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谷氨酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用研究进展

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动物营养学报 2024年第2期36卷 757-768页

作者：黄钰琴王力仪单体中浙江大学动物科学学院浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室杭州310058

氨基酸是蛋白质和小肽的基本组成单位,在动物生长、发育、免疫、繁殖及维持机体稳态等方面发挥着重要的作用。谷氨酸(Glu)是动物组织含量丰富的非必需氨基酸之一,在介导兴奋性神经传递、维持肠道功能完整性、调控机体能量稳态等过程中... 详细信息

氨基酸是蛋白质和小肽的基本组成单位,在动物生长、发育、免疫、繁殖及维持机体稳态等方面发挥着重要的作用。谷氨酸(Glu)是动物组织含量丰富的非必需氨基酸之一,在介导兴奋性神经传递、维持肠道功能完整性、调控机体能量稳态等过程中发挥重要作用。本文主要综述了Glu的理化性质、生理功能及其在畜禽生产上的应用研究进展,以期为今后Glu在畜禽生产上的开发利用提供参考。

关键词：谷氨酸氨基酸营养畜禽生长发育肉品质

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糖核苷酸的生物合成和应用

生物化学与生物物理进展 2024年第4期51卷 822-838页

作者：郝萌连佳琪张翠璐关婉怡河北师范大学分子细胞生物学教育部重点实验室河北省分子细胞生物学重点实验室河北师范大学生命科学学院石家庄050024

糖基化是生物体中最重要的反应之一,通过糖基化作用可以形成具有多种生物功能的糖缀合物。糖核苷酸作为Leloir型糖基转移酶催化的转糖基反应的糖基供体,在聚糖和糖缀合物的生物合成中必不可少。然而,糖核苷酸的成本较高、可用性有限等... 详细信息

糖基化是生物体中最重要的反应之一,通过糖基化作用可以形成具有多种生物功能的糖缀合物。糖核苷酸作为Leloir型糖基转移酶催化的转糖基反应的糖基供体,在聚糖和糖缀合物的生物合成中必不可少。然而,糖核苷酸的成本较高、可用性有限等因素阻碍了生物催化级联反应在工业中大规模的应用。因此,人们越来越关注糖核苷酸的合成策略,以实现其在多种领域的广泛应用。目前,糖核苷酸及其衍生物的化学合成方法已经建立起来,但合成反应的产量通常很低,而酶法(化学-酶法)和细胞工厂法在合成糖核苷酸过程中具有显著优势。本文主要围绕哺乳动物中常见的9种糖核苷酸,概述了其类型和结构、酶法(化学-酶法)和细胞工厂法两种制备方法。伴随糖核苷酸的高效合成,其多种功能逐渐被发现和应用。本文进一步概述了糖核苷酸在聚糖及糖缀合物合成、糖基转移酶生化性质表征以及生物正交标记策略等方面的应用,对生物化学、糖生物学的研究以及相关医药产品的研发具有十分重要的意义。

关键词：糖核苷酸糖基转移酶激酶焦磷酸化酶

饲粮电解质平衡的生物学作用及其在畜禽生产中的应用研究进展

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动物营养学报 2024年第7期36卷 4183-4190页

作者：沈雨甜付阳冯杰路则庆浙江大学动物科学学院绿色饲料与健康养殖国家工程研究中心农业农村部华东动物营养与饲料重点实验室浙江省饲料与动物营养重点实验室杭州310058

电解质是指在水溶液中能够解离成带电离子的化合物,其主要组成元素包括钠(Na^(+))、钾(K^(+))、氯(Cl^(-))、钙(Ca^(2+))、镁(Mg^(2+))等离子。饲粮电解质平衡(dEB)是指在畜禽饲粮中,不同电解质或正、负离子的含量和比例均达到适宜范围... 详细信息

