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miR-135a-5p靶向抑制Kif3B调控小鼠腭胚突间充质细胞的自噬

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中国组织工程研究 2024年第19期28卷 3003-3011页

作者：冯文宣廉舒博王哲陈靖何苇遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属口腔医院贵州省遵义市563000

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间... 详细信息

背景:研究表明,在地塞米松诱导腭裂的小鼠胚胎腭突间充质细胞中miR-135a-5p呈高表达,初级纤毛及其介导的Shh信号通路参与小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。由此猜测miR-135a-5p可能通过初级纤毛及其介导的Shh信号途径调控小鼠胚胎腭突间充质细胞的自噬。目的:探讨miR-135a-5p对小鼠胚胎腭突间充质细胞自噬的调控作用。方法:体外提取并培养C57BL/6J小鼠胚胎腭突间充质细胞。细胞转染分别设置为:①对照组、miR-135a-5p阴性对照组、miR-135a-5p模拟物组。②NC+miR-NC组、KIF3B过表达组、miR-135a-5p+KIF3B组。qRT-PCR验证miR-135a-5p、KIF3B的转染效率;透射电镜观察各组细胞中自噬小体/自噬溶酶体的数目;免疫荧光技术测定自噬标记物LC3B的荧光表达程度;Western blot检测KIF3B、LC3和P62的蛋白表达。③miR-135a-5p阴性对照组、SAG处理组、SAG+miR-135a-5p组。qRT-PCR检测Shh信号下游关键转录因子Gli3的mRNA表达水平;Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的蛋白表达。结果与结论:①过表达miR-135a-5p后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01);LC3B的荧光密度显著升高(P<0.01),KIF3B、P62的蛋白表达降低(P<0.01),LC3的蛋白表达升高;②过表达KIF3B后,细胞内自噬小体/自噬溶酶体数目明显减少(P<0.01),LC3B的荧光密度降低(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);miR-135a-5p靶向抑制KIF3B的表达(P<0.01),并使自噬小体/自噬溶酶体数目、LC3B的荧光强度以及LC3的蛋白表达得到回升(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01);③SAG使Gli3的mRNA表达明显升高(P<0.01),P62的蛋白表达升高(P<0.01),LC3的蛋白表达下降(P<0.01);加入miR-135a-5p后,Gli3的mRNA表达显著下降(P<0.01),P62的蛋白表达下降(P<0.01),LC3的蛋白表达回升(P<0.01);④结果表明:miR-135a-5p靶向抑制KIF3B并且可能通过负向调控Shh信号通路促进小鼠胚胎间充质细胞自噬。

关键词：自噬胚胎腭突间充质细胞 miRNA KIF3B Shh信号通路腭裂

消退素D1在甲状旁腺激素促进牵张成骨中的水平变化及其对巨噬细胞极化效应研究

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口腔医学研究 2024年第6期40卷 506-511页

作者：刘毅恒田力月李永頔杨芷姗唐正龙贵州医科大学口腔医学院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属口腔医院口腔颌面外科贵州贵阳550004

目的:研究甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促进牵张成骨过程中消退素D1(resolvin D1,RvD1)表达水平变化及其对巨噬细胞极化的影响。方法:48只兔建立下颌骨牵张成骨模型,随机分为对照组和实验组。对照组术后注射生理盐水,实验组... 详细信息

目的:研究甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)促进牵张成骨过程中消退素D1(resolvin D1,RvD1)表达水平变化及其对巨噬细胞极化的影响。方法:48只兔建立下颌骨牵张成骨模型,随机分为对照组和实验组。对照组术后注射生理盐水,实验组间歇性注射PTH 20μg/kg。分别对各组兔牵张后第3、5、7天进行取样,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察牵张区新骨组织;液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测新骨组织中RvD1含量;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测新骨组织中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及精氨酸酶1(Arginase 1,Arg1)的表达。体外构建由脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7炎症模型,并添加100 ng/mL RvD1进行处理,qPCR和流式细胞术检测巨噬细胞极化标记物的表达。结果:PTH促进下颌骨牵张成骨兔牵张区新骨生成并明显提高新骨中RvD1含量(P<0.01)。同时,实验组牵张区新骨中巨噬细胞M2型极化标志物Arg1的表达升高,而iNOS的表达降低(P<0.01)。体外实验结果显示RvD1上调了LPS处理的RAW264.7细胞中M2型极化标志物Arg1、CD206和抑炎因子白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的表达(P<0.05),并下调M1型标志物iNOS、CD86和促炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达(P<0.01)。结论:PTH能提高兔下颌骨牵张新骨组织中RvD1含量,RvD1可进一步诱导巨噬细胞向M2型极化而发挥促进炎症消退和骨再生作用。

