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卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育及移植结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第2期44卷 161-169页

作者：申春艳张建瑞杜姗姗管一春郑州大学第三附属医院生殖医学科郑州450052

目的探讨玻璃化冷冻卵母细胞行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎发育及妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析郑州大学第三附属医院生殖医学科2015年10月至2022年12月期间行ICSI助孕周期患者的临床... 详细信息

目的探讨玻璃化冷冻卵母细胞行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)对胚胎发育及妊娠结局的影响。方法回顾性队列研究分析郑州大学第三附属医院生殖医学科2015年10月至2022年12月期间行ICSI助孕周期患者的临床资料。纳入玻璃化冷冻卵母细胞解冻行ICSI助孕的周期95个(记为冷冻卵子组)和同期新鲜卵母细胞行ICSI助孕周期5830个(记为新鲜卵子组),冷冻卵子组按照冷冻方法分为二步法亚组与桥接法亚组。利用1∶3倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)后得到冷冻卵子组94个周期,新鲜卵子组282个周期,比较两组ICSI后受精、胚胎发育情况及移植后临床妊娠结局。采用多重线性回归分析影响卵子存活率的相关因素。结果PSM匹配后,冷冻卵子组的正常受精率[69.59%(572/822)]、正常卵裂率[95.63%(547/572)]、可利用胚胎率[74.41%(407/547)]、优质胚胎率[36.38%(199/547)]、可利用囊胚形成率[37.08%(89/240)]及卵子利用率[37.00%(407/1100)]均显著低于新鲜卵子组[74.26%(1875/2525),P=0.009;97.97%(1837/1875),P=0.002;84.65%(1555/1837),P0.05)。冷冻卵子组卵裂期胚胎移植数[(1.91±0.28)枚]和晚期流产率[10.53%(4/38)]显著高于新鲜卵子组[(1.72±0.45)枚,P=0.001;1.14%(1/88),P=0.048],卵裂期胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率及早期流产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。冷冻卵子组中二步法亚组的卵子存活率[55.95%(188/336)]、卵子退化率[6.38%(12/188)]、可利用囊胚形成率[5.08%(13/59)]及卵子利用率[26.49%(89/336)]与桥接法亚组[82.98%(634/764),P0.05)。多重线性回归分析影响卵子存活率的因素结果显示促排卵方案(β=-19.730,t=-2.06,P=0.043)、卵子冷冻数(β=-1.417,t=-3.10,P=0.003)及卵子玻璃化冷冻方法(β=33.872,t=5.04,P<0.001)对卵子存活率的影响差异具有统计学意义。结论卵母细胞玻璃化冷冻对胚胎发育造成了不利的影响,胚胎移植后妊娠结局与新鲜卵母细胞相似,但其围产期结局的安全性仍需要进一步的研究证实。

关键词：卵母细胞玻璃化冷冻胚胎发育胚胎移植

阴道微生物群失调对冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响:一项回顾性队列研究

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 456-462页

作者：刘曼曼张贺博徐诗联张瑞黄江笛杨如雪周梁任炳楠张俊韦刘朝朝张文娟管一春郑州大学第三附属医院生殖医学科郑州450052

目的探讨阴道微生物群失调对全胚胎冷冻首次行冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)患者妊娠结局及单胎妊娠活产FET患者围产期结局的影响。方法采用回顾性队列研究收集2021年1月至2022年12月期间于郑州大学第三附属医院生... 详细信息