电解质是指在水溶液中能够解离成带电离子的化合物,其主要组成元素包括钠(Na^(+))、钾(K^(+))、氯(Cl^(-))、钙(Ca^(2+))、镁(Mg^(2+))等离子。饲粮电解质平衡(dEB)是指在畜禽饲粮中,不同电解质或正、负离子的含量和比例均达到适宜范围,以满足动物的生理需求并维持其正常生理功能。作为饲粮配方设计的关键要素之一,适当的dEB值可以有效提高饲粮营养物质利用率,改善动物健康状况,促进生长发育,对提高养殖业的经济和社会效益具有重要意义。因此,本文旨在对dEB的生物学作用及其在畜禽生产中的应用研究进展进行综述,以期为养殖业的可持续发展提供参考。

关键词：畜禽电解质平衡生产性能营养代谢机体健康

丁酸钠和吲哚-3-丙酸共处理对Caco-2细胞紧密连接以及炎症因子的影响

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畜牧兽医学报 2024年

作者：王轲信吴娴龚海洲方巧玉李向臣张亚南浙江农林大学动物科技学院.动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室扬州大学动物科学与技术学院浙江大学动物科学学院动物分子营养学教育部重点实验室

本研究以人克隆结肠腺癌Caco-2细胞系为模型，旨在探究丁酸钠（sodium butyrate， NaB）和吲哚-3-丙酸（indole-3-propionic acid，IPA）共处理对Caco-2细胞紧密连接和炎症因子的影响。使用0.4 mmol·L-1NaB和0.1 mmol·L-1IPA处理Caco-2细胞24 h，检测细胞跨膜电阻（TEER）值、细胞紧密连接蛋白表达、炎症因子的基因表达和细胞上清液中炎症因子的分泌水平。结果发现，与NaB、IPA单独处理组相比，NaB和IPA共处理组均显著提高TEER值（P < 0.01）。qPCR和蛋白免疫印迹结果表明，与对照组相比，共处理组显著下调了Claudin-2的mRNA相对表达量（P < 0.01）；与NaB单独处理组相比，共处理组显著上调了Claudin-1的mRNA相对表达量（P < 0.05），并且极其显著促进了Claudin-1、ZO-1和Occludin蛋白的表达（P < 0.001）；与IPA单独处理组相比，共处理组显著上调了ZO-1的mRNA相对表达量（P < 0.05），并极其显著提高了Claudin-1和ZO-1蛋白表达量（P < 0.001）。在炎症因子方面，与对照组相比，NaB和IPA共处理组显著下调炎症因子IL-6、IL-1β、IL-8及TNF-α的mRNA相对表达量（P < 0.05）。ELISA结果显示，与对照组相比，共处理极其显著降低了细胞上清液中IL-6、IL-1β、IL-8及TNF-α的分泌量（P < 0.001）。本研究表明，相比于NaB或IPA单独处理，NaB和IPA共处理可增加细胞跨膜电阻值，促进细胞间紧密连接蛋白表达并且降低促炎因子的分泌，降低了肠道通透性。综上，NaB和IPA共处理在增强上皮细胞屏障功能以及降低炎症反应方面具有更强的作用。

关键词：丁酸钠吲哚-3-丙酸紧密连接炎症因子 Caco-2细胞

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猪SELW基因对骨骼肌卫星细胞分化的影响

农业生物技术学报 2024年第1期32卷 168-179页

作者：胡荣斌吴兴凤潘志洪李莉何逸懿徐娥贵州大学动物科学学院动物营养与饲料研究所/高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

硒蛋白W(selenoprotein W, SELW)是骨骼肌中重要的硒蛋白之一，对细胞分化等多种生物学功能具有重要作用，为探究SELW基因对猪(Sus scrofa)骨骼肌卫星细胞分化的影响。选取3头7日龄健康的大白猪，采集心、肝、脾、肺、肾、背肌、腿肌7... 详细信息

