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半理性设计提升4-α-糖基转移酶歧化活性并应用于工业生产

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食品与发酵工业 2024年

作者：谢静雯李超慧韦猛赵伟张金祥山东福洋生物科技股份有限公司康彤(上海)生物研发有限公司

4-α-糖基转移酶（4-alpha-glucanotransferase， 4αGT）是一种多功能的糖基转移酶，在淀粉工业上具有广泛的应用，如淀粉改性及海藻糖、麦芽寡糖、大环糊精、糖原等淀粉深加工产品的制备。其中，以淀粉为原料制备海藻糖的工业生产过... 详细信息

4-α-糖基转移酶（4-alpha-glucanotransferase， 4αGT）是一种多功能的糖基转移酶，在淀粉工业上具有广泛的应用，如淀粉改性及海藻糖、麦芽寡糖、大环糊精、糖原等淀粉深加工产品的制备。其中，以淀粉为原料制备海藻糖的工业生产过程中，借助4αGT的歧化活性，能够减少葡萄糖、麦芽糖等副产物的含量，从而提升海藻糖产量。在该研究中，采用半理性设计策略对Synechocystis sp. PCC 6803来源4αGT进行了改造。研究基于HotSpot Wizard在线工具及残基所处空间位置选择突变热点，利用4-α-糖基转移酶水解淀粉产生透明圈的能力对18 000个转化子进行高通量筛选，确定了一个对4αGT活性起着关键性作用的位点，对其进行饱和突变，最终获得活性提升的突变体A470F，歧化活性较野生型提升了17%。在工业化生产的条件下，突变体A470F在海藻糖制备上，较野生型也有所提升。通过对突变位点附近底物通道及作用力进行分析，为4αGT的活性改造提供了理论支持，并且为淀粉糖工业的制造效率提升提供了新思路。

关键词：海藻糖 4-α-糖基转移酶半理性设计歧化活性

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塞拉菌素合成新工艺研究

中国现代应用药学 2024年第2期41卷 221-227页

作者：钟秀文张蕾黄友纯罗峰陈仁尔俞永平陈文腾浙江大学杭州310058 浙江荣耀生物科技股份有限公司浙江台州318000

目的改进塞拉菌素的合成工艺。方法以多拉菌素为起始原料,经二氧化锰氧化、一锅法脱糖肟化反应得到关键中间体25-环己烷基-25-去(1-甲丙基)-5-脱氧-5-(肟基)-阿维菌素B1a单糖,用乙腈和水混合溶剂重结晶,再通过氢化反应制得塞拉菌素。结... 详细信息

目的改进塞拉菌素的合成工艺。方法以多拉菌素为起始原料,经二氧化锰氧化、一锅法脱糖肟化反应得到关键中间体25-环己烷基-25-去(1-甲丙基)-5-脱氧-5-(肟基)-阿维菌素B1a单糖,用乙腈和水混合溶剂重结晶,再通过氢化反应制得塞拉菌素。结果中间体及目标产物结构均经^(1)H-NMR、^(13)C-NMR和HPLC-HRMS确证,总收率达53.2%,产物纯度97.1%。结论此工艺步骤简化,操作简便,收率高,成本较低,有应用于工业化生产的潜力。

关键词：塞拉菌素合成新工艺

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溴虫氟苯双酰胺与氟唑酰胺生物活性比较

农药 2024年第9期 680-684页

作者：唐剑峰韩君迟会伟王盈民宋文涛山东中农联合生物科技股份有限公司

[目的]明确作为γ-氨基丁酸（GABA）门控氯离子通道变构调节剂类杀虫剂的溴虫氟苯双酰胺和氟唑酰胺的生物活性差异。[方法]采用浸虫浸叶、喷雾法等测定2个杀虫剂对小菜蛾、二化螟、烟粉虱、桃蚜、西花蓟马和朱砂叶螨的生物活性。[结果]... 详细信息

