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槟榔活性成分诱导口腔黏膜下纤维化的机制:基于网络药理学结合临床样本验证

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南方医科大学学报 2024年第5期44卷 930-940页

作者：李睿镈高歌谢曦罗海彬海南大学热带生物资源教育部重点实验室//海南大学药学院海南海口570228

目的探究槟榔的成分及其促进口腔黏膜下纤维化的机制。方法采用Thermo QE plus液相色谱串联高分辨质谱仪和Compound discover 3.2数据处理软件进行槟榔中药化学成分分析,将检测到的化合物以质谱响应值排序,分析排名前20化合物的活性。... 详细信息

目的探究槟榔的成分及其促进口腔黏膜下纤维化的机制。方法采用Thermo QE plus液相色谱串联高分辨质谱仪和Compound discover 3.2数据处理软件进行槟榔中药化学成分分析,将检测到的化合物以质谱响应值排序,分析排名前20化合物的活性。化合物活性来源根据《中国药典(2015版)》汇总,数据查询基于PubChem、Chemical book以及Scifinder数据库。借助网络药理学方法分析槟榔影响口腔黏膜下纤维化(OSF)的潜在活性成分、核心靶点及主要影响的生物功能、信号通路。通过整合人类基因数据库(Genecards)、基因组百科全书数据库(KEGG)等数据库获取OSF的作用靶点。以OB≥30%为条件,在中药系统药理学技术平台(TCMSP)中筛选出槟榔可作用于靶点的化合物,并构建靶点-化合物、化合物-中药、靶点-化合物-中药网络。运用MOE软件的分子对接技术,分析成分-靶点结合的可能性,再利用Pymol软件进行分子对接可视化。最后通过免疫组化在临床样本中验证槟榔是否影响PI3K-Akt、MAPK两条通路涉及的主要蛋白,初步验证槟榔诱导OSF的潜在作用机制。结果基于网络药理学和槟榔粗提物中筛选出前10的化合物与OSF核心靶点中核心交集基因,确定了槟榔可能通过调控PI3K-Akt与MAPK通路。通过免疫组化在临床样本中验证,细胞膜上的PI3K蛋白表达量在OSF患者组中表达下降(P=0.0002),p-PI3K(P=0.0002)表达量上升,进一步激活下游的AKT1蛋白表达增加(P=0.0006),加剧磷酸化蛋白p-AKT蛋白的表达及堆积(P=0.0013);而在MAPK通路中,OSF患者组对比正常组,通过上调JNK蛋白(P=0.0130),诱导下游AP-1复合蛋白c-jun及c-fos转录因子的活性增加,促使其向细胞核聚集;且OSF患者组较正常组血浆的IL-6(P<0.0001)与IL-8(P=0.0095)含量均上升。结论槟榔碱、槟榔次碱、异去甲槟榔碱等槟榔中的主要活性成分可能通过刺激PI3K-Akt与MAPK信号通路,促进炎症介质IL-6及IL-8的表达,诱导胶原增生,导致口腔黏膜下纤维化病变。

关键词：槟榔口腔黏膜下纤维化性变网络药理学分子对接

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信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006次级代谢产物研究

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热带海洋学报 2024年第4期43卷 181-188页

作者：林应婷孙颖胡江南董帅热带生物资源教育部重点实验室药学院海南大学海南海口570228

文章旨在对信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物进行结构和活性研究。运用多种分离材料和技术,如正反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶(sephadex LH-20)、聚苯乙烯反相树脂填料(MCI GEL CHP-20/P120)、半制备高效液相等进行分离... 详细信息

文章旨在对信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物进行结构和活性研究。运用多种分离材料和技术,如正反相硅胶柱层析、葡聚糖凝胶(sephadex LH-20)、聚苯乙烯反相树脂填料(MCI GEL CHP-20/P120)、半制备高效液相等进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等现代波谱技术进行结构鉴定。采用CCK8 (cell counting kit)法研究化合物1—14对脑胶质瘤细胞U87和肺癌细胞A549的抑制作用。从信号芋螺内生真菌Talaromyces ***006的次级代谢产物中分离获得14个化合物,分别是ergosteryl stearate (1)、麦角甾醇(2)、β-谷甾醇(3)、2-hydroxyemodin (4)、(+)-rugulosin (5)、1,1′,3,3′,5,5′-hexahydroxy-7,7-dimethyl[2,2′-bianthracene]-9,9′,10,10′-tetrone (6)、rel-(6R,7R)-5,6,7,8-tetrahydro-6-hydroxy-7-methyl-8-oxo-3-propyl-1H-2-benzopyran (7)、rel-(6R,7R)-5,6,7,8-tetrahydro-7-hydroxy-7-methyl-8-oxo-3-propyl-1H-2-benzopyran (8)、scorpinone (9)、orsellinic acid (10)、6-methyl-1,2,4-benzenetriol (11)、2-methyl-5-isopropyl-phenol (12)、3-methoxy-5-methyl-phenol (13)、5-methyl-benzene-1,3-diol (14)。化合物1—4和7—14为首次从Talaromyces sp.中分离获得。化合物8和12对脑胶质瘤细胞U87的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为21.07μmol·L^(-1)和15.74μmol·L^(-1),同时对肺癌细胞A549的IC50分别为20.88μmol·L^(-1)和22.93μmol·L^(-1)。

