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延边地区羊腹泻大肠杆菌分离鉴定、毒力基因与耐药性分析

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内蒙古农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：陈明泽朴春光朴春浩张颖卢世豪崔京花芦静孟凡奇梁晚枫赵达卓延边大学农学院动物医学系和龙动物疫病预防控制中心汪清动物疫病预防控制中心延边州动物疫病预防控制中心南票区动物疫病预防控制中心

（目的）为解决困扰延边地区养殖户的羊大肠杆菌感染引起的腹泻问题，分离鉴定延边地区引起羊腹泻的大肠杆菌，并研究其致病性，耐药性以及毒力基因携带情况，为该病的治疗和预防提供参考依据。（方法）试验采集了反复发病羊场患病羊肛... 详细信息

（目的）为解决困扰延边地区养殖户的羊大肠杆菌感染引起的腹泻问题，分离鉴定延边地区引起羊腹泻的大肠杆菌，并研究其致病性，耐药性以及毒力基因携带情况，为该病的治疗和预防提供参考依据。（方法）试验采集了反复发病羊场患病羊肛拭子10份，对其进行培养、分离、鉴定，并利用荧光PCR 确定其致病性。对分离菌株进行毒力基因检测及K-B 纸片法耐药性分析。（结果）结果显示，从10份样品中分离出的10株大肠杆菌有9 株为致病性大肠杆菌；携带irp2、fyuA、stx1、FimC 等多种致病性较强的毒力因子；对磺胺异噁唑、多西环素、四环素等耐药，且部分分离株对其它药物也存在不同程度的耐药。（结论）延边地区羊腹泻大肠杆菌携带多种毒力基因且耐药性严重，这一现象需引起我们的高度重视，对延边地区养羊业临床上规范和合理使用抗生素治疗大肠杆菌具有指导意义。

关键词：羊大肠杆菌分离鉴定毒力基因耐药性

上海5家宠物医院环境不动杆菌的耐药性检测及一株皮特不动杆菌的测序分析

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微生物学通报 2024年

作者：张玉杰王晓旭徐锋沈莉萍鞠龚讷唐聪圣齐新永徐平王建上海市动物疫病预防控制中心

【背景】不动杆菌属细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性分析。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌... 详细信息

【背景】不动杆菌属细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性分析。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌分离、纯化后利用细菌鉴定质谱仪鉴定分离株种属，并通过微量肉汤稀释法检测不动杆菌属分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration， MIC)，并对其中1株耐碳青霉烯类分离菌进行基因组测序及遗传特征分析。【结果】730份环境样品共分离获得124株革兰氏阴性菌，经鉴定14株属于不动杆菌属(Acinetobacter spp.)，其中9株为鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)。14株不动杆菌对米诺环素均敏感，但其中2株皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)和2株鲁氏不动杆菌为碳青霉烯类多重耐药不动杆菌，5株鲁氏不动杆菌对复方新诺明耐药，1株约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)对环丙沙星耐药。基因组测序结果表明，碳青霉烯类多重耐药皮特不动杆菌携带NDM-1、OXA-500和OXA-727等相关耐药基因，多位点序列分型(multilocus sequence typing， MLST)结果表明分离株为ST1037型，单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism， SNP)分析该菌株与来源于浙江省的临床尿液分离株A. pittii AP43的进化距离最近。【结论】上海市5家宠物医院环境中的不动杆菌分离株耐药率较低(<40%)，存在多重耐药现象(5株不动杆菌分别耐≥3种药物)且皮特不动杆菌携带多种耐药基因。