[目的]明确作为γ-氨基丁酸（GABA）门控氯离子通道变构调节剂类杀虫剂的溴虫氟苯双酰胺和氟唑酰胺的生物活性差异。[方法]采用浸虫浸叶、喷雾法等测定2个杀虫剂对小菜蛾、二化螟、烟粉虱、桃蚜、西花蓟马和朱砂叶螨的生物活性。[结果]2个杀虫剂对小菜蛾、二化螟、烟粉虱、桃蚜和西花蓟马的LC50值均在1.7 mg/L以下，溴虫氟苯双酰胺杀虫活性相对更高。氟唑酰胺对朱砂叶螨活性较高，而溴虫氟苯双酰胺活性较低。[结论]2个药剂均可用于农业害虫的防治，氟唑酰胺还可用于害螨的防治。

关键词：氨基丁酸门控氯离子通道受体生物活性溴虫氟苯双酰胺氟唑酰胺

植物精油的生物学活性及其在仔猪生产上的应用

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中国饲料 2024年第1期 17-22页

作者：刁蓝宇张倚剑吴胜上海美农生物科技股份有限公司上海201800

自抗生素在养殖业中的应用受到限制以来,植物精油作为绿色、高效、安全的抗生素替代品在提高动物生产性能和养殖效益等方面受到越来越多的关注,目前已被广泛应用于动物生产中。断奶仔猪的肠道发育不完全,在饲养过程中受多种因素的影响... 详细信息

自抗生素在养殖业中的应用受到限制以来,植物精油作为绿色、高效、安全的抗生素替代品在提高动物生产性能和养殖效益等方面受到越来越多的关注,目前已被广泛应用于动物生产中。断奶仔猪的肠道发育不完全,在饲养过程中受多种因素的影响经常出现腹泻现象,影响生产性能。植物精油具有抑菌、抗氧化、抗炎等特性,能够有效改善断奶仔猪的肠道菌群结构、促进肠道健康发育、提高仔猪生长速度。本文从植物精油的理化特性、生物学活性及其在仔猪生产上的应用进行综述。

关键词：植物精油理化特性生物学活性仔猪生产

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抗体修饰DNA测序酶的开发及其运用

生物技术通报 2024年

作者：宋辉曹文刚肖晓文杜军北京擎科生物科技股份有限公司研究院湖北擎科生物科技有限公司研发部

【目的】开发一种新型DNA测序酶，解决一代测序技术应对复杂DNA结构模板所面临的主要挑战，如测序信号中断或测序信号快速衰减。【方法】从NCBI数据库中挖掘到了Taq DNA聚合酶和单链结合蛋白SSB基因信息，利用遗传融合、定点突变及基因... 详细信息

【目的】开发一种新型DNA测序酶，解决一代测序技术应对复杂DNA结构模板所面临的主要挑战，如测序信号中断或测序信号快速衰减。【方法】从NCBI数据库中挖掘到了Taq DNA聚合酶和单链结合蛋白SSB基因信息，利用遗传融合、定点突变及基因设计技术获得了一种新型的测序酶Sso-Sequenase。利用亲和层析和离子交换层析，获得了纯化的测序酶。利用抗体修饰技术改良了Sso-Sequenase的性能，并且利用STR技术对其热启动性能进行了表征。选取多组不同类型的复杂模板，采用一代技术对比分析了Sso-Sequenase测序酶试剂盒和传统BigDye测序试剂盒的测序表现。【结果】Sso-Sequenase在大肠杆菌中稳定表达，纯度达到95%以上，产量高达10.5 mg/L。当温度低于35℃时，Sso-Sequenase表现出热启动活性。在复杂模板的一代测序反应中，如重复序列、高GC和发夹结构等样本，Sso-Sequenase测序酶成功完成了所有样本的测序，序列的平均碱基质量QV大于20。相比而言，BigDye测序试剂盒在处理这些复杂样本时，多数样本测序信号出现了显著衰减或中断。【结论】开发了一种纯度好、产量高，兼具热启动活性的DNA测序酶Sso-Sequenase及测序试剂盒，显著提高了复杂DNA结构模板（重复序列、高GC和发夹结构）测序成功率。