关键词：消退素D1 甲状旁腺激素牵张成骨巨噬细胞

甲磺酸去铁胺促进去势骨质疏松大鼠颌骨缺损的修复

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3143-3149页

作者：田艾李丽肖天骄康佳兵湛济帆韦艳陈河林贵州医科大学口腔医学院贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属口腔医院口腔修复种植科贵州省贵阳市550004

背景:甲磺酸去铁胺(deferoxamine mesylate,DFO)是一种抗骨质疏松的潜在药物,具有铁螯合、血管再生、抗氧化等作用,近年来研究表明DFO的应用可扩展到组织再生工程领域。目的:以高铁干预去势大鼠模拟绝经后骨质疏松症患者体内铁蓄积状态... 详细信息

背景:甲磺酸去铁胺(deferoxamine mesylate,DFO)是一种抗骨质疏松的潜在药物,具有铁螯合、血管再生、抗氧化等作用,近年来研究表明DFO的应用可扩展到组织再生工程领域。目的:以高铁干预去势大鼠模拟绝经后骨质疏松症患者体内铁蓄积状态,探讨DFO干预铁过载骨质疏松大鼠下颌骨缺损植骨后的修复效果。方法:首先构建铁蓄积去势骨质疏松模型,模型组大鼠行双侧卵巢切除术,第2周开始腹腔注射枸橼酸铁铵(90 mg/kg,每周2次,持续干预11周),假手术组大鼠去除卵巢周围部分脂肪,给予等量生理盐水干预11周。确认模型建立成功后,实验大鼠分为假手术组(n=6)、高铁去势组(n=6)和高铁去势DFO治疗组(n=6),于双侧下颌骨建立直径5 mm的骨缺损并植入Bio-Oss骨粉,术后第4天开始高铁去势DFO治疗组腹腔注射DFO(100 mg/kg,每周3次),假手术组及高铁去势组予以等量生理盐水干预,植骨术后2,12周取下颌骨、肝脏及血液样本,行肝脏及颌骨普鲁士蓝染色、血清铁蛋白ELISA检测体内各组织铁水平;苏木精-伊红染色、Masson染色观察骨缺损区炎症细胞浸润及早期成骨情况;抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞分化情况;ELISA法检测血清中降钙素、Ⅰ型胶原C-末端肽水平;Micro-CT检测、苏木精-伊红染色观察中晚期成骨情况。结果与结论:①高铁去势组胫骨骨小梁数目减少,骨小梁排列稀疏;②与假手术组比较,植骨术后2周高铁去势组肝脏、颌骨及血清中铁水平明显升高,DFO干预后铁水平降低,差异均有显著性意义(P<0.05);③骨缺损修复早期,高铁去势组较假手术组有较多炎性细胞浸润,新生骨基质较少,Ⅰ型胶原纤维生成较少(P<0.05);DFO干预后炎性细胞浸润减少,少量新生骨基质生成,胶原纤维增加显著(P<0.05);④骨缺损修复中晚期,Micro-CT显示高铁去势组较假手术组新骨生成减少,DFO治疗后新生骨质增加(P<0.05);⑤与假手术组比较,高铁去势组破骨细胞数量、血清降钙素、Ⅰ型胶原C-末端肽水平升高,DFO干预后破骨细胞数量减少,骨代谢指标得到改善;⑥结果表明:高铁干预去势大鼠体内铁水平升高,伴随下颌骨骨缺损区新骨生成能力减弱;DFO可通过清除组织内铁沉积改善骨代谢与抑制破骨细胞活性,提高铁蓄积骨质疏松大鼠的骨形成能力,促进下颌骨缺损区骨愈合。

