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多酶恒温快速扩增技术结合荧光探针快速检测日本血吸虫基因方法的建立

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第4期42卷 481-486页

作者：章乐生王旗汪峰峰朱海李清越马晓荷汪敏王毓洁汪天平操治国安徽省血吸虫病防治研究所安徽合肥230601

目的结合多酶恒温快速扩增技术(MIRA)和荧光探针法,建立一种快速检测日本血吸虫特异性基因片段的方法。方法以日本血吸虫非长末端重复序列反转录转座子(SjR2)片段为靶序列,设计并合成3对引物和荧光探针,建立荧光MIRA法反应体系,PCR检测... 详细信息

目的结合多酶恒温快速扩增技术(MIRA)和荧光探针法,建立一种快速检测日本血吸虫特异性基因片段的方法。方法以日本血吸虫非长末端重复序列反转录转座子(SjR2)片段为靶序列,设计并合成3对引物和荧光探针,建立荧光MIRA法反应体系,PCR检测,绘制扩增曲线。比较并筛选扩增效果较好的引物对和探针浓度;通过检测1 fg/µl、5 fg/µl、10 fg/µl、100 fg/µl、1 pg/µl和10 pg/µl等不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA,评价该法的灵敏度;提取卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫、东方次睾吸虫、颚口线虫及刚地弓形虫基因组DNA,并用荧光MIRA法检测,评价其特异度。耳缘静脉采集兔血,分离血清,制备含1 fg、5 fg、10 fg、100 fg、1 pg和10 pg日本血吸虫成虫DNA的兔模拟阳性血清并进行DNA提取,以荧光MIRA法检测,评估该法检测血清中日本血吸虫靶基因的最低限度。结果引物对1(SjR2‑1)的扩增效率较高,在反应第22个循环时(11 min)扩增出荧光产物,荧光值最高达170000;探针量为0.6µl/反应时具有较好的荧光强度和低荧光背景。建立的荧光MIRA法在39℃时第26个循环(13 min)时扩增出荧光产物,检测血吸虫成虫DNA的最低检出限为1 fg/反应。扩增产物电泳显示,血吸虫基因组DNA模板含量为10 pg、1 pg、100 fg、10 fg时,均有电泳条带出现,电泳显示的检测限为10 fg/反应,产物大小为186 bp。仅含有日本血吸虫成虫DNA的反应管出现荧光扩增曲线,检测卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫、东方次睾吸虫、颚口线虫及刚地弓形虫等基因组DNA未出现明显荧光扩增曲线。不同浓度的血吸虫DNA模拟阳性血清中,DNA含量为1 pg和10 pg时,有阳性扩增曲线出现,最快于第16个循环(8 min内)即出现阳性荧光扩增信号,该法检测模拟阳性血清中血吸虫成虫DNA的最低检测限为1 pg/反应。结论成功建立了一种检测日本血吸虫特异性基因片段的荧光MIRA法,该法反应快速、敏感性高、特异性强,具有潜在的日本血吸虫病诊断应用价值。

关键词：日本血吸虫多酶恒温快速扩增技术荧光探针基因片段

多酶恒温快速扩增技术（MIRA）结合荧光探针快速检测日本血吸虫基因方法的建立

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：章乐生王旗汪峰峰朱海李清越马晓荷汪敏王毓洁汪天平操治国安徽省血吸虫病防治研究所

目的结合多酶恒温快速扩增技术（MIRA）和荧光探针法建立一种快速检测日本血吸虫特异性基因片段的方法。方法以日本血吸虫SjR2基因片段为靶序列，设计并合成引物和荧光探针，建立荧光MIRA法反应体系。比较并筛选灵敏度较高的引物对，... 详细信息

目的结合多酶恒温快速扩增技术（MIRA）和荧光探针法建立一种快速检测日本血吸虫特异性基因片段的方法。方法以日本血吸虫SjR2基因片段为靶序列，设计并合成引物和荧光探针，建立荧光MIRA法反应体系。比较并筛选灵敏度较高的引物对，通过检测不同浓度的日本血吸虫成虫基因组DNA，对该法的敏感性进行评价；检测卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫、东方次睾吸虫、颚口线虫及弓形虫等基因组DNA，对该法的特异性进行评价。制备含1 fg、5 fg、10 fg、100 fg、1 pg和10 pg血吸虫成虫DNA的模拟阳性兔血清并进行DNA提取，以荧光MIRA法检测，评价该法检测血清中血吸虫特异性核酸的可行性。结果建立的荧光MIRA法在39℃时20 min内即可完成检测。该法检测日本血吸虫成虫基因组DNA的最低检测限为1 fg/反应；检测卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫、东方次睾吸虫、颚口线虫及弓形虫等基因组DNA结果均为阴性。该法检测模拟阳性血清中血吸虫成虫DNA的最低检测限为1 pg/反应。结论成功建立了一种检测日本血吸虫特异性基因片段的荧光MIRA法，该法反应快速、敏感性高、特异性强，具有应用于日本血吸虫病分子诊断的潜在价值。

