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MiR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制

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解放军医学杂志 2024年

作者：李华锋张鸿毅肖克兵杨辉李子峰赵刚刚西安医学院第一附属医院泌尿外科

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，... 详细信息

目的　探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法　取对数生长期HK-2细胞，设置：(1)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达，Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染miR-15b-5p mimi和OE-NC质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimi和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达，Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达，CCK-8法检测细胞活性，TUNEL检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后进行H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后进行H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达，LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p和FOXO1之间的靶向关系。结果　倒置显微镜下观察显示，对照组细胞数量较多，细胞大多呈典型鹅卵石形态，铺路石状生长；H/R组大部分细胞收缩变圆，贴壁细胞数量明显减少；与对照组比较，H/R组miR-15b-5p相对表达水平明显降低，FOXO1 mRNA和蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3’-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活性，降低细胞凋亡，抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比，H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞活性降低，细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论　miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。

关键词： miR-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞缺氧/复氧自噬

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双侧输尿管肾源性腺瘤1例报告

中华泌尿外科杂志 2024年第2期45卷 148-149页

作者：周世英何书明海南医学院第二附属医院泌尿外科海口570311

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣... 详细信息

肾源性腺瘤发生于输尿管罕见。本文报道1例双侧输尿管肾源性腺瘤患者,术前CT检查示膀胱癌累及双侧输尿管壁内段和盆段。行膀胱镜活检,病理检查示肾源性腺瘤。行左侧输尿管镜检查+双侧输尿管下段切除术+右侧输尿管膀胱吻合术+左侧膀胱瓣输尿管下段成形术。术后病理诊断为肾源性腺瘤。术后随访26个月,患者无复发和转移。

关键词：输尿管输尿管肿瘤肾源性腺瘤

多模化仿生应力调节膀胱平滑肌细胞的生物学功能

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生物医学工程学杂志 2024年第2期41卷 321-327页

作者：韦堂墙陈林胡海峰杨进成都大学附属医院泌尿外科成都610081

以往研究表明,经过多代培养后的细胞会出现生长停滞、去分化和丧失原有功能等问题,其原因是缺乏应力刺激。为探讨多模化仿生应力(MMBS)对人膀胱平滑肌细胞(HBSMCs)生物学功能的影响,本实验建立了MMBS培养系统来模拟膀胱所受的应力环境,... 详细信息

以往研究表明,经过多代培养后的细胞会出现生长停滞、去分化和丧失原有功能等问题,其原因是缺乏应力刺激。为探讨多模化仿生应力(MMBS)对人膀胱平滑肌细胞(HBSMCs)生物学功能的影响,本实验建立了MMBS培养系统来模拟膀胱所受的应力环境,并对HBSMCs加载不同强度的仿生应力持续24 h,然后检测细胞生长、增殖及功能分化。结果显示,MMBS可以促进HBSMCs的生长和增殖,以80 cm H_(2)O压力附加4%牵张应力,对促进HBSMCs的生长、增殖以及α—平滑肌肌动蛋白和平滑肌蛋白22—α的表达最有效。综上,在构建组织工程膀胱时,MMBS培养系统将有助于调节HBSMCs的生长、增殖以及功能分化成熟。

关键词：组织工程膀胱平滑肌细胞应力细胞增殖细胞分化

P2X嘌呤能受体通道蛋白参与实体瘤进展的研究

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西安交通大学学报（医学版） 2024年第4期45卷 686-694页

作者：秦宇轩崔心刚上海交通大学医学院附属新华医院泌尿外科上海200092

腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是生物体内最普遍存在的供能物质,亦是一种重要的信号分子,肿瘤微环境中ATP的表达水平显著上调。嘌呤能受体离子通道P2X广泛分布多种组织内,微环境中ATP特异性激活P2X受体,调控门控离子通道开放... 详细信息

