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巨噬细胞极化在肝纤维化中的作用和调控机制以及中国传统医药的干预

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中国新药杂志 2024年第10期33卷 1021-1031页

作者：彭望霞陆华冠谢新刘建军湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地长沙410208

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究... 详细信息

肝巨噬细胞是肝脏中重要的免疫细胞,具有显著的异质性和可塑性。在肝脏慢性损伤条件下,驻留的肝巨噬细胞和被招募到损伤部位的外周单核细胞在肝微环境中各种因素的刺激下,被激活并极化为多种巨噬细胞表型,发挥不同的功能。近年来的研究表明,肝巨噬细胞极化对肝纤维化进程起关键的调节作用,但机制尚不完全清楚。本文综述了Notch、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smads、Janus激酶/信号传导及转录激活因子(JAK/STAT)和Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB(NF-κB)等信号通路调节巨噬细胞极化参与肝纤维化进程的分子机制。此外,中国传统医药具有多成分、多靶点的优势,对慢性肝病和肝纤维化具有良好的疗效,本文也综述了近年来中药方剂和单体化合物靶向肝巨噬细胞的抗纤维化作用机制,并为临床应用提出新的见解。

关键词：肝纤维化巨噬细胞极化中药复方单体化合物

加味百合地黄汤通过调控SDF-1/CXCR4轴对围绝经期抑郁症大鼠下丘脑炎性损伤的改善作用

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中成药 2024年第1期46卷 250-255页

作者：刘洋李翎熙周密吴敏学王宇红赵洪庆湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物国家重点实验室培育基地湖南长沙410208

目的探究加味百合地黄汤对围绝经期抑郁症(PDD)大鼠下丘脑神经炎性损伤的作用。方法大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(氟哌噻吨美利曲辛片,1.89 mg/kg)和加味百合地黄汤高、中、低剂量组(16.2、8.1、4.05 g/kg),每组10只,除正常组... 详细信息

目的探究加味百合地黄汤对围绝经期抑郁症(PDD)大鼠下丘脑神经炎性损伤的作用。方法大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组(氟哌噻吨美利曲辛片,1.89 mg/kg)和加味百合地黄汤高、中、低剂量组(16.2、8.1、4.05 g/kg),每组10只,除正常组外,其余各组均通过卵巢摘除(OVX)联合慢性不可预见性应激(CUS)建立PDD模型,给予相应剂量药物干预21 d。采用糖水偏好实验和旷场实验评价抑郁样行为,酶联免疫吸附法检测脑脊液炎症因子水平,HE染色观察下丘脑组织结构变化,免疫荧光染色、RT-qPCR、Western blot检测小胶质细胞Iba-1及SDF-1/CXCR4轴相关因子的表达。结果与模型组比较,加味百合地黄汤高剂量组抑郁样行为改善(P<0.01);下丘脑胞体肿胀、间隙增加、炎性浸润等病理损伤缓解;脑脊液中促炎因子IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05),抗炎因子IL-4、IL-10、IGF-1水平升高(P<0.01),Iba-1、SDF-1、CXCR4表达降低(P<0.05),PSD-95、BDNF、NGF表达升高(P<0.05)。结论加味百合地黄汤抗PDD的作用可能与其抑制SDF-1/CXCR4轴进而改善下丘脑神经炎性损伤有关。

关键词：加味百合地黄汤围绝经期抑郁症(PDD) SDF-1/CXCR4轴小胶质细胞下丘脑脑脊液

柴金解郁安神片调控ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的机制研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2489-2500页

作者：刘检刘林唐林赵洪庆杨蕙李薇孟盼王宇红湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心湖南长沙410007 抑郁类疾病中医药防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208 湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层(ACC)-腹侧海马(vHPC)谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制。首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒(AAV)定位注射至大鼠ACC脑区,并通过慢性温和不可预知性应激(CUMS... 详细信息

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层(ACC)-腹侧海马(vHPC)谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制。首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒(AAV)定位注射至大鼠ACC脑区,并通过慢性温和不可预知性应激(CUMS)联合孤笼饲养复制大鼠抑郁模型,实验设正常组、模型组、AAV空载组、AAV病毒组、AAV病毒+糖皮质激素受体(GR)阻断剂组、AAV病毒+趋化因子受体1(CX3CR1)阻断剂组、AAV病毒+柴金解郁安神片组,采用水迷宫(Morris water maze)、旷场(open-field)和强迫游泳(forced-swimming)实验联合动物行为分析系统评估大鼠抑郁样行为;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠ACC及vHPC脑区神经元形态结构变化;免疫荧光及核磷酸蛋白(c-Fos)检测大鼠ACC-vHPC谷氨酸能神经环路激活情况;高尔基染色和透射电镜检测大鼠vHPC神经元树突、树突棘及突触亚微结构变化;免疫荧光、Western blot分别检测大鼠vHPC谷氨酸能神经元细胞内突触重塑相关蛋白谷氨酸受体2A(GRIN2A)、谷氨酸受体2B(GRIN2B)、Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶2(MK2)、丝切蛋白(cofilin)表达水平。结果表明,谷氨酸能AAV病毒激活后模型组大鼠抑郁样行为表型、ACC及vHPC神经元形态结构、突触超微结构损伤更加加重,而GR、CX3CR1阻断剂均能不同程度逆转其异常改变,提示ACC脑区内胶质细胞GR/CX3CR1双信号介导的ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常激活可能与抑郁的发生发展密切相关。有趣的是,柴金解郁安神片也能显著抑制AAV病毒诱导的ACC-vHPC神经环路激活及Glu含量异常升高,同时有效逆转模型组大鼠进一步加重的抑郁样行为和vHPC谷氨酸能神经元突触重塑,并揭示其改善腹侧海马神经元突触损伤的分子机制可能与调控突触重塑相关信号NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin有关。综上,该文证实了柴金解郁安神片能有效调控ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常进而改善抑郁症大鼠腹侧海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制可能与调节突触相关NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin信号通路有关,这可能是其发挥抗抑郁作用的重要机制。