关键词：日本血吸虫多酶恒温快速扩增技术荧光探针基因片段

基于加权秩和比法综合评价湖南省血吸虫病监测质量控制体系

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疾病监测 2024年第1期39卷 85-90页

作者：夏蒙周杰程湘晖李广平胡本骄李梅喻鑫玲李胜明邓奕罗振华湖南省血吸虫病防治所世界卫生组织湖区血吸虫病防治合作中心血吸虫病免疫与传播控制湖南省重点实验室湖南岳阳414000

目的建立湖南省血吸虫病监测工作质量控制体系,并采用加权秩和比法综合评价2021年湖南省血吸虫病监测工作质量,为制定血吸虫病防治策略提供科学依据。方法在湖南省41个血吸虫病流行县(市、区)随机抽取12个监测村(社区),采用实验室考... 详细信息

目的建立湖南省血吸虫病监测工作质量控制体系,并采用加权秩和比法综合评价2021年湖南省血吸虫病监测工作质量,为制定血吸虫病防治策略提供科学依据。方法在湖南省41个血吸虫病流行县(市、区)随机抽取12个监测村(社区),采用实验室考核与现场评价结合,对照湖南省血吸虫病监测工作质量指标体系,以层次分析法赋值各指标组合权重,根据专家论证结果构建工作质量评价体系层次结构模型,将每个二级指标利用现场数据进行赋值,得出每个评估单位的加权秩和比(RSRw)和RSRw拟合值,对血吸虫病监测质量进行综合评价和优劣排序。结果采用加权秩和比法从组织管理、能力建设、任务完成、数据管理和质量控制等5个方面综合评价2021年度湖南省血吸虫病监测工作质量。根据RSRw拟合值将2021年度湖南省血吸虫病监测质量综合评价结果分为“差”“良”和“优”3档,其中“优”档县(市、区)2个(>0.630),“良”档县(市、区)9个(0.417~0.630),“差”档县(市、区)1个(省血吸虫病监测工作质量评估,有助于今后湖南省血吸虫病监测工作质量的全面提升。

关键词：血吸虫病监测加权秩和比综合评价湖南省

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我国外来入侵生物福寿螺的物种鉴定

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 384-388,398页

作者：蒋玲赵永波李天美大理大学公共卫生学院云南大理671000 大理州血吸虫病防治研究所云南大理671000

福寿螺为我国外来入侵生物之一,是传播广州管圆线虫病的主要中间宿主,目前已在我国广泛扩散,并对入侵地的农林牧渔业生产、生态环境及人体健康造成严重威胁。准确、快速地鉴别福寿螺的种类是开展其入侵机制、扩散规律及种群遗传学等各... 详细信息

福寿螺为我国外来入侵生物之一,是传播广州管圆线虫病的主要中间宿主,目前已在我国广泛扩散,并对入侵地的农林牧渔业生产、生态环境及人体健康造成严重威胁。准确、快速地鉴别福寿螺的种类是开展其入侵机制、扩散规律及种群遗传学等各项研究的基础,并对制定与实施防治策略有重大意义。目前福寿螺的鉴定方式主要基于传统形态学及分子生物学,其中福寿螺的分子鉴定主要基于特异性引物PCR快速鉴别技术和DNA条形码技术,本文对福寿螺的物种鉴定方式进行综述。

关键词：福寿螺物种鉴定形态学分子鉴别

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柴油发动机故障与维修技术分析

中国机械 2024年第5期 80-84页

作者：杨年宝安徽省怀宁县血吸虫病防治站

近几年来，随着机械化水平提高，诸多设备对柴油机的应用性能、应用效果提出了全新的要求。在此背景下，相应的维修技术需要得到进一步升级，以此确保柴油机能在工业、农业、交通运输等领域中发挥重要作用。基于此，本文从实际故障维修... 详细信息

近几年来，随着机械化水平提高，诸多设备对柴油机的应用性能、应用效果提出了全新的要求。在此背景下，相应的维修技术需要得到进一步升级，以此确保柴油机能在工业、农业、交通运输等领域中发挥重要作用。基于此，本文从实际故障维修案例入手，总结经验、分析思路，明确具体的维修手段，促进维修工作发展，从而保证柴油机的正常运行，并且通过科学合理的维修工作延长使用寿命。

关键词：柴油机维修技术故障处理维修方式

杭州市西湖区首例境外输入性埃及血吸虫病病例报告

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中国血吸虫病防治杂志 2024年

作者：章华米苏幸张剑锋章颖怡浙江省杭州市西湖区疾病预防控制中心浙江省血吸虫病防治中心

本文报道了杭州市西湖区首例境外输入性埃及血吸虫病病例的诊治过程及流行病学调查情况。该患者为来自津巴布韦的留学生，无明显诱因出现反复肉眼血尿，膀胱镜检查发现膀胱肿块，病理切片示膜内见大量新鲜或钙化寄生虫虫卵，尿液离心沉... 详细信息