硒蛋白W(selenoprotein W, SELW)是骨骼肌中重要的硒蛋白之一，对细胞分化等多种生物学功能具有重要作用，为探究SELW基因对猪(Sus scrofa)骨骼肌卫星细胞分化的影响。选取3头7日龄健康的大白猪，采集心、肝、脾、肺、肾、背肌、腿肌7个组织样提取RNA,qPCR检测SELW基因在不同组织中的相对表达量。运用在线软件对猪SELW蛋白质进行生物信息学分析。克隆猪SELW基因(GenBank ***＿213977) CDS全长序列，构建过表达SELW基因重组慢病毒载体并感染骨骼肌卫星细胞，嘌呤霉素筛选获得SELW稳定表达细胞系，通过亚细胞定位确定SELW蛋白的表达部位，qPCR和Western blot检测SELW基因及蛋白的表达水平。收集诱导分化0和48 h的细胞样，qPCR检测配对盒子3基因(paired box3, PAX3)、PAX7、肌源性因子5基因(myogenic factor 5, MYF5)、生肌决定因子基因(myogenic determinant,MYOD)、肌细胞生成素基因(myocyte generating factor, MYOG)的表达量。结果表明，SELW基因在猪7个不同组织中均有表达，在心脏和背肌中表达量极显著高于其他组织(P分子式为C421H677N109O119S3Se1，相对分子质量为9 344.81 D，理论等电点为9.15，属于稳定蛋白质。遗传进化分析可知猪SELW基因与人(Homo sapiens)、恒河猴(Macaca mulatta)、苏门答腊猩猩(Pongo abelii)相似性最高。亚细胞定位结果表明，SELW蛋白定位于细胞核和细胞质。qPCR和Western blot检测SELW过表达效率，SELW-OE组表达量极显著高于SELW-NC组(P分子调控机制提供基础资料。

关键词：硒蛋白W(SELW) 重组慢病毒载体猪骨骼肌卫星细胞

黑种草子总生物碱对溃疡性结肠炎小鼠的抗炎作用

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中成药 2024年第7期46卷 2376-2381页

作者：周梦乔胡兴江张乔刘雪玲吴霞吴明兰李小冬李卫芬叶子奇浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院浙江省药物临床研究与评价技术重点实验室浙江省中药临床评价与转化研究中医药重点实验室临床药学部浙江杭州310003 浙江大学动物科学学院饲料科学研究所分子动物营养学教育部重点实验室浙江杭州310058

目的探索黑种草子总生物碱(TAN)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用。方法通过UPLC-TOF-MS/MS对TAN化学成分进行分析。体内实验建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型,分别给予SASP(200mg/kg)和TAN(2.5、5.0mg/kg),连续7d。给药结束后,... 详细信息

目的探索黑种草子总生物碱(TAN)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抗炎作用。方法通过UPLC-TOF-MS/MS对TAN化学成分进行分析。体内实验建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠UC模型,分别给予SASP(200mg/kg)和TAN(2.5、5.0mg/kg),连续7d。给药结束后,检测小鼠体质量、疾病活动指数、结肠长度、结肠病理损伤、IL-1β、IL-18、IL-6、NF-κB、IκBα蛋白表达及其磷酸化水平。体外实验建立LPS和Nigericin双重诱导的THP-1细胞模型,给予TAN(12.5、25、50μg/mL)和MCC950(NLRP3抑制剂,5μmol/L)处理,采用ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-18、IL-6水平。结果TAN主要由多种含量较大的特征型单体生物碱组成。TAN(2.5、5.0mg/kg)能改善DSS诱导的小鼠体质量减轻、疾病指数升高、结肠缩短和病理损伤,降低DSS所致的结肠炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6分泌及NF-κB、IκBα蛋白磷酸化水平。体外炎症模型证实,TAN可抑制LPS和Nigericin双重诱导的THP-1细胞上清中的IL-1β、IL-18、IL-6水平。结论TAN含有多种结构类似的单体生物碱,具有改善溃疡性结肠炎小鼠炎症的作用,该作用可能与其抑制NF-κB通路有关。

关键词：黑种草子总生物碱溃疡性结肠炎炎症 NF-κB

猪丁型冠状病毒ns7、ns7a蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 29-38页

作者：杨宛书李娟杜柳阳陈文镜周继勇顾金燕浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江杭州310058 浙江大学动物科学学院浙江杭州310058