关键词：柴金解郁安神片抑郁症 ACC-vHPC神经环路突触重塑 NR/CaMKⅡ MK2/cofilin

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的通脉养心丸入血、入心脏组织成分分析及其质谱裂解规律研究

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中药药理与临床 2024年

作者：唐艳陈婷刘思琦陈婷湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南省中药粉体与创新药物研究省部共建国家重点实验室培育基地湖南中医药大学针灸推拿与康复学院省部共建组分中药国家重点实验室

目的：本研究采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术对通脉养心丸大鼠体内血清及心脏组织成分进行快速定性分析。方法：选择Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，采用正负离子模式下质谱扫描，根据样品采集... 详细信息

目的：本研究采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术对通脉养心丸大鼠体内血清及心脏组织成分进行快速定性分析。方法：选择Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，采用正负离子模式下质谱扫描，根据样品采集模式、一级质谱加合离子信息、二级碰撞能量、二级碎片信息等多级质谱信息对化合物进行鉴定分析。结果：从给药通脉养心丸血清中共鉴定出17个化合物，包括9个黄酮类、4个皂苷类、3个五环三萜类、1个有机酸类化合物。从心脏组织样本中共鉴定出3个化合物，包括2个黄酮类和1个皂苷类。结论：本研究辨析了通脉养心丸入血及心脏组织原型及其代谢成分，揭示了通脉养心丸化学成分群在体内变化和传递过程，为通脉养心丸的质量控制、临床应用以及新药研发提供实验依据。

关键词：通脉养心丸超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法定性分析体内化学成分

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北柴胡质量控制研究

中成药 2024年第7期46卷 2129-2133页

作者：于静波韩越艾启迪孙洋周梓洋刘赛虎张子浩舒慧王宇红湖南中医药大学科技创新中心/中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的对北柴胡质量进行控制。方法分析采用VenusilXBPC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;柱温35℃;检测波长210nm。建立HPLC指纹图谱,测定柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷D、柴胡皂... 详细信息

目的对北柴胡质量进行控制。方法分析采用VenusilXBPC_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;柱温35℃;检测波长210nm。建立HPLC指纹图谱,测定柴胡皂苷A、柴胡皂苷B2、柴胡皂苷C、柴胡皂苷D、柴胡皂苷E、柴胡皂苷F、6″-O-乙酰基柴胡皂苷A的含量,进行主成分分析。结果12批药材指纹图谱中有13个共有峰,相似度0.970~0.995。7种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9998),平均加样回收率90.75%~100.91%,RSD1.6%~4.0%。内蒙古、山西产药材中各成分含量接近。结论该方法精密、准确、稳定,可用于北柴胡质量评价。

关键词：北柴胡质量控制 HPLC指纹图谱含量测定主成分分析

柴金解郁安神片调控CaMKⅡ和Cofilin双信号通路改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑

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中国药理学通报 2024年 1523-1532页

作者：刘检唐林赵洪庆刘林杨蕙李薇孟盼王宇红湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心抑郁类疾病中医药防治湖南省重点实验室湖南中医药大学科技创新中心中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南中医药大学科技创新中心

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂... 详细信息

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂组、CX3CR1阻断剂组、CX3CR1激动剂组、柴金解郁安神片组、柴金解郁安神片联合GR激动剂组、柴金解郁安神片联合CX3CR1激动剂组,观察星形胶质细胞、小胶质细胞、前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)和海马神经元形态结构变化;检测ACC和海马谷氨酸能神经元激活及突触重塑情况;免疫荧光、Western blot分别检测海马谷氨酸能神经元内突触重塑相关谷氨酸受体2A(GRIN2A)、GRIN2B、CaMKII、MK2、Cofilin蛋白表达水平。结果柴金解郁安神片能明显改善胶质细胞、ACC和海马神经元损伤,并抑制ACC和海马谷氨酸能神经元异常激活,同时下调GRIN2A、GRIN2B、MK2蛋白,上调CaMKII、Cofilin蛋白,继而改善海马谷氨酸能神经元突触可塑性损伤和突触重塑。结论柴金解郁安神片能有效改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制与调节突触重塑相关NR/CaMKII、MK2/Cofilin信号通路有关。