关键词：宠物医院不动杆菌属碳青霉烯耐药性测序

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管碟法测定硫酸新霉素效价的方法优化

中国抗生素杂志 2024年第6期49卷 667-672页

作者：吴雨珊孙冰清张妤姜芹顾欣张文刚曹莹上海市动物疫病预防控制中心上海201103

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8... 详细信息

目的优化硫酸新霉素含量管碟法测定方法,增大新霉素抑菌圈直径大小,提高检测结果的准确性。方法按照《中国兽药典》2020版一部附录1200抗生素微生物(检定法)的实验基本要求,设置菌液麦氏浊度(0.5、1、2、3和>4 mcf)、培养基pH(7.6、7.8、8.0、8.2和8.4)、磷酸盐缓冲液中NaCl添加比例(0、3%、4%、5%、7%和9%)等变量进行含量测定,比较抑菌圈直径大小和可信限率等指标。结果在添加0.5%的菌液麦氏浊度为3 mcf的金黄色葡萄球菌液、培养基p H为8.0、缓冲液添加5%的Na Cl条件下,高剂量抑菌圈直径扩大至20 mm左右,抑菌圈边缘清晰,且符合《中国兽药典》可信限率的要求(不大于5%)。通过多产品多厂家的实样验证此条件稳定可靠。结论优化后的方法可用于硫酸新霉素常规效价含量的测定。

关键词：新霉素抗生素微生物检定法效价测定金黄色葡萄球菌

猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析

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动物医学进展 2024年第8期45卷 28-34页

作者：张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军北京市动物疫病预防控制中心北京102629 北京市平谷区动物疫病预防控制中心北京101200

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,... 详细信息

为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。

关键词：猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定 VP2基因遗传进化分析

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4种布鲁氏菌病胶体金试纸条的比较研究

中国动物传染病学报 2024年

作者：黄晓兵杨磊刘爱军倪柏锋孙思琪浙江省动物疫病预防控制中心

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条... 详细信息

旨在对比分析不同厂家布病胶体金法试纸条的检测效果，为牛羊定点屠宰场开展布病自检工作提供参考。本研究采用布病阳性血清标准品测定了4个厂家胶体金试纸条的Cut-off值，并通过对166份结果已知的家畜血清的检测，比较各个厂家试纸条的敏感性、特异性等评价指标。结果表明：4个厂家试纸条的Cut-off值为标准血清抗体含量2.5 IU/mL～10 IU/mL，敏感性为8%～100%，特异性为93.10%～100%，符合率为72.29%～96.39%，AUC值为0.54～0.97；配对卡方检验结果显示：除厂家A外，厂家B、C、D的结果与真实结果均有显著性差异（P＜0.05）。A厂家试纸条的检测结果与真实结果符合率为95.18%，成本-效果分析结果表明，4个厂家的C/E值分别为15.76、31.52、19.71和20.75，厂家A试纸条准确诊断1份样品的成本最低。故推荐使用A厂家的胶体金试纸条开展宰前动物布病的筛查工作。

关键词：布鲁氏菌病胶体金法初筛比较分析

禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

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中国家禽 2024年第5期46卷 118-124页

作者：刘颖昳胡迪刘倩倩迟盛仁刘琳王传彬顾小雪中国动物疫病预防控制中心北京102618

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果... 详细信息

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果显示:从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2~3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品(DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪)的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。

关键词：禽白血病病毒净化 ELISA p27抗原

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上海水牛的生长性能、屠宰性能及肉品质分析

中国草食动物科学 2024年

作者：齐丽娜陆雪林吴昊旻张文刚李先玉薛云周瑾章伟建上海市动物疫病预防控制中心

试验旨在测定上海水牛的生长性能、屠宰性能和肉品质，系统评价其肉用潜力。首先选取了6、12、30和60月龄的上海水牛进行了体尺测定，然后选取育肥后的上海水牛阉牛5头（30月龄）测定其屠宰性能及肉品质。结果表明， 30月龄试验牛平均... 详细信息