目的探讨阴道微生物群失调对全胚胎冷冻首次行冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)患者妊娠结局及单胎妊娠活产FET患者围产期结局的影响。方法采用回顾性队列研究收集2021年1月至2022年12月期间于郑州大学第三附属医院生殖医学科全胚胎冷冻首次行FET患者共2299个周期的临床资料,根据移植前阴道微生物群优势菌类型分为3组:对照组(优势菌为乳酸杆菌即革兰阳性杆菌,1849个周期)、革兰阴性杆菌组(191个周期)和革兰阳性球菌组(259个周期)。比较各组基线数据、妊娠结局。选取符合纳排标准的单胎妊娠活产FET患者,进一步分析各组的围产期结局。主要观察指标为活产率、流产率及早产率。多因素logistic回归模型矫正主要观察指标的混杂因素,分析阴道微生物群优势菌类型与活产率、流产率及早产率的关系。结果对照组、革兰阴性杆菌组和革兰阳性球菌组移植日子宫内膜厚度差异具有统计学意义[分别为(9.38±1.58)mm、(9.56±1.70)mm、(9.84±1.74)mm,P0.05)。多因素logistic回归模型矫正女方年龄、不孕年限、基础卵泡刺激素、抗苗勒管激素、单胚胎移植占比、单囊胚移植占比、移植日内膜厚度、内膜准备方案后,革兰阳性球菌是FET后活产的独立危险因素(a OR=0.73,95%CI:0.55~0.95,P=0.021)。结论胚胎移植前阴道微生物群优势菌为革兰阳性球菌可能与首次FET患者活产率降低相关,而与单胎妊娠活产FET患者围产期结局无明显相关性。

关键词：生殖技术,辅助胚胎移植妊娠结局阴道微生物群失调活产率

染色质重塑因子对哺乳动物配子发生及早期胚胎发育进程影响的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第2期44卷 201-204页

作者：洪仁芸梁元姣东南大学附属中大医院生殖医学科南京210009

真核生物中染色质重塑因子种类繁多,根据ATP酶和其他组成蛋白亚单位的不同大致可以分为四类:SWI/SNF、ISWI、CHD和INO80。不同的染色质重塑因子在不同的层面通过对染色质结构的改变来影响基因转录调控等,以确保细胞内各种生物学进程的... 详细信息

真核生物中染色质重塑因子种类繁多,根据ATP酶和其他组成蛋白亚单位的不同大致可以分为四类:SWI/SNF、ISWI、CHD和INO80。不同的染色质重塑因子在不同的层面通过对染色质结构的改变来影响基因转录调控等,以确保细胞内各种生物学进程的准确运行。目前,关于染色质重塑因子在哺乳动物配子发生及早期胚胎发育过程中发挥作用的研究尚不普遍。本文将以四类染色质重塑因子为切入点对此进行简单综述,为深入了解染色质重塑因子在生殖发育等方面的功能提供理论依据。

关键词：染色质重塑因子配子发生早期胚胎发育哺乳动物

让生命“落地”,是我的使命——访上海交通大学医学院附属第一人民医院生殖医学科主任贺小进

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康复 2024年第7期 24-26页

作者：张灵无不详上海交通大学医学院附属第一人民医院生殖医学科

贺小进主任的诊室外一直人头攒动,许多“求子”者慕名而来,等着向他咨询情况。尽管求诊者众多,但贺小进一直面带笑容,不紧不慢地为他们一一解答,给出接下来的干预方案。忙碌而充实,是贺小进的工作常态;为家庭缔造一个新生命的希望,让一... 详细信息

贺小进主任的诊室外一直人头攒动,许多“求子”者慕名而来,等着向他咨询情况。尽管求诊者众多,但贺小进一直面带笑容,不紧不慢地为他们一一解答,给出接下来的干预方案。忙碌而充实,是贺小进的工作常态;为家庭缔造一个新生命的希望,让一批批夫妇顺利从生殖医学科“毕业”,是他的从医信念。走过的每一步,都满怀对一生命的敬畏和热爱。

关键词：生殖医学干预方案上海交通大学医学院落地生命

复发性流产生殖道感染病原学和蜕膜组织TLR4、MIF、bax/bcl-2表达水平及其临床意义

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中华医院感染学杂志 2024年 2192-2196页

作者：李素叶王娇焦艳郭丹冀雪霞衡水市人民医院生殖医学科

目的探讨复发性流产(RSA)生殖道感染病原学和蜕膜组织中Toll样受体4(TLR4)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(bax)表达水平及其临床意义。方法选取2022年4月—2023年7月衡水市人民医院RSA再次妊... 详细信息