关键词：抑郁症谷氨酸能神经元突触重塑 NR/CaMKⅡ MK2/Cofilin 柴金解郁安神片

柴金解郁安神片调控CaMKII和Cofilin双信号通路改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑

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中国药理学通报 2024年第8期40卷 1523-1532页

作者：刘检唐林赵洪庆刘林杨蕙李薇孟盼王宇红湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心湖南长沙410007 抑郁类疾病中医药防治湖南省重点实验室湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208 中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂组... 详细信息

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂组、CX3CR1阻断剂组、CX3CR1激动剂组、柴金解郁安神片组、柴金解郁安神片联合GR激动剂组、柴金解郁安神片联合CX3CR1激动剂组,观察星形胶质细胞、小胶质细胞、前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)和海马神经元形态结构变化;检测ACC和海马谷氨酸能神经元激活及突触重塑情况;免疫荧光、Western blot分别检测海马谷氨酸能神经元内突触重塑相关谷氨酸受体2A(GRIN2A)、GRIN2B、CaMKII、MK2、Cofilin蛋白表达水平。结果柴金解郁安神片能明显改善胶质细胞、ACC和海马神经元损伤,并抑制ACC和海马谷氨酸能神经元异常激活,同时下调GRIN2A、GRIN2B、MK2蛋白,上调CaMKII、Cofilin蛋白,继而改善海马谷氨酸能神经元突触可塑性损伤和突触重塑。结论柴金解郁安神片能有效改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制与调节突触重塑相关NR/CaMKII、MK2/Cofilin信号通路有关。

关键词：抑郁症谷氨酸能神经元突触重塑 NR/CaMKII MK2/Cofilin 柴金解郁安神片

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何首乌苷对大脑中动脉栓塞再灌注模型大鼠皮层线粒体自噬的调控作用及神经保护机制

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中草药 2024年第14期55卷 4771-4781页

作者：向韵黄丹雷昌周梓洋邱峰刘桐赫施佳仪谭开媚曾红雨易韬伍大华张秀丽湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208 湖南省中医药研究院附属医院湖南长沙410006

目的研究何首乌苷(2,3,5,4'-tetrahydroxyldiphenylethylene-2-O-glucoside,THSG)在脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CI/R)中对大鼠皮层神经元的保护作用。方法采用线栓法建立大鼠短暂性大脑中动脉栓塞再灌注(transient middle cerebral artery occlusion/reperfusion,tMCAO/R)模型。雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和THSG低、中、高剂量(10、20、40 mg/kg)组,每组10只。采用Longa 5分法评估神经功能缺损情况;TTC染色检测大鼠脑梗死体积百分比;苏木素-伊红(HE)染色检测神经元结构;Nissl染色检测Nissl小体数量;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62的蛋白表达;透射电镜观察皮层神经元线粒体自噬情况;免疫荧光检测神经元Parkin、LC3的表达。结果THSG显著降低了MCAO/R大鼠脑梗死体积百分比和神经功能缺损评分(P<0.05、0.001),降低了MCAO/R大鼠皮层神经元结构损伤和Nissl小体丢失的现象,下调了皮层区cleaved Caspase-3、Bax、p62蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),上调了皮层区Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达(P<0.01),促进皮层神经元中自噬体的数量增加以及PINK1、Parkin蛋白表达(P<0.05、0.001)。结论THSG能显著改善MCAO/R大鼠皮层神经元损伤,其神经保护机制与促进PINK1/Parkin依赖性线粒体自噬途径有关。

关键词：何首乌苷脑缺血再灌注皮层线粒体自噬 PINK1/Parkin通路

基于谱效关系及活性验证的百合地黄汤抗抑郁成分研究

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药学学报 2024年第5期59卷 1364-1373页

作者：胡超赵洪庆刘检王璐杨磊张水寒唐林湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208 湖南省中医药研究院湖南长沙410208

本研究通过谱效相关分析及活性验证探明百合地黄汤抗抑郁的药效成分。利用不同溶剂分次提取并结合HPLC和UHPLC-MS分析方法对百合地黄汤不同提取部位化学成分进行全面表征。动物实验方案经湖南中医药大学动物伦理委员会审查通过(审查号为... 详细信息

本研究通过谱效相关分析及活性验证探明百合地黄汤抗抑郁的药效成分。利用不同溶剂分次提取并结合HPLC和UHPLC-MS分析方法对百合地黄汤不同提取部位化学成分进行全面表征。动物实验方案经湖南中医药大学动物伦理委员会审查通过(审查号为LLBH-202104270001),所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。采用旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验等经典行为学方法结合神经递质测定进行抗抑郁药效综合评价。整合三种相关分析方法进行谱效关联表征,以三种关联分析所得药效成分的交集为潜在药效成分,并进行了体外细胞实验验证。研究发现,王百合苷A、B、C、梓醇和异毛蕊花糖苷可能是百合地黄汤发挥抗抑郁作用的主要药效物质,同时也提示,多元化的谱效相关分析及活性验证有助于提升谱效相关分析结果的准确性。

关键词：百合地黄汤抑郁症谱效关系活性验证熵权-TOPSIS法 HPLC指纹图谱多指标药效评价