试验旨在测定上海水牛的生长性能、屠宰性能和肉品质，系统评价其肉用潜力。首先选取了6、12、30和60月龄的上海水牛进行了体尺测定，然后选取育肥后的上海水牛阉牛5头（30月龄）测定其屠宰性能及肉品质。结果表明， 30月龄试验牛平均胴体重271.80 kg±11.69 kg，净肉重193.80 kg±7.90 kg，骨重76.00 kg±4.50 kg，屠宰率（50.40±1.54）%，净肉率（35.94±0.95）%，胴体肉骨比2.57±0.12，眼肌面积81.79 cm2±7.31 cm2，嫩度10.05 kg/cm2±1.16 kg/cm2，pH0h值为6.03±0.15， pH24h值为5.51±0.01; 上海水牛牛肉每100 g平均含水量72.330 g±1.217 g，脂肪4.223 g±1.719 g，蛋白质21.460 g±0.578 g，总灰分1.388 g±0.220 g，总氨基酸17.210 g/100g±0.431 g/100g，总核苷酸241.800 mg/100g±15.320 mg/100g，总脂肪酸2.831 g/100 g±1.060 g/100 g。综上所述，上海水牛的屠宰率和净肉率较高、肉质良好，具有较好的肉用潜力。今后在加强上海水牛地方品种保护的同时，应重视开发利用，继续加强对其肉质风味特色的遗传改良，逐步扩大水牛肉消费市场，进一步提高产肉量。

关键词：上海水牛生长性能屠宰性能肉品质

超高效液相色谱-串联质谱法测定添加剂预混合饲料中3种异噻唑啉酮杀菌剂的研究

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饲料研究 2024年第17期 138-143页

作者：吴雨珊张婧吴剑平王博曹莹严凤上海市动物疫病预防控制中心

试验旨在建立添加剂预混合饲料中3种噻唑啉酮类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法（UPLC-MS/MS）。饲料样品经乙腈提取后，使用Prime HLB小柱净化，以SB-C18 （100 mm×3 mm,1.8μm）作为分析柱，甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱... 详细信息

试验旨在建立添加剂预混合饲料中3种噻唑啉酮类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法（UPLC-MS/MS）。饲料样品经乙腈提取后，使用Prime HLB小柱净化，以SB-C18 （100 mm×3 mm,1.8μm）作为分析柱，甲醇和水作为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾正离子模式下，进行检测；使用基质匹配外标法测定3种异噻唑啉酮类药物的含量，并对所建方法的线性关系、检出限、定量限、回收率、准确度、精密度等指标进行考察。结果显示，在0.25～500.00μg/L范围内线性关系良好，3种目标物的相关系数（R2）均大于0.990 0；检出限、定量限分别为10μg/kg和30μg/kg。3种异噻唑啉酮类药物的回收率在69.8%～99.9%之间，相对标准偏差（RSD）在4.2%～10.0%之间。研究表明，试验所用方法操作简单、灵敏度高且定量准确，适用于测定添加剂预混合饲料中3种异噻唑啉酮类药物含量，可为养殖环节投入品中异噻唑啉酮类药物污染筛查提供准确高效的技术手段，从源头保障动物源性产品安全。

关键词：添加剂预混合饲料超高效液相色谱-串联质谱异噻唑啉酮杀菌剂

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羊肠道病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王勤欧云文何博刘俐君达州职业技术学院开江县动物疫病预防控制中心达州市动物疫病预防控制中心

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有... 详细信息

为了建立一种快速的羊肠道病毒（CEV）抗体间接ELISA检测方法，试验采用原核表达系统对VP1蛋白进行体外表达，利用纯化后的重组蛋白建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示：VP1蛋白以包涵体形式表达，Western blot检测表明重组蛋白具有良好的反应活性，建立的间接ELISA方法检测BDV、BVDV、GPV、ORF、SPA阳性血清均为阴性，对CEV阳性血清的最低检出效价可达1︰25 600，与IFA方法的符合率为93.33%（28/30），检测四川地区816份羊血清样品的CEV阳性感染率达7.72%（63/816）。表明建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性，可用于CEV临床抗体检测及流行病学调查。

关键词：羊肠道病毒 VP1蛋白原核表达间接ELISA 抗体检测