腺苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)是生物体内最普遍存在的供能物质,亦是一种重要的信号分子,肿瘤微环境中ATP的表达水平显著上调。嘌呤能受体离子通道P2X广泛分布多种组织内,微环境中ATP特异性激活P2X受体,调控门控离子通道开放,进而影响下游信号传导参与机体生理活动。而异常嘌呤能信号在肿瘤恶性进展中也发挥着重要作用。本文就P2X受体蛋白家族的结构、表达与功能特点,以及P2X受体家族参与多种实体瘤进展的机制和靶向P2X家族治疗肿瘤的研究进行了综述,以期丰富嘌呤能信号相关基础研究资料,为肿瘤临床治疗靶点的开发提供新思路和策略。

关键词： P2X嘌呤能受体蛋白肿瘤微环境 ATP 实体瘤靶向治疗

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中华泌尿外科杂志 2024年第3期45卷 161-167页

作者：徐云泽孔文曹明孙光曦赵劲歌刘嵩阳张志凌何立儒杨晓群张海洲徐烈雨于妍斐王杭祁洪刚许天源杨博袁易初陈东宁林登强周芳坚魏强薛蔚马鑫董培曾浩张进上海交通大学医学院附属仁济医院泌尿科上海200125 四川大学华西医院泌尿外科成都610041 中山大学附属肿瘤医院泌尿外科广州510030 上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科上海200025 无锡市惠山区第二人民医院泌尿外科无锡214000 江西省人民医院泌尿外科南昌330000 北京大学第一医院泌尿外科北京100034 复旦大学附属中山医院泌尿外科上海200030 浙江大学医学院第一附属医院泌尿外科杭州310003 同济大学附属第十人民医院泌尿外科上海200070 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植科武汉430030 浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科杭州310003 福建医科大学附属第一医院泌尿外科福州350000 复旦大学附属中山医院厦门医院泌尿外科厦门361009 解放军总医院泌尿外科北京100853

目的探讨我国遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征相关性肾癌(HLRCC-RCC)患者的临床特征以及系统治疗的有效性。方法去回顾性分析2008年1月至2021年12月在国内15家医疗中心基因诊断明确有FH胚系突变的119例HLRCC-RCC患者的临床资料。男73... 详细信息

目的探讨我国遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征相关性肾癌(HLRCC-RCC)患者的临床特征以及系统治疗的有效性。方法去回顾性分析2008年1月至2021年12月在国内15家医疗中心基因诊断明确有FH胚系突变的119例HLRCC-RCC患者的临床资料。男73例,女46例;中位年龄38(13,74)岁;中位肿瘤直径6.5(1.0,20.5)cm。I~Ⅱ期38例(31.9%),Ⅲ~V期81例(68.1%)。本组119例中11例同时表现为皮肤平滑肌瘤,46例女性HLRCC-RCC患者中44例有子宫肌瘤病史。总结患者的病理特点、治疗方法,以及患者预后生存情况。结果本研究119例中,共86例患者接受手术治疗,其中根治性肾切除术70例,肾部分切除术5例,减瘤性肾切除术11例;其余33例初诊转移患者行肾穿刺活检术。基因检测结果显示119例均存在FH基因胚系突变,其中94例FH基因点突变,18例FH基因插人/缺失突变,4例FH基因剪接突变,2例FH基因大片段缺失,1例FH基因拷贝数变异。免疫组化染色结果显示113例患者2-SC强阳性,FH阴性。本组共102例患者接受系统治疗,包括44例初诊转移患者和58例术后转移患者。其中酪氨酸激酶抑制剂(TKI)联合免疫检查点抑制剂(ICI)治疗组33例,贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组8例,TKI单药治疗组61例。所有患者均获得随访,中位随访时间17(3,82)个月。生存分析结果显示TKI联合ICI治疗组中位PFS为18(5,38)个月,中位OS未达到;贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组中位PFS为12(5,14)个月,中位OS为30(10,32)个月;TKI单药治疗组中位PFS为10(364)个月,中位OS为44(10,74)个月。TKI联合ICI治疗组的PFS(P=0.009)和OS(P=0.006)均优于贝伐单抗联合厄洛替尼治疗组;TKI联合ICI治疗组的PFS(P=0.003)和OS(P=0.028)均优于TKI单药治疗组。结论HLRCC-RCC罕见,具有家系遗传特性,恶性程度高,预后不佳,易出现转移。免疫组化染色2-SC强阳性及FH阴性可为临床诊断提供重要依据,基因检测显示FH基因胚系突变可明确诊断。初步研究结果证实TKI联合ICI治疗转移性HLRCC-RCC的临床效果较好,但有待大样本多中心随机对照临床研究进一步验证。