本文报道了杭州市西湖区首例境外输入性埃及血吸虫病病例的诊治过程及流行病学调查情况。该患者为来自津巴布韦的留学生，无明显诱因出现反复肉眼血尿，膀胱镜检查发现膀胱肿块，病理切片示膜内见大量新鲜或钙化寄生虫虫卵，尿液离心沉渣镜检发现埃及血吸虫虫卵，确诊为境外输入性埃及血吸虫病。此外，对该患者所在学校的境外留学生开展血吸虫病调查，经间接红细胞凝集试验及尿液和粪便病原学检查，检出1例输入性曼氏血吸虫病患者。建议加强境外流动人员血吸虫病健康教育和监测，并提高医疗和疾病预防控制机构专业人员输入性血吸虫病诊断能力，以防止发生误诊、误治。

关键词：埃及血吸虫病曼氏血吸虫病输入性病例留学生西湖区

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长江江滩堤防工程中钉螺控制措施的实施效果

医学动物防制 2024年第6期40卷 584-587页

作者：王帅匡义波曹毅军万燕左玉婷李洋罗华堂武汉市疾病预防控制中心湖北武汉430022 武汉市江夏区血吸虫病防治所

目的研究武汉市长江江滩堤防工程中钉螺控制措施实施后的灭螺效果,为长江江滩钉螺综合治理提供参考。方法在长江江夏段堤防工程建设中结合表面清障、药物灭螺、土地平整、填旧开新、植树抑螺等钉螺控制措施,对江滩有螺环境进行改造治理... 详细信息

目的研究武汉市长江江滩堤防工程中钉螺控制措施实施后的灭螺效果,为长江江滩钉螺综合治理提供参考。方法在长江江夏段堤防工程建设中结合表面清障、药物灭螺、土地平整、填旧开新、植树抑螺等钉螺控制措施,对江滩有螺环境进行改造治理。采用系统抽样法,分别于2021年4月(工程前)、2022年4月(工程1年后)开展两次钉螺调查。采用χ^(2)检验比较工程前后平均有螺框出现率和平均活螺率,采用Wilcoxon符号秩和检验(signed-rank test)比较活螺密度。结果长江江夏段堤防灭螺联合工程总长度为13120m,总面积为60.85m^(2)×104.00m^(2)。江滩堤防灭螺工程建设1年后,平均有螺框出现率下降了51.29%(χ^(2)=24.139,P<0.001)、活螺密度减少了73.86%(Z=-2.366,P=0.018)、平均活螺率均下降了11.84%(χ^(2)=26.556,P<0.001)。结论堤防工程中结合钉螺控制综合措施,能降低长江滩有螺环境的活螺密度,具有显著的抑螺效果。

关键词：血吸虫病长江堤防工程钉螺江滩

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静态拉伸对大鼠椎间盘髓核和纤维环的影响

中国组织工程研究 2024年第8期28卷 1180-1185页

作者：莫骏罗宗平江苏省血吸虫病防治研究所江苏省无锡市214064 苏州大学附属第一医院骨科研究所江苏省苏州市215006

背景:牵引在临床上用于椎间盘退变早期的治疗,但其对正常椎间盘的影响仍未可知,是直接造成椎间盘退变还是正向作用即是此次实验的观察要点。目的:建立大鼠尾椎椎间盘静态拉伸模型,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。方法:选用20... 详细信息

背景:牵引在临床上用于椎间盘退变早期的治疗,但其对正常椎间盘的影响仍未可知,是直接造成椎间盘退变还是正向作用即是此次实验的观察要点。目的:建立大鼠尾椎椎间盘静态拉伸模型,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。方法:选用20只3月龄SD大鼠,采用外固定装置静态拉伸大鼠尾椎7/8、8/9、9/10椎间隙1 mm,6/7、10/11椎间盘作为对照;拉伸2,4,6,8周随机抽取5只大鼠进行尾椎椎间盘MRI T2加权扫描、组织切片染色、合成分解代谢RT-PCR基因检测,观察静态拉伸对椎间盘髓核和纤维环的影响。结果与结论:①大鼠尾椎椎间盘经过短期静态拉伸后,椎间盘髓核区的T2加权像信号增强;②整个拉伸期间,髓核区域髓核细胞生长状态良好,细胞间基质含量丰富,纤维环排布整齐;③RT-PCR结果显示,拉伸之后蛋白多糖基因表达升高,基质金属蛋白酶3表达降低,Ⅰ、Ⅱ型胶原基因表达降低,基质金属蛋白酶13表达升高,基质金属蛋白酶抑制剂1表达升高,这些基因结果也进一步表明拉伸使得蛋白多糖更趋向合成代谢状态,Ⅰ、Ⅱ型胶原更趋向于分解代谢状态;④结果提示静态拉伸有助于促进髓核区域蛋白多糖的合成代谢,使得水分得以维持。

关键词：静态拉伸髓核纤维环 T2高信号蛋白多糖

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事业单位全过程预算管理存在的问题及对策

会计师 2024年第3期 61-63页

作者：何语西安徽省血吸虫病防治研究所

探讨了事业单位在全过程预算管理中存在的问题,深入分析问题的原因,并提出了相应的解决策略。包括重视预算编制的质量、强调预算执行的动态性、突出预算绩效的导向作用、加强审计监督等对策。

关键词：事业单位预算管理全过程