目的探讨复发性流产(RSA)生殖道感染病原学和蜕膜组织中Toll样受体4(TLR4)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)和Bcl-2相关蛋白(bax)表达水平及其临床意义。方法选取2022年4月—2023年7月衡水市人民医院RSA再次妊娠出现先兆流产患者103例为RSA组,根据生殖道感染情况分为感染组与未感染组,另选取正常早孕人流要求终止患者101例为对照组,实时荧光定量聚合酶链式反应测定蜕膜组织TLR4、MIF、bax/bcl-2 mRNA水平,Logistic回归分析RSA发生影响因素。结果 103例RSA患者共有52例发生生殖道感染,感染发生率为50.49%;RSA组蜕膜组织TLR4 mRNA、bax mRNA水平高于对照组,MIF mRNA、bcl-2 mRNA水平低于对照组,bax/bcl-2值高于对照组(P生殖系统感染、内分泌异常、TLR4高表达、高bax/bcl2值是RSA发生的危险因素,MIF高表达是防止RSA发生的保护因素;感染组蜕膜组织TLR4 mRNA、MIF mRNA、bax mRNA表达水平高于未感染组,bc/-2 mRNA表达水平低于未感染组,bax/bcl-2值高于未感染组(P生殖道感染可增加RSA发生风险,使患者TLR4、bax/bcl-2水平进一步升高。

关键词：复发性流产病原菌生殖道感染 Toll样受体4 巨噬细胞移动抑制因子细胞淋巴瘤基因-2

槲皮素通过抑制p38 MAPK/NOX4信号通路减轻H_(2)O_(2)诱导的人子宫内膜基质细胞氧化应激损伤

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四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 552-558页

作者：陈秀楠王瑞琦单红英周平李蓉北京大学第三医院生殖医学中心北京100191

目的探讨槲皮素对过氧化氢(hydrogen peroxide, H_(2)O_(2))诱导人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cells, HESCs)损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法体外培养HESCs,加入不同浓度的槲皮素(0、10、20和40μmol/L)作用... 详细信息

目的探讨槲皮素对过氧化氢(hydrogen peroxide, H_(2)O_(2))诱导人子宫内膜基质细胞(human endometrial stromal cells, HESCs)损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法体外培养HESCs,加入不同浓度的槲皮素(0、10、20和40μmol/L)作用24 h,验证给予不同剂量的槲皮素对正常子宫内膜细胞没有毒性,随后采用250μmol/L H_(2)O_(2)孵育细胞12 h,建立H_(2)O_(2)诱导的HESCs损伤模型。槲皮素预处理24 h,H_(2)O_(2)刺激HESCs后,CCK-8检测细胞活力,筛选有效的干预剂量,随后将HESCs分为空白组、H_(2)O_(2)模型组、H_(2)O_(2)+槲皮素组,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;AnnexinⅤ/PI双染,流式细胞术检测槲皮素对H_(2)O_(2)诱导HESCs凋亡的影响;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测相关蛋白NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4, NOX4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38 MAPK)及磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)表达。结果根据CCK-8实验结果,选择槲皮素20μmol/L为有效干预剂量。ROS检测显示,与空白组相比,H_(2)O_(2)模型组ROS的平均荧光强度升高(P<0.01),而与H_(2)O_(2)模型组相比槲皮素处理下调了ROS的平均荧光强度,减轻了氧化损伤(P<0.05)。细胞凋亡检测结果显示,H_(2)O_(2)模型组细胞凋亡率较空白组增加(P<0.01),而与槲皮素共同作用则逆转了细胞凋亡率的增加(P<0.05)。JC-1染色检测线粒体膜电位变化情况显示,与空白组相比,H_(2)O_(2)诱导所致的线粒体膜电位降低的细胞比例增加(P<0.01),而槲皮素处理后线粒体膜电位降低的细胞比例低于H_(2)O_(2)模型组(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组相比,H_(2)O_(2)模型组NOX4蛋白、p-p38 MAPK蛋白相对表达量升高(P<0.05);而加入槲皮素后,与H_(2)O_(2)模型组相比,NOX4蛋白、p-p38 MAPK蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论槲皮素预处理对H_(2)O_(2)诱导的HESCs氧化损伤具有保护作用,其机制可能是减少ROS过量累积以及抑制p38 MAPK/NOX4信号通路。