关键词： DNA测序酶抗体修饰复杂模板测序

茶皂素及槐糖脂对紫草素脂质纳米粒子形成和稳定性的影响

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食品工业科技 2024年第3期45卷 65-74页

作者：何洁彭盛峰张军兵刘伟南昌大学食品学院江西南昌330047 江西丹霞生物科技股份有限公司江西鹰潭335000

紫草素(Shikonin)是一种具有多种生理活性的疏水性天然色素,为了提高其水溶性、稳定性和生物利用率,开发天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子。本课题以卵磷脂为原料,采用pH驱动法制备紫草素脂质纳米粒子,通过添加茶皂素或槐糖脂,... 详细信息

紫草素(Shikonin)是一种具有多种生理活性的疏水性天然色素,为了提高其水溶性、稳定性和生物利用率,开发天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子。本课题以卵磷脂为原料,采用pH驱动法制备紫草素脂质纳米粒子,通过添加茶皂素或槐糖脂,考察茶皂素或槐糖脂对紫草素脂质纳米粒子的形成以及不同环境稳定性的影响。实验结果表明,当卵磷脂与茶皂素(或槐糖脂)质量比为2:1时,茶皂素修饰的紫草素脂质纳米粒子(Saponin modified shikonin lipid nanoparticles,Sap-SLNP)的包封率达到99.01%,负载率达到5.06%,槐糖脂修饰的紫草素脂质纳米粒子(Sophorolipid modified shikonin lipid nanoparticles,Sop-SLNP)的包封率达到98.36%,负载率达到5.16%。两种天然表面活性剂修饰的紫草素脂质纳米粒子环境稳定性相近,热稳定性和光稳定性分别约是游离紫草素的2倍和1.6倍,在pH2~7以及离子浓度0~1000 mmol/L内依然保持较好的稳定性,经过反复冻融3次后粒径变化不大,包封率仍有85%左右,将近是无修饰脂质纳米粒子的2倍,并且经过4周储藏粒径基本不变,包封率仍有80%左右,约为无修饰脂质纳米粒子的1.7倍。此外紫草素的生物利用率显著提高,约是游离紫草素的3倍。

关键词：紫草素脂质纳米粒子茶皂素槐糖脂 pH驱动法稳定性

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钴掺杂叶片状沸石咪唑酯骨架结构材料实现磷酸盐快速去除

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中国环境科学 2024年第9期44卷 4929-4938页

作者：孙太焱彭海豪童婧向银萍徐峥勇杨朝晖熊炜平湖南大学环境科学与工程学院湖南长沙410082 湖南现代环境科技股份有限公司湖南长沙410004

为了减小水体富营养化的危害,提高吸附法除磷的效率,本文研究钴掺杂对于锌基叶片状沸石咪唑盐(Zn-ZIF-L)磷酸盐吸附能力的提升.本文采用间歇式吸附试验研究各个影响因素对于吸附的影响,采用XRD、XPS、FT-IR等研究材料的表面微观结构以... 详细信息

为了减小水体富营养化的危害,提高吸附法除磷的效率,本文研究钴掺杂对于锌基叶片状沸石咪唑盐(Zn-ZIF-L)磷酸盐吸附能力的提升.本文采用间歇式吸附试验研究各个影响因素对于吸附的影响,采用XRD、XPS、FT-IR等研究材料的表面微观结构以推测可能的吸附机理.发现当Zn和Co的初始摩尔比为9.5:0.5时,其吸附性能最好.掺杂后,在10min内吸附量增加55%,最大吸附量达到85.68mg/g,在不同温度、浓度、当pH值为4~8时、在不同阴离子以及腐殖酸环境下保持着较好的吸附性能.当初始浓度为10mg/L时,可吸附去除97%以上的磷,吸附剂在0.1mol/L的Cl^(-)或NO_(3)^(-)中仍能保持93%以上的吸附量.其中,P-OH与Zn-OH/Co-OH之间的化学键、静电相互作用和氢键相互作用在磷酸盐吸附中起主导作用.Co(0.5)-Zn-ZIF-L经过4次循环后仍能保持较高的吸附量.结果表明,Co(0.5)-Zn-ZIF-L能作为一种有效的吸附剂去除水体中的磷酸盐.

