miR-6838-5p能抑制乳腺癌细胞增殖(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证明miR-6838-5p可以靶向结合DDR1(P<0.01),Western blotting实验证明miR-6838-5p能调控DDR1基因表达;DDR1促进乳腺癌细胞的增殖(P<0.05);miR-6838-5p过表达+DDR1过表达共转染后能回复miR-6838-5p对乳腺癌细胞增殖的抑制作用(P<0.05);裸鼠荷瘤实验结果表明过表达miR-6838-5p后肿瘤体积明显减小,Western blotting结果表明肿瘤内miR-6838-5p过表达后抑制了DDR1的表达(P<0.05)。结论miR-6838-5p通过调控DDR1基因表达抑制了乳腺癌细胞的增殖。

关键词： miR-6838-5p 乳腺癌 DDR1 细胞增殖

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新型溴苯取代的三氟甲基苯并环戊酮WW02对肺癌细胞增殖的影响及其分子机制

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中国临床药理学与治疗学 2024年第6期29卷 645-652页

作者：李玉磊李萍马金珠凌云云左梦雨丁振宇薛良军皖南医学院第一附属医院(皖南医学院弋矶山医院) 安徽芜湖24100 皖南医学院基础医学院安徽芜湖241002 皖南医学院药学院安徽芜湖241002

目的:探讨新型溴苯取代的三氟甲基苯并环戊酮WW02抑制人肺癌A549和H1299细胞活力及增殖的分子机制。方法:采用CCK-8和EdU法测定不同浓度的WW02(6.25、12.5、25、50μg/mL)对A549和H1299的细胞活力及增殖影响;不同浓度的WW02刺激A549和H1... 详细信息

目的:探讨新型溴苯取代的三氟甲基苯并环戊酮WW02抑制人肺癌A549和H1299细胞活力及增殖的分子机制。方法:采用CCK-8和EdU法测定不同浓度的WW02(6.25、12.5、25、50μg/mL)对A549和H1299的细胞活力及增殖影响;不同浓度的WW02刺激A549和H1299细胞24h后,通过免疫印记(Westernblot)实验检测不同浓度WW02作用下Akt及mTOR磷酸化水平的变化;通过MOE Dock对WW02与Akt跟mTOR进行了分子对接。结果:用不同浓度(6.25、12.5、25、50μg/mL)WW02处理A549和H1299细胞后,A549及H1299细胞的活力较DMSO对照组呈浓度依赖性下降(P<0.05);细胞的增殖较DMSO对照组呈浓度依赖性下降(P<0.05)。与DMSO对照组相比,WW02刺激24h后,A549细胞中Akt及mTOR的磷酸化水平下降(12.5、12.5、25、50μg/mL WW02作用下,P<0.05);而与DMSO对照组相比,WW02刺激24h后H1299细胞中Akt及mTOR的磷酸化水平下降(25、50μg/mL WW02作用下,P<0.05);结合模式分析发现,WW02与Akt和mTOR结合较强,WW02与mTOR的最高打分为-8.3kcal/mol,而WW02与Akt的最高打分为-7.3kcal/mol。结论:WW02抑制肺癌A549及H1299细胞的活力与增殖,其作用机制可能通过直接结合Akt及mTOR蛋白进而抑制Akt及mTOR磷酸化来实现。

关键词：溴苯取代的三氟甲基苯并环戊酮细胞增殖 Akt mTOR WW02

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三种无形态损伤提取粉螨DNA方法的改进与评估

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应用昆虫学报 2024年

作者：范海页朱永航陈慧林刘璐瑶赵薇曹玉祥叶长江孙恩涛皖南医学院检验学院

【目的】改进和评估无形态损伤提取粉螨DNA并保留完整凭证标本的方法。【方法】用改良Chelex-100法，STE法和碱裂解法提取单只椭圆食粉螨Aleurolyphus ovatus基因组DNA，并进行凭证标本回收和形态观察。超微量分光光度计测定DNA的纯度... 详细信息