关键词：信号芋螺内生菌篮状菌属次级代谢产物生物活性

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红树植物海漆中二萜类化合物及其抗神经炎症活性（英文）

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有机化学 2024年

作者：李俊义杨璐陈明宾饶勇江仲平黄玲海南大学热带生物资源教育部重点实验室海南大学食品科学与工程学院

本研究采用正相、反相硅胶柱层析和半制备高效液相色谱等分离方法对海南红树植物海漆(Excoecaria agallocha L.)茎和枝条的化学成分进行研究，从中分离得到一个新的3,4位开环对映-贝壳杉烷型二萜agallochanin acid A (1)和一个新的降4... 详细信息

本研究采用正相、反相硅胶柱层析和半制备高效液相色谱等分离方法对海南红树植物海漆(Excoecaria agallocha L.)茎和枝条的化学成分进行研究，从中分离得到一个新的3,4位开环对映-贝壳杉烷型二萜agallochanin acid A (1)和一个新的降4个碳的对映-半日花烷型二萜agallochanin acid B (2),以及4个已知的二萜化合物(3-6)。通过高分辨质谱、一维、二维核磁共振波谱以及ECD计算的方法确定了这些二萜类化合物的结构。测试了所有化合物对LPS诱导BV-2小胶质细胞中NO释放的抑制作用，化合物3和5具有显著的抑制NO释放作用，其IC50值分别为14.32±1.99和4.24±0.37μM。

关键词：海漆红树植物贝壳衫烷二萜半日花烷二萜抗神经炎症

Gly33的缺失和突变对hTrx-1抗氧化活性的影响

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生物学杂志 2024年第4期41卷 11-16,23页

作者：郭席君杨吉康黄君维王彤刘馨乔齐兴柱海南大学热带生物资源教育部重点实验室海口570228 海南大学药学院海口570228

为探讨人硫氧还蛋白hTrx-1活性位点保守序列中Gly33残基在还原氧化性蛋白过程中是否必不可少,通过合成突变基因对hTrx-1的Gly33残基进行缺失和替换(G→A)。合成的突变基因随后在原核细胞中表达并进一步纯化及检测抗氧化活性,结果表明,... 详细信息

为探讨人硫氧还蛋白hTrx-1活性位点保守序列中Gly33残基在还原氧化性蛋白过程中是否必不可少,通过合成突变基因对hTrx-1的Gly33残基进行缺失和替换(G→A)。合成的突变基因随后在原核细胞中表达并进一步纯化及检测抗氧化活性,结果表明,无论是Gly33残基的缺失还是突变为Ala,突变的hTrx-1均能在原核细胞中高效表达,暗示2种突变型hTrx-1均能形成“Trx折叠”结构。抗氧化活性检测表明Gly33残基缺失的情况下,其抗氧化能力有所下降,当Gly33突变为Ala时,其抗氧化能力大幅下降到接近失去抗氧化能力。推测Trx-1活性中心保守氨基酸残基的改变影响了活性中心区域的几何构象,从而导致底物蛋白难以从空间上靠近。参与形成二硫键巯基的含量检测结果表明,突变型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量明显低于野生型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量,推测突变型hTrx-1的Cys32与Cys35形成二硫键的能力受到影响。

关键词：硫氧还蛋白1 Trx折叠 Gly33 抗氧化二硫键

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长鼻粗吻海龙中一个新天然产物化学成分研究

中药材 2024年 1683-1687页

作者：陈浩蔡月徐春丽刘贵金邓世明海南大学热带生物资源教育部重点实验室/海南大学药学院海南省疾控中心

目的:研究海龙科动物长鼻粗吻海龙Trachyrhamphus longirostri Kaup的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱和半制备HPLC对长鼻粗吻海龙85%乙醇提取物的石油醚萃取部位进行分离纯化,根据化合物理化性质和波谱数据进行... 详细信息