关键词：癌,肾细胞遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌综合征延胡索酸水合酶缺陷基因检测临床特征疗效

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CT阴性结石误诊为输尿管肿瘤1例

山东大学学报（医学版） 2024年第1期62卷 120-124页

作者：刘永国苏文桂孙国宝张程榕张立刚祝增军潍坊医学院附属医院泌尿外科山东潍坊261041

输尿管蛋白结石极为罕见,其可能由某种单一成分组成,也可能为多种蛋白基质混合而成,目前尚无确切结论。本文报道1例54岁肾功能不全患者在肾内科治疗时发现CT阴性结石,被误诊为输尿管肿瘤行腹腔镜手术治疗。术后该患者双侧输尿管分别先... 详细信息

输尿管蛋白结石极为罕见,其可能由某种单一成分组成,也可能为多种蛋白基质混合而成,目前尚无确切结论。本文报道1例54岁肾功能不全患者在肾内科治疗时发现CT阴性结石,被误诊为输尿管肿瘤行腹腔镜手术治疗。术后该患者双侧输尿管分别先后再次出现上述结石,通过多种检查发现该CT阴性结石为蛋白质。

关键词：泌尿系结石输尿管肿瘤 CT阴性结石误诊

间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征合并偏头痛患者的临床特征

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中南大学学报(医学版) 2024年

作者：傅增辉金艳林再红李志超刘松涛刘旸于绘丽齐齐哈尔医学院附属第三医院神经内科齐齐哈尔医学院附属第三医院泌尿外科齐齐哈尔医学院附属第二医院泌尿外科

目的：间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(interstitial cystitis/bladder pain syndrome,IC/BPS)与偏头痛均属于慢性疼痛综合征，二者在病理生理和临床表现上具有相似性，该研究旨在探讨IC/BPS合并偏头痛的临床特征。方法：选择2019年01月至... 详细信息

目的：间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征(interstitial cystitis/bladder pain syndrome,IC/BPS)与偏头痛均属于慢性疼痛综合征，二者在病理生理和临床表现上具有相似性，该研究旨在探讨IC/BPS合并偏头痛的临床特征。方法：选择2019年01月至2023年12月齐齐哈尔医学院附属第二医院、附属第三医院就诊的313例IC/BPS患者并收集临床资料。采用O’Leary Sant间质性膀胱炎症状指标评分(interstitial cystitis patient symptom index scores,ICSI)、疼痛数字评分法(Numeric Rating Scale,NRS)、广泛性焦虑障碍量表-7(Generalized Anxiety Disorde-7,GAD-7)、患者健康问卷-9(9 Patient Health Questionnaire,PHQ-9)、匹茨堡睡眠质量量表(The Pittsburgh Sleep Quality Index, PSQI)、躯体化症状自评量表(Self-Rating Somatic Symptom Scale,SSS)和生活质量影响程度评分表进行评估；酶联免疫法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)和P物质(substance P,SP)水平。结果：与无偏头痛的IC/BPS患者相比，合并偏头痛的IC/BPS患者在IC/BPS病程、ICSI评分、膀胱疼痛评分、焦虑评分、抑郁评分、睡眠评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分、血清IL-1β、IL-6、PGE2和SP水平均较高，而运动频次偏低(均P<0.05)。与48例合并偏头痛的轻中度IC/BPS患者相比，39例合并偏头痛的重度IC/BPS患者的头痛疼痛评分、头痛发作频率、头痛持续时间、膀胱疼痛评分、焦虑评分、睡眠评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分、血清IL-1β、IL-6、PGE2和SP水平均较高(均P<0.05)。合并偏头痛的IC/BPS患者ICSI评分与头痛疼痛评分、头痛发作频率、头痛持续时间、膀胱疼痛评分、焦虑评分、躯体化症状评分、生活质量影响程度评分呈正相关(均P<0.05)。结论：IC/BPS合并偏头痛患者的临床症状及精神心理症状较重，其IC/BPS症状严重程度与偏头痛的病情具有相关性。