【目的】改进和评估无形态损伤提取粉螨DNA并保留完整凭证标本的方法。【方法】用改良Chelex-100法，STE法和碱裂解法提取单只椭圆食粉螨Aleurolyphus ovatus基因组DNA，并进行凭证标本回收和形态观察。超微量分光光度计测定DNA的纯度。通过对COⅠ基因的扩增，验证所提取的DNA是否满足PCR扩增。【结果】3种方法处理后的凭证标本整体保持完整，但碱裂解法处理后，躯体刚毛易脱落，凭证标本透明过度，影响标本的形态鉴定。改良Chelex-100法的A260/A280比值为1.95，其余两种方法 A260/A280均低于1.8。3种方法所提单只螨DNA均满足PCR扩增，但STE法的扩增效果较差。【结论】改良Chelex-100法保存凭证标本完整，不影响标本的形态鉴定；提取的DNA纯度高，可以满足PCR扩增和后续相关分子生物学研究，且简单高效，适于单只粉螨DNA的无形态损伤提取。

关键词：粉螨 DNA提取无形态损伤改良Chelex-100法碱裂解法

绿原酸减轻脓毒症诱导的小鼠急性肾损伤:基于抑制caspase-1经典细胞焦亡信号通路

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 317-323页

作者：房尚萍孙任珂苏慧翟科程项毓高杨梦娜郭文俊皖南医学院麻醉学院安徽芜湖241002 皖南医学院麻醉学实验实训中心安徽芜湖241002 皖南医学院第一附属医院安徽芜湖241002

目的探讨caspase-1经典的细胞焦亡信号通路在绿原酸治疗急性肾损伤小鼠中的作用及机制。方法将24只C57Bl/6J小鼠随机分成4组,每组6只:假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿刺组(CLP组)、CLP+地塞米松组(CLP+DXM组)、CLP+绿原酸组(CLP+CGA组)。S... 详细信息

目的探讨caspase-1经典的细胞焦亡信号通路在绿原酸治疗急性肾损伤小鼠中的作用及机制。方法将24只C57Bl/6J小鼠随机分成4组,每组6只:假手术组(Sham组)、盲肠结扎穿刺组(CLP组)、CLP+地塞米松组(CLP+DXM组)、CLP+绿原酸组(CLP+CGA组)。Sham组小鼠仅开腹未造模,CLP组CLP+DXM组和CLP+CGA组小鼠均盲肠结扎穿刺(CLP)造模。Sham组、CLP组、CLP+DXM组和CLP+CGA组在造模后持续静脉泵注生理盐水10 mg/kg、生理盐水10 mg/kg,注地塞米松1μg/kg和绿原酸15 mg/kg 6 h。各组均在注射药物结束后8 h,比较各组小鼠7 d生存率,肾组织大体形态、HE染色,肾组织细胞凋亡及肾功能相关指标尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、肾损伤分子1(KIM-1);及肾组织NLRP3炎性小体和caspase-1通路关键蛋白表达情况。结果绿原酸干预后提高了小鼠7 d生存率,肾组织肾小球毛细血管充血、肾间质水肿、肾小管上皮细胞肿胀程度明显减轻(P<0.05),降低了肾功能指标BUN、Scr、KIM-1水平;NLRP3炎性小体及caspase-1通路关键蛋白表达。结论绿原酸可能通过抑制NLRP3炎性小体和caspase-1信号通路,改善盲肠结扎穿刺所致急性肾损伤。

关键词：绿原酸急性肾损伤脓毒症细胞焦亡 NLRP3炎性小体

决明子脐贴对慢传输型便秘大鼠的治疗作用及谱效关系

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 720-726页

作者：黄莉程索婷刘竹邹纯才鄢海燕皖南医学院药学院安徽芜湖241002

目的研究决明子脐贴对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及谱效关系。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、便秘贴阳性对照组和决明子脐贴低、中、高剂量组,6只/组。以复方地芬诺酯混悬液连续灌胃14d建立STC大鼠模型。造模成功后,将... 详细信息