为获得免疫原性好的猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)辅助蛋白ns7和ns7a,并制备特异性的多克隆抗体,以用于ns7和ns7a蛋白功能的初步研究,本试验构建原核表达载体pGEX-PDCoV-ns7和pGEX-PDCoV-ns7a,测序正确后转入*** BL21(DE3)中诱导表达。利用GST-Resin进行蛋白纯化,将获得的重组蛋白以皮下注射方式免疫BALB/c小鼠,成功制备4份PDCoV ns7和2份ns7a小鼠多克隆抗体,并用ELISA、Western blot和IFA对抗体效价、反应性及特异性进行鉴定。结果显示,本试验成功应用大肠杆菌表达了可溶性ns7和ns7a蛋白,制备的PDCoV ns7和ns7a多克隆抗体效价分别为1∶409600和1∶12800,并在Western blot和IFA试验中具有良好的反应性及特异性。结果表明,制备的PDCoV辅助蛋白ns7和ns7a多克隆抗体为深入研究ns7及ns7a蛋白的生物学功能提供了重要工具。

关键词：猪丁型冠状病毒辅助蛋白ns7和ns7a 原核表达多克隆抗体

猪圆环病毒2型Cap蛋白互作宿主核蛋白的筛选与鉴定

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中国兽医学报 2024年第1期44卷 20-28页

作者：余涛胡婧宇司维颜焰董伟仁顾金燕周继勇浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江杭州310058 浙江大学动物科学学院浙江杭州310058

为探究在猪圆环病毒2型(PCV2)入核复制过程中发挥生物学功能的宿主核相关蛋白,本研究借助免疫沉淀技术联合蛋白质谱鉴定技术,从宿主细胞核膜提取物中筛选到了可与PCV2 Cap蛋白发生潜在互作的2个蛋白质:高迁移率族蛋白1(HMGB1)和精氨酸酶... 详细信息

为探究在猪圆环病毒2型(PCV2)入核复制过程中发挥生物学功能的宿主核相关蛋白,本研究借助免疫沉淀技术联合蛋白质谱鉴定技术,从宿主细胞核膜提取物中筛选到了可与PCV2 Cap蛋白发生潜在互作的2个蛋白质:高迁移率族蛋白1(HMGB1)和精氨酸酶1(ARG1)。通过进一步的免疫共沉淀试验及激光共聚焦试验,证明了HMGB1、ARG1与PCV2 Cap蛋白的相互作用,且互作与Cap蛋白的核定位信号(NLS)无关。该研究为进一步探索PCV2入核复制的机制解析提供了重要信息。

关键词：猪圆环病毒2型入核 Cap蛋白互作高迁移率族蛋白1 精氨酸酶1

MXene基复合水凝胶在修复感染创面中的研究进展

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复合材料学报 2024年第7期41卷 3427-3441页

作者：吴晓娜汪宜宇赵凯黑龙江大学生命科学学院农业微生物技术教育部工程研究中心黑龙江省寒区植物基因与生物发酵重点实验室哈尔滨150080 台州学院生命科学学院浙江省植物进化生态学与保护重点实验室台州市生物医药与高端剂型重点实验室台州318000

感染创面严重危害着人类的生活质量甚至是生命健康,因此研发高效且副作用小的抗菌生物材料用于修复感染创面具有广阔的市场前景。二维过渡金属碳化物(MXene)是一种新型的二维片状材料,具有优异的抗菌性能,其抗菌机制主要包括物理捕获理... 详细信息

感染创面严重危害着人类的生活质量甚至是生命健康,因此研发高效且副作用小的抗菌生物材料用于修复感染创面具有广阔的市场前景。二维过渡金属碳化物(MXene)是一种新型的二维片状材料,具有优异的抗菌性能,其抗菌机制主要包括物理捕获理论、红外热效应、活性氧(ROS)生成理论、胞间分子泄露理论等,因此MXene有望成为一种更安全、有效、广谱的抗菌手段。通过水凝胶包裹MXene制成的MXene复合水凝胶比单纯水凝胶具有更佳的抗菌、抗氧化性以及光热效应等优势。本文综述了MXene的抗菌机制,并就近年来报道的MXene复合水凝胶修复感染创面的研究进行全面综述和总结。

关键词： MXene 复合水凝胶抗菌创面修复应用