目的:研究海龙科动物长鼻粗吻海龙Trachyrhamphus longirostri Kaup的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱和半制备HPLC对长鼻粗吻海龙85%乙醇提取物的石油醚萃取部位进行分离纯化,根据化合物理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从长鼻粗吻海龙中分离得到10个甾体类化合物,分别鉴定为:胆甾-3β,5α,6β-三醇-3-甲酸酯(1)、胆甾醇甲酸酯(2)、胆甾-4-烯-3-酮(3)、胆甾醇(4)、 3β-羟基-胆甾-5-烯-7-酮(5)、6β-羟基-胆甾-4-烯-3-酮(6)、胆甾醇-5α,6α-环氧化物(7)、胆甾-5-烯-3β,7α-二醇(8)、胆甾-5-烯-3β,7β-二醇(9)、3β,5α,6β-三羟基胆甾烷醇(10)。结论:其中,化合物1为新天然产物,化合物2、5～7为首次从该属动物中分离得到。

关键词：长鼻粗吻海龙化学成分结构鉴定甾体

超声辅助复合酶法提取长茎葡萄蕨藻藻渣多糖及其降脂功能

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现代食品科技 2024年

作者：刘忠群谢晓岑罗晶晶谢曦彭宏王蓉宋彦廷胡文婷海南多萄纤生物科技有限公司海南大学药学院热带生物资源教育部重点实验室

该研究探讨了优化超声波辅助复合酶法从长茎葡萄蕨藻藻渣中提取多糖的工艺条件，并探究其降脂功能。以长茎葡萄蕨藻藻渣为原料，在单因素试验的基础上，利用响应面法优化提取多糖的最佳参数；通过与胆酸盐的结合能力在体外评价长茎葡萄... 详细信息

该研究探讨了优化超声波辅助复合酶法从长茎葡萄蕨藻藻渣中提取多糖的工艺条件，并探究其降脂功能。以长茎葡萄蕨藻藻渣为原料，在单因素试验的基础上，利用响应面法优化提取多糖的最佳参数；通过与胆酸盐的结合能力在体外评价长茎葡萄蕨藻藻渣多糖降脂作用；采用高脂饮食诱导小鼠建立高脂血症模型，以长茎葡萄蕨藻藻渣多糖灌胃干预，4周后评价其体内降脂效果。长茎葡萄蕨藻藻渣多糖的最佳提取条件为复合酶（中性蛋白酶:木聚糖酶:纤维素酶=1:1:1）质量分数2.5%，酶解温度48℃，酶解时间123min，多糖得率可达36.62%，质量分数为87.20%。长茎葡萄蕨藻藻渣多糖（10mg/mL）与胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠结合率分别为86.56%、89.47%、84.26%和64.68%。与模型组比较，长茎葡萄蕨藻藻渣多糖（200、400 mg/kg）显著减轻小鼠体质量（11.29%、15.38%），降低脂肪系数（4.07%、3.18%）及血清中TG(59.87%、68.42%)、TC(28.24%、39.08%)和LDL-C(34.93%、49.28%)水平，提高HDL-C(52.67%、99.00%)水平。优化得到的超声波辅助复合酶法提取长茎葡萄蕨藻藻渣多糖的条件合理可靠，所得多糖有较强的结合胆酸盐能力，对高脂饮食诱导的高血脂症具有预防作用。

关键词：长茎葡萄蕨藻藻渣多糖胆酸盐降脂

虾青素对槟榔碱诱导的口腔上皮损伤的保护效应及机制初探

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现代食品科技 2024年

作者：陈琳琳谢金梅张榕芮石宇晴常秀亭谢曦海南大学药学院热带生物资源教育部重点实验室海南大学食品科学与工程学院海南大学生命健康学院

探索虾青素（AST）对槟榔碱（ARC）诱导的口腔上皮损伤的保护效应及其作用机制。建立ARC诱导的大鼠口腔黏膜损伤模型，观察大鼠口腔黏膜组织病理学形态及人早期生长反应因子1(EGR1)的变化。测定ARC诱导的人正常口腔上皮角质（HOK）细胞... 详细信息