关键词：甲磺酸去铁胺骨质疏松铁骨缺损新骨生成

Compound 3k治疗骨关节炎:调控氧化应激通路改善软骨细胞糖酵解的作用机制

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 363-370页

作者：郭素蓉曹士盛穆星彤杨青张娟天津医科大学口腔医学院天津市300041 天津医科大学口腔医院口腔修复科天津市300041

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于... 详细信息

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于缺氧诱导因子1α/活性氧的氧化应激通路探究Compound 3k在糖酵解过度活跃所导致的骨关节炎中的作用机制。方法:取对数生长期的ATDC5成软骨细胞,用10 ng/mL白细胞介素1β作用24 h诱导骨关节炎体外细胞模型,以CCK-8法检测不同浓度(0.25,0.5,1,2.5,5,10,15μmol/L)Compound 3k的细胞毒性,选出合适浓度进行后续实验。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、治疗组,模型组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导,治疗组以Compound 3k预刺激2 h后与白细胞介素1β共培养,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用ELISA试剂盒检测各组细胞炎症水平;用试剂盒检测各组细胞活性氧、细胞外乳酸脱氢酶及葡萄糖含量;qRT-PCR及Western blot检测相关炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1、甘油醛3-磷酸脱氢酶、单羧酸转运蛋白1和缺氧诱导因子1α的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞增殖活性下降、糖酵解水平活跃,表现为细胞外乳酸脱氢酶含量增加(P<0.001),葡萄糖含量减少(P<0.001),相关炎症因子白细胞介素6(P<0.0001)及肿瘤坏死因子α(P<0.001),糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1(P<0.001)、甘油醛3-磷酸脱氢酶(P<0.001)、单羧酸转运蛋白1(P<0.001)及缺氧诱导因子1α(P<0.001)的表达水平均上调,并伴随氧化应激,活性氧过量产生。②与模型组相比,Compound 3k的治疗有效提高细胞增殖活性,抑制过度活跃的糖酵解水平的同时,抑制了骨关节炎软骨细胞炎症(P<0.001)及糖酵解相关基因的表达(P<0.001),且抑制氧化应激,缺氧诱导因子1α的表达水平下调(P<0.0001),活性氧水平下降。③上述结果证实,Compound 3k抑制了白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症,其机制可能与糖酵解及缺氧诱导因子1α/活性氧介导的氧化应激有关。

关键词：骨关节炎糖酵解 Compound 3k 氧化应激 HIF-1α/ROS ATDC5细胞葡萄糖代谢白细胞介素1β 小分子药物

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机器学习在流行病学中的应用进展

中华流行病学杂志 2024年第9期45卷 1321-1326页

作者：麦凯童刘星彤林晓妍刘诗音赵辰恺杜江波南京医科大学第一临床医学院南京211166 南京医科大学公共卫生学院流行病学系南京211166 南京医科大学口腔医学院南京211166 南京医科大学公共卫生学院全球健康中心南京211166 南京医科大学生殖医学与子代健康全国重点实验室南京211166

健康相关的人群数据收集和分析是流行病学研究的重要方面。近年来,随着大数据、互联网和云计算等领域的快速发展,人工智能逐渐进入流行病学研究者视野。越来越多的研究者尝试将人工智能算法应用于基因组测序和医学影像数据挖掘。人工智... 详细信息

健康相关的人群数据收集和分析是流行病学研究的重要方面。近年来,随着大数据、互联网和云计算等领域的快速发展,人工智能逐渐进入流行病学研究者视野。越来越多的研究者尝试将人工智能算法应用于基因组测序和医学影像数据挖掘。人工智能在疾病诊断、风险预测等领域的应用范围迅速扩大。近年来,机器学习作为人工智能的一个分支,在流行病学研究领域的应用较为广泛。本文通过文献检索,针对机器学习在流行病学中应用的重点领域和前沿进展进行总结归纳,回顾机器学习发展的历史脉络,分析其在当下流行病学研究领域的经典案例和主要挑战,了解机器学习和人工智能算法目前的应用场景和未来的发展趋势,进而更好地发掘我国海量医学健康数据的流行病学研究价值。