关键词：间质性膀胱炎膀胱疼痛综合征偏头痛焦虑抑郁

输尿管软镜、超微经皮肾镜及微通道经皮肾镜取石术治疗2~3 cm肾下盏结石的疗效比较

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中国微创外科杂志 2024年第2期24卷 86-91页

作者：王世先杨水法杨恩明潘东山黄旭锋王俊龙王飞洪德时杨乐乐李康林杰斌厦门医学院附属第二医院泌尿外科厦门361021

目的比较输尿管软镜(flexible ureteroscope,FURS)碎石术、超微经皮肾镜取石术(super-mini percutaneous nephrolithotomy,SMP)与微通道经皮肾镜取石术(minimally invasive percutaneous nephrolithotomy,MPCNL)治疗2~3 cm肾下盏结石的疗效。方法回顾性分析2017年1月~2022年9月我院209例2~3 cm肾下盏结石的临床资料,其中FURS组65例,采用奥林巴斯电子输尿管软镜碎石取石术;SMP组62例,采用SMP进行碎石取石;MPCNL组82例,采用MPCNL。比较3组一次性结石清除率(stone-free rate,SFR)、手术时间、术后即刻血红蛋白下降值、术后迟发性出血发生率、术后住院时间、术后发热、住院费用。结果3组手术时间、术后即刻血红蛋白下降值、术后住院时间、住院费用和一次性SFR差异均有显著性(P<0.05)。MPCNL组一次性SFR(89.0%,73/82)显著高于FURS组(72.3%,47/65)(P=0.009);MPCNL组手术时间(38.8±7.6)min,明显短于FURS组(52.3±7.2)min与SMP组(47.5±7.8)min(P=0.000,0.001)。FURS组术后即刻血红蛋白下降(1.5±0.5)g/L,显著少于SMP组(5.0±1.6)g/L和MPCNL组(6.3±1.8)g/L(均P=0.000);FURS组住院时间(2.2±0.5)d,明显短于SMP组(3.5±0.8)d与MPCNL组(5.3±1.4)d(均P=0.000);FURS组住院费用(22543.4±1600.4)元,明显少于SMP组(26837.7±2003.9)元与MPCNL组(26784.4±2086.9)元(均P=0.000),SMP组与MPCNL组差异无显著性(P=0.869)。3组术后发热发生率无显著性差异(χ^(2)=0.462,P=0.794)。结论FURS、SMP与MPCNL均是处理2~3 cm肾下盏结石的有效方法。FURS术中出血最少、住院时间最短、住院费用最少,但一次性SFR最低、手术时间最长。MPCNL手术时间最短,一次性SFR最高,但术中出血最多,住院时间最长。

关键词：输尿管软镜超微经皮肾镜取石术微通道经皮肾镜取石术肾下盏结石

局麻下超声/CT双重引导经皮射频消融治疗肾肿瘤的疗效分析

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中华泌尿外科杂志 2024年第5期45卷 360-365页

作者：杨文锦王啸峰黄海锋张帆张胜捷刘光香纪长威郭宏骞南京中医药大学鼓楼临床医学院、南京鼓楼医院、南京大学医学院附属鼓楼医院泌尿外科、南京大学泌尿外科研究所南京210008