目的研究决明子脐贴对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及谱效关系。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、便秘贴阳性对照组和决明子脐贴低、中、高剂量组,6只/组。以复方地芬诺酯混悬液连续灌胃14d建立STC大鼠模型。造模成功后,将决明子脐贴按低、中、高剂量(41.75、125.25、375.75 mg/kg)固定于大鼠腹部神阙穴处,连续给药14 d,以便秘贴(13.33mg/kg)为阳性对照组,空白对照组与模型组给予等体积的纯水灌胃。观察大鼠的一般情况,计算大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察大鼠结肠病理改变,测定大鼠血清中NO、NOS水平以及结肠组织中总蛋白含量、NO、NOS、AChE水平。建立决明子脐贴的HPLC指纹图谱,采用均值法和灰色关联度分析法研究决明子脐贴共有峰与对STC大鼠治疗作用的谱效关系。结果决明子脐贴能提高大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察未发现结肠组织有病理学改变。与空白对照组比较,模型组大鼠血清与结肠中的NO、NOS水平上升(P<0.05,P<0.01),AChE水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清与结肠中NO、NOS水平下降(P<0.05,P<0.01),AChE水平上升(P<0.05,P<0.01)。6批决明子脐贴共确认28个共有峰,根据谱效关系得到的关联度与关联序结果显示,决明子脐贴中各成分对STC大鼠的治疗作用贡献度不同,其中橙黄决明素的贡献最大。结论决明子脐贴通过不同给药剂量的多种活性成分协同发挥对STC大鼠的治疗作用,其中橙黄决明素、大黄酸、黄决明素、决明素、美决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚是决明子脐贴治疗STC的主要药效成分群。

关键词：慢传输型便秘决明子脐贴肠道推进率灰色关联度分析法谱效关系

黄芪甲苷-(β-榄香烯)微乳制备及其体外抗A549细胞活性研究

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中成药 2024年

作者：张紫薇栾敏娜董金鹏范紫鑫张强孙玉卜晓阳陈云艳皖南医学院药学院

摘要：目的制备黄芪甲苷-(β-榄香烯)微乳，并考察其体外抗A549细胞活性。方法筛选乳化剂EL35、RH 40、吐温80及助乳化剂无水乙醇、丙二醇、PEG 400，绘制伪三元相图。以油相与乳化

关键词：黄芪甲苷 β-榄香烯微乳制备工艺 A549细胞

圣草酚改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究

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中国临床药理学与治疗学 2024年第9期29卷 1002-1010页

作者：王欢张俊秀张雅戎浩王友娣汪五三马同军皖南医学院药学院安徽芜湖241002 皖南医学院公共卫生学院安徽芜湖241002 皖南医学院基础医学院安徽芜湖241002

目的:观察圣草酚能否改善自发性高血压大鼠(SHRs)的血管重构,并探讨其可能机制。方法:设置WKY正常对照、SHRs模型及圣草酚给药(EDT 120 mg/kg,SHRs+EDT)组,连续给药20周。尾袖法测量血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及平均血压(MBP)],超... 详细信息

目的:观察圣草酚能否改善自发性高血压大鼠(SHRs)的血管重构,并探讨其可能机制。方法:设置WKY正常对照、SHRs模型及圣草酚给药(EDT 120 mg/kg,SHRs+EDT)组,连续给药20周。尾袖法测量血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及平均血压(MBP)],超声检测脉搏波速度(PWV),HE染色观察主动脉中膜厚度(MT),MASSON染色观察主动脉胶原百分比(VFC)变化,ELISA检测血清TNF-α、IL-6及IL-10含量,q-PCR检测主动脉中TNF-α、IL-6及IL-10 mRNA变化,免疫组化观察主动脉CollagenⅠ和CollagenⅢ表达,Western blotting检测主动脉TGF-β1、MMP-2、MMP-9、Toll样受体4(TLR4)、p-IкBa、IкBa、p-p65及p65表达。结果:圣草酚给药20周后,SHRs的SBP、DBP、MBP及PWV显著下降(P<0.05或P<0.01),主动脉的MT和VFC显著减少(P<0.05),CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、MMP-2、MMP-9、TLR4、p-IкBa、p-p65蛋白表达显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论:圣草酚长期给药后,可抑制TLR4、NF-κB表达发挥抗炎作用,从而减少TGF-β1、MMP-2、MMP-9表达,使胶原含量下降,改善SHRs的主动脉重构和硬化。

关键词：高血压血管重构炎症 Toll样受体4 核转录因子κB