关键词：机器学习流行病学人工智能疾病诊断风险预测

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促红细胞生成素在骨组织工程中的应用及前景

中国组织工程研究 2024年第9期28卷 1443-1449页

作者：杨玉芳杨芷姗段棉棉刘毅恒唐正龙王宇贵州医科大学口腔医学院贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属口腔医院口腔颌面外科贵州省贵阳市550004

背景:骨缺损是由许多因素引起的,如炎症、肿瘤、创伤或骨骼疾病等,促红细胞生成素通过作用于间充质干细胞,促进其向成骨细胞、破骨细胞分化,作用于血管内皮细胞诱导血管生成,促进骨缺损、软骨缺损的修复,是一种在骨组织工程构建中具有... 详细信息

背景:骨缺损是由许多因素引起的,如炎症、肿瘤、创伤或骨骼疾病等,促红细胞生成素通过作用于间充质干细胞,促进其向成骨细胞、破骨细胞分化,作用于血管内皮细胞诱导血管生成,促进骨缺损、软骨缺损的修复,是一种在骨组织工程构建中具有应用潜力的生长因子。目的:阐述促红细胞生成素在骨组织工程中的应用及其潜在机制。方法:由第一作者运用计算机检索中国知网、万方、维普数据库及PubMed数据库中2004-2022年发表的相关文献,以“Erythropoietin,Bone defect,Bone regeneration,Angiogenesis,Osteogenesis、Osteoblast,Osteoclast,Bone tissue engineering”为英文检索词,以“促红细胞生成素,骨缺损,骨再生,血管生成,成骨分化,成骨细胞,破骨细胞,骨组织工程”为中文检索词检索,并进行筛选、归纳与总结,最终纳入64篇相关文献进行综述。结果与结论:①促红细胞生成素可以直接作用于骨髓微环境中的成骨细胞及破骨细胞,通过促进间充质干细胞向成骨细胞、破骨细胞、脂肪细胞、神经细胞和基质细胞分化,通过激活Wnt/β-catenin、缺氧诱导因子1α/血管内皮生长因子、p38MAPK和EphrinB2/EphB4等信号通路介导间充质干细胞完成成骨向分化;②通过调节红细胞的生成以改变血液的携氧能力,通过刺激血管内皮细胞促进血管生成,新生的血管可以将成骨所需的氧气、养分、生长因子和骨祖细胞携带到成骨的位置,从而促进骨形成和骨折愈合;③促红细胞生成素目前作为一种具有成骨成血管作用的生长因子,通过多种载药手段已被应用于壳聚糖、聚己内酯、生物陶瓷和纳米纤维等各类型支架材料研究中,并与其他生长因子如骨形态发生蛋白2,9等共同作用于支架材料表面参与了骨缺损的修复,在新型组织工程骨的构建中展现了其优异的实用性,具有潜在的临床应用价值。

关键词：促红细胞生成素骨缺损骨再生血管生成成骨分化成骨细胞破骨细胞骨组织工程

CENPF调控PI3K/AKT信号通路影响唾液腺腺样囊性癌进展

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口腔医学研究 2024年第9期40卷 803-809页

作者：杨心怡黄薇薇黄丽胡赟贵州医科大学口腔医学院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属口腔医院病理科贵州贵阳550004

目的:探讨着丝粒蛋白F(centromere protein F,CENPF)在腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)发生发展中的作用和分子机制。方法:通过小干扰RNA转染敲低ACC细胞中的CENPF。通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、划痕实验和Transwell测定评估敲低CENPF对ACC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;通过蛋白免疫印迹实验分析改变CENPF表达后ACC细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路相关蛋白表达变化,通过CCK-8、划痕实验和Transwell测定评估敲低CENPF联合PI3K抑制剂BKM-120对ACC细胞增殖、迁移、侵袭的影响。结果:敲低ACC-M中CENPF表达后,CCK-8实验证明其增殖能力减弱;划痕实验表明其迁移能力减弱,Transwell实验表明其侵袭能力减弱,PI3K/AKT通路关键蛋白p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平下降。在下调CENPF的ACC-M中加入PI3K抑制剂,PI3K/AKT通路关键蛋白表达水平进一步下降。此外,加入PI3K抑制剂后,CENPF下调的ACC-M增殖、迁移、侵袭能力较单纯下调CENPF的ACC-M进一步减弱。结论:CENPF通过调控PI3K/AKT信号通路参与ACC进展。