关键词：槲皮素子宫内膜基质细胞氧化应激细胞凋亡活性氧

基于AGE-RAGE信号通路探讨坤泰胶囊治疗多囊卵巢综合征模型大鼠的作用机制

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1082-1090页

作者：黄进格张健项瑞君吴元元何田玉赵梦妮王芳甘肃中医药大学甘肃兰州730000 兰州大学第二医院生殖医学科甘肃兰州730030

旨在探讨坤泰胶囊(Kuntai Capsules,KTC)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠的影响及可能的作用机制。将50只雌性SD大鼠随机分为5组:对照组,模型组,KTC低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组采用颈背... 详细信息

旨在探讨坤泰胶囊(Kuntai Capsules,KTC)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠的影响及可能的作用机制。将50只雌性SD大鼠随机分为5组:对照组,模型组,KTC低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组采用颈背部皮肤注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)联合高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导PCOS大鼠模型,造模28 d。将KTC溶于等量生理盐水,分别予以低(0.315 g·kg^(-1)·d^(-1))、中(0.63 g·kg^(-1)·d^(-1))、高(1.26 g·kg^(-1)·d^(-1))剂量进行灌胃,对照组和模型组均给予等量生理盐水,持续灌胃15 d。给药结束后,血糖仪测定空腹血糖(FBG);酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清空腹胰岛素(FINS)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH),计算LH/FSH比值和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫荧光法检测Ⅲ型胶原α1链(COL3A1)、凋亡因子Bcl-2关联X的蛋白(Bcl-2 associated X,Bax)和B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR,RT-PCR)检测卵巢组织中COL3A1、Bax、Bcl-2 mRNA表达水平。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠体质量、FBG、FINS、LH、T、LH/FSH、HOMA-IR水平均升高(P<0.05或P<0.01),FSH水平下降(P<0.05),其阴道脱落细胞可见大量白细胞,以动情间期为主;卵巢表面囊性突起较多,颗粒细胞层厚度减少,卵母细胞缺失;卵巢组织中COL3A1、Bax蛋白表达水平上升(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),卵巢组织中COL3A1、Bax mRNA表达水平上升(P<0.05)。与模型组相比,KTC低、中、高剂量组大鼠体质量、FBG、FINS、LH、T、LH/FSH、HOMA-IR水平均下降(P<0.05或P<0.01),KTC中、高剂量组FSH水平升高(P<0.05或P<0.01);KTC低、中、高剂量组大鼠逐渐出现稳定的动情周期;卵巢表面较光滑,卵巢组织可见卵母细胞及成熟卵泡,颗粒细胞层厚度增加;KTC低、中剂量组COL3A1蛋白表达水平下降(P<0.05或P<0.01),KTC低剂量组Bax蛋白表达水平下降(P<0.05或P<0.01)、Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0.01);KTC低剂量组COL3A1、Bax mRNA表达水平下降(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达水平上升(P<0.05)。综上所述,KTC通过调节AGE-RAGE信号通路,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,减少卵泡闭锁,促进胰岛素分泌,降低血糖和体质量,恢复血清激素水平,改善PCOS的症状,减轻卵巢形态学损伤,恢复卵巢功能,对PCOS的治疗具有重要价值。

关键词：多囊卵巢综合征坤泰胶囊 AGE-RAGE信号通路药物治疗

体外受精-胚胎移植患者中反复妊娠丢失的危险因素分析

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四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 724-730页

作者：曹亚聪李一鸣潘萍杜涛杨冬梓赵晓苗中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心广州510000 东莞市妇幼保健院生殖免疫科东莞523000 广东省人民医院生殖医学科广州510000

目的探讨体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)患者发生反复妊娠丢失(recurrent pregnancy loss, RPL)的危险因素。方法本研究采用回顾性病例对照设计,纳入2012年1月–2021年3月在中山大学孙逸仙纪念... 详细信息