目的探讨局麻下超声/CT双重引导经皮射频消融治疗肾肿瘤的有效性和安全性。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月南京鼓楼医院在局麻下使用超声/CT双重引导射频消融治疗40例肾肿瘤患者的临床资料。男33例,女7例;年龄(61.5±11.9)岁;体... 详细信息

目的探讨局麻下超声/CT双重引导经皮射频消融治疗肾肿瘤的有效性和安全性。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月南京鼓楼医院在局麻下使用超声/CT双重引导射频消融治疗40例肾肿瘤患者的临床资料。男33例,女7例;年龄(61.5±11.9)岁;体质量指数(24.79±3.37)kg/m^(2)。肿瘤位于左肾20例,右肾16例,双侧肾肿瘤4例。40例共44个肿瘤,肿瘤最大径(2.3±0.7)cm(1.0~4.0cm);肾上极15例,中极21例,下极8例;外生性肿瘤23例,内生性5例,混合性16例。术前有多发转移患者2例(其中1例为双侧肾肿瘤患者)。术前血肌酐值68.0(56.5,87.5)μmol/L,估算肾小球滤过率(eCFR)114.2(79.6,132.4)ml/(min·1.73m^(2))。所有患者行射频消融术前/术中均行肾穿刺检查。所有患者的经皮射频消融手术均采用超声/CT双重引导,术中均双定位确认肿瘤完全损毁。双侧肿瘤患者,分两次手术,两次手术间隔时间为1个月。术后密切观察患者生命体征情况,并进行长期随访,记录复发及转移情况。结果本组40例(44侧)手术均于局麻下顺利完成。射频时间(9.5±3.6)min。无输血病例,无中转开放手术,无围手术期死亡病例。肿瘤以外生性为主(23例,52.3%),距集合系统>7mm者31例(70.5%),位于后方者28例(63.6%),完全位于极线以外者13例(29.5%),R.E.N.A.L.评分为(6.1±0.2)分。36例单侧肾肿瘤患者病理结果:透明细胞癌28例,乳头状肾细胞癌2例,未分型肾细胞癌4例,良性肾肿瘤2例。4例双侧肾肿瘤患者病理结果:2例双侧肾肿瘤患者的一侧为良性肾肿瘤,另一侧为透明细胞癌;另两例双侧肾肿瘤均为透明细胞癌。40例中38例(共40个肿瘤)为肾癌,均为CT。期。40例术后1d血肌酐值71.5(59.0,94.3)μmol/L,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05);eCFR107.4(79.7132.2)ml/(min·1.73m^(2)),与术前相比差异无统计学意义(P>0.05)。术后无Clavien-Dindo分级≥Ⅱ级的并发症。术后疼痛评分示重度疼痛(7~10分)仅1例。术后随访时间15~70个月。38例肾癌患者中,36例术前未发生远处转移者,术后60个月内局部复发2例(5.5%),其中1例射频消融术后6个月复发,采取肾部分切除术治疗,肾部分切除术后随访60个月,未再出现局部复发;另一例术后41个月复发,再次采取射频消融治疗,第2次射频消融治疗后随访12个月,未再出现局部复发。术前发生远处转移的2例患者,术后均行靶向治疗加免疫治疗12个月,其中1例于术后8个月出现局部复发,行肾部分切除术治疗,随访至肾部分切除术后60个月,未再发生局部复发;另一例为双侧肾肿瘤患者,消融术后34个月出现左肾复发,行左侧肾部分切除术,消融术后42个月右肾复发,再次行射频消融术,第2次右肾消融术后随访12个月,未出现局部复发。结论局麻下超声/CT双重引导经皮射频消融治疗肾肿瘤,对患者的肾功能影响较小,且并发症发生率低,无严重并发症;术后肿瘤的控制效果好。该术式是一种安全、有效、微创的手术方式。

关键词：肾肿瘤超声/CT引导射频消融经皮局部麻醉