关键词：除磷钴掺杂叶片状沸石咪唑酯骨架结构材料

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新型杀线虫剂三氟杀线酯拓展应用及抗性风险初探

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农药 2024年第5期63卷 386-390页

作者：赵恭文刘杰袁雪赵宝修杨绎崔建华唐剑峰山东中农联合生物科技股份有限公司济南250100

[目的]拓展三氟杀线酯作用靶标和应用作物,初步分析三氟杀线酯的抗性风险。[方法]采用离体浸虫法、田间药效试验、酶活性测定等方法筛选三氟杀线酯作用靶标和应用作物,分析三氟杀线酯的抗性风险。[结果]拓展应用方面,20 mg/L三氟杀线酯... 详细信息

[目的]拓展三氟杀线酯作用靶标和应用作物,初步分析三氟杀线酯的抗性风险。[方法]采用离体浸虫法、田间药效试验、酶活性测定等方法筛选三氟杀线酯作用靶标和应用作物,分析三氟杀线酯的抗性风险。[结果]拓展应用方面,20 mg/L三氟杀线酯对南方根结线虫、拟禾本科根结线虫、大豆孢囊线虫、小麦孢囊线虫室内杀线活性达到100%,明显优于20 mg/L噻唑膦处理;田间有效成分用量为2250 g a.i./hm^(2)时,三氟杀线酯对黄瓜、番茄、大姜、火龙果根结线虫的防治效果也显著高于噻唑膦,防效均超过80%。抗性风险分析方面,三氟杀线酯对乙酰胆碱酯酶抑制作用较弱,作用机理与噻唑膦不同;在噻唑膦高抗性区域,三氟杀线酯对黄瓜根结线虫依然有很好的防治效果,防效超过80%;三氟杀线酯和噻唑膦处理南方根结线虫后的中毒状态明显不同。[结论]三氟杀线酯是一种应用范围广,且与噻唑膦不存在交互抗性风险的新型杀线虫剂。

关键词：三氟杀线酯根结线虫杀线虫剂拓展应用抗性风险

西方饮食饲料对APOE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化造模的影响

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中国比较医学杂志 2024年第7期34卷 29-38页

作者：王蕾宋辉欠李斌梁超陈敏田玉淑吴旭颖张文明刘云波北京华阜康生物科技股份有限公司北京102202

目的为了研究西方饮食饲料快速建模及对APOE^(-/-)小鼠生物学指标及组织病理学的影响。方法用48♀48♂APOE^(-/-)小鼠、48♀48􀳜C57BL/6J进行了试验,分为8组,分别为APOE^(-/-)普通繁殖料组(24♀24♂)和APOE^(-/-)西方饮食饲料组(24♀24... 详细信息

目的为了研究西方饮食饲料快速建模及对APOE^(-/-)小鼠生物学指标及组织病理学的影响。方法用48♀48♂APOE^(-/-)小鼠、48♀48􀳜C57BL/6J进行了试验,分为8组,分别为APOE^(-/-)普通繁殖料组(24♀24♂)和APOE^(-/-)西方饮食饲料组(24♀24♂)、C57BL/6J普通繁殖料组(24♀24♂)和C57BL/6J西方饮食饲料组(24♀24♂)。从3周开始饲喂,直到20周实验结束。实验结束后采集血清检测生化指标,分离主动脉做大体油红O染色及分析,主动脉根部做石蜡切片和HE染色。结果西方饮食没有显著增加APOE^(-/-)体重,但可以显著提高APOE^(-/-)鼠的血脂指标、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白,促进动脉粥样硬化斑块的形成,雄鼠适合主动脉大体斑块的造模,雌鼠适合主动脉弓根部斑块造模。结论西方饮食饲料可以促进APOE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化造模,增加主动脉斑块面积比,缩短建模时间,提高建模的均一性。

关键词： APOE^(-/-)小鼠西方饮食饲料动脉粥样硬化生化指标建模

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