目的探讨体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)患者发生反复妊娠丢失(recurrent pregnancy loss, RPL)的危险因素。方法本研究采用回顾性病例对照设计,纳入2012年1月–2021年3月在中山大学孙逸仙纪念医院进行IVF-ET的反复妊娠丢失患者作为病例组,因男性不育而行IVF-ET治疗的妇女为对照组。在最后一次流产后至少12周的首次月经周期前5 d采集患者空腹外周血,比较两组的临床特征及实验室相关指标,并采用单因素和多因素logistic回归模型分析可能影响RPL的潜在高危因素。采用线性趋势检验确定总睾酮(total testosterone, TT)水平与流产次数间的线性关系。结果与对照组相比,RPL组的年龄、体重指数及腰臀比(waist-to-hip ratio, WHR)均增加,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,RPL组的空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平及胰岛素抵抗指数的稳态评估模型升高(P0.05)。RPL组的中性粒细胞计数及中性粒细胞/淋巴细胞比值水平较对照组升高(P0.8(OR=2.30,95%CI:1.26~4.19)、FINS>10 mU/L(OR=4.50,95%CI:1.30~15.56)会增加RPL的风险(P<0.05)。TT水平的升高会降低RPL的发病风险(OR=0.59,95%CI:0.38~0.93,P=0.023)。线性趋势检验发现,TT与自然流产次数间存在线性相关关系(P_(trend)=0.003)。结论在接受IVF-ET的患者中,高龄、TT水平的降低、WHR升高及FINS水平升高是RPL的危险因素。

关键词：反复妊娠丢失睾酮胰岛素抵抗肥胖症

毛兰素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制

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中国药房 2024年第11期35卷 1339-1344页

作者：房丽娜李妍仪董超许丽丽史兆松李越东杨波许再超承德市中心医院生殖医学科河北承德067000

目的探究毛兰素(ERI)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制。方法通过皮下注射脱氢表雄酮构建PCOS大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为PCOS组,ERI低、中、高剂量组(10、20、40 mg/kg)和ERI高剂量+维替泊芬组(40 mg/... 详细信息

目的探究毛兰素(ERI)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制。方法通过皮下注射脱氢表雄酮构建PCOS大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为PCOS组,ERI低、中、高剂量组(10、20、40 mg/kg)和ERI高剂量+维替泊芬组(40 mg/kg ERI+10 mg/kg维替泊芬),每组10只;另取10只正常大鼠作为正常组。各给药组大鼠灌胃相应剂量的ERI和/或腹腔注射维替泊芬,PCOS组和正常组大鼠灌胃等体积的1%二甲基亚砜,每日1次,连续6周。给药结束后,检测各组大鼠体重和空腹血糖(FPG),血清中雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平,观察卵巢组织形态学变化,分析卵巢组织细胞凋亡情况,检测卵巢组织中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)]和HippoYAP信号通路相关蛋白[大肿瘤抑制激酶1(LATS1)、磷酸化LATS1(p-LATS1)、Yes相关蛋白(YAP)、磷酸化YAP(p-YAP)、转录共激活子因子PDZ结合基序(TAZ)]表达水平。结果与PCOS组比较,ERI低、中、高剂量组大鼠卵巢多囊特征减轻,闭锁卵泡数量减少,颗粒细胞层增厚,体重、FPG水平、T水平、LH水平、LH/FSH、囊性卵泡数量、细胞凋亡指数和Bax、Caspase-3、p-LATS1、pYAP蛋白表达水平均显著降低或减少(P<0.05),黄体数量、E2水平和Bcl-2、LATS1、YAP、TAZ蛋白表达水平均显著升高或增多(P<0.05)。与ERI高剂量组比较,ERI高剂量+维替泊芬组大鼠的上述指标变化均被抑制(P<0.05)。结论 ERI能促进PCOS大鼠卵巢颗粒细胞增殖,调节性激素水平,其作用机制可能与抑制Hippo-YAP信号通路有关。

关键词：毛兰素颗粒细胞多囊卵巢综合征 Hippo-YAP信号通路卵巢功能性激素