关键词：着丝粒蛋白F 腺样囊性癌 PI3K/AKT信号通路机制研究

断冠粘接结合数字化贴面修复在上前牙复杂冠折中的应用1例

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国际口腔医学杂志 2024年第2期51卷 172-175页

作者：杨育泽艾璐莹张自亮肖康毛雨典吴赟陈凌福建医科大学附属第一医院口腔医学中心福州350004 福建医科大学附属第一医院滨海院区国家区域医疗中心口腔科福州350212 福建医科大学口腔医学院福州350004

本文报道了1例因外伤导致上前牙复杂冠折的病例。治疗过程中,首先对患牙行牙髓切断、断冠粘接术,实现了患牙牙髓活力、牙体形态的保存;其次配合数字化技术制作贴面、椅旁外染色技术,增加患牙的固位力及恢复美观;最终实现患牙牙体、牙髓... 详细信息

本文报道了1例因外伤导致上前牙复杂冠折的病例。治疗过程中,首先对患牙行牙髓切断、断冠粘接术,实现了患牙牙髓活力、牙体形态的保存;其次配合数字化技术制作贴面、椅旁外染色技术,增加患牙的固位力及恢复美观;最终实现患牙牙体、牙髓的保存,最大程度恢复了患牙初始形态、颜色、咬合、邻接关系等特征。随访2年多以来,临床效果稳定。

关键词：复杂冠折牙髓切断术数字化技术

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下颌后缩对大鼠脑血流及脑卒中恢复的影响

安徽医科大学学报 2024年第10期 1814-1822页

作者：付春风刘小郁韩全成郑秀云梅勤程雨荷吴婷婷安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究重点实验室

目的探究下颌后缩对脑部血流的改变以及对脑卒中恢复产生的影响和潜在的机制。方法 6周龄的SD雄性大鼠选作实验对象。金属套管粘接于大鼠上颌切牙1周，迫使下颌后缩(MR)。通过激光散斑成像检测MR对脑部血流改变；莫里斯水迷宫检测MR对... 详细信息

目的探究下颌后缩对脑部血流的改变以及对脑卒中恢复产生的影响和潜在的机制。方法 6周龄的SD雄性大鼠选作实验对象。金属套管粘接于大鼠上颌切牙1周，迫使下颌后缩(MR)。通过激光散斑成像检测MR对脑部血流改变；莫里斯水迷宫检测MR对认知功能改变。而后通过大脑中动脉阻塞法(MCAO)对MR建造脑卒中模型(MCAO MR)观察1周。此外，将MCAO MR大鼠在制备MCAO当天去除金属套管，使其在自然状态下恢复下颌骨的位置，设为脑卒中+咬合恢复(MCAO RO)组并作为阳性对照。至此将大鼠分为Sham组、MCAO组、MCAO MR组、MCAO RO组。通过改良神经评分检测神经功能；2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测大鼠大脑缺血面积；苏木精-伊红(HE)染色观察神经细胞变化；免疫组化检测血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平；Western blot检测血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)、沉默调节蛋白6(SIRT6)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的蛋白表达水平，qRT-PCR检测SIRT6、TXNIP、VEGF的mRNA表达水平；免疫荧光检测小胶质细胞活化标志物离子钙结合衔接分子1(IBA-1)。结果激光散斑显示下颌后缩使脑部血流出现降低，水迷宫显示认知功能下降。MCAO MR相较于其他组，TTC染色显示的缺血面积更大，HE染色和神经评分显示神经系统功能恢复更差。Western blot和qRT-PCR显示MCAO MR组抑制SIRT6的mRNA和蛋白表达水平，上调了TXNIP的mRNA和蛋白表达水平，小胶质细胞活化增多。结论下颌后缩降低脑部血流改变大鼠认知功能，并调控SIRT6/TXNIP轴抑制脑卒中大鼠血流和神经恢复。

关键词：下颌后缩脑血流脑卒中康复认知功能

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