探索虾青素（AST）对槟榔碱（ARC）诱导的口腔上皮损伤的保护效应及其作用机制。建立ARC诱导的大鼠口腔黏膜损伤模型，观察大鼠口腔黏膜组织病理学形态及人早期生长反应因子1(EGR1)的变化。测定ARC诱导的人正常口腔上皮角质（HOK）细胞中紧密连接相关蛋白ZO-1和Occludin、线粒体形态、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性氧（mtROS）和EGR1的变化。通过分子对接预测AST与EGR1的结合情况。大鼠口腔黏膜组织病理切片显示，与模型组相比，AST干预组中口腔黏膜上皮变薄、钉突变短症状有所改善，黏膜下相对胶原面积及CollagenⅠ面积显著降低9.84%、23.01%。细胞实验结果显示，AST改善了ARC诱导的HOK细胞ZO-1和Occludin蛋白定位异常、线粒体形态损伤、MMP下降及mtROS生成过多。此外，AST抑制ARC诱导的EGR1高表达，细胞水平上能显著下调24.53%。分子对接结果显示AST与EGR1的对接结合能为-6.8697 kcal/mol，存在两个氢键作用。综上所述，AST可能通过调控EGR1和线粒体功能从而改善ARC诱导的口腔黏膜损伤，有望开发成为保护口腔黏膜的功能性食品。

关键词：虾青素槟榔碱口腔上皮损伤早期生长反应因子1 线粒体功能

饲料磷水平对虎龙杂交斑生长、骨矿化及肝脏、血液相关生理生化指标的影响

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中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2024年

作者：周智愚邓银生张金枫梁程锦吴小易海南大学/海南省热带水生生物技术研究重点实验室海南大学/南海海洋资源利用国家重点实验室

本文旨在探究饲料不同磷（P）水平对虎龙杂交斑生长、骨矿化及肝脏、血液相关生理生化指标的影响。实验设计了7组以干物质计，其等能（以每100 g计）、等蛋白、等脂分别为1 421.2 kJ、47%、8%的实验饲料，饲料中磷的实测值分别为1.05%、... 详细信息

本文旨在探究饲料不同磷（P）水平对虎龙杂交斑生长、骨矿化及肝脏、血液相关生理生化指标的影响。实验设计了7组以干物质计，其等能（以每100 g计）、等蛋白、等脂分别为1 421.2 kJ、47%、8%的实验饲料，饲料中磷的实测值分别为1.05%、1.10%、1.20%、1.37%、1.52%、1.59%和1.70%，相应缩写为P1.05、P1.10、P1.20、P1.37、P1.52、P1.59及P1.70，每组3个平行。实验鱼[初始体质量（12.14±0.05） g]每日表观饱食投喂两次（8:00和16:30），养殖周期为6周。分析结果显示，P1.05组体质量增长率（WG）、特定生长率（SGR）和肥满度（CF）均极显著高于其他实验组（P实验组，但各组间无显著差异（P>0.05）。随着饲料磷水平升高，P1.05组血浆及肝脏碱性磷酸酶（ALP）、甘油三酯（TG）含量高于其他实验组，而全鱼灰分以及血浆、肝脏总胆固醇（TC）含量呈现相反趋势。P1.05组血浆钙（Ca）含量在各实验组中最高，而磷含量最低，脊椎骨Ca、P含量在P1.05组均低于其他实验组。P1.05组肝脏胰岛素样生长因子1(igf-1)基因表达水平显著高于其他实验组（P实验条件下，w=1.05%饲料磷水平已满足虎龙杂交斑幼鱼生长的需要，过高磷水平则会导致实验鱼生长下降。

关键词：虎龙杂交斑饲料磷水平生长骨矿化

南方灵芝(Ganoderma austral)引起榕树茎腐病在中国的首次报道

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植物病理学报 2024年

作者：吴进钧李增平张宇朱业飞刘芝妤付金鑫海南大学热带农林学院热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室

2022—2023年，本课题组在海南进行田间病害调查时，在黄葛榕（Ficus virens）、小叶榕（Ficus concinna）上发现了一种茎腐病，疑似由南方灵芝（Ganoderma austral）侵染引起。该病害的田间症状具体表现为：树冠一侧枝条的叶片部分失...

2022—2023年，本课题组在海南进行田间病害调查时，在黄葛榕（Ficus virens）、小叶榕（Ficus concinna）上发现了一种茎腐病，疑似由南方灵芝（Ganoderma austral）侵染引起。该病害的田间症状具体表现为：树冠一侧枝条的叶片部分失绿发黄，随后脱落，枝条枯死，继而蔓延到全株，造成树冠稀疏，最终整株枯死（图1-A, B）。在阴雨潮湿季节，病株茎干下部侧面可长出黄褐色半圆形的檐状子实体，内部组织呈白腐状（图1-C